UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE HONDURAS

ESCUELA DE MICROBIOLOGA
SECCIN DE BACTERIOLOGA


CURSO TERICO-PRCTICO
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades
causadas por Clostridium difficile


IMPARTIDO POR:
Dr. Carlos Quesada Gmez (CQ)
Dra. Evelyn Rodrguez Cavallini (ER)
Dipl. Robin Crdenas Mora (RC)
Laboratorio de Investigacin en Bacteriologa Anaerobia
Facultad de Microbiologa, Universidad de Costa Rica








CURSO TERICO-PRCTICO
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades
causadas por Clostridium difficile





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P R O G R A M A

DESCRIPCIN DEL CURSO:
El curso terico prctico Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades causadas por Clostridium
difficile pretende desarrollar en los participantes las habilidades, las destrezas y conocimiento en el diagnstico
de laboratorio de infecciones y de las enfermedades causadas por este agente. Con ello, se desea
compartir la experiencia y quehacer del Laboratorio de Investigacin en Bacteriologa Anaerobia de la
Universidad de Costa Rica con docentes de la carrera de microbiologa y con microbilogos que
laboran en el rea de salud en Honduras, lo que abrir nuevas expectativas en cuanto a trabajos
conjuntos.

OBJETIVO GENERAL:
Proyectar el quehacer del Laboratorio de Investigacin en Bacteriologa Anaerobia de la Universidad de Costa
Rica, a travs del desarrollo en los participantes de las habilidades, destrezas y conocimiento en el diagnstico
de laboratorio de infecciones y de las enfermedades causadas por Clostridium difficile.

OBJETIVOS ESPECFICOS:
1. Conocer los principales aspectos respecto al cultivo de bacterias anaerobias, para un adecuado manejo de
ellas en el laboratorio.
2. Brindar los conocimientos y las habilidades y destrezas para el diagnstico, cultivo y pruebas de
sensibilidad antimicrobiana de C. difficile.
3. Conocer los aspectos fundamentales en cuanto a la distribucin, clnica, tratamiento y epidemiologa de
C. difficile.
4. Compartir con los participantes la experiencia del LIBA en diagnstico e investigacin en C. difficile, con
el propsito de estimular su estudio y eventualmente, plantear proyectos conjuntos LIBA-UNAH.



CURSO TERICO-PRCTICO
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades
causadas por Clostridium difficile





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CRONOGRAMA

LUNES 29 DE SEPTIEMBRE
Conferencias magistrales
1:00 1:15 pm Bienvenida e introduccin del curso
1:15 2:00 pm Clostridium difficile: nuevas perspectivas de un viejo conocido (ER)
2:00 2:30 pm Aspectos clnicos, diagnstico y tratamiento de enfermedades producidas por C. difficile (ER)
2:30 3:00 pm RECESO
3:00 3:30 pm
Vigilancia epidemiolgica molecular: tcnicas de tipificacin y caracterizacin de aislamientos
clnicos (CQ)
3:30 4:15 pm
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades producidas por C. difficile: cultivo
en anaerobiosis, PSA y deteccin de toxinas (CQ)
4:15 4:30 pm RECESO
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
4:30 6:00pm
Deteccin de toxinas A/B de C. difficile en heces para diagnstico clnico
Manipulacin, manejo y subcultivo de aislamientos de C. difficile en el laboratorio
clnico I Cultivo bacteriolgico de C. difficile: Medios selectivos y ricos. Rayado a partir
de CM en CCFA y BAK, uso de jarras de anaerobiosis.


MARTES 30 DE SEPTIEMBRE
(Conferencias magistrales)
1:00 1:30 pm
Situacin epidemiolgica de Latinoamrica y el mundo de las enfermedades
producidas por C. difficile (ER)
1:30 2:00 pm
Clostridium difficile: ms que un patogno nosocomial: situacin actual en alimentos,
animales y casos comunitarios (CQ)
2:00 2:30 pm RECESO
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
2:30 6:00pm
Cultivo y aislamiento de C. difficile a partir de muestras clnicas I: Tratamiento de shock
con alcohol, cultivo en agar CCFA y en caldo FAB.
Diagnstico molecular I: Preparacin de pre-inculo para deteccin de genes de toxinas
e identificacin molecular. Inocular aislamiento en BHI.


CURSO TERICO-PRCTICO
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades
causadas por Clostridium difficile





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MIRCOLES 1 DE OCTUBRE
(Conferencias magistrales)
1:00 1:30 pm Control de diseminacin y transmisin de C. difficile a nivel intrahospitalario (ER)
1:30 2:15 pm Nuevas perspectivas en el diagnstico de laboratorio de C. difficile (ER)
2:15 2:45 pm RECESO
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
2:45 6:00 pm
Manipulacin, manejo y sub-cultivo de aislamientos de C. difficile en el laboratorio
clnico II: Subcultivo en agar BAK, descripcin de morfologa macroscpica de colonias y
microscpica por tincin de Gram.
Diagnstico molecular II: Extraccin de ADN de aislamientos de C. difficile
PSA I: Prueba de sensibilidad a los antibiticos en aislamientos clnicos de C. difficile en
agar E-test


JUEVES 2 DE OCTUBRE
(Conferencias magistrales)
1:00 2:00 pm
Experiencia con C. difficile en Costa Rica 2003 2014: Brotes epidmicos y
establecimiento de una lnea de investigacin (CQ)
2:00 2:30 pm
Nuevas opciones teraputicas para el tratamiento de infecciones complicados por
C. difficile (CQ)
2:30 3:00 pm RECESO
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
3:00 6:00 pm
Cultivo y aislamiento de C. difficile a partir de muestras clnicas II: Recuperacin de
aislamientos en CCFA y sub-cultivo en agar BAK. Sub-cultivo del caldo FAB si el CCFA es
negativo.




CURSO TERICO-PRCTICO
Diagnstico de laboratorio de infecciones y enfermedades
causadas por Clostridium difficile





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VIERNES 3 DE OCTUBRE
(Conferencias magistrales)
1:00 2:00 pm
Redes de colaboracin en investigacin y vigilancia epidemiolgica de infecciones
por C. difficile (ER)
2:00 2:15 pm RECESO
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
2:15 5:00 pm
Manipulacin, manejo y sub-cultivo de aislamientos de C. difficile en el laboratorio
clnico III: Identificacin presuntiva (fluorescencia, morfologa macroscpica, aglutinacin
en ltex).
Diagnstico molecular III: PCR para la deteccin de genes de toxinas y tpi (identificacin
definitiva).
PSA II: Lectura e interpretacin de E-test para C. difficile

SBADO 4 DE OCTUBRE
Prctica de laboratorio (ER, CQ, RC)
8:00 12:00 m
Cultivo y aislamiento de C. difficile a partir de muestras clnicas III: Identificacin
bioqumica definitiva con ID 32A
Diagnstico molecular IV: Electroforesis de PCR e interpretacin de resultados
12:00 1:00 pm Discusin y conclusiones.