Aceites esenciales

Definicin
Los componentes voltiles provenientes de plantas han atrado la atencin del hombre desde la antigedad como principios
aromticos o especies de gran complejidad en su composicin. El estudio de los aceites esenciales como materias primas
bsicas para la industria de fragancias y sabores, se ha transformado en una de las reas de investigacin y desarrollo ms
importantes para muchos pases. Inicialmente considerados como material de deshecho del metabolismo de las plantas, la
importancia biolgica de los aceites esenciales ha sido reconocida slo recientemente.
Los aceites esenciales son las fracciones lquidas voltiles, generalmente destilables por arrastre con vapor de agua, que
contienen las sustancias responsables del aroma de las plantas y que son importantes en la industria cosmtica (perfumes y
aromatizantes), de alimentos (condimentos y saborizantes) y farmacutica (saborizantes).
Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de hasta ms de 100 componentes que pueden tener la siguiente
naturaleza qumica:

Compuestos alifticos de bajo peso molecular (alcanos, alcoholes, aldehdos, cetonas, steres y cidos),
Monoterpenos,
Sesquiterpenos,
Fenilpropanos.

En su gran mayora son de olor agradable, aunque existen algunos de olor relativamente desagradable como por ejemplo los
componentes que forman parte de la fraccin aromtica del ajo y la cebolla, los cuales contienen compuestos azufrados.
Los aceites pueden estar asociados formando mezclas con otros productos naturales como es el caso de las resinas y
productos relacionados.
Resinas y combinaciones de resinas
Dentro de este grupo de productos naturales, podemos encontrar a su vez una serie de posibles combinaciones o mezclas:
1. Resinas, son productos amorfos slidos o semislidos de naturaleza qumica compleja. Pueden ser de origen fisiolgico o
fisiopatolgico.
Ejemplos:

resina colofonia, obtenida por separacin de la oleorresina trementina. Composicin: cido abitico y derivados

resina jalapa, extraccin alcohlica de la raz de Exogonium purga. Composicin: glicsidos con accin como
catrticos.
2. Oleorresinas, son mezclas homogneas de resinas y aceites esenciales.
Ejemplos:

oleorresina trementina, obtenida por incisin en los troncos de diversas especies de Pinus. Composicin: resina
(colofonia) y aceite esencial (esencia de trementina) que se separa por destilacin por arrastre con vapor

oleorresina copaiba, obtenida por incisin en los troncos de diversas especies de Copaiba. Composicin: resina y
aceite esencial que se separa por destilacin por arrastre con vapor.
Tambin se utiliza el trmino oleorresina para nombrar los extractos vegetales obtenidos mediante el uso de solventes, los
cuales deben estar virtualmente libres de dichos solventes. Se utilizan extensamente para la sustitucin de especias de uso
alimenticio y farmacutico por sus ventajas (estabilidad y uniformidad qumica y microbiolgica, facilidad de incorporar al
producto terminado).
3. Goma-resinas, son extractos naturales obtenidos de un rbol o planta. Estn compuestos de mezclas de gomas y resinas.
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Ejemplo:

guta, obtenida por incisiones de la corteza de Garcinia handburyi. Composicin: resina y un polisacrido (arabina).
Si la fuente de la goma-resina tambin contiene un aceite esencial, se denomina oleo-goma-resina.
Ejemplo:

asaftida (obtenida por incisiones en las races y rizomas de diversas especies del gnero Ferula), mirra (obtenida por
incisiones en las cortezas de diversas especies del gnero Commiphora).
4. Blsamos, son extractos naturales obtenidos de un arbusto o un rbol. Se caracterizan por tener un alto contenido de
cido benzoico y cinmico, as como sus correspondientes steres.
Ejemplos:

blsamo de benju, obtenido por incisin de las cortezas de diversas especies del gnero Styrax

blsamo de Per, obtenido por incisin de los troncos de rboles del gnero Myroxylon.
Clasificacin de los aceites esenciales
Los aceites esenciales se clasifican con base en diferentes criterios: consistencia, origen y naturaleza qumica de los
componentes mayoritarios.
De acuerdo con su consistencia los aceites esenciales se clasifican en esencias fluidas, blsamos y oleorresinas. Las
esencias fluidas son lquidos voltiles a temperatura ambiente. Los blsamos son de consistencia ms espesa, son poco
voltiles y propensos a sufrir reacciones de polimerizacin, son ejemplos el blsamo de copaiba, el blsamo del Per,
Benju, blsamo de Tol, Estoraque, etc. Las oleorresinas tienen el aroma de las plantas en forma concentrada y son
tpicamente lquidos muy viscosos o sustancias semislidas (caucho, gutapercha, chicle, oleorresina de paprika, de pimienta
negra, de clavero, etc.).
De acuerdo a su origen los aceites esenciales se clasifican como naturales, artificiales y sintticas. Los naturales se obtienen
directamente de la planta y no sufren modificaciones fsicas ni qumicas posteriores, debido a su rendimiento tan bajo son
muy costosas. Los artificiales se obtienen a travs de procesos de enriquecimiento de la misma esencia con uno o varios de
sus componentes, por ejemplo, la mezcla de esencias de rosa, geranio y jazmn enriquecida con linalool, o la esencia de ans
enriquecida con anetol. Los aceites esenciales sintticos como su nombre lo indica son los producidos por la combinacin
de sus componentes los cuales son la mayora de las veces producidos por procesos de sntesis qumica. Estos son ms
econmicos y por lo tanto son mucho ms utilizados como aromatizantes y saborizantes (esencias de vainilla, limn, frutilla,
etc.).
Desde el punto de vista qumico y a pesar de su composicin compleja los aceites esenciales se pueden clasificar de
acuerdo con los componentes mayoritarios. Segn esto los aceites esenciales ricos en monoterpenos se denominan aceites
esenciales monoterpnicos (por ej. hierbabuena, albahaca, salvia, etc.). Los ricos en sesquiterpenos son los aceites
esenciales sesquiterpnicos (por ej. copaiba, pino, junpero, etc.). Los ricos en fenilpropanos son los aceites esenciales
fenilpropanoides (por ej. clavo, canela, ans, etc.).
Aunque esta clasificacin es muy general resulta til para estudiar algunos aspectos fitoqumicos de los monoterpenos, los
sesquiterpenos y los fenilpropanos, sin embargo existen clasificaciones ms complejas que tienen en cuenta otros aspectos
qumicos.
Distribucin y estado natural
Los aceites esenciales se encuentran ampliamente distribuidos en plantas que incluyen las Compuestas, Labiadas,
Laurceas, Mirtceas, Pinceas, Rosceas, Rutceas, Umbelferas, etc. Se les puede encontrar en diferentes partes de la
planta: en las hojas (ajenjo, albahaca, eucalipto, hierbabuena, mejorana, menta, pachul, romero, salvia, etc.), en las races
(anglica, crcuma, jengibre, sndalo, sasafrs, valeriana, vetiver, etc.), en el pericarpio del fruto (ctricos como limn,
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mandarina, naranja, etc.), en las semillas (ans, cardamomo, hinojo, comino, etc.), en el tallo (canela, etc.), en las flores
(lavanda, manzanilla, piretro, tomillo, rosa, etc.) y en los frutos (nuez moscada, perejil, pimienta, etc.).
Aunque en los aceites esenciales tanto los mono-, los sesquiterpenos y los fenilpropanos se les encuentra en forma libre, ms
recientemente se han investigado los que estn ligados a carbohidratos, ya que se considera que son los precursores
inmediatos del aceite como tal.
Extraccin y aislamiento
Los diferentes procesos de extraccin utilizados en la obtencin de aceites esenciales y extractos aromticos, se pueden
resumir de la siguiente forma:

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Mtodo

Mtodos de extraccin de mezclas aromticas

Procedimiento

Productos obtenidos

1. Mtodos directos
1.1.1. Compresin de cscaras
1.1. Expresin

aceites esenciales ctricos

1.1.2. Raspado de cscaras

1.2. Exudado

1.2.1. Lesiones mecnicas en cortezas

gomas, resinas, blsamos

2. Destilacin
2.1. Directa
2.2. Por arrastre con vapor (directo,
indirecto, a presin, a vaco)

aceites esenciales, y aguas aromticas

2.3. Destilacin-maceracin
almendras, mostaza, ajo, hojas de abedl
(liberacin enzimtica de agliconas en
agua caliente)

3. Extraccin con solventes

3.1.1. En caliente

infusiones y resinoides alcohlicos en

caliente, oleoresinas

3.1.2. En fro

concretos y absolutos, resinoides en

fro, oleoresinas

3.2.1. En caliente

pomadas en caliente,
absolutos de pomadas

3.2.2. En fro

pomadas en fro, lavados y absolutos de

enflorados

3.1 Solventes voltiles

lavados

3.2. Solventes fijos (grasas y aceites)

4. Procesos de extraccin con fluidos en

condiciones subcrticas y supercrticas

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Los aceites esenciales se pueden extraer de las muestras vegetales mediante diferentes mtodos como: expresin,
destilacin con vapor de agua, extraccin con solventes voltiles, enfleurage y con fluidos supercrticos.
En la expresin el material vegetal es exprimido mecnicamente para liberar el aceite y este es recolectado y filtrado. Este
mtodo es utilizado para el caso de las esencia de ctricos.
En la destilacin por arrastre con vapor de agua, la muestra vegetal generalmente fresca y cortada en trozos pequeos,
se coloca en una recipiente cerrado y sometida a una corriente de vapor de agua sobrecalentado, la esencia as arrastrada
es posteriormente condensada, recolectada y separada de la fraccin acuosa. Esta tcnica es muy utilizada especialmente
para esencias fluidas, especialmente las utilizadas para perfumera. Se utiliza a nivel industrial debido a su alto rendimiento,
la pureza del aceite obtenido y porque no requiere tecnologa sofisticada.
En el mtodo de extraccin con solventes voltiles, la muestra seca y molida se pone en contacto con solventes tales
como alcohol, cloroformo, etc. Estos solventes solubilizan la esencia pero tambin solubilizan y extraen otras sustancias
tales como grasas y ceras, obtenindose al final una esencia impura. Se utiliza a escala de laboratorio pues a nivel industrial
resulta costoso por el valor comercial de los solventes, porque se obtienen esencias impurificadas con otras sustancias, y
adems por el riesgo de explosin e incendio caractersticos de muchos solventes orgnicos voltiles.
En el mtodo de enflorado o enfleurage, el material vegetal (generalmente flores) es puesto en contacto con una grasa. La
esencia es solubilizada en la grasa que acta como vehculo extractor. Se obtiene inicialmente una mezcla (concreto) de
aceite esencial y grasa la cual es separada posteriormente por otro medios fisico-qumicos. En general se recurre al
agregado de alcohol caliente a la mezcla y su posterior enfriamiento para separar la grasa (insoluble) y el extracto
aromtico (absoluto). Esta tcnica es empleada para la obtencin de esencias florales (rosa, jazmn, azahar, etc.), pero su
bajo rendimiento y la difcil separacin del aceite extractor la hacen costosa.
El mtodo de extraccin con fluidos supercrticos, es de desarrollo ms reciente. El material vegetal cortado en trozos
pequeos, licuado o molido, se empaca en una cmara de acero inoxidable y se hace circular a travs de la muestra un
fluido en estado supercrtico (por ejemplo CO2), las esencias son as solubilizadas y arrastradas y el fluido supercrtico, que
acta como solvente extractor, se elimina por descompresin progresiva hasta alcanzar la presin y temperatura ambiente,
y finalmente se obtiene una esencia cuyo grado de pureza depende de las condiciones de extraccin. Aunque presenta
varias ventajas como rendimiento alto, es ecolgicamente compatible, el solvente se elimina fcilmente e inclusive se puede
reciclar, y las bajas temperaturas utilizadas para la extraccin no cambian qumicamente los componentes de la esencia, sin
embargo el equipo requerido es relativamente costoso, ya que se requieren bombas de alta presin y sistemas de
extraccin tambin resistentes a las altas presiones.
Monoterpenos y sesquiterpenos
Los monoterpenos y sesquiterpenos son terpenos de 10 y 15 tomos de carbonos derivados biosintticamente de
geranilpirofosfato (GPP) y farnesilpirofosfato (FPP) respectivamente. La Figura 1 muestra ejemplos de monoterpenos y
sesquiterpenos naturales. De acuerdo con su estructura se les clasifica segn el nmero de ciclos como acclicos,
monocclicos, bicclicos, etc.

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mentano

tuyano

carano

canfano

mirceno

CH2OH
CHO

geraniol

geranial

humulano
bisabolano

cadinano

eremofilano

elemano

cariofilano

Figura 1. Ejemplos de mono- y sesquiterpenos naturales

Biosntesis
Los monoterpenos y en general todos los compuestos terpenoides naturales se biosintetizan por la ruta de la acetilcoenzima
a travs de un intermedio comn que es el cido mevalnico. Sin embargo, recientemente se ha propuesto que algunos
terpenoides no se originan por esta ruta, sino por una ruta alterna que puede involucrar piruvato, gliceraldehdo-3-fosfato y
un intermedio de 5 tomos de carbono, la 1-desoxi-xilulosa-5-fosfato.
Secuencia biosinttica
1. Biosntesis del cido mevalnico
Inicialmente se condensan dos molculas de acetilCoA, con la participacin hipottica de una -cetotiolasa y una enzima
condensante. Esta unidad es atacada por otra unidad de acetilCoA que ha perdido un H-. La hidrlisis de una de las dos
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funciones tioster da lugar a la -hidroxi--metilglutarilcoenzima-A. Una segunda hidrlisis del otro grupo tioster seguida
de dos reducciones sucesivas con una reductasa NADPH-dependiente se llega al cido mevalnico.
2. Biognesis de IPP y DMAPP
El cido mevalnico es el precursor de las dos unidades bsicas que dan origen a los terpenoides: Isopentenilpirofosfato
(IPP) y dimetilalilpirofosfato (DMAPP). Inicialmente, una molcula de cido mevalnico es pirofosfatada por dos unidades
de ATP para originar mevalonil-pirofosfato. La molcula sufre un proceso concertado de descarbonatacin con la
participacin de otra molcula de ATP. De esta manera se origina una molcula de Isopentenilpirofosfato (IPP). La
isomerizacin del enlace doble del IPP da origen a la unidad de DMAPP.
3. Condensacin cabeza-cola de IPP y DMAPP
Una unidad de IPP puede condensarse con muchas unidades DMAPP mediante un proceso de condensacin comnmente
denominado condensacin "cabeza-cola", siendo la cabeza la funcin pirofosfato y la cola el extremo donde estn ubicados
los metilos. El proceso de condensacin de dos molculas de 5 tomos de carbono (IPP y DMAPP) da origen a una
molcula de 10 tomos de carbono: geranilpirofosfato (GPP). Esta sustancia es el precursor inmediato de todos los
monoterpenos naturales. La condensacin de geranilpirofosfato con una nueva unidad IPP da origen al farnesilpirofosfato
(FPP), el cual es el precursor de todos los sesquiterpenos naturales.

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OH
HO2C

acetil-CoA

isomerasa

OPP

OH

OP

HR

Hs
isopentenil PP
(IPP)

cido mevalnico

dimetilalilpirofo
(DMAPP)

OPP

OPP

HR

DMAPP

HR HS

Hs
IPP

OPP

E
OPP

OPP
geranil PP
(GPP)

OPP

OPP
HR

GPP

HR

HS

Hs

OPP

OPP
farnesil PP
(FPP)
Figura 1. Biosntesis de mono y sesquiterpenos
Ejemplos de monoterpenos y sesquiterpenos naturales
La Figura 2 muestra varios ejemplos de monoterpenos naturales representantes de varias clases de esqueletos como
mentano, pinano, canfano, etc.
La Figura 3 muestra ejemplos de sesquiterpenos naturales con varias clases de esqueletos.

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CH2OH
CHO

CH2OH

Nerol

Geraniol

Citronelal

Limoneno

OH

Car-3-eno

Alcohol
Fenchlico

Fenchona

O H
O

alfa-Pineno

Thuyona

O
O

Alcanfor
gama-Thuyaplicina

Figura 2. Ejemplos de monoterpenos

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Nepetalactona

HOCH2
OH

Farnesol

Nerolidol

alfa-Cadineno

gama-Bisaboleno

Cariofileno

beta-Selineno

OH
HO

COOH
O

Carotol

Acido abscsico

Figura 3. Ejemplos de sesquiterpenos

Mtodos de anlisis
Ensayos de reconocimiento
Debido a la diversidad de grupos funcionales que pueden estar presentes en los componentes mono- y sesquiterpnicos de
un aceite esencial no existe una prueba especfica para su reconocimiento. Sin embargo existen unos pocos procedimientos
experimentales que permiten reconocer algunos de ellos por su coloracin con diferentes reactivos, su absorcin de luz UV
de 254 nm y su Rf en cromatografa en capa fina. A manera de ejemplo la Tabla 1 resume las caractersticas de varios
monoterpenos y su comportamiento al analizarlos por cromatografa en capa fina con varios agentes reveladores. Por
ejemplo, el limoneno se reconoce en las placas de TLC porque no absorbe luz UV 254 nm, adiciona bromo, no forma un
derivado 2,4-dinitrofenilhidrazona y produce color pardo con el cido sulfrico.
Otros reactivos tiles para revelar monoterpenos y sesquiterpenos son anisaldehdo-cido sulfrico, vainillina-cido
sulfrico y cido fosfomolbdico.
Tabla 1. Reconocimiento de Monoterpenos por TLC
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TERPENO

UV

Limoneno
-Pineno
Pulegona
Geraniol
Carvona
p-Cimeno
-Terpineol
1,8-Cineol

+
+
+
-

ENSAYO
BROMO
+
+
+
+
+
+
-

ENSAYO
2,4-DNFH
+
+
-

ENSAYO
H2SO4
Pardo
Pardo
Amarillo
Prpura
Rosa
Verde
Verde

Mtodos fundamentales de anlisis de aceites esenciales

1. determinaciones fsicas
1.1. aroma
1.2. peso especfico
1.3. ndice de refraccin
1.4. desviacin ptica (poder rotatorio)
1.5. solubilidad en mezclas alcohol-agua (alcoholes rebajados)
2. determinaciones qumicas
2.1. ndice de acidez libre
2.2. ndices de saponificacin y ster
2.3. determinacin de aldehdos y cetonas
2.3.1. formacin de fenilhidrazonas
2.3.2. formacin de oximas
2.3.3. formacin de semicarbazonas
2.3.4. mtodo del bisulfito
2.4. ndice de acetilo
2.5. tcnicas cromatogrficas: TLC, TLC/AgNO3, HRGC, HPLC
2.6. mtodos espectroscpicos: UV, IR, GC-MS, 1H-, 13C-NMR
Extraccin y aislamiento
Como se mencion anteriormente, la mayora de monoterpenos y sesquiterpenos se encuentran presentes en los aceites
esenciales de diversas plantas. A partir de dichos aceites es posible realizar su aislamiento mediante la utilizacin de uno o
varios mtodos cromatogrficos tales como la cromatografa en columna, en capa fina y HPLC. Para las cromatografas en
columna y en capa fina se utiliza ampliamente la slica gel como fase estacionaria. Como fase mvil se emplea solventes
apolares puros o mezclados. Sin embargo actualmente se utilizan tcnicas de separacin ms eficientes y rpidas como la
cromatografa lquida de alta eficiencia HPLC, y la cromatografa de gases (GC), as como tambin combinaciones online HPLC-GC-MS.
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Esta ltima tcnica gracias al desarrollo reciente de columnas capilares de alta resolucin, permite analizar mezclas
complejas presentes en aceites esenciales, e identificar los componentes a partir de los tiempos de retencin a travs de los
denominados Indices de Retencin de Kovats (IK). Estos valores son caractersticos para cada componente y existen
bases de datos con los ndices de muchos componentes de aceites esenciales.
Los valores IK se determinan en dos columnas cromatogrficas una polar (por ejemplo Carbowax 20M) y una apolar (por
ejemplo SE-52, DB-5).
Adicionalmente, la tcnica acoplada Cromatografa de Gases-Espectrometra de Masas (GC-MS), permite obtener el
espectro de masas de cada componente con el cual se obtiene el peso molecular e informacin estructural. As mismo
existen bases de datos con los espectros de masas de muchos componentes, por lo cual el ndice de Kovats (determinado
en dos columnas de diferente polaridad) y el espectro de masas son criterios para la asignacin qumica de muchos
componentes de aceites esenciales, no solo monoterpenos sino tambin otros tipos de sustancias caractersticas de dichos
aceites.
Ms recientemente se han desarrollado columnas cromatogrficas quirales para la separacin de componentes pticamente
activos, y se han desarrollado mtodos para el anlisis combinado HPLC-MS y HPLC-NMR de mezclas de
sesquiterpenos.
Caracterizacin espectral
Los monoterpenos y sesquiterpenos en un buen nmero se pueden caracterizar qumicamente a partir de los datos de
cromatografa de gases y los espectros de masas tal como se anot anteriormente, pero cuando existen dudas de tal
caracterizacin se recurre a los mtodos espectrales como Infrarrojo, Ultravioleta y Resonancia Magntica Nuclear.
Espectro infrarrojo
El espectro infrarrojo permite detectar la presencia de grupos hidroxilo, carbonilo, anillos aromticos, enlaces dobles C=C
cis y trans, etc. Para determinar el espectro basta con colocar una gota del componente en una celda de NaCl.
Espectro ultravioleta
El espectro UV de los monoterpenos y sesquiterpenos permite el reconocimiento de grupos funcionales y grupos
cromforos. Por ejemplo el limoneno presenta un mximo de absorcin en 262 nm (E=6400). En general, la
espectrofotometra ultravioleta tiene una utilidad limitada en el estudio de la gran mayora de los aceites esenciales
terpnicos, ya que pocos terpenos tienen grupos cromforos. Sin embargo, en la fraccin no voltil de los aceites
esenciales ctricos se encuentran componentes carotenoides o con ncleos heterocclicos oxigenados (cumarinas,
furocumarinas sustituidas y polimetoxiflavonas), lo que da a estas esencias un comportamiento caracterstico en el UV. Esta
particularidad se ha utilizado para la puesta a punto de mtodos que permite evaluar la calidad y la genuinidad, identificar el
origen geogrfico de una muestra, la tecnologa empleada para su extraccin o la poca de produccin del aceite.
Espectro de Resonancia Magntica Nuclear
Gracias a los desarrollos de la NMR se cuenta con bases de datos de los espectros, especialmente de 13C-NMR para los
monoterpenos y sesquiterpenos ms frecuentes. En la Figura 4 se presentan los desplazamientos qumicos de los carbonos
de varios monoterpenos y varios sesquiterpenos.

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17.6

16.1
26.8

131.1
25.6

39.8

124.4

17.6

136.9

58.6

27.7

131.5

OH

125.3

22.8

25.6

124.5

25.4

15.9

13.7

39.7

125.0

124.3

39.8

145.9 26.1

OH

124.7

17.1

30.8

FARNESOL

25.1

124.4

17.4

17.0

162.1

27.2

132.2

128.7
32.5

123.1

131.0

MIRCENO

24.4

17.4

26.3

145.1

115.5

112.9

132.9

OH

139.0

137.1 58.6

134.9 25.6

26.9

130.8

42.2

111.5

LINALOOL

GERANIOL
17.4

73.3

25.3

CHO

162.1

26.0
40.5

123.5

190.0

CHO

127.5

189.4

trans-CITRAL

cis-CITRAL

23.8

23.1

22.3
120.7
45.6
70.9

23.5

25.9

OH

50.4

MENTOL

197.7
31.3

30.6

28.0
41.2

TERPINEOL

149.7
20.5

43.1

119.6

28.5

116.5

24.8

42.7

108.4

LIMONENO
19.5

131.5

20.0
9.7

46.6

57.0
30.1

43.2

O
214.7

140.9

147.2
20.2

23.6

22.2

143.8

30.9

27.1

26.7

15.4
135.2

120.8

OH

71.9
16.0

30.9

44.6

25.8
21.0

133.2

132.9

31.9
35.0

34.0
110.3

CARVONA

20.6

27.4

43.2

20.6

TERPINENO

ALCANFOR

Figura 4. Desplazamientos qumicos (ppm) de varios mono- y sesquiterpenos

Por otra parte, el desarrollo reciente de los mtodos bidimensionales homo- y heteronucleares, han permitido la
determinacin estructural fina de los terpenoides y dems sustancias naturales, eliminando la ambigedad en la asignacin
de las seales observadas.
Espectrometra de Masa
En relacin con el estudio de aceites esenciales el acoplamiento del HRGC a la Espectrometra de Masa (GC-MS) es el
que ha recibido mayor atencin desde su introduccin. La tcnica acoplada GC-MS permite obtener el espectro de masas
de cada componente eludo. Se obtiene el dato de su peso molecular e informacin estructural. Existen bases de datos con
los espectros de masas de muchos componentes, por lo cual el ndice de Kovats (determinado en dos columnas de
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diferente polaridad) y el espectro de masas son criterios para la identificacin qumica de muchos de los componentes de
un aceite esencial, sean monoterpenos u otros tipos de sustancias caractersticas de dichos aceites.
En el acoplamiento de GC-MS, la tcnica de ionizacin ms utilizada es la de impacto electrnico (EI). Sin embargo la
tcnica de ionizacin qumica (CI) tiene cada vez ms aplicaciones, por la mayor informacin que permite obtener
Fenilpropanos
Los fenilpropanos son sustancias naturales ampliamente distribuidas en los vegetales caracterizadas por un anillo aromtico
unido a una cadena de 3 carbonos y derivados biosintticamente del cido shikmico. La Figura 5 muestra varios ejemplos
de fenilpropanoides ampliamente distribuidos. Ntese como la cadena lateral puede presentar varios estados de oxidacin
(grupos metilo, hidroximetileno, aldehdo y carboxilo) e insaturacin. El anillo aromtico generalmente est sustituido en los
carbonos 3, 4 y 5, siendo estos sustituyentes grupos hidroxilo, metoxilo o metilndioxi, principalmente.
OH

OH

CHO

HO
OCH3
Alcohol hidrocinamlico

CH3O

Cinamaldehdo

Alcohol coniferlico

HO

HO

Ans-cetona

OCH3

OCH3

Eugenol

Isoeugenol
CH3O
O
O

Isosafrol

Safrol

Isomiristicina

CH3O

OH CH3O
GluO

O
O
Miristicina

OCH3

OH

O
O

Coniferina
(glicsido)

Apiol

HO
HO

CH3O
OH

Anetol

Elemicina

Figura 5. Ejemplos de fenilpropanos naturales presentes en aceites esenciales

Biosntesis
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Los fenilpropanos presentes en los aceites esenciales se originan biosintticamente a partir del cido shikmico. El cido
shikmico se aisl inicialmente de la planta asitica Illicium sp. (Fam. Illiciaceae) y es reconocido como un compuesto que
es el punto de partida para un vasto nmero de compuestos naturales de muchas clases. Aunque es un discreto
constituyente vegetal, no hay duda de que es un metabolito universal de las plantas superiores. El cido shikmico es el
precursor de los constituyentes vegetales que contienen anillos aromticos diferentes a los formados por la ruta de la
malonilcoenzima-A Hay en muchos casos dos patrones estructurales claros que permiten reconocer los compuestos
aromticos derivados biosintticamente desde el cido shikmico: el patrn de oxigenacin, y la presencia de anillos
aromticos ligados a cadenas de tres tomos de carbono (patrn C6C3). Mientras que en los metabolitos aromticos
originados por la va de la malonilcoenzima-A, los grupos oxigenados se hallan en disposicin meta entre s, en el caso de
los originados a partir del cido shikmico, los grupos oxigenados estn en disposicin orto diorto entre s.
La Figura 6 esquematiza la biosntesis de fenilpropanoides a travs de la formacin del cido shikmico. Este precursor es
convertido posteriormente en los aminocidos fenilalanina o tirosina los cuales por accin enzimtica dan origen bien sea al
cido cinmico o p-hidroxicinmico (tambin llamado cido p-cumrico por otros autores). Estos dos cidos aromticos
son los precursores directos de los fenilpropanos naturales.

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OP

O
HO

OH
OH

O
CH2

Pi

OP

Pi

HO

OH
OH

OH
OH
eritrosa-4-fosfato

fosfoenolpiruvato
COOH

5-dehidroquinato

OP
COOH

COOH

fosfoenolpirvico
OH

HO

OH

OH

ATP

ADP

PO

OH
OH

OH
O

cido shikimico

NH2
OH

O
COOH

Pi

OH

OH

O
CO2 H2O
OH

cido fenilpirvico
OH
O

cido cinmico

OH

OH

O 1) p-hidroxilacin

NH3

fenilalanina

reduccin

reduccin

2) metilacin

OMe

OMe

OMe
anetol

Figura 6. Biosntesis de fenilpropanoides a travs de la formacin del cido shikmico

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Mtodos de anlisis
Extraccin y aislamiento
Los fenilpropanos presentes en aceites esenciales se extraen con la misma metodologa descrita anteriormente para monoy sesquiterpenos. Sin embargo, debido a su anillo aromtico presentan ventajas en su deteccin por TLC y HPLC pues
absorben luz ultravioleta (254 nm) y no requieren ser revelados con agentes qumicos, ni necesitan ser derivatizados, y por
lo tanto pueden aislarse y analizarse ms fcilmente.
Ensayos de reconocimiento
Existen ensayos de reconocimiento para el anillo aromtico como la reaccin con formaldehdo y cido sulfrico. As
mismo en el caso de fenilpropanos con hidroxilos fenlicos estos pueden reconocerse por el ensayo del cloruro frrico, el
cual produce coloraciones verdes y azules con sustancias fenlicas en general.
La tabla 2 presenta los valores Rf y coloraciones con dos reactivos reveladores para varios fenilpropanos. Bajaj et al.
reportaron la utilidad del reactivo Cloramina-T para la deteccin de varios compuestos fenlicos.
Tabla 2. Valores Rf en slica gel y colores de algunos fenilpropanos
Compuesto

Safrol
Estragol
Anetol
Miristicina
Apiol
Timol
Eugenol
Isoeugenol
Metileugenol
Metilisoeugenol
Elemicina

Rf
en Rf en
Benceno n-hexano/CHCl3
(3 :2)
0.74
0.86
0.72
0.69
0.50
0.71
0.39
0.41
0.38
0.20
0.31
0.29
0.27
0.42
0.42
0.27

Color con
VainillinaH2SO4
Rosado
Rojo
Pardo
Pardo
Rojo
Pardo
Rojo
-

Color con
R. de Gibbs
Gris
Pardo
Pardo
Pardo
Amarillo
Rojo pardo
Prpura
Amarillo

Caracterizacin espectral
Espectro infrarrojo
Por tratarse de sustancias con anillo aromtico, sus espectros infrarrojo muestran las seales caractersticas de estos
compuestos y dan informacin sobre el tipo de sustitucin del anillo aromtico adems de los grupos funcionales presentes
en la molcula. Por ejemplo, el espectro IR del eugenol muestra entre otras bandas en 3500 (ancha) debida al grupo
hidroxilo, 1510 caracterstica de aromticos, y tres bandas en 990, 920 y 938 cm-1 caractersticas de un grupo vinilo
monosustitudo. El espectro IR del cinamaldehdo muestra bandas en 3330 (dbil), 3050, 2820, 2750, 1660 (intensa,
debida al grupo carbonilo), 975, 740 y 695 cm-1 entre otras.
Espectro ultravioleta

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A diferencia de la mayora de mono- y sesquiterpenos, los fenilpropanos absorben luz UV con mximos alrededor de 254
nm dependiendo de los grupos cromforos presentes en la molcula. Por ejemplo el isoeugenol muestra mximos en 260
(15850) y 305 (7000), el safrol en 286 nm, la miristicina en 276 nm, el isosafrol en 264 nm, el cido trans-cinmico en 273
nm y el cido cis-cinmico en 264 nm.
Espectro de Resonancia Magntica Nuclear
Los espectros de 1H-NMR de los fenilpropanos muestran seales de protones aromticos alrededor de 6-8 ppm cuyas
multiplicidades y constantes de acoplamiento permiten realizar una asignacin estructural clara an con espectros de baja
resolucin.
Espectrometra de Masa
Debido tambin a su anillo aromtico, los fenilpropanos presentan espectros de masa con iones moleculares intensos, lo
que facilita la determinacin de su peso molecular.
En el caso de compuestos con grupos carboxilo e hidroxilo es conveniente derivatizarlos para obtener sustancias ms
volatilizables y trmicamente ms estables, ya que esto facilita por ejemplo su anlisis en mezclas mediante GC o GC-MS.
Tratamientos posteriores al proceso de extraccin
Posteriormente al proceso de extraccin, puede ser necesario realizar una o mas de los tratamientos que se enumeran:
1. purificacin de absolutos
2. eliminacin de colorantes
3. desterpenacin
3.1 destilacin fraccionada con vaco
-cabeza de destilacin: hidrocarburos monoterpnicos
-cuerpo de destilacin: componentes oxigenados (mono y sesquiterpenos)
-1a cola de destilacin: hidrocarburos sesquiterpnicos
-2da cola de destilacin: ceras y alquitranes de destilacin
3.2 extraccin con solventes selectivos
-mezclas etanol-agua
-empleo de 2 solventes inmiscibles a contracorriente
3.3 separacin por adsorcin cromatogrfica
4. descerado

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