QUIMICA ANALTICA CUANTITATIVA

SEMINARIO: TOMA DE MUESTRA Y PRETRATAMIENTOS

EL PROCESO ANALITICO
El proceso analtico pude definirse como una serie de operaciones que separan la
muestra bruta de los resultados.
Las llamadas operaciones preliminares comprenden una serie de pasos tales
como: toma de muestra, preservacin, tratamientos (Ej. Disolucin, disgregacin),
aplicacin de tcnicas separativas, desarrollo de reacciones analticas, etc.
El segundo paso del proceso analtico requiere el uso de un mtodo analtico de
determinacin que puede ser clsico o instrumental. Si se emplea un mtodo
instrumental, se genera una seal (por ejemplo, en el espectrofotmetro, se produce
una seal lumnica) que se transduce en otra seal fcilmente medible (seal
elctrica). Despus de la transduccin, la seal analtica debe ser relacionada
inequvocamente con la presencia, cantidad, o estructura de uno o varios analitos.
Finalmente un sistema de procesamiento de datos (una computadora) realiza los
clculos matemticos y estadsticos que se requieren para obtener el mejor
resultado analtico posible a partir de los datos obtenidos.
Las caractersticas bsicas del proceso analtico, sensibilidad, selectividad,
precisin, rapidez, estn afectadas por los tres escalones del proceso.

Muestra

Toma de
muestra

Pretrata- Procesos
mientos separati- Reaccin
vos
analtica

Medicin y
transduccin
de la seal
Manejo y
tratamiento
de datos

CARACTERSTICAS
ANALTICAS
BSICAS

Resultados

SENSIBILIDAD
SELECTIVIDAD
PRECISION
RAPIDEZ ....

La importancia de las operaciones preliminares es frecuentemente subestimada a

pesar que es en ellas donde se cometen los ms grandes errores. Adems hacen
posible la preconcentracin del analito y eliminacin de los efectos de matriz,
pueden ser complicados, requerir tiempo y dedicacin por parte del operador.
De este modo estas operaciones influyen decisivamente en la precisin,
sensibilidad, selectividad, rapidez y costo del proceso analtico.
Las tcnicas de separacin analtica estn entre los pasos ms frecuentemente
incluidos dentro de las operaciones preliminares.

TOMA DE MUESTRA
La obtencin de una muestra adecuada para anlisis es una fuente importante de
dificultades, y con frecuencia limita la validez del resultado final. El qumico analtico
tiene que conocer el origen de su muestra, y en la medida de lo posible, ha de
ejercer algn control sobre la manera en que se obtienen las muestras.
Si se desea efectuar el anlisis de una gran cantidad de material, es esencial que la
muestra tomada sea verdaderamente representativa del todo. El problema es
relativamente pequeo cuando la masa de material es tan homognea que cualquier
porcin de ella en suficiente cantidad para su anlisis es de la misma composicin
que cualquier otra porcin. Este es el caso de gases bien mezclados y de lquidos
bien agitados y de verdaderas soluciones, pero si el material es menos homogneo,
frecuentemente se presentan bastantes problemas.
Los errores en el muestreo pueden ser sistemticos o al azar. Los errores
sistemticos son los que resultan de la preferencia repetida de un componente del
seno del material. Ej. : tomar cada muestra de la superficie de un lquido tranquilo,
donde pueden haber gradientes de concentracin a distintos niveles; o preferir los
trozos grandes de una mezcla slida, siendo que estos pueden diferir en
composicin de los trozos pequeos.
Los errores al azar son los que producen tanto resultados altos como bajos. Son
menos peligrosos que los errores sistemticos, ya que se pueden reducir al mnimo
tomando ms muestras o muestras mayores, lo cual no reducira los errores
sistemticos.
Para la exactitud absoluta del muestreo, la muestra debera consistir de toda la
cantidad de material, sin embargo, rara vez se desea exactitud absoluta, y de
todos modos sta no podra alcanzarse en las otras etapas del anlisis.
El tamao que ha de tomarse para la muestra est determinado por: el mximo
error tolerable o incertidumbre, que se determina por la exactitud de cada una de
las otras operaciones de que consta el anlisis completo, por el uso a que estn
destinados los resultados, y por el grado de heterogeneidad del material.
Gases y lquidos. Los gases son en general, homogneos y pueden recogerse
muestras de ellos en matraces evacuados o por desplazamiento del aire inicialmente
presente. Tambin pueden adsorberse sobre un adsorbente adecuado y luego
desorberlos en el laboratorio. Se puede admitir que un lquido de una sola fase es
homogneo si se ha agitado moderadamente. El muestreo de un lquido tranquilo
puede hacerse tomando porciones de lquido a distintas profundidades.
Slidos. Los materiales slidos compuestos de gran nmero de trocitos separados,
muestran a menudo mucha variacin de un trozo a otro al igual que dentro del
mismo trozo. De ordinario es necesario tomar una muestra bruta mayor a al que
puede someterse a anlisis en el laboratorio y reducirla luego de tamao de
partcula y de masa total para obtener la muestra analtica final. Se han ideado
procedimientos para diversos tipos de materiales, todos ellos tendientes a
reducir al mnimo el riesgo de un error sistemtico.
El muestreo es la operacin de conseguir en una reducida cantidad de
producto, algo que resulte ser representativo de un todo de mayor masa que
constituye el material a analizar. Es operacin de suma importancia, puesto
que si la muestra no est bien tomada, el anlisis no tendr ningn valor.

Si el material es ms o menos homogneo, el muestreo es simple, pueden tomarse

varias porciones de distintos lugares, pulverizar todo y mezclar muy bien, reservando
una cierta cantidad para realizar el anlisis. Esta parte es similar a la parte final del
caso de material heterogneo.
Si el material es voluminoso el muestreo debe ser muy cuidadoso para obtener una
muestra representativa. Se tomar un gran nmero de porciones de diferentes
partes, en forma sistemtica, por ejemplo durante la descarga, y luego se mezclarn
muy ntimamente. Cuanto ms pequeos sean los trozos de material mejor podr
ser realizada la mezcla, es por ello que si vienen trozos demasiado grandes deber
procederse previamente a una trituracin grosera hasta tamaos medios de 3 a 5
cm. La mezcla se realiza por paleo formando un gran cono. Con la pala se tomarn
porciones de la periferia de la base y se volcarn en el pice del cono.

Luego se procede a un cuarteo previo para reducir la cantidad de material. El

cuarteo consiste en que una vez lograda la primera homogeneizacin por paleo, se
divide el cono resultante en cuatro partes logradas por planos verticales
perpendiculares (hipotticos). De las cuatro partes se separan dos opuestas (Ej. 1-1)
y se retiran reservando las otras dos. Con estas dos partes se procede a un nuevo
paleo y formacin de un cono nuevo mezclando perfectamente como se hizo la
primera vez.

Se repite el cuarteo cuantas veces haga falta para formar un pequeo montn de 2 a
3 Kg y tal muestra se contina cuarteando en el laboratorio, hasta que la muestra
quede reducida a 200-300 g o menos, previa molienda a polvo fino. La porcin final
destinada al anlisis, de ser posible se muele a polvo impalpable, preferiblemente se
pulveriza en mortero de gata.
Para metales y aleaciones se realizan perforaciones con taladros especiales en
distintas partes del material, preferentemente en la parte central; debe tomarse todo
el material extrado puesto que el polvo fino puede tener composicin diferente de
las virutas mayores.
Antes de realizar el anlisis generalmente el producto se seca a 105-110C,
refiriendo luego el contenido a muestra seca. Tambin puede referirse a muestra
hmeda (sin secar) pero en este caso es conveniente determinar la humedad de la
muestra por secado hasta peso constante; entonces podr referirse el resultado ya
sea a muestra seca o a muestra hmeda.

TRITURACIN Y MOLIENDA
Si se trata de muestra dura primero se reduce a trozos pequeos en planchas de
acero duro usando un martillo como elemento percutor. Se evitan prdidas de
material rodeando la muestra con algn reborde. Los trozos pequeos se pueden
romper en mortero de percusin. El mortero y la mano son de acero duro (al
tungsteno).

Se reduce a tamao de polvo grueso. El polvo grueso se pulveriza por pequeas

porciones luego, en mortero de gata.
SECADO Y CALCINACIN
El papel del agua en el anlisis cuantitativo tiene particular importancia, porque el
posible intercambio de agua entre la muestra y la atmsfera podra afectar la
composicin de la muestra cualquiera fuere el mtodo analtico usado
subsiguientemente. En una determinacin gravimtrica por ejemplo, puede ser
causa de error el intercambio de agua entre el precipitado y la atmsfera.
El contenido de agua ha de ser un factor conocido para que los resultados analticos
tengan significado. As, si se usa una muestra hmeda se pueden convertir los
resultados a base seca y viceversa.
Sequedad absoluta y sequedad reproducible. Algunas muestras analticas pueden
llevarse al estado de sequedad absoluta por calentamiento prolongado. Sin embargo
las condiciones extremas necesarias para la completa expulsin del agua enlazada
fuertemente, pueden ocasionar efectos secundarios, como la prdida de dixido de
carbono de carbonatos o la oxidacin de sulfuros. Una muestra que ha
experimentado estos cambios, ya no es representativa del material original. En estos
casos hay que renunciar a al meta de sequedad absoluta a favor de una meta de
sequedad reproducible. Es esencial llegar por lo menos a este estado, de lo
contrario el contenido de agua variar con el tiempo, lugar y circunstancias, por
ejemplo con la humedad atmosfrica.
Secado por calentamiento: hornos, mecheros y estufas. El mtodo ms comn para
lograr sequedad reproducible es calentar la muestra por una o ms horas a 105110C en una estufa o un horno bien ventilados. Este tratamiento es a menudo
insuficiente para expulsar agua fuertemente enlazada, pero elimina de la muestra el
agua dbilmente enlazada. Esta es la fraccin de agua que mostrar ms
variaciones con las condiciones atmosfricas y por ello su eliminacin da, en
general, muestras de un estado de sequedad suficientemente reproducible. Sin
embargo esta temperatura es suficientemente alta para causar reacciones

secundarias indeseables en ciertas sustancias. La temperatura de secado escogida

ha de ser siempre una frmula de compromiso entre los requisitos de sequedad
completa y la prevencin de reacciones secundarias.
La muestra ha de colocarse en la estufa de desecacin de manera tal que el aire
tenga libre acceso a toda la muestra
Cuando se necesitan temperaturas ms altas se usa estufa elctrica o mechero.
Secado por evaporacin. Cuando las muestras analticas experimentan cambios
secundarios an en condiciones suaves de desecacin en estufa, ha de usarse el
mtodo de evaporacin. La muestra finamente pulverizada se expone simplemente
al aire a temperatura ambiente de modo que pueda evaporarse de ella todo el agua
en exceso. El aire circundante puede secarse a su vez por un desecante o puede
mantenerse a un nivel de humedad constante. En ocasiones se emplea el secado al
vaco o a presin reducida, ya que al bajar la presin, baja el punto de ebullicin del
agua, logrndose su expulsin a temperaturas ms bajas. Las muestras de metales
pueden secarse rpidamente lavndolas con acetona pura u otro solvente voltil
miscible con agua, y secndolas luego al aire por breve tiempo.
Secado y calcinacin de precipitados. En una determinacin cuantitativa por un
mtodo de determinacin gravimtrico, el componente deseado se separa de otros
componentes de la muestra por precipitacin, lavado y filtracin. Sin embargo la
separacin no es completa hasta que no se seca el precipitado para eliminar la
humedad dejada por las ltimas porciones del lquido de lavado. Muchos
precipitados pueden secarse bien si se colocan en una estufa a 110C por media
hora a 2 horas. Sin embargo, a menudo se necesita una temperatura ms alta por
una o varias de las siguientes razones: a) algunas sustancias retienen agua hasta
temperaturas mucho ms altas que 110C. b) Algunos precipitados han de
transformarse en otras sustancias de composicin qumica ms definida para la
pesada. c) el quemado y destruccin del papel de filtro requiere temperaturas ms
altas.
Las estufas de desecacin, estufas elctricas y varios tipos de mecheros son tiles
en el secado y calcinacin de precipitados.
DISOLUCIN DE LA MUESTRA
Excepto en algunos casos, antes de la separacin y medicin del componente
deseado, es necesario disolver la muestra pesada. Siempre que sea posible la
muestra se disuelve en agua. Los disolventes orgnicos son adecuados para
muchas sustancias orgnicas.
Existen algunos detalles experimentales que deben tenerse en cuenta a la hora de
disolver una muestra en el laboratorio:
La muestra se pesa, se pone en un vaso de precipitados, se cubre con un vidrio de
reloj. El vaso debe tener pico para permitir que por su abertura salgan los vapores o
gases. Se vierte cuidadosamente el disolvente (agua, solucin acuosa de cido, etc.)
escurriendolo por varilla de vidrio, cuyo extremo inferior toque las paredes interiores
del vaso. Durante esta parte de la operacin se desplaza algo el vidrio de reloj. Si se
produce desprendimiento de gases el vaso debe cubrirse tanto como sea posible.
Para este caso, conviene usar pipeta para escurrir el solvente por la abertura del
pico. Una vez que termina el desprendimiento de gas y toda la muestra se ha

disuelto, lavar la cara inferior del vidrio de reloj con chorro de agua de piseta,
cuidando que el agua de lavado escurra por las paredes y no caiga directamente
sobre la solucin para evitar salpicaduras al exterior. Si fuera necesario calentar,
para evitar prdidas por salpicaduras, es mejor trabajar con erlenmeyer en lugar de
vaso de precipitados, colocando en la boca del erlenmeyer un pequeo embudo con
su vstago hacia adentro.

Si la solucin debe luego ser evaporada parcialmente o llegar a sequedad se usar

recipientes anchos y chatos que presentan gran superficie de evaporacin. Se
pueden emplear vasos de precipitados anchos y bajos de vidrio resistente o cpsula
de porcelana. Se elige el material en base a su resistencia al ataque por el lquido
caliente y a las determinaciones a efectuar.
Las evaporaciones se realizan en bao mara o sobre plancha calefactora a baja
temperatura. Se deben preferir evaporaciones lentas y no por ebullicin violenta,
para evitar prdidas. Durante la evaporacin cubrir el recipiente con vidrio de reloj
colocando pequeos ganchos de vidrio invertidos entre el borde del vaso y el vidrio
de reloj para proteger la solucin de la entrada de partculas extraas, sin impedir la
salida de vapores.
Al final de la evaporacin se debe lavar el vidrio de reloj con chorro de piseta
recogiendo el agua en el vaso.

Los dos mtodos ms generales de disolucin son el tratamiento con cido y la

fusin con fundente.
Tratamiento con cidos. Los cidos pueden ser clasificados como cidos no
oxidantes, como HCl, H2SO4, y HClO4 diluido, y cidos oxidantes como HNO 3 y
perclrico concentrado caliente. En general, cualquier metal que se encuentre por
encima del hidrgeno en la serie electromotriz se disolver, aunque algunas
reacciones son lentas. Los metales que se encuentran por debajo del hidrgeno,
requieren por lo general para su disolucin de un cido oxidante.
Los cidos fuertes como el clorhdrico, pueden disolver las sales de las que se
forman molculas de cidos dbiles. Ej. El carbonato de calcio se disuelve en HCl
dando cido carbnico y cloruro de calcio.

Una solucin cida puede servir no solo como cido sino tambin como agente de
precipitacin o de formacin de complejos. El ion cloruro, por ejemplo, puede formar
complejos solubles con muchos iones metlicos, con lo cual aumenta la solubilidad
de las sales de estos iones metlicos.
El HCl disuelve todos los metales comunes con excepcin de antimonio, bismuto,
arsnico, cobre, mercurio y plata. La reaccin de disolucin es muy lenta con
plomo, cobalto, nquel, cadmio, y unos cuantos metales ms que se encuentran
por encima del H en la serie electromotriz. Las sales de los cidos dbiles y la
mayor parte de los xidos son solubles.
El H2SO4 diluido disuelve todos los metales comunes, excepto plomo, antimonio,
bismuto, arsnico, cobre, mercurio y plata. El H 2SO4 concentrado y caliente
disuelve todos los metales comunes.
El HNO3 ataca a la mayor parte de los metales. Ataca tambin sales insolubles de
aniones oxidables como los sulfuros metlicos.
El HClO4 concentrado y caliente disuelve todos los metales comunes, pero debe
usarse con mucho cuidado, pues las sustancias fcilmente oxidables, incluso
algunas sustancias orgnicas, reaccionan con violencia explosiva.
El agua regia, compuesta de tres partes de cido clorhdrico y una de cido
ntrico, ataca todos los metales
Algunas otras combinaciones de dos cidos o de un cido ms un agente oxidante,
reductor o formador de complejos, son tiles como disolventes en casos especficos.
Fusin. Cuando no es posible disolver una muestra por un cido, la fusin de la
muestra con fundente puede solubilizar la muestra en agua. Las fusiones son
especialmente tiles con minerales, rocas de silicatos y carbonatos que no son
atacables por cido clorhdrico, pero tambin son tiles con muchas otras muestras.
En general el fundente es alcalino a fin de reducir al mnimo la prdida por
volatilizacin de gases cidos, como H2S y SO2.
Uno de los fundentes ms comnmente usados es el carbonato de sodio que
convierte los xidos en sales de sodio solubles. Ej.
Al2(SiO3)3 +4 Na2CO3 3 Na2SiO3 + 2 NaAlO2 + 4 CO2
Una mezcla de sodio y potasio se funde a temperatura inferior que el carbonato de
sodio solo, resultando conveniente con algunas muestras pero no con otras.
En la prctica se usan unos 5 g de carbonato de sodio por cada gramo de muestra.
El fundente se introduce en un crisol de platino suficientemente grande con el fin de
que solo quede medio lleno. La muestra pesada se introduce y agita con el fundente.
La mezcla se calienta gradualmente hasta que la muestra original parece estar
totalmente destruida. Basta con media hora. Luego se deja enfriar la muestra y la
masa slida que se forma se trata con agua caliente. La solucin resultante es
fuertemente alcalina, pero est a punto para las operaciones de separacin y
medicin subsiguientes.
Para xidos que son difciles de disolver se usa comnmente pirosulfato de potasio
como fundente cido. Al ser calentado el pirosulfato libera SO 3 que a su vez
reacciona con el xido para formar un sulfato soluble. Normalmente se usan 20 g
ms de pirosulfato de potasio por cada gramo de muestra y la temperatura se
mantiene ligeramente por encima del punto de fusin, alrededor de 300C. Se
utilizan crisoles de platino o slice.
Se cuentan entre los fundentes tiles el perxido de sodio y las mezclas de clorato
de potasio o de nitrato de potasio con carbonato de sodio.

SEPARACIONES
Fundamentos. Una separacin analtica puede definirse como una operacin que
implica dividir una mezcla (muestra) en por lo menos dos partes de distinta
composicin, de manera de enriquecer una de las fracciones en un componente con
relacin al resto.
El proceso de separacin requiere que los distintos componentes sean finalmente
apartados, por lo tanto deber haber siempre un desplazamiento fsico a travs del
espacio.
De este modo, los fenmenos de transporte, son esenciales en las separaciones.
Simplificando, los desplazamientos pueden clasificarse en: a) Movimiento de flujo en
el cual los componentes se desplazan en su medio, no es indispensable para la
separacin. b) Desplazamientos relativos, en que los componentes se desplazan a
travs del medio circundante, son esenciales para llevar a cabo la separacin.
Existen dos grandes tipos de sistemas de separacin: estticos y dinmicos. Los
sistemas dinmicos se pueden disponer fsicamente de modo que el desplazamiento
de flujo sea perpendicular o paralelo al desplazamiento relativo.
Estos conceptos se comprendern mejor cuando se trate las separaciones por
extraccin y por mtodos cromatogrficos.
Objetivos. Las tcnicas de separacin analtica mejoran: 1) la selectividad y 2) la
sensibilidad.
La aplicacin directa de una tcnica analtica determinativa a la muestra puede
fracasar debido a la interferencia de otras especies con propiedades fsico-qumicas
similares a la del analito, o que producen disturbios en la seal de medida. Si se
asla el analito de inters del resto, lgicamente se evitan estos problemas (Fig.1)

MUESTRA
A, B, C,
D, E ...

A
Tcnica de
separacin

B, C, D, E...

A
B
Tcnica de
separacin

C
D

Las tcnicas de separacin son una de las tres vas primarias para aumentar la
selectividad (las otras vas son la reactividad qumica del analito y la discriminacin
de la seal por parte del instrumento de medida).

1
REACTIVIDAD
QUIMICA
1-3

1-2
1
2

DISCRIMINACION DE
LA SEAL

3-2

SEPARACIONES
2

Obviamente una combinacin binaria o ternaria de estas vas resultar en un mayor

nivel de selectividad.
Otro objetivo bsico de las separaciones analticas es el indirecto incremento de
sensibilidad.
Con muy bajas concentraciones de analito (anlisis de trazas), la aplicacin directa
de un mtodo analtico generalmente conduce a la obtencin de ninguna seal, o de
una seal muy baja que no puede ser distinguida del ruido de fondo.
El uso de una tcnica de separacin, al transferir el analito de inters a una nueva
fase de un volumen mucho ms bajo (hasta 10 5 veces ms bajo) posibilita la
aplicacin satisfactoria de una tcnica analtica gracias a la preconcentracin
lograda. (Fig.2).

MUESTRA
A

A
Tcnica de
separacin

Adems de estos dos objetivos, las tcnicas separativas ofrecen otras ventajas
adicionales que facilitan los pasos posteriores del proceso analtico.

SEPARACIN POR PRECIPITACIN

Formacin del precipitado
Por lo general las precipitaciones se efectan en vasos de precipitados. Se emplea
un agitador de vidrio (varilla) o un agitador mecnico (magntico). En cualquier caso
solo deben entrar en contacto con la solucin materiales de vidrio o plstico.
La solucin del agente precipitante ha de ser bastante diluida, y aadirse
lentamente, con bureta, pipeta o gotero. La cantidad de solucin de reactivo
precipitante se debe calcular de antemano.
Por lo general, el manejo subsiguiente se facilita con la precipitacin por solucin
caliente. Conforme a ello, si la solubilidad y otros factores lo permiten, la solucin de
la muestra y la del agente precipitante deben estar calientes en el momento de
mezclarse.
Digestin
La separacin por precipitacin no queda fsicamente completa hasta que no se
separa el precipitado de sus aguas madres; adems, el precipitado rara vez est
listo para filtracin inmediatamente despus de haberse formado. En algunos casos
las partculas son tan pequeas que el filtro no puede retenerlas y, en otras, se
retiene una cantidad de impurezas innecesariamente grande si la filtracin se
efecta de inmediato. Para disminuir estas posibles fuentes de error, se debe dejar
que el precipitado repose algn tiempo en contacto con el lquido del que se ha
formado. A este proceso se llama digestin. A menudo el proceso se efecta a
temperatura elevada, aunque tambin es til la digestin a temperatura ambiente, en
particular cuando se requiere tiempo prolongado.
Es posible aumentar el tamao de las partculas de un precipitado durante la
digestin: las partculas pequeas se coagulan para formar agregados; los cristales
pequeos se vuelven a precipitar haciendose ms grandes. Cuanto ms grandes,
ms fcilmente se filtran las partculas que quedan al final del proceso de digestin.
Un mecanismo notable por el cual las impurezas son retenidas en el precipitado es
la adsorcin de las impurezas sobre las superficies de los cristales del precipitado.
Una masa dada de precipitado tiene menos superficie si las partculas individuales
son grandes que si son pequeas. El incremento del tamao de las partculas
durante la digestin no solo ayuda a la filtrabilidad del precipitado sino que tambin
puede mejorar su pureza.
La duracin del perodo de digestin vara ampliamente segn la situacin.
Filtracin
Al final del perodo de digestin, el precipitado debe contener esencialmente todo el
componente desconocido o algn componente relacionado cuantitativamente con l.
Debe ser lo bastante puro y estar en la forma fsica adecuada para la filtracin. Hay
diversos tipos de medios filtrantes. La naturaleza del precipitado y la temperatura a

10

la que ha de secarse subsiguientemente o calcinarse son los factores que dictan el

filtro que se debe usar.
Papel de filtro. Si el precipitado ha de ser pesado seguidamente, es necesario
incinerar el papel para eliminarlo antes de pesar el precipitado; por lo tanto el papel
empleado debe ser del tipo que no deja cenizas. Durante la ignicin, el carbn del
papel produce una atmsfera fuertemente reductora; por consiguiente el papel de
filtro es til como medio de filtracin solamente con precipitados que no se reducen
fcilmente.
El papel de filtro se suministra con diversos grados de porosidad.
Al plegar y colocar el papel en un embudo de 60 grados, son puntos importantes: el
papel debe doblarse dos veces. El primer doblez debe ser a lo largo del dimetro del
papel; el segundo doblez debe ser de modo que los bordes queden algo desparejos.
Luego debe arrancarse una esquina de la seccin ligeramente ms pequea, y abrir
el papel en la seccin ligeramente ms grande.
1

Entonces el papel puede ser insertado en un embudo de 60 grados humedecido con

suave chorrito de agua y presionando firmemente hacia abajo. Ante todo, el papel de
filtro debe ajustarse fuertemente a toda la circunferencia superior. La esquina rota
impide que se forme una columna de aire entre el embudo de vidrio y el papel.
Crisol de Gooch. El crisol de Gooch es de porcelana y tiene fondo perforado que se
cubre con una esterilla filtrante de fibras de asbesto. Es til para filtrar precipitados
que deben calcinarse, en particular los que se reducirn durante la calcinacin en
presencia de papel de filtro. Adems es til para filtrar soluciones como la de
permanganato, que atacan el papel. La esterilla de asbesto debe prepararse cada
vez que se haga una filtracin. Una vez usada, se quita fcilmente y se desecha.
Crisoles de filtracin con base porosa. El crisol de vidrio poroso tiene paredes de
vidrio y un disco de vidrio poroso soldado en el fondo. Existe en el comercio con
varios grados de porosidad. Es muy cmodo de usar porque no necesita
preparacin. Sin embargo s debe limpiarse despus de usarlo, lavando con
disolvente apropiado. No resiste altas temperaturas, por lo tanto se emplea para
precipitados que puedan secarse a temperaturas no muy superiores a los 100C.
El crisol de porcelana porosa es similar al anterior con la ventaja de poder soportar
elevadas temperaturas de calcinacin.
El crisol tipo Munroe es de platino. Su base es una capa permanente de platino
esponjoso. Puede tolerar temperaturas muy elevadas. Sin embargo, es muy caro por
lo que se emplea raras veces.
El inconveniente general de los crisoles de base porosa, es que a veces es difcil
limpiarlos.
Filtros de membrana. Son de steres de celulosa, principalmente de nitratos de
celulosa. El tamao de los poros vara de 0.010 micra a varias micras. Es un medio

11

rpido y cmodo para separar las partculas mayores al tamao del poro, de lquidos
y gases.
Transferencia del precipitado al equipo de filtracin. Para transferir un precipitado al
equipo de filtracin es preciso observar precauciones especiales. Este proceso est
ligado a la operacin de lavado, ya que la mayor parte del lavado se debe hacer en
el vaso en el que se form el precipitado. Por supuesto todas las aguas de lavado
deben pasar por el filtro. El lquido de lavado ha de verterse de modo que resbale
por una varilla de vidrio, evitando salpicaduras.
Todo el precipitado se transfiere al filtro junto con una porcin de lquido de lavado.
Los restos de precipitado se transfieren con ayuda de un fino chorro de agua de
piseta.

Filtracin por aspiracin. El paso de un lquido por el filtro es a menudo muy lento a
no ser que se aplique aspiracin. Es casi imprescindible con crisoles de Gooch o con
los de base de vidrio poroso, as como con filtros de membrana de poros muy finos.
Lavado
Se debe lavar el precipitado filtrado, para completar la separacin de las aguas
madres, antes de su desecacin o calcinacin. En algunos casos se emplea agua
destilada. Pero es ms frecuente que el lquido de lavado tenga que contener un ion
en comn con el precipitado, para reducir al mnimo las prdidas por solubilidad, o
un electrolito para evitar que los agregados de partculas ms diminutas se separen
y pasen por el filtro. Por supuesto, el electrolito ha de ser alguno que no deje residuo
apreciable. Es ms eficiente emplear varias porciones pequeas de lquido de
lavado que usar una porcin grande. Por lo general los lquidos calientes tienen
menor viscosidad que los fros y pasan por el filtro ms rpidamente. Sin embargo,
las prdidas por solubilidad pueden ser mayores con lquidos calientes.
Calcinacin del precipitado

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Cuando se emplea papel de filtro, se pliega ste alrededor del precipitado y se

introduce en un crisol de porcelana, cuarzo o platino. La calcinacin debe
efectuarse en dos etapas: 1) carbonizacin del papel a temperatura
relativamente baja y 2) calcinacin del precipitado a la temperatura final
deseada. Si no se completa el primer paso antes de iniciar el segundo, el
precipitado pudiera reducirse excesivamente y la llama podra arrojar parte de l
fuera del crisol. El primer paso se efecta generalmente en mechero, aunque
para el resto de la calcinacin puede usarse alguna otra fuente de calor. El crisol
se monta en un tringulo de pipa, que se coloca sobre el trpode. Una vez
eliminado el papel por completo, se puede elevar la temperatura de la llama
hasta alcanzar la temperatura de calcinacin deseada, se pueden introducir el
crisol y su contenido en una mufla a temperatura apropiada. Al trmino del
perodo de calcinacin se deja enfriar el crisol al aire durante unos minutos y
luego se introduce en un desecador por lo menos durante media hora antes de
pesarlo. Las fases de calcinacin, enfriamiento y pesada, deben repetirse hasta
que coincidan pesadas sucesivas.
SEPARACIONES POR EXTRACCIN Y POR MTODOS CROMATOGRFICOS
La virtud de muchos mtodos instrumentales est en el hecho de que mejoran
grandemente la exactitud y la sensibilidad del paso de medicin en el anlisis y,
en ciertos casos, se puede aplicar un mtodo experimental al material de la
muestra original sin tener que separar antes unos de otros los componentes que
han de determinarse. Pero, al mismo tiempo, el advenimiento de la moderna
instrumentacin qumica necesit el desarrollo de tcnicas de separacin nuevas
y, en ocasiones muy especficas, a fin de explotar plenamente estas tcnicas
experimentales.
Una separacin por cualquiera de estos mtodos puede ir seguida de muy variadas
tcnicas de medicin para la determinacin de sustancias orgnicas e inorgnicas.
Los mtodos de extraccin y cromatogrficos para separar sustancias, tienen mucho
en comn. La extraccin de un soluto de una fase lquida por otra suele ser
selectiva, al menos hasta cierto grado. Incluso cuando una sola extraccin sea
insuficiente para lograr una separacin cuantitativa, a menudo es posible separar
especies qumicas cuantitativamente por mtodos de extraccin en multietapas.
Asimismo veremos que los mtodos cromatogrficos pueden considerarse como
mtodos de extraccin en multietapas.
Extraccin
La extraccin de un soluto de una fase lquida por otra fase lquida es una de las
tcnicas de separacin ms rpida y simple en qumica analtica. En contraste con la
separacin por precipitacin, la extraccin tiene la ventaja de procurar separaciones
ms netas y ms limpias.
Coeficiente de distribucin o reparto. Cuando se ponen en contacto dos disolventes
inmiscibles entre s, una sustancia soluble en ambos se distribuye o reparte entre las
dos fases Finalmente se establece un estado de equilibrio dinmico.
A1 A2

13

En donde A1 y A2 representan el soluto A en los disolventes 1 y 2, respectivamente.

La constante de equilibrio para el reparto de soluto puede expresarse en trminos de
actividades de la especie correspondiente.
Kd

A
A

2
1

Donde Kd es el coeficiente de distribucin o reparto y A1 y A2 son las

concentraciones totales del soluto A en dos fases cualquiera. El coeficiente de
distribucin se mantiene razonablemente constante por intervalos importantes de
concentracin y de otras condiciones.
Los requisitos generales que han de satisfacerse por un proceso de extraccin para
que este sea adecuado como mtodo de separacin cuantitativa de especies
qumicas son en esencia los mismos que han de cumplir otros mtodos de
separacin. El componente deseado ha de separarse completa y selectivamente, y
la sustancia separada ha de estar en forma fsica y qumica apropiada para cualquier
operacin o medicin consecutiva que haya de efectuarse con ella.
Completitud de la extraccin. Algunos coeficientes de distribucin son lo
suficientemente altos para que sea posible la extraccin cuantitativa de una especie
en una sola operacin. Otros coeficientes de distribucin sin excesivamente bajos
para permitir transferencia cuantitativa en una sola extraccin. En estos casos para
lograr una separacin cuantitativa es necesario efectuar la extraccin dos o tres
veces con porciones distintas del segundo disolvente. Esta es la tcnica de
extraccin mltiple.
Selectividad de la extraccin. Cuando se ponen en contacto dos disolventes
mutuamente inmiscibles, uno de los cuales contiene inicialmente dos solutos, ambos
solutos se distribuyen entre las dos fases. La distribucin de equilibrio de cada
soluto, A y B, es totalmente independiente de la presencia del otro. Por consiguiente
los dos coeficientes de distribucin K dA y KdB indican el grado de completitud con la
cual cada soluto ser extrado del disolvente 1 por el disolvente 2.
En el proceso de extraccin ocurre alguna separacin entre A y B siempre y cuando
los dos coeficientes de distribucin difieran entre s. Es evidente que, para lograr la
separacin cuantitativa de A y B por extraccin de A de una fase lquida a otra, el
coeficiente de distribucin de A, ha de ser lo suficientemente alto para que sea
despreciable la cantidad de A que queda en la solucin inicial, y que el coeficiente de
distribucin de B ha de ser lo bastante pequeo para que la cantidad de B que es
extrada en la segunda fase sea despreciable. A menudo es posible lograr las
condiciones deseadas.
Principios generales de la cromatografa
El trmino cromatografa se refiere a toda tcnica de separacin en la cual se hacen
pasar los componentes de una muestra a analizar a travs de una columna a
diferentes ritmos de velocidad. En toda separacin cromatogrfica hay una fase
estacionaria, que consiste en la sustancia con la que se empaqueta la columna y
una fase mvil que recorre la columna. La muestra que va a analizarse se introduce
por la parte superior de la columna. A medida que la fase mvil recorre la columna,
cada componente de la muestra se distribuye continuamente entre las dos fases. El
proceso es similar en principio a un proceso de extraccin en multietapas, con gran
nmero de etapas.
14

Los procesos cromatogrficos pueden clasificarse por estados fsicos de las dos
fases. La fase estacionaria puede ser lquida o slida y la fase mvil gas o lquido.
As el proceso puede clasificarse como: cromatografa lquido-lquido, cromatografa
slido-lquido, cromatografa lquido-gas, y cromatografa slido-gas, en que el
segundo nombre se refiere al estado de la fase mvil. Tambin es comn llamar a
los dos primeros cromatografa lquida y a los dos ltimos cromatografa de gases.
Basndose en el mecanismo por el cual se distribuyen los componentes, se
distinguen tres clases mayores de separaciones cromatogrficas: cromatografa de
adsorcin, en la cual la fase estacionaria adsorbe reversiblemente solutos de la fase
mvil; cromatografa de reparto en la cual se reparte el soluto entre las dos fases de
manera muy semejante a un proceso de extraccin lquido-lquido, y cromatografa
de intercambio inico, en la cual iones cargados cambian de mano literalmente una y
otra vez entre las dos fases.
Debe insistirse en que la cromatografa es un mtodo de separacin y como tal ha
de ir seguida de la medicin correspondiente si ha de hacerse la identificacin
cualitativa o la determinacin cuantitativa.

15

APLICACIN
ANALISIS DE TRAZAS
ANLISIS DE TRAZAS DE ELEMENTOS METLICOS EN MUESTRAS BIOLGICAS Y
AMBIENTALES

Cuando se emplea el trmino traza no existe un acuerdo general en cuanto a

lmites de concentracin. Para los autores consultados, traza significa una
concentracin inferior a 0.01% (Ej. 100 g/ml o g/g). A veces se emplea la
expresin ultratraza para concentraciones inferiores a ng/ml ng/g.
Hay muy pocos mtodos estandarizados para el anlisis de trazas de elementos en
el campo ambiental. Cuando se hace necesaria una determinacin para resolver
un problema crtico, hay que desarrollar el mtodo apropiado. Debido a que este
proceso demanda tiempo, muchas situaciones crticas pasan sin contar con los
datos analticos adecuados.
Un procedimiento para anlisis de trazas debera, idealmente, tener las siguientes
cualidades:
Lmite de deteccin adecuado
Ser relativamente rpido
Ser relativamente de bajo costo
Ser aplicable a amplio rango de muestras
Ser relativamente especfico
Ser aplicable en la mayora de los laboratorios analticos (sin necesidad de
equipamiento especial)
Ser preciso
Las tcnicas. Histricamente los mtodos gravimtricos y titulomtricos fueron
empleados para el anlisis de trazas de elementos. De este modo era necesario
emplear un gran nmero de laboriosos pasos de separacin y preconcentracin para
aislar el constituyente y llevarlo a un nivel detectable antes de la determinacin. La
aplicacin prctica y precisin en el anlisis de trazas recin pudo lograrse con el
advenimiento de la instrumentacin.
Separacin y preconcentracin. A pesar de los recientes avances en la
instrumentacin analtica, es an necesario emplear mtodos de separacin y
preconcentracin previo al paso determinativo. Estos mtodos consumen tiempo y
constituyen fuentes de errores (por prdida o contaminacin) y deben ser usado solo
cuando sean necesarios. El motivo de emplear estos mtodos es llevar la

16

concentracin de un elemento en el estado de traza a un nivel detectable y/o

separarlo de sustancias interferentes.
La extraccin con solvente y la cromatografa de intercambio inico son los mtodos
ms comnmente usados.
Blanco. En el anlisis de trazas de elementos, es sumamente importante correr un
blanco en cada serie de determinaciones. La cantidad detectable es muchas veces
alcanzada por la concentracin de estos elementos en los reactivos, y por los niveles
de contaminacin en el ambiente del laboratorio. Para mantener los blancos bajos
podra ser necesario el uso de cidos especialmente purificados y agua bidestilada o
desionizada.
El laboratorio. Idealmente se debera trabajar en un laboratorio limpio aislado de
toda fuente de contaminacin externa, para el anlisis de trazas. Lamentablemente
esto es extremadamente costoso y no est al alcance.
Un problema frecuente es la contaminacin con metales provenientes del polvo. El
polvo se origina afuera, en los alrededores y tambin dentro del laboratorio, siendo
muy difcil y costoso eliminarlo. Sin embargo debe procurarse un mtodo para
restringir la exposicin de las muestras al polvo.
Se debe evitar el uso de elementos metlicos en el laboratorio, incluyendo las
instalaciones. El laboratorio de anlisis de trazas debe ser fcil de limpiar, evitando
el uso de materiales en pisos, paredes y techos que tiendan a acumular polvo. Es
esencial disponer de una aspiradora.
Las muestras. La recoleccin, preservacin y preparacin fsica de la muestra son
aspectos muy importantes del proceso analtico. La metodologa depender del tipo
de muestra y motivo del anlisis. Las muestras de suelo y sedimento deben ser
trituradas hasta obtener un tamao de partcula adecuado para el anlisis. Las
muestras de agua generalmente se filtran y se acidifican. Las muestras de aire para
determinacin de metales se toman haciendo pasar el aire a travs de un filtro o un
adsorbente. La muestra as preparada est lista para el tratamiento qumico. Las
muestras biolgicas son difciles de preservar y preparar fsicamente para el anlisis,
y la metodologa depende del tipo de muestra.
Preparacin qumica de la muestra. La preparacin qumica de la muestra es un
aspecto muy importante en el anlisis de trazas en muestras biolgicas y
ambientales. La eleccin del mtodo depende del tipo de muestra y el fin del
anlisis.
Bsicamente los dos mtodos de descomposicin de la muestra que se emplean
son el ataque con cidos y la fusin. En el caso de tratamiento cido, se usan cidos
minerales o mezclas de ellos. Las fusiones emplean grandes cantidades de fundente
en exceso sobre la muestra.
Si la cantidad de materia orgnica es abundante, es necesario incluir un agente
oxidante par liberar los metales. Generalmente se usa en estos casos mezcla ntricoperclrica. El cido ntrico por s solo o cidos ntrico y clorhdrico juntos,
generalmente no extraen totalmente los metales de la muestra. El cido sulfrico es
un agente deshidratante y puede producir condiciones fuertemente reductoras. Para
mantener las condiciones oxidantes puede aadirse peridicamente perxido de
hidrgeno a la solucin sulfrica.

17

Cuando hay presente abundante materia orgnica, es a menudo necesaria una

fusin oxidante. Para este fin puede agregarse perxido de sodio a la mezcla de
fusin. Los hidrxidos de sodio y potasio son comnmente usados como fundentes.
Errores. Los errores referidos al anlisis de trazas pueden ocurrir en cualquiera de
los pasos, desde la toma de muestra hasta la determinacin.
Algunos autores sostienen de acuerdo a su experiencia que la magnitud de los
errores es:
Toma de muestra > preparacin de la muestra > determinacin
Es importante que el analista est convencido de que la muestra, como se presenta,
es representativa y vale la pena ser analizada.
La preparacin de la muestra comprende ambos tratamientos: fsico y qumico. La
preparacin fsica incluye pulverizacin y tamizacin si fuera necesario, que puede
resultar en seria contaminacin si se usan implementos metlicos. Pueden ocurrir
prdidas si alguna fraccin es eyectada. La preparacin qumica de la muestra es
crucial, y no existe unanimidad en el tratamiento apropiado para cada tipo de
muestra. El paso determinativo, durante el cual la muestra es introducida en el
instrumento de medicin, est relativamente libre de errores. Debe ponerse gran
cuidado en la calibracin del instrumento y la eliminacin de interferencias.
DESCOMPOSICIN DE LA MUESTRA
La mayora de los mtodos determinativos usados en el anlisis de trazas de
metales requieren que la muestra se presente en forma lquida. Por eso es
importante contar con mtodos que sean apropiados para convertir una matriz
orgnica en una solucin adecuada para el anlisis.
Las muestras biolgicas estn constituidas por distintos componentes orgnicos e
inorgnicos que tienen distintos comportamientos frente a los reactivos usados en la
descomposicin. Por ejemplo, las grasas son mucho ms difciles de descomponer
que los hidratos de carbono. Tambin las trazas de elementos estn presentes de
diferente forma en las muestras, tal como sales inorgnicas (aditivos alimentarios) o
como parte de una molcula orgnica (como el hierro de la hemoglobina). Debido a
estas variaciones no existe un nico mtodo adecuado para todas las muestras
biolgicas.
Bsicamente existen tres procedimientos para la descomposicin de muestras
orgnicas:
1) Mineralizacin por va hmeda
2) Mineralizacin seca
3) Fusin.
La mineralizacin por va hmeda consiste en tratar la muestra orgnica con una
mezcla de cidos incluyendo un agente oxidante, que puede ser un cido o una sal.
La mineralizacin seca es el tratamiento de la muestra a elevada temperatura
(generalmente superior a 450C) en aire para eliminar la materia orgnica como
xidos de carbono, o a 50-100C a presin reducida. En la fusin la muestra se
mezcla con un reactivo capaz de fundir la muestra, y este procedimiento se reserva
para muestras que tienen alto contenido de constituyentes inorgnicos.
Las ventajas y desventajas de estos procedimientos pueden resumirse:

18

La mineralizacin hmeda requiere mayor tiempo por parte del operador, pero
generalmente el tiempo total es menor. Como se usa un gran volumen de reactivos,
pueden surgir problemas de contaminacin a causa de las impurezas de los mismos.
La mineralizacin por va seca requiere un tiempo total ms largo, pero la
participacin del operador es mnima. Se pueden tratar muestras relativamente
grandes si se emplean altas temperaturas. En este procedimiento, como el
recipiente que contiene la muestra debe permanecer abierto a la atmsfera, pueden
surgir problemas de contaminacin con sustancias provenientes del aire o del
equipo. Tambin pueden ocurrir prdidas por la incorporacin del analito a las
paredes del recipiente, a altas temperaturas.
En todos los procedimientos, puede ser un problema las prdidas por volatilidad del
analito. El analito tambin puede perderse por formacin de un residuo insoluble.
Prdidas por volatilizacin. El mercurio y muchos de sus compuestos son voltiles a
temperatura relativamente baja. Por ello cuando se va a determinar mercurio se
deben tomar precauciones especiales durante la descomposicin de la muestra. Es
esencial asegurarse que existan condiciones oxidantes durante toda la
descomposicin.
Los elementos que forman hidruros covalentes, arsnico, antimonio, selenio, estao
y telurio, se pierden rpidamente como hidruros a temperaturas relativamente bajas.
Tambin en este caso es necesario mantener las condiciones oxidantes.
La presencia o formacin de haluros metlicos puede causar problemas en la
descomposicin. Muchos haluros metlicos son voltiles a bajas temperaturas.
Teniendo en cuenta los puntos de ebullicin de estos compuestos, puede observarse
que muchos metales pueden perderse a las temperaturas empleadas comnmente
en la mineralizacin (450-850C). Muchas muestras biolgicas y ambientales
contienen estos compuestos.
Prdida por formacin de residuos y por incorporacin a las paredes del recipiente.
Los analitos pueden incorporarse a las paredes del recipiente durante la
mineralizacin a altas temperaturas. El mecanismo no est claro, pero la reaccin
entre un xido metlico y silicatos puede formar vidrios que no son fcilmente
atacados por cidos minerales. La presencia de cloruro de sodio, un componente
comn de las muestras orgnicas, se cree que agrava este problema.
Muchos materiales orgnicos contienen apreciable cantidad de silicona. Durante la
mineralizacin la silicona permanece en el residuo como dixido de silicona o como
un silicato. Tales residuos pueden retener analitos metlicos.
Mineralizacin por va seca. Aunque generalmente requiere un largo tiempo, es
conveniente porque el operador interviene muy poco, pueden emplearse muestras
grandes, y a menos que sea necesaria la adicin de reactivos, la contaminacin por
esta causa es mnima.
Deben mantenerse las condiciones oxidantes tanto como sea posible durante todo el
proceso. La temperatura empleada depende de la presencia o ausencia de
compuestos voltiles y de que metales se consideren. A veces se recomienda la
adicin de nitrato de aluminio o magnesio, para ayudar a mantener las condiciones
de oxidacin, acelerar la descomposicin y minimizar las interacciones del analito
con las paredes del recipiente.
La contaminacin puede ser un problema serio, ya que la muestra debe permanecer
expuesta al aire por un largo perodo, y partculas de polvo pueden quedar

19

atrapadas en la muestra. Tambin las paredes del horno pueden ser una fuente de
contaminacin. Debe realizarse este procedimiento en un ambiente lo ms limpio
posible y siempre se debe correr un ensayo en blanco.
La materia orgnica comnmente contiene apreciables niveles de sustancias que
forman un residuo insoluble en cido durante la mineralizacin. El ms comn es la
silicona. Este residuo puede atrapar trazas de elementos que no sern recuperados
posteriormente en el tratamiento con cidos. Es importante no descartar el residuo
de la mineralizacin hasta no estar seguro de que ningn elemento ha sido retenido.
Para solubilizar estos residuos se emplea cido fluorhdrico, o fusin con persulfato
de potasio o metaborato de litio.
Los materiales orgnicos varan en la temperatura requerida para su
descomposicin. Un rango de temperatura promedio sera 550-600C. El tiempo
requerido depende de la naturaleza del material y puede ser de 2 a 24 horas.
Mineralizacin por va hmeda. Una gran variedad de cidos y mezclas de cidos se
han propuesto para la descomposicin de muestras orgnicas. La mayora de las
veces es imprescindible emplear un agente oxidante (un cido u otro compuesto
mezclado con el cido) para obtener una descomposicin completa. Cuando existe
la posibilidad de prdidas por volatilizacin, la descomposicin debe hacerse bajo
reflujo o en un recipiente cerrado.
El problema de la prdida de mercurio durante la descomposicin de muestras
orgnicas, hace necesario utilizar un sistema de reflujo. El equipo tpico consta de un
matraz de base redonda unido a un condensador de reflujo. Tambin se emplea en
la determinacin de elementos que forman hidruros covalentes.
Propiedades de los cidos en la descomposicin de materia orgnica
Acido ntrico: El cido ntrico por s mismo es adecuado para descomponer
muestras orgnicas. Puede emplearse en muestras de orina (cido ntrico hirviente),
muestras de hgado y suero (tratamientos repetidos con cido ntrico fumante). Sin
embargo, el cido ntrico es comnmente usado con cido perclrico para oxidar la
materia orgnica en la mayora de las muestras.
Acido perclrico: Caliente y concentrado es agente oxidante extremadamente
fuerte. Si se usa solo para oxidar materia orgnica pueden ocurrir violentas
explosiones. Toda descomposicin con cido perclrico debe hacerse con una
mezcla de cido ntrico y cido perclrico, con cido ntrico en exceso (3 a 5 partes
de ntrico por cada parte de perclrico).
Acido sulfrico: Sus propiedades oxidantes no aparecen si no se lo calienta. Como
es un excelente deshidratante, su uso solo, resulta en un residuo negro de productos
carbonceos que son difciles de tratar. Por eso, generalmente se lo usa junto con
otras sustancias como perxido de hidrgeno o cido ntrico. La adicin de estas
sustancias tiene el efecto adicional de acelerar la descomposicin de otro modo
lenta. El cido sulfrico precipita el plomo, y no debe usarse cuando se quiere
determinar plomo. Tambin precipita el sulfato de calcio, que se sabe, puede ocluir
otros metales. El cido sulfrico es el de mayor punto de ebullicin de los cidos
usados. Esta propiedad es de gran valor cuando se desea remover las trazas de
constituyentes ms voltiles de una mezcla en descomposicin. (Ej. Cl - o F-).

20

Agua regia. (1:3 HNO3:HCl) no es comnmente empleada para descomponer

muestras orgnicas. Sin embargo su uso es satisfactorio en muchos casos en
anlisis de muestras biolgicas o ambientales, tal como el anlisis de trazas de
metales en suelos y sedimentos.
Acido fluorhdrico. No tiene poder oxidante. Solo tiene aplicacin en la
descomposicin de muestras orgnicas. La mayora de las muestras orgnicas
contienen silicona o slica en cantidades variables. Durante la descomposicin es
comn que se forme un residuo conteniendo slica, que retiene los metales de
inters. Se debe tratar entonces la muestra con una mezcla de cidos como
perclrico, ntrico y fluorhdrico para asegurarse que todos los metales pasen a la
solucin. En este caso no debe usarse material de vidrio para la descomposicin.
Puede usarse recipientes de tefln.
Fusiones
Las fusiones, aunque son muy efectivas en la descomposicin de materia orgnica,
tienen la desventaja de que en el anlisis de trazas, adicionan contaminantes. Se
recomienda no emplearla si existe otro procedimiento satisfactorio.
Se dispone de una variedad de fundentes. Estos se mezclan en gran exceso (hasta
diez veces) con la muestra. Los fundentes ms comunes usados con muestras
orgnicas son perxido de sodio, hidrxido de sodio, pirosulfato de potasio, fluoruro
de potasio y metaborato de litio. La fusin debe hacerse en un recipiente resistente
al calor y a la mezcla de fusin. Ningn material es enteramente resistente al ataque
del fundente, y se produce contaminacin. Generalmente se utiliza el platino.
Luego de la fusin, la mezcla se enfra a temperatura ambiente y se disuelve en
cidos diluidos.
MTODOS DE SEPARACIN Y PRECONCENTRACIN
Los mtodos de separacin y preconcentracin implican pasos extra en el anlisis y
deben evitarse si no son esenciales. Es aqu donde se presentan frecuentemente
problemas debido a contaminacin o prdidas.
La razn para efectuar una preconcentracin en un procedimiento, es llevar la
concentracin del analito a un nivel detectable para el mtodo de determinacin
escogido. Afortunadamente los progresos en la instrumentacin mejoran cada vez
ms los lmites de deteccin. Con el correr del tiempo, la necesidad de la
preconcentracin ir decreciendo.
Las separaciones son algunas veces necesarias para separar al analito de una
matriz interferente. Al igual que la preconcentracin, su necesidad va decreciendo a
medida que mejora la instrumentacin.
Los procedimientos ms comunes y los ms apropiados para el anlisis de trazas
son la extraccin con solventes y la cromatografa de intercambio inico.
ERRORES EN LA OBTENCIN, TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS BIOLOGICAS
PARA LA DETERMINACION DE TRAZAS DE METALES

21

Tipos de errores
Adicin de metales o contaminacin. Las adiciones no deseadas pueden tener
efectos devastadores en los resultados, en el anlisis de trazas, sobre todo para
aquellos metales que existen en niveles muy bajos en las muestras biolgicas, pero
que estn presentes a altos niveles en el ambiente o los materiales en contacto con
la muestra. Existen numerosas fuentes de adicin.
Los dispositivos para extraccin de sangre (agujas, jeringas y tubos colectores) son
importantes fuentes de adicin no deseada de elementos como cromo, manganeso,
cobalto y nquel. Las agujas metlicas deben usarse con precaucin y de preferencia
emplear catteres plsticos en el estudio de metales.
La jeringa constituye otra fuente de error. Se obtienen valores errneos para el zinc,
a causa de adicin proveniente del mbolo de goma o el tubo de plstico.
Con fines investigativos, solo se usan tubos de cuarzo en la recoleccin de muestras
de sangre. Antes de su uso se limpian con extremo cuidado. Se lavan con agua
destilada; se sumergen por dos das en perxido de hidrgeno 30%, y se enjuagan
con agua bidestilada; se hierve por ocho horas en una mezcla 1:1 de cidos ntrico y
sulfrico; se enjuaga con agua bidestilada: se hierve por ocho horas dos veces en
agua bidestilada; se enjuaga con agua bidestilada, y finalmente se coloca en
corriente de agua bidestilada por 6-8 horas. Esto se menciona solo para ejemplificar
el extremo cuidado que debe tenerse cuando se trabaja en el anlisis de trazas.
Otra importante fuente de contaminacin es el aire del ambiente, que contiene
partculas de diferente origen: naturales, como el polvo ambiental o el polen, y
aportadas por la actividad del hombre, el trfico, las industrias, etc. Constituye una
de las ms importantes fuentes de error.
Otro problema lo constituyen los reactivos qumicos. Cuando se trabaja con sangre o
plasma se debe prestar atencin al contenido de metales del anticoagulante que se
usa. Se debe investigar en todos los anticoagulantes la presencia de aluminio.
Los mayores problemas con los reactivos se producen durante los pretratamientos
(dilucin, descomposicin, preconcentracin, separacin, extraccin, etc.). Estos
problemas son relativamente fciles de manejar cuando el nivel del elemento a
determinar es del orden de 10 -6 (g/g), pero muy difciles de controlar cuando es del
orden de 10-9 (ng/g) o menor.
Prdida de elementos. Las prdidas de analito pueden alterar la integridad de la
muestra. En investigacin biomdica, sin embargo, las prdidas son mucho menos
preocupantes que las adiciones. Se estudiaron los efectos del recipiente en contacto
con la muestra a distintas temperaturas. Se determin el contenido de cobre y zinc
en pooles de suero humano contenido en erlenmeyers de vidrio de distinta
composicin, a tres temperaturas: ambiente, de refrigeracin y de freezer. Se
encontr que las prdidas eran significativas pero pequeas, despus de muchos
das de almacenamiento. An no existen datos concluyentes, y las observaciones
realizadas deben tomarse con precaucin. La literatura contiene un gran nmero de
observaciones experimentales sobre el intercambio de metales entre soluciones
acuosas diluidas y recipientes de distintos materiales.
Cuando las muestras de suero o plasma deben guardarse para su anlisis posterior,
pueden surgir otros problemas. El almacenamiento prolongado de muestras
pequeas en recipientes de polietileno o plstico puede producir prdidas de agua
por difusin a travs de las paredes o por sublimacin en caso de cierre inadecuado.

22

An ms importantes son las prdidas de compuestos voltiles de selenio y

mercurio.
Frecuentemente se usa la deshidratacin para estabilizar muestras biolgicas.
Existen distintas variantes, como deshidratacin a presin reducida y bajas
temperaturas, secado en horno, y deshidratacin en freezer o liofilizacin. Todos
estos mtodos estn sujetos a prdidas de elementos y deben estudiarse en
particular, sobre todo para aquellos elementos que forman compuestos voltiles.
Es necesario aclarar que no es necesario tomar las mismas precauciones para todos
los elementos que se estudien. Los factores decisivos que determinan la
significancia de los errores por contaminacin son la concentracin intrnseca del
metal en la muestra, y el contenido de ese metal en todos los materiales (tubos de
recoleccin, recipientes de almacenamiento, pipetas, reactivos, etc.) en contacto con
la muestra.
APLICACIN
DETERMINACIN DE TXICOS MINERALES EN TEJIDO HUMANO
PRETRATAMIENTOS DE LA MUESTRA
En casos de muerte por intoxicacin, se procede a preparar un pool de vsceras. El
mdico forense toma porciones de cerebro, pulmn, hgado, corazn, aparato
digestivo, vasos, sangre y orina. Generalmente no se analiza cada tejido por
separado a menos que se busque un txico especfico, que tenga un rgano blanco
(Ej. Intoxicacin con digitalina, se toma muestra de corazn). De lo contrario lo que
se hace es un pool de vsceras, tomando una porcin de cada rgano.
Si queremos determinar compuestos fijos inorgnicos, el primer paso es eliminar la
materia orgnica.
Destruccin de la materia orgnica: caractersticas
1) Evitar las prdidas. Generalmente en toda materia viva hay cloruros, y estos con
los metales reducidos como arsnico y mercurio forman compuestos voltiles,
entonces todo procedimiento que tienda a favorecer la eliminacin de cloruros
voltiles modificar la composicin de la muestra. Pueden haber prdidas por
arrastre mecnico; si se producen proyecciones se pierde material. Pueden
haber prdidas por adsorcin, ya sea a las paredes del recipiente o cuando se
forma carbn durante el proceso. La mineralizacin debe ser en lo posible rpida.
2) Evitar contaminacin por los reactivos. La mayora de los reactivos que usamos
en el laboratorio contienen cierta cantidad de metales pesados, an los de grado
reactivo. Por eso es necesario hacer un blanco.
3) Los equipos de vidrio no deben ceder componentes. Los que ms se utilizan son
los de vidrio tipo pirex (boro silicato), perfectamente lavado con cido ntrico y
enjuagado con agua bidestilada hasta eliminar todo el cido.
Los mtodos que se utilizan son los mtodos de mineralizacin de muestras
orgnicas ya vistos. Los ms utilizados son:
- Mineralizacin con mezcla sulfo-ntrico-perclrica
- Mineralizacin con mezcla sulfo-ntrica

23

Finalizada la mineralizacin, se obtiene una solucin que debera contener la

totalidad de los componentes inorgnicos de la muestra, incluyendo los txicos
minerales, si estuvieren presentes. Se procede entonces a aplicar el mtodo de
determinacin especfico para el analito que se investiga.

BIBLIOGRAFIA

R. B. Fischer - D. G. Peters, Anlisis Qumico Cuantitativo

D. C. Harris, Anlisis Qumico Cuantitativo
M. Valcrcel - M. D. Luque de Castro, Non-Cromatographic Continuous Separation Techniques
H.G. Seiler - A. Sigel - H. Sigel, Handbook of Metals in Clinical and Analytical Chemistry

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