UNIVERSIDAD CENTRAL DE ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA
Nombre: Cristhian Narvaez
Fecha: 2011-04-16
Curso: Noveno Semestre Alimentos
Mtodos de cuantificacin de Biomasa. Ventajas y desventajas de
la Turbidimetria y Densidad ptica (Absorbancia).
La Turbidimetra mide la reduccin de la transmisin de luz debido a
partculas de una suspensin y cuantifica la luz residual transmitida.
Estudios tericos y experimentales han mostrado que soluciones diluidas de
diferentes tipos de bacterias, independientemente del tamao celular,
tienen casi la misma absorbancia por unidad de concentracin de peso seco.
Esto quiere decir que, en soluciones diluidas, la absorbancia es
directamente proporcional al peso seco, independientemente del tamao
celular del microorganismo.
Entre las ventajas mas destacables de los mtodos de dispersin de luz
estn:

El mtodo turbidimetrico puede realizarse tanto en el rango de luz

visible, como el de ultravioleta dando un gran espectro de accin

Se
puede
trabajar
con
densidades
microbianas
microorganismos de tamao de unos cuantos nanmetros.

bajas,

de

Las desventajas por su parte son:

Las suspensiones con las que se trabajan

no deben tener una
absorbancia mayor a 0.3, ya que valores mayores producen
desviaciones de la ley de Beer.

El trabajar con suspensiones diluidas puede involucrar un mayor error

de pipeteo y menor sensibilidad por el bajo nivel de absorcin.

Existe una relacin directamente proporcional entre la absorbancia y el

peso seco, no as entre la misma y el nmero total de microorganismos. En
estos grficos se puede apreciar que suspensiones diluidas de dos
microorganismos diferentes con igual peso seco tienen la misma
absorbancia, mientras que para el mismo nmero de microorganismos
totales la absorbancia de cada suspensin es distinta
Cabe recordar, que se encuentran absorbancias muy diferentes por
partcula o por UFC (Unidad Formadora de Colonia) cuando los tamaos de
las clulas bacterianas son diferentes. Por esta razn, para estimar el
nmero de microorganismos totales o el nmero de microorganismos

viables de una suspensin bacteriana debe realizarse una "curva de

calibracin" con cada tipo de microorganismo, slo de esta forma es posible
relacionar
Absorbancia
(Densidad ptica)
con
el
nmero
de
microorganismos totales o con UFC.

Absorbancia en funcin del Peso Seco

Absorbancia en funcin del Nmero de Microorganismos Totales

Bibliografa
www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm
www2.udec.cl/~pasantias/publicacion/10.pdf
http://es.scribd.com/doc/22450159/eq-8-cuantificacion-y-aislamiento-demicroorganismos-microbiologia