Guía Implementación 17025 Microb

ndice 1
GUIA PARA LA ACREDITACION DE LABORATORIOS DE

MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS

AUTOR: ALICIA IRENE CUESTA. acuesta@inti.gov.ar
Consultora Internacional de la FAO
CAPTULO 1 PERSONAL
1.1 COMPETENCIA TCNICA.
1.2 CAPACITACIN DEL PERSONAL
1.3 ORGANIZACIN
ANEXO 1.A EJEMPLOS DE PERFILES DE PUESTOS

PR 1.1 PERFILES DE PUESTO, AUTORIZACIN Y CALIFICACIN DEL PERSONAL
PR 1.2 CAPACITACIN DEL PERSONAL

CAPTULO 2 INSTALACIONES Y CONDICIONES AMBIENTALES
2.1 LOCALES
2.2 CONDICIONES AMBIENTALES
ANEXO A.2. EJ EMPLO DE DISTRIBUCIN DE REAS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.

IN 2.1 MONITOREO AMBIENTAL
PR 2.1 LIMPIEZA Y DESINFECCIN DE LOCALES
PR 2.2 PLAN DE HIGIENE

CAPTULO 3: MTODO DE ENSAYO Y VALIDACIN DE LOS MTODOS
3.1 MTODOS DE ENSAYO MICROBIOLGICOS:
3.2 MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS:
3.3 VALIDACIN DE LOS MTODOS MICROBIOLGICOS:
3.4 ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN EN MICROBIOLOGA:
3.5 CONTROL DE LOS DATOS:
ANEXO 3.A. DOCUMENTOS PARA LA ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN EN MICROBIOLOGA:

PR 3.1 DISEO DE MTODOS PROPIOS
PR 3.2 VALIDACIN DE MTODOS MICROBIOLGICOS
PR 3.3 MTODO DE ENSAYO CUANTITATIVO
PR 3.4 ESTIMACION DE LA INCERTIDUMBRE DE MTODOS MICROBIOLGICOS
PR 3.5 CONTROL DE DATOS
PR 3.6 MTODO DE ENSAYO CUALITATIVO
IN 3.1 PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVOS Y REACTIVOS
IN 3.2 EVALUACIN DE LA CALIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS

CAPTULO 4 EQUIPOS
4.1 REQUISITOS
ANEXO 4.A. DIRECTRICES PARA CALIBRACION DE EQUIPOS EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA.
ANEXO 4.B DIRECTRICES PARA LA PUESTA EN SERVICIO Y VERIFICACION DE EQUIPOS EN EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.
ANEXO 4.C DIRECTRICES PARA EL MANTENIMIENTO DE EQUIPOS
ANEXO 4.D INSTRUCTIVO DE USO DE EQUIPOS

PR 4.1 MANEJ O DE EQUIPOS
IN 4.1 LIMPIEZA DE EQUIPOS
ndice 2
CAPTULO 5 TRAZABILIDAD DE LAS MEDICIONES
5.1 DEFINICIN
5.2 REQUISITOS
5.3 PATRONES DE REFERENCIA Y MATERIALES DE REFERENCIA:
5.4 MATERIALES DE REFERENCIA (CERTIFICADOS)
5.5 COMPROBACIONES INTERMEDIAS
5.6 CULTIVOS DE REFERENCIA

PR 5.1 MANEJ O Y USO DE CULTIVOS DE REFERENCIA
PR 5.2 MANEJ O DE PATRONES Y MATERIALES DE REFERENCIA
IN 5.1 CALIBRACIN DE TERMMETROS
CAPTULO 6 MUESTREO
6.1 DEFINICIN
6.2 REQUISITOS:
6.3 PLANES DE MUESTREO
6.4 ELECCIN DE LOS PLANES DE MUESTREO
ANEXO 6.A: CATEGORAS DE RIESGO
ANEXO 6.B: ESPECIFICACIONES MICROBIOLGICAS POR GRUPO DE ALIMENTO.
ANEXO 6.C: EJ EMPLOS DE PLANES DE MUESTREO PARA LECHE EN POLVO

PR 6.1 MUESTREO

CAPTULO 7 MANIPULACIN DE LOS TEMS DE ENSAYO
7.1 GENERALIDADES
7.2 TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
7.3 RECEPCIN DE LAS MUESTRAS
7.4 MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS
7.5 ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS
7.6 DISPOSICIN FINAL DE LAS MUESTRAS

PR 7.1 MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS

CAPTULO 8 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS
8.1 GENERALIDADES
8.2 CONTROLES DE CALIDAD
8.3 EVALUACIN DE LAS TENDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS.
APNDICE 8.A. EJ EMPLO DE GRFICO DE CONTROL

PR 8.1 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS DE ENSAYOS

CAPTULO 9 INFORME DE LOS RESULTADOS
9.1 GENERALIDADES
9.2 CORRECCIONES A LOS INFORMES DE ENSAYO.

DOCUMENTO MODELO DE INFORME DE RESULTADO

REFERENCIAS
Captulo 1: Personal
Autor: Alicia Cuesta. Consultora Internacional de la FAO
1
CAPTULO 1
PERSONAL
Requisitos de la Norma 17025

ndice

CAPTULO 1 PERSONAL ...........................................................................................................................................1
1.1 COMPETENCIA TCNICA...............................................................................................................................1
1.2 CAPACITACIN DEL PERSONAL....................................................................................................................1
1.3 ORGANIZACIN............................................................................................................................................2
ANEXO 1.A EJEMPLOS DE PERFILES DE PUESTOS:.......................................................................................................3

1.1 COMPETENCIA TCNICA.
Todo el personal involucrado en el ensayo, debe ser competente para la tarea asignada.
1.1.1 La direccin del laboratorio debe asegurar la competencia del personal que participa en la
realizacin del ensayo, que opera equipos, que evala los resultados y firma los informes
de ensayos.
1.1.2 Cuando el laboratorio emplea personal en formacin debe proveer adecuada supervisin.
1.1.3 La direccin debe autorizar al personal que realiza una determinada tarea; como ser
realizar el muestreo, el ensayo, emitir el informe, operar equipos o realizar
interpretaciones.
1.1.4 El laboratorio debe conservar los registros:
de la autorizacin (1.1.3)
relativos a la competencia del personal y la fecha a partir de la cual se autoriz para
efectuar una tarea.
1.1.5 La competencia del personal debe ser evaluada en forma continua.
Ejemplo: a travs de controles de calidad de los resultados, Ensayos intralaboratorios e
interlaboratorios (ver Captulo 8 Aseguramiento de la calidad de los resultados).
1.2 CAPACITACIN DEL PERSONAL.
Todo el personal tcnico que trabaja en el laboratorio de microbiologa debe recibir un adecuado
entrenamiento de modo de asegurar que ejecuta en forma idnea las operaciones relacionadas con
el ensayo.
(PR 1.2 Capacitacin del personal)
1.2.1 La direccin debe definir y mantener actualizados: los requisitos mnimos en cuanto a su
nivel de estudio, calificacin y experiencias del personal directivo, tcnico y de apoyo
clave afectado a los ensayos (perfiles de puestos).
Los ejemplos de perfiles de puesto que se presentan a continuacin son generales, hay que
adaptarlos a cada organizacin y a los casos especiales.
Se detallan cinco perfiles (ANEXO 1.A.):
Captulo 1: Personal
2
Director del laboratorio
Responsable de calidad
J efe del laboratorio de microbiologa
Personal tcnico del laboratorio de microbiologa
Auxiliar de laboratorio de microbiologa.
1.2.2 El personal deber contar con conocimientos, experiencia y competencia de acuerdo a las
tareas y responsabilidades que tenga asignadas.
Todo el personal tcnico debe recibir un adecuado entrenamiento que incluyen tcnicas
bsicas de microbiologa para la manipulacin de cultivos y muestras en condiciones de
esterilidad, adecuado criterio para el manejo de material potencialmente infeccioso,
conocimiento de normas de bioseguridad, etc.
1.2.3 El laboratorio deber asegurar la formacin permanente de su personal y mantener
actualizado su Curriculum vitae y los registros de formacin que recibe cada uno de los
miembros del personal.
1.2.4 La formacin a ser adquirida deber orientarse a garantizar la competencia en las tcnicas
y mtodos realizado por el personal involucrado en el ensayo.
1.2.5 El laboratorio debe conservar los registros para todo el personal tcnico:
Curriculum vitae: el nivel de estudios, ttulos obtenidos, experiencia, calificacin,
formacin, aptitudes.
de su capacitacin en la realizacin de la tarea asignada
1.2.6 El laboratorio debe establecer y documentar el tiempo necesario para la capacitacin y el
intervalo de tiempo lmite que el analista puede no realizar el ensayo sin necesidad de
recapacitarse.
1.2.7 La capacitacin que recibe el personal, dentro de la organizacin o fuera de ella, debe
incluir temas relacionados con calidad de modo de asegurar el buen funcionamiento de su
sistema de calidad y la mejora continua.
1.3 ORGANIZACIN
(Ver requisitos de gestin)
1.3.1 Cada laboratorio dispondr de una estructura organizativa y contar con personal
adecuado a los diferentes campos analticos en que desarrolla su actividad.
1.3.2 El laboratorio debe disponer de personal que est empleado por el laboratorio o que est
bajo contrato con l.
1.3.3 El laboratorio debe definir claramente en su manual de calidad las responsabilidades de
todo el personal. El personal debe tener claro conocimiento del rea de su
responsabilidad.
Captulo 1: Personal
3
ANEXO 1.A EJ EMPLOS DE PERFILES DE PUESTOS:

El dueo del puesto dispone de todas las atribuciones necesarias para poder realizar las tareas
detalladas en el perfil de puesto.

A. Denominacin del puesto: Director del laboratorio

Puestos subordinados: J efe del laboratorio de microbiologa, Personal tcnico y Auxiliar de
laboratorio.
Requisitos de dueo del puesto: ser experto titulado en el rea de trabajo especfica. Debe serlo
en los aspectos administrativos y de relaciones humanas (manejo y motivacin del personal), para
cumplir con xito sus funciones.
Debe tener la experiencia necesaria que le permita prever, reconocer y solucionar cualquier
problema tcnico que se presente durante la ejecucin de los ensayos.

Tareas:
Responsable de todas las operaciones tcnicas y de proveer los recursos necesarios para
la realizacin del ensayo y el aseguramiento de calidad de los resultados.
Definir y planificar la poltica de calidad.
Establecer los objetivos de calidad del laboratorio.
Determinar las estrategias tcnicas a seguir para lograr los objetivos de calidad.
Verificar el funcionamiento del sistema de calidad.
Definir y planificar la estructura de la organizacin.
Asegurar que el laboratorio cuente con personal competente para la realizacin del ensayo
y que dicho personal est libre de presiones que pudieran influir en su trabajo.
Verificar que se mantengan actualizados los registros de personal.
Promover a la capacitacin de todo el personal.
Ejecutar la revisin del sistema de calidad.

B. Denominacin del puesto: Responsable de calidad
Requisitos de dueo del puesto: profesional con experiencia en el la implementacin de un
sistema de calidad.
Objetivo del puesto: elaborar, disear e implementar el sistema de calidad. Colaborar con las
reas tcnicas en su implementacin.
Captulo 1: Personal
4
Tareas:
Recomendar al Director del laboratorio la poltica de calidad.
Conducir el sistema de de calidad y establecer medidas de control.
Coordinar las actividades de control de calidad para lograr la integracin del sistema.
Recomendar las necesidades de adiestramiento del personal con respecto al tema calidad.
Asistir al personal del laboratorio en la elaboracin de procedimientos.
Informar peridicamente al director sobre el funcionamiento del sistema de calidad y
promover a la mejora del sistema.

C. Denominacin del puesto: J efe del laboratorio de microbiologa.

Puestos subordinados: Personal tcnico y Auxiliar de laboratorio
Superior: Director del laboratorio
Reemplazante: Personal tcnico asignado.
Requisitos de dueo del puesto: debe ser un profesional especializado en microbiologa de
alimentos, bromatologa o disciplinas estrechamente relacionadas, altamente calificado, tener
amplios conocimientos, experiencia de al menos cinco aos y criterio necesario para el trabajo en
microbiologa.
Objetivo del puesto: organizacin y supervisin de todas las tareas realizadas en el laboratorio de
microbiologa.

Tareas:
Supervisin de los analistas.
Verificacin de los resultados.
Planificacin de los ensayos.
Elaboracin del plan de capacitacin del personal a su cargo.
Programacin de verificacin y calibracin de los equipos pertenecientes al laboratorio de
microbiologa.
Programacin de preparacin de ensayos intralaboratorios y participacin en ensayos
interlaboratorios.
Evaluacin de las desviaciones del sistema informadas.
Definicin e implementacin de a las acciones correctivas y preventivas.
Validacin y desarrollo de metodologas nuevas.
Calificacin del personal a su cargo.
Evaluacin de quejas y reclamos de su rea.
Captulo 1: Personal
5

D. Denominacin del puesto: Personal tcnico o analista del laboratorio de microbiologa.

Superior: Director del laboratorio y J efe del laboratorio de microbiologa.
Puestos subordinados: Auxiliar de laboratorio.
Requisitos del dueo del puesto: tcnico o profesional con experiencia mnima de un ao en
microbiologa.
Objetivo del puesto: Ejecucin de tareas relacionadas con el laboratorio de microbiologa.

Tareas:
Realizacin de los ensayos.
Manipulacin de las muestras y registro.
Confeccin del informe.
Reportar al jefe del laboratorio de desviaciones con respecto a: condiciones de recepcin
de la muestra, condiciones de almacenamiento, durante la realizacin ensayo,
mantenimiento, verificacin y calibracin de equipos.
Responsable de la vigencia de los reactivos y medios de cultivo usados.

E. Denominacin del puesto: Auxiliar de laboratorio de microbiologa.

Superior: Director del laboratorio, J efe del laboratorio de microbiologa y Personal tcnico.
Requisitos de dueo del puesto: personal capacitado en tcnicas de lavado y preparacin de
material para el laboratorio de microbiologa.

Tareas:
Trabajan bajo supervisin del personal tcnico.
Realizacin limpieza y mantenimiento de equipos.
Preparacin de muestras
Preparacin de medios de cultivo y reactivos.
Lavado de material.

(NOMBRE DEL PROCEDIMIENTO Cdigo: PR 1.1
LABORATORIO)

(Logo DEL LABORATORIO)

Perfiles de puesto, autorizacin
y calificacin del personal
Revisin: 1
Fecha: 23 de Agosto de 2005
PAGINA : 1 de 8

REDACTADO POR REVISADO POR APROBADO POR
NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
3 DEFINICIONES Y ABREVIATURAS
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO
8 ARCHIVO Y REGISTROS
9 APENDICES Y ANEXOS

REVISION Y APROBACIN

REVISION N : 001

MODIFICACION: S X NO
(Adjuntar en Anexo las modificaciones efectuadas)

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 2 de 8

1 OBJETIVO
Establecer los requisitos mnimos de formacin, experiencia laboral y caractersticas de
personalidad y que debe cumplir el personal, a fin de asegurar la competencia para el desarrollo
de las tareas asignadas
2 ALCANCE
Este procedimiento est destinado a todo el personal del (NOMBRE DEL LABORATORIO).
Personal directivo: personal que posee asignadas responsabilidades de relativas a la gestin.

Personal autorizado: personal que posee el reconocimiento formal de su capacidad para
realizar en forma correcta una determinada tarea que le ha sido asignada.

Perfil del puesto de trabajo: son los requisitos mnimos de formacin acadmica y
experiencia que debe tener el personal para acceder al puesto de trabajo

4 REFERENCIAS
Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Personal.
Norma ISO 17025:1999 tem 5.2. Personal

5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL RC JM
Autorizacin del personal para la realizacin del ensayo
(PR 1.1/3 y PR 1.2/4)
D E
Elaborar los perfiles de puestos del personal (PR 1.1/4) D/E P
Identificar las necesidades de personal y elevar la solicitud I D/E
Gestionar los recursos necesarios para la incorporacin del
personal solicitado
D/E
Archivar y Verificar la actualizacin de la planilla de personal
autorizado (PR 1.1/3)
E

DL: Direccin del laboratorio E: Ejecuta
RC: Responsable de calidad D: Decide
J M: J efe del laboratorio de microbiologa P: Participa
I: recibe informacin
6 RELACIONES
PR 1.2 Capacitacin del personal
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 3 de 8

7 DESARROLLO
7.1 Cuando un analista o personal tcnico o un auxiliar de laboratorio cumple el plan de
formacin y entrenamiento que se registra en PR 1.2/4; dicho personal se incorpora a la
planilla de PR 1.1/3 como personal Autorizado para la realizacin del ensayo u otra
actividad para la que fue capacitado (como puede ser validacin de la metodologa, anlisis
de datos, evaluacin de la calidad de los medios de cultivo, preparacin de los medios de
cultivo, lavado de material, etc.).
7.2 Personal en proceso de reautorizacin:
En el caso que una persona no haya realizado, por un perodo superior a 1 ao, la tarea o
ensayo para la cual estaba autorizada o cuando los resultados emitidos por dicha persona
durante controles entre analistas o usando material de referencia, no cumplan con los
valores de precisin establecidos, debe ser nuevamente capacitado para poder estar
autorizado en la realizacin de las tareas y/o ensayos que tena designadas. El jefe de
laboratorio de microbiologa elabora, para el analista en proceso de reautorizacin, un plan
de formacin y entrenamiento que registra en PR 1.2/4.
7.3 El J efe del laboratorio de microbiologa detecta las necesidades de personal, de acuerdo a la
situacin, que puede ser por incremento extraordinario de tareas, inexistencia o falta de
disponibilidad de personal. El J efe del laboratorio de microbiologa especifica con detalle
los objetivos de la funcin que debe cumplir el personal a incorporar, la formacin
requerida, ya sea secundaria, terciaria, universitaria y describe las tareas a realizar, los
requerimientos tcnicos de formacin, la experiencia previa, si es necesaria, e informa a la
Direccin.
7.4 La Direccin evala la solicitud, elabora el perfil, especifica el horario a cumplir y de
quien depende directamente (reporta/ informa a) y que tarea desarrollar
7.5 Si existen en la base de datos del Laboratorio currculum vitae de personas que se
ajustan al perfil requerido, se las convoca con prioridad a una entrevista a dichas personas.
En caso de no existir en la base de datos currculum vitae se intenta obtener a travs de
bolsas de trabajo de universidades, colegios con orientaciones afines, etc.
7.6 La Direccin gestiona la incorporacin de la persona.
El perfil de puesto elaborado, y las tareas para las cuales esta autorizado el personal, se conservan
en el rea de calidad.
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 4 de 8

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

1 PR 1.1/1 Hoja de modificaciones
2 PR 1.1/2 Lista de distribucin del procedimiento
3 PR 1.1/3 Planilla de personal autorizado laboratorio de microbiologa
4 PR 1.1/4 Registro de perfil del puesto
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 5 de 8

ANEXO 1: HOJA DE MODIFICACIONES

VERSIN N: 001 HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 6 de 8

ANEXO 2: LISTA DE DISTRIBUCIN DEL PROCEDIMIENTO

N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N
FECHA FIRMA ACLARACION

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 7 de 8

ANEXO 3 PR 1.1/3

Pg.____ de ____

PLANILLA DE PERSONAL AUTORIZADO LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Nombres del personal/analistas autorizados
Actividades para la cual
est autorizado

Aprobado por:

Firma del Responsable Fecha

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 8 de 8

ANEXO 4 PR 1.1/4

REGISTRO DE PERFIL DEL PUESTO

Denominacin del puesto:
Puestos subordinados:
Superior:
Reemplazante:
Requisitos de dueo del puesto:

Objetivo del puesto:

Tareas:

Firma del responsable de la elaboracin del perfil Fecha

LABORATORIO)


Capacitacin del personal
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 14

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 2 de 14

1 OBJETIVO
En este procedimiento se describe y define la metodologa que el laboratorio emplear para la
identificacin de las necesidades y planificacin de la capacitacin, entrenamiento, formacin
y perfeccionamiento de los empleados, incluyendo la ejecucin de las acciones de capacitacin
necesarias.

2 ALCANCE
Se aplica a todo el personal del laboratorio antiguo y al recientemente incorporado.

Capacitacin: proceso continuo y sistemtico destinado a la formacin, entrenamiento,
actualizacin o perfeccionamiento especfico del personal.

Entrenamiento: Actividad de ensear las habilidades que una persona necesita para
desarrollar su labor en un determinado puesto de trabajo. Tiene carcter eminentemente
prctico y se relaciona directamente con la tecnologa, tiles, equipos, etc. que se usan en el
puesto de trabajo.

Formacin: Actividades de incorporacin de conocimientos generales y especficos
necesarios para que el personal pueda desarrollar su labor en un determinado puesto de
trabajo.
Se hace referencia a la formacin acadmica del personal.

4 REFERENCIAS
Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Personal.
Norma ISO 17025:1999 tem 5.2. Personal
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 3 de 14

5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL RC JM PT Externos
Identificacin de las necesidades de capacitacin (PR 1.2/8) E D/E P
Confeccin del plan de capacitacin (PR 1.2/3 y PR 1.2/4) P D/E I
Aprobacin del plan de capacitacin (PR 1.2/3) D
Capacitacin de nuevos empleados P E E E
Perfeccionamiento tcnico (cursos, talleres) E E E
Seguimiento del Plan de capacitacin anual E
Completar documentacin de capacitacin (PR 1.2/5,
PR 1.2 /6)
E E
Completar y/o Archivar documentacin y certificados de
capacitacin (PR 1.2/5, PR 1.2/6, PR 1.2/7)
E
Evaluacin de la eficiencia de la capacitacin realizada P D
Actualizar el curriculum vitae personal E E E E
Asignacin de recursos para llevar a cabo la capacitacin D/E P

PT: Personal tcnico

6 RELACIONES
PR 1.1 perfiles de puesto, autorizacin y calificacin del personal.
7 DESARROLLO
La capacitacin de los empleados es una accin de fundamental importancia para el sistema de
calidad. Se asegura la calificacin del personal necesaria para tareas especficas por medio de
ttulos profesionales, realizacin de cursos y la experiencia adquirida a travs de la prctica. A su
vez se verifica dicha calificacin a travs de los controles realizados peridicamente para el
aseguramiento de calidad de los resultados.

7.1 Curriculum vitae:
El curriculum vitae de todo el personal del (NOMBRE DEL LABORATORIO) debe actualizarse
anualmente.

Cada curriculum vitae debe contener la siguiente informacin y caractersticas:
formacin acadmica
puesto de trabajo
responsabilidades que tiene asignadas dicho personal.
estar paginado con nmero individual y total de pginas.
Contener la fecha de emisin y firmado en la ltima pgina.
Tener adjunto copia de los ttulos acadmicos y certificados de asistencia a los cursos
mencionados en el mismo.

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 4 de 14

7.2 La firma al pie de la Ficha tcnica individual del personal del laboratorio de microbiologa
PR 1.2/5 se utiliza como registro de firmas.

7.3 PROGRAMA DE PERFECCIONAMIENTO:
En el ltimo trimestre de cada ao el jefe del laboratorio de microbiologa junto con el
responsable de calidad realizan la encuesta PR 1.2/8 y elaboran un programa de
perfeccionamiento para el personal del laboratorio que culmina con un plan de capacitacin al
ao siguiente.
Antes de la aprobacin del plan de capacitacin se les informa a los empleados en una reunin
donde est presente el director y el responsable del laboratorio de microbiologa sobre las
capacitaciones planeadas. En esta reunin los empleados pueden exponer sus deseos personales
con referencia al perfeccionamiento.
El director decide la aprobacin del plan de capacitacin.

7.4 CAPACITACION DE NUEVOS EMPLEADOS:
Los empleados nuevos deben cumplir los requisitos mencionados en la descripcin de perfil de
puesto.
El jefe de laboratorio de microbiologa de modo de contar con personal autorizado para las
distintas actividades que se realizan en su rea, elabora el Plan de formacin y entrenamiento del
personal del laboratorio de microbiologa PR 1.2/4. En dicho Plan se detallan las actividades de
formacin y entrenamiento que debe realizar el personal en cuestin para obtener su autorizacin,
los criterios de aceptacin de dicha capacitacin y el periodo durante el cual se completar la
misma.
Los empleados nuevos tienen a su lado una persona experimentada que los supervisa.
Esta persona acompaa al empleado nuevo durante todo el perodo de adiestramiento y
eventualmente determina otras necesidades de capacitacin.
Una vez concluida, las actividades planificadas de formacin y entrenamiento, el jefe de
laboratorio de microbiologa documenta en el registro Plan de formacin y entrenamiento del
personal del laboratorio de microbiologa PR 1.2/4 la fecha en la cual el empleado fue aceptado
como competente para esa actividad y la referencia donde se localiza la evidencia objetiva.

7.5 EVALUACIN DE LA CAPACITACIN RECIBIDA

Durante la Revisin del Sistema de la Calidad, que se realiza segn el procedimiento PR
Auditoras Internas y Revisin del Sistema, se analiza la capacitacin adquirida frente a los
objetivos que haban sido establecidos. En el caso que no se hayan cumplido se toman acciones
de acuerdo a lo indicado en el procedimiento Reclamos, sugerencias, no conformidades y
acciones correctivas.
Los registros PR 1.2 /3 Plan anual de capacitacin del laboratorio de microbiologa, PR 1.2/4
Plan de formacin y entrenamiento del personal del laboratorio de microbiologa se archivan en
el laboratorio de microbiologa, el resto de las planillas se ocupar de archivarlas el sector de
calidad.
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 5 de 14

N
ANEXOS
Codificacin Ttulos

3 PR 1.2 /3 Plan anual de capacitacin del laboratorio de microbiologa
4 PR 1.2/4 Plan de formacin y entrenamiento del personal del
laboratorio de microbiologa
5 PR 1.2/5 Ficha tcnica individual del personal del laboratorio de
microbiologa
6 PR 1.2/6 Asistencia a cursos y/o entrenamiento personal del
7 PR 1.2/7 Actualizacin del curriculum vitae del laboratorio de
microbiologa
8 PR 1.2/8 Identificacin de necesidades de capacitacin
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 6 de 14


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 7 de 14


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 8 de 14

ANEXO 3: PR 1.2/3
PLAN ANUAL DE CAPACITACIN DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
Pg.____ de ____

Nombre del personal
AREA DE
CAPACITACION

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 9 de 14

ANEXO 4: PR 1.2/4
Pg.____ de ____

PLAN DE FORMACIN Y ENTRENAMIENTO DEL PERSONAL DEL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Nombre y
apellido del
empleado:

Puesto del
empleado:

Actividades de
capacitacin
a realizar
Criterio de
aceptacin de
la capacitacin
Periodo
previsto para
realizar la
capacitacin
Fecha inicio
capacitacin
Fecha
aceptado
como
competente
Firma
responsable de
capacitacin
Firma
Responsable
del
Laboratorio
Firma del
capacitado
Referencia a
localizacin de
evidencia
objetiva
Observaciones

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 10 de 14

ANEXO 5: PR 1.2/5
Pg.____ de ____

FICHA TECNICA INDIVIDUAL DEL PERSONAL
DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

Nombre y Apellido

Funcin
Formacin recibida

Ttulos obtenidos
Actividades realizadas

Firma del personal Fecha

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 11 de 14

ANEXO 6 PR 1.2/6

Planilla de asistencia a cursos y/o entrenamiento personal del laboratorio de microbiologa

Nombre y Apellido

Curso
realizado
Duracin Lugar de
realizacin del
curso
Dictante Fecha Observaciones

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 12 de 14

ANEXO 7 PR 1.2/7

Pg. ___de___

PLANILLA DE ACTUALIZACION DEL CURRICULUM VITAE

NOMBRE DEL PERSONAL

Fecha Firma(1)

Fecha Firma(1)

Fecha Firma(1)

Fecha Firma(1)

(1) Corresponde a la firma del responsable de llevar el registro de actualizacin del Curriculum
vitae del personal.

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 13 de 14

ANEXO 8: PR 1.2/8
IDENTIFICACIN DE NECESIDADES DE CAPACITACIN

ENCUESTA

A. DATOS PERSONALES: N Encuesta

LABORATORIO:

FUNCIN: Profesional Tcnico Administrativo
Otros Aclaracin:

A1. TAREAS QUE DESARROLLA EN LA ACTUALIDAD:

A2. INDIQUE LAS LTIMAS ACTIVIDADES DE CAPACITACIN

TEMA

INSTITUCION

EVALUACION

GRADO DE INTERES

CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS

MATERIAL RECIBIDO

DURACION

UTILIDAD EN SU TAREA

CALIFICACION DEL DOCENTE

INSTITUCIN: Direccin de Laboratorios, Organismo Central, Organismos Nacionales,
Internacionales o Privados.

EVALUACION: Curso con evaluacin del participante: Si / No

GRADO DE INTERES: A: Alto. R: Regular. B: Bajo.

CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS, MATERIAL RECIBIDO, UTILIDAD EN SU TAREA,
CALIFICACIN DEL DOCENTE:

MB: Muy Bueno. B: Bueno. R: Regular. M: Malo.

DURACION: A: Adecuada. I: Insuficiente. E: Excesiva.

A3. INTERS POR PARTICIPAR EN ACTIVIDADES DE CAPACITACIN:

Significativo Escaso

Normal Ninguno

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 14 de 14

B. NECESIDADES DE CAPACITACIN (Indique el/ los Temas que considera)

B.1. De su rea de trabajo:

B.1.1. Imprescindibles (para perfeccionar su funcin):

B.1.2. Otros de su inters:

B.2 De otras reas del Organismo y/ u otros Organismos:

B.2.1. Imprescindibles (para perfeccionar su funcin):

B.2.2. Otros de su inters:

C. METODOLOGA: TCNICA DE ENSEANZA PREFERIDA

CURSO TERICO SEMINARIO PARTICIPATIVO
TALLER ADIESTRAMIENTO EN TERRENO
OTROS Aclarar:

LUGAR Y FECHA

Captulo 2: Instalaciones y condiciones ambientales
Autor: Alicia Cuesta. Consultora Internacional de la FAO.
1
CAPTULO 2
INSTALACIONES Y CONDICIONES AMBIENTALES

ndice:

CAPTULO 2 INSTALACIONES Y CONDICIONES AMBIENTALES.............................................................. 1
2.1 LOCALES......................................................................................................................................................1
2.2 CONDICIONES AMBIENTALES ......................................................................................................................2
ANEXO A.2. EJ EMPLO DE DISTRIBUCIN DE REAS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA. .................................6

2.1 Locales

2.1.1 Las instalaciones del laboratorio de ensayo (incluye fuente de energa, luz y condiciones
ambientales) deben ser capaces de facilitar la realizacin correcta de los ensayos.
2.1.2 Los requisitos tcnicos necesarios para que las instalaciones no afecten los resultados de
los ensayos deben estar documentados.
2.1.3 Debe haber una efectiva separacin entre reas vecinas en las que se realicen actividades
incompatibles. Se deben tomar medidas para prevenir la contaminacin cruzada.
2.1.4 La ubicacin, el diseo y la distribucin de las diferentes reas que integran el laboratorio
deben minimizar el riesgo de contaminacin de las muestras y los cultivos.
En la prctica esto se puede lograr:
Separando las actividades en tiempo y espacio.
Mediante la construccin del laboratorio segn un diseo sin camino de regreso
se puede obtener una reduccin significativa del riesgo de contaminacin cruzada.
Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las
precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por
ejemplo uso de recipientes hermticamente cerrados.
2.1.5 Es recomendable disponer de reas auxiliares (Ejemplo: oficina, sector de archivos,
guardarropas) y sectores o reas de ensayo propiamente dicho, en donde se llevan a cabo las
actividades especficas para la realizacin del ensayo.
El espacio destinado a depsito de materiales, equipos, muestras debe ser suficiente y apropiado
para su uso.
No es aceptable que el laboratorio de microbiologa ocupe una sola sala polivalente.
El rea analtica debe estar separada de la de preparacin de medios de cultivo y lavado de
material. Es conveniente separar las siguientes reas:
1) zona de recepcin y almacenamiento de muestras.
2) preparacin, muestreo y pesada de muestras.
3) rea de siembra
4) rea de apoyo: donde se realiza la preparacin de los medios y reactivos, esterilizacin,
descontaminacin, lavado de material.
El rea de lavado, luego de descontaminar la muestra, puede ser compartida con otro laboratorio.
En este caso se debe tener la precaucin que no entre en contacto con alguna sustancia que pueda
interferir con el crecimiento microbiano.
2
El laboratorio puede tomar una serie de medidas de modo de disminuir el riesgo de
contaminacin y facilitar la limpieza y desinfeccin de las diferentes reas:
Medidas relativas al diseo:
Las reas del laboratorio deben ser suficientemente espaciosas
El espacio necesario estar de acuerdo con el volumen de muestras analizadas y
la organizacin interna del laboratorio
Las uniones entresuelo, paredes y techos deben ser cncavas
Las reas de trabajo deben estar ventiladas apropiadamente y a una temperatura
adecuada. Puede hacerse por ventilacin natural o forzada, o mediante el uso de
acondicionadores de aire. En este ltimo caso, los filtros deben revisarse,
mantenerse y reemplazarse peridicamente, acorde al tipo de trabajo que se
realiza.
Evitar uso de cortinas y/o persiana internas
En caso de uso incluirlas en el plan de limpieza

Medidas relativas a los materiales y otras:
Las paredes, techos suelos y superficies de trabajo del laboratorio deben ser lisas.
Las superficies de madera de las instalaciones y accesorios deben estar protegidas
y selladas
Evitar maderas rugosas y sin revestir
Minimizar la apertura de puertas y ventanas durante la realizacin del ensayo
Contar para el lavado de manos del personal con canillas no manuales, el jabn
desinfectante debe estar dispuesto en dispensadores y toallas descartables para el
secado.
Ausencia de documentos obsoletos, objetos o mobiliario innecesario en el rea
del laboratorio
Los armario estanteras, equipos deben estar colocados de forma de evitar
acumulacin de polvo. Ejemplo armarios hasta el techo.

2.1.6 Se debe controlar el acceso y el uso de las reas que afecta la calidad de los ensayos.
El acceso al laboratorio debe estar restringido slo al personal tcnico o a personas
autorizadas.
2.2 Condiciones Ambientales

2.2.1 El laboratorio debe asegurarse que las condiciones ambientales, bajo las cuales se realizan
los ensayos microbiolgicos, no invaliden los resultados de ensayo ni comprometan la
calidad requerida de los resultados.
3
2.2.2 Cuando los muestreos o ensayos se realicen fuera de la instalacin permanente del
laboratorio se deben tomar precauciones especiales.
2.2.3 Los requisitos tcnicos necesarios para que las condiciones ambientales no afecten los
resultados de los ensayos deben estar documentados.
De modo de elaborar requisitos tcnicos y las medidas relativas al tem 2.2.4 tener en cuenta los
siguientes puntos:

Condiciones ambientales Efecto posible sobre el ensayo Lugar a monitorear
crtico
(o Etapa del ensayo
que puede afecta)
Deficiente esterilidad biolgica
(nmero aumentado de microorga-
nismos o presencia de determinados
tipos de microorganismos en sus-
pensin en el aire o en las superfi-
cies respecto al criterio establecido)
Contaminacin de las muestras y
cultivos
Sala de siembra y
Sala de preparacin
de muestras
Mayor polvo en suspensin en el
aire
cultivos
Sala de siembra y
Sala de preparacin
de muestras.

Suministro elctrico interrumpido o
deficiente
-Variacin de las condiciones de
ensayo
-Prdida de viabilidad cepas de
referencia por descongelacin.
-Conservacin inadecuada de la
muestra, reactivos y medios de
cultivo.
Funcionamiento de
estufas,
congeladores y
heladeras
Humedad ambiente alta
cultivos por aumento de la
proliferacin de mohos
Sala de siembra y
Sala de preparacin
de muestras
Temperatura alta
Aumento del crecimiento microbiano
dependiendo de la temperatura y del
medio ambiente
Sala de siembra y
Sala de preparacin
de muestras
Niveles de ruido o vibracin
excesivos
Interfiere en la pesada de la muestra,
polvos deshidratados para preparacin
de medios de cultivos o reactivos
Sala de preparacin
de muestras

2.2.4 El laboratorio deber establecer un programa documentado de limpieza y desinfeccin
que tenga en cuenta los resultados de vigilancia de las condiciones ambientales y la
posibilidad de contaminacin cruzada.

2.2.4.1 PLAN DE LIMPIEZA Y DESINFECCION:
El laboratorio debe contar con un plan de limpieza y desinfeccin. Este debe documentarse en
cuanto al procedimiento y monitorearse de modo de demostrar su efectividad. Ver PR 2.1
Limpieza y desinfeccin de locales y IN 2.1 Monitoreo ambiental.
Los registros de las operaciones de limpieza permiten corroborar el cumplimiento del plan
establecido. PR 2.1/3 Registro general de limpieza y/o desinfeccin del Laboratorio de
microbiologa.
4
2.2.4.2 PLAN DE HIGIENE:
El plan de higiene debe estar junto con la documentacin del laboratorio, en un procedimiento o
en un instructivo.

Plan de higiene: Los procedimientos operativos empleados durante la realizacin del trabajo en el
laboratorio. Tiene como principal objetivo evitar la contaminacin en todas las etapas del ensayo
lo que implicara obtencin de resultados errneos, la infeccin del personal, etc.

2.2.5 El laboratorio debe monitorear, controlar y registrar las condiciones ambientales de modo
que se cumpla el punto 2.2.1, de acuerdo al documento modelo IN 2.1 Monitoreo ambiental.

2.2.5.1 MONITOREO AMBIENTAL:
La calidad microbiolgica del aire y las superficies del laboratorio en microbiologa es un
indicador de la efectividad de las tareas realizadas segn el plan de limpieza, desinfeccin y
mantenimiento y plan de higiene.

El procedimiento de monitoreo ambiental consta de: una toma de muestra, lugares de toma de
muestra, lmites de tolerancia o criterios de aceptacin o rechazo, frecuencia de monitoreo y
acciones correctivas a tomar en caso de desvos de los lmites establecidos.

El programa de muestreo para monitoreo ambiental incluye:
la determinacin cuantitativa de microorganismos presentes en el ambiente (recuento total
o recuento de determinados tipos de microorganismos como por ejemplo hongos)
y la determinacin cualitativa de algunos patgenos y/o indicadores dependiendo de los
ensayos que realiza el laboratorio (Ejemplo: Enterobacterias, Coliformes, Salmonella spp,
Listeria monocytogenes, Listeria spp, Staphylococcus aureus).
Si el laboratorio efecta ensayos de deteccin de Listeria monocytogenes y Salmonella spp,
estos dos microorganismos son los que se deben monitorear en el ambiente.

Esto se aplica tanto a control ambiental del rea analtica del laboratorio como para la/s
campana/s de flujo laminar.

El laboratorio debe definir los recuentos mximos de microorganismos que considera aceptable y
disponer de un procedimiento documentado en el que se describan las acciones a tomar para
corregir las situaciones en que se sobrepasen esos lmites.

La frecuencia con la que se realiza el monitoreo ambiental la debe establecer el laboratorio
teniendo en cuenta la frecuencia de uso de las reas y los resultados previos.

5
Mtodos para control de superficies:

Mtodo recoleccin
Tipo de superficie
en la que se puede
usar
siembra dificultades
Hisopado Hisopo estril Delimitada Siembra directa Gesto codificado
Esponja-
trapeado
Esponja embebida
en medio especfico
Irregular
Siembra de
volumen
conocido
Protocolo estricto
y guante estril
Caja de
contacto
Contacto, presin y
tiempo standard
Plana
Incubacin
directa
Influencia del
soporte
Petrifilm
Contacto, presin y
tiempo standard
Plana
Incubacin
directa
Influencia del
soporte

Mtodos para control del aire:

Documentos de consulta:
Normas IRAM 14071-1:2002 Control de carga microbiana en el aire. Parte 1: Mtodo pasivo,
por sedimentacin.
Normas IRAM 14071-2:2002 Control de carga microbiana en el aire. Parte 2: Mtodo activo,
por impacto.

2.2.6 Se debe interrumpir los ensayos cuando las condiciones ambientales comprometan los
resultados de ensayo.

Anexo A.2. Ejemplo de distribucin de reas en el laboratorio de Microbiologa.

6

5) Balanza
6) Campana de flujo laminar o cabina de seguridad
7) Microscopio
8) Estufa de cultivo
9) Heladera con congelador
10) Congelador para mantenimiento de cepas de referencia a -70 Celsius.
11) Estufa de esterilizacin
12) Autoclave de descontaminacin
13) Autoclave de esterilizacin
14) Estufa de secado

NOTA: lo ideal es que los laboratorios dispongan de autoclave especfico para descontaminacin.
No obstante, se podr utilizar un nico autoclave siempre que se tomen las debidas precauciones
para separar las cargas de descontaminacin y esterilizacin.

Sala de
lavado
Droguero Oficina
2
Sala de
preparacin
de muestras
Sala de
preparacin
de material
3 4
5
7
10.2
1
Sala de
siembra
9
Area de
acceso
restringido
8
6
10
(NOMBRE DEL INSTRUCTIVO Cdigo: IN 2.1
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 8

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


(NOMBRE DEL PROCEDIMIENTO Cdigo: IN 2.1
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 2 de 8

1 OBJETIVO
Realizar el monitoreo de la calidad microbiolgica del aire y de las superficies en el laboratorio
de Microbiologa.
2 ALCANCE
Se aplica tanto al control ambiental del rea analtica como a la/s campana/s de flujo laminar
pertenecientes al laboratorio de Microbiologa.

No aplicable

4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Locales y Medio Ambiente.
-Norma ISO 17025:1999 tem 5.3. Instalaciones y condiciones ambientales.
-Norma ISO 7218:1996(E). Microbiologa de alimentos reglas generales para los ensayos
microbiolgicos.
-Normas IRAM 14071-1:2002 Control de carga microbiana en el aire. Parte 1: Mtodo pasivo,
por sedimentacin.
5 RESPONSABILIDADES
Actividad RC JM PT
Realizar Control ambiental del aire y de superficies I P E
Verificar cumplimiento de las tareas de monitoreo
ambiental del aire y de superficies
I D/E
Controlar que los resultados obtenidos en el control
ambiental del aire y de superficies sean conformes
I D/E P
Tomar acciones correctivas en caso que los resultados
obtenidos en el control ambiental del aire y de superficies
no cumplan con los criterios de aceptacin.
P D/E P

PT: Personal tcnico E: Ejecuta
I: Recibe informacin

6 RELACIONES
Captulo 2: Instalaciones y Condiciones ambientales. Requisitos de la norma 17025.
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 3 de 8

7 DESARROLLO
Se realizan los controles ambientales segn 7.1 y 7.2.
Los resultados obtenidos se registran en IN 2.1/3 Registro de monitoreo ambiental del aire y de
superficies de trabajo del laboratorio de microbiologa.
7.1 MONITOREO DE LA CALIDAD MICROBIOLGICA DEL AIRE POR
EXPOSICIN DE PLACAS:

7.1.1 Toma de muestra: durante un tiempo estipulado, se exponen placas de Petri (o sea se
abren las placas) con medio de cultivo no selectivo, en el rea de trabajo y durante el
proceso de siembra.
7.1.2 Tiempo y temperatura de incubacin: Luego de la exposicin al aire, las placas se
cierran e incuban durante 72 horas a 30 C. *
7.1.3 Medio de cultivo usado: PCA.
7.1.4 Frecuencia de realizacin de los controles: mensual.*
7.1.5 reas a monitorear o zonas de toma de la muestra: sala de siembra y sala de
preparacin de muestras.
Es necesario que las placas sean colocadas en el mismo lugar, cada vez que se efecta el
control, de modo de poder analizar tendencias.

7.1.6 Criterio de conformidad: para una exposicin durante 15 minutos de las placas se
permite hasta 15 colonias.*
Los resultados se expresan como unidades de colonias (ufc) por placa.

* Los valores de criterio de conformidad, tiempo y temperatura de incubacin y frecuencia
de monitoreo que figuran en este documento se presentan a ttulo orientativo.
7.2 MONITOREO DE LA CALIDAD MICROBIOLGICA DE LAS SUPERFICIES
DE TRABAJO:
Se puede emplear dos metodologas tal como se indica a continuacin:
7.2.1 Por frotacin con esponja o hisopos:
Mediante esta tcnica se realizar la determinacin cuantitativa de microorganismos
totales presentes en el ambiente y la determinacin cualitativa de algunos patgenos y/o
indicadores.
Las esponjas esterilizadas se preparan dentro de una bolsa estril. Se emplea la esponja
para monitorear superficies grandes.
Los hisopos estriles son de eleccin para esquinas, superficies pequeas, donde se
pueden alojar los microorganismos.

7.2.1.1 Toma de muestra: por frotacin con esponja o hisopos de un rea determinada de la
superficie de trabajo a monitorear.
Antes de usar, la esponja o hisopos se humedece en caldo nutritivo o agua peptona 0.1%.
Se puede usar un marco estril para delimitar el rea.
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 4 de 8

Luego de la frotacin se introduce la esponja o hisopos en un determinado volumen de
diluyente.
Se siembra en el medio de cultivo 1 ml del diluyente que estuvo en contacto con la
esponja o hisopos.

7.2.1.2 Medio de cultivo usado:
Determinacin cuantitativa de microorganismos totales en PCA
Determinacin cualitativa de algunos patgenos y/o indicadores: en medio selectivo para
el microorganismo target.
7.2.1.3 Tiempo y temperatura de incubacin:
Determinacin cuantitativa de microorganismos totales: 48 horas a 35 C. *
Determinacin cualitativa de algunos patgenos y/o indicadores: depende del
microorganismo investigado.
7.2.1.4 Frecuencia de realizacin de los controles: trimestral*
7.2.1.5 reas a monitorear o lugares de toma de muestra: sala de siembra y sala de
7.2.1.6 Criterio de conformidad:
Determinacin cuantitativa: no debe superar las 10 ufc/cm
2
.*
Determinacin cualitativa: Ausencia del microorganismo target.

*Los valores de criterio de conformidad, tiempo y temperatura de incubacin y frecuencia
de monitoreo que figuran en este documento se presentan a ttulo orientativo.

7.2.2 Por contacto directo con la superficie de trabajo:
Slo sirve para muestrear superficies planas.

7.2.2.1 Toma de muestra: por contacto directo con la superficie de trabajo con placa de Petri
con medio de cultivo no selectivo o equivalente.
7.2.2.2 Medio de cultivo usado: PCA (microorganismos totales)
7.2.2.3 Tiempo y temperatura de incubacin: luego del muestreo, las placas se cierran e
incuban durante 48 horas a 35 C. *.
7.2.2.4 Frecuencia de realizacin de los controles: trimestrales*
7.2.2.5 reas a monitorear o lugares de toma de muestra: sala de siembra y sala de
7.2.2.6 Criterio de conformidad: 50 ufc/placa*
*Los valores de criterio de conformidad, tiempo y temperatura de incubacin y frecuencia de
monitoreo que figuran en este documento se presentan a ttulo orientativo.
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 5 de 8

7.3 Acciones correctivas a tomar en caso de desvos de los lmites establecidos: si un
control excede los lmites de aceptacin se proceder a la limpieza y desinfeccin de dicha
rea segn PR 2.1 limpieza y desinfeccin de locales y se volver a chequear hasta que los
resultados obtenidos vuelvan a cumplir con los criterios de conformidad.

Los registros de monitoreos ambientales se conservan en el laboratorio de Microbiologa.

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

1 IN 2.1/1 Hoja de modificaciones
2 IN 2.1/2 Lista de distribucin del procedimiento
3 IN 2.1/3 Registro de monitoreo ambiental del aire y de superficies de
trabajo del laboratorio de microbiologa
LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 6 de 8


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 7 de 8


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Monitoreo ambiental
Revisin: 1
PAGINA : 8 de 8

ANEXO 3 IN 2.1/3

REGISTRO DE MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE Y DE SUPERFICIES DE TRABAJ O
DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Pg.____ de ____

Fecha Sector del
laboratorio
monitoreado
Medio
de
cultivo
usado
Metodologa empleada
(exposicin de placas,
frotacin con esponja -
hisopado o contacto
directo de superficies)
Resultado
(unidades)
Conforme
(SI/NO)
Personal
tcnico
responsable

Criterio de conformidad determinacin cuantitativa de microorganismos totales presentes en el aire y superficies:
exposicin de placas ( ufc/placa):
frotacin con esponja o hisopado de superficies (ufc/cm
2
):
contacto directo de superficies (ufc/placa):

Criterio de conformidad determinacin cualitativa de patgenos y/o indicadores:
frotacin con esponja o hisopado de superficies: Ausencia

LABORATORIO)


Limpieza y desinfeccin
de locales
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 10

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 2 de 10

1 OBJETIVO
Organizar las tareas de limpieza y desinfeccin del laboratorio de microbiologa de (Nombre del
Laboratorio), fijar la frecuencia de realizacin de las mismas, para que los locales estn en
condiciones adecuadas para realizar los ensayos y permitir al personal que trabaje en forma
cmoda.
2 ALCANCE
Este procedimiento se aplica a todas las instalaciones que forman parte del laboratorio de
microbiologa.

D: frecuencia diaria.
S: frecuencia semanal.
M: frecuencia mensual.
T: frecuencia trimestral.
4 REFERENCIAS
Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Locales y Medio Ambiente.
Norma ISO 17025:1999 tem 5.3. Instalaciones y condiciones ambientales
5 RESPONSABILIDADES
Control servicios empresa de limpieza contratada E
Verificar cumplimiento de las tareas de limpieza que realiza
el laboratorio de microbiologa
D/E
Controlar que se realicen las tareas de limpieza E
Verificar que se mantenga el orden general del laboratorio E
Realizar la limpieza y/o desinfeccin de mesadas. E
Autoriza, interrumpe o solicita que se rehaga la tarea de
limpieza y/o desinfeccin del laboratorio
D/E
Realizar la limpieza y/o desinfeccin de los locales: pisos,
paredes, ventanas, muebles.
E
Mantenimiento del orden general del laboratorio de
microbiologa
E

PT: Personal tcnico
Externos: Empresa contratada.
6 RELACIONES
Captulo 2: Condiciones ambientales. Requisitos de la norma 17025.
LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 3 de 10

7 DESARROLLO
A continuacin se detallan las superficies a limpiar y/o desinfectar, el nivel de limpieza requerido
(trapeo hmedo, trapeo mojado, etc.), la frecuencia de la limpieza y el personal que realiza la
limpieza.
Las tareas realizadas quedan registradas en la PR 2.1/3 Registro general de limpieza y/o
desinfeccin del laboratorio de microbiologa
Las superficies del laboratorio se deben limpiar con regularidad y en horario prefijado para no
interferir con las tareas propias del laboratorio.
No se permite la realizacin de tareas de limpieza y/o desinfeccin en la misma rea y
paralelamente a la siembra y/o preparacin de las muestras.
La limpieza se realizar con un desinfectante (ejemplo: lavandina 10%) mediante el uso de un
trapo embebido.
El personal encargado de la limpieza debe estar instruido en cuanto a las condiciones que debe
realizar las tareas, uso adecuado de los desinfectantes, posibles peligros que puede acarrear la
negligencia.

En las siguientes secciones se desarrollan las indicaciones a aplicar al laboratorio de
microbiologa.
7.1 PISOS:

Nota: No barrer el laboratorio para no levantar polvo.

Tarea Descripcin de la tarea Frecuencia
Personal
que realiza
la tarea
Trapeado
Pasar un trapo escurrido, previamente
embebido en detergente diluido en agua
D
Desinfeccin
pasar un trapo escurrido, previamente
embebido en lavandina diluida al 10% u
otro desinfectante
D
Personal de
limpieza
externo
contratado

7.2 PAREDES

Personal que
realiza la tarea
Trapeado

Pasar un trapo escurrido, previamente
embebido en lavandina diluida al 10%
u otro desinfectante
T
Personal de
limpieza externo
contratado

Nota: se incluyen las caeras de gas, aire y agua.

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 4 de 10

7.3 TECHOS

Personal que realiza
la tarea
Trapeado

Pasar un trapo escurrido,
previamente embebido en
lavandina diluida al 10% u otro
desinfectante
T
Personal de limpieza
externo contratado

7.4 VIDRIOS Y VENTANAS

Se aplica a todas los vidrios de ventanas interiores y exteriores y tabiques de vidrio.

la tarea
Lavado
Con esponja hmeda con
detergente y secado con secador
M
Limpieza de la
zona del
picaporte y
cerradura
Con spray y franela S
externo contratado

7.5 CESTOS Y RECIPIENTES PARA RESIDUOS NO CONTAMINADOS

la tarea
Vaciamiento ------------------------------------ D
externo contratado

7.6 MESAS Y SILLAS

la tarea
Trapeado
Pasar un trapo escurrido,
detergente diluido en agua
S
externo contratado
7.7 ESTANTES

Se aplica a los estantes en general.
la tarea
Trapeado

Con franela

S
externo contratado
LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 5 de 10

7.8 MESADAS:

la tarea
Limpieza y
desinfeccin
Rociar las mesadas con alcohol
70% v/v u otro desinfectante,
distribuir bien con toalla de
papel
Antes y despus
del uso
Personal tcnico del
laboratorio.

Nota: las mesadas deben quedar libres al finalizar las tareas diarias.

7.9 DROGUERO

la tarea
Pisos: barrido Con escobilln S
externo contratado
Estantes:
vaciamiento y
lustrado
Con franela M
externo contratado
Frascos:
limpieza
externa
Con trapo seco absorbe polvo M
externo contratado
Vidrios: lavado
y secado
Con esponja hmeda con
detergente y secado con secador
M
externo contratado

7.10 DESINSECTIZACION
El laboratorio contrata un servicio externo especialista en desinsectizacin.
7.11 PRECAUCIONES:
Los productos de limpieza permitidos son:
Agua
Detergente sin lavandina
Spray para vidrios
Desinfectantes

En el laboratorio hay un lugar indicado para guardar los elementos y productos de limpieza.
7.12 ARCHIVO Y REGISTROS
Los registros se conservan en el laboratorio de microbiologa.

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 6 de 10

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

1 PR2.1/1 Hoja de modificaciones
2 PR2.1/2 Lista de distribucin del procedimiento
3 PR 2.1/3 Registro general de limpieza y/o desinfeccin del
Laboratorio de microbiologa

N
APNDICE
Codificacin Ttulo

1 --- Plano del laboratorio

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 7 de 10


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 8 de 10


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 9 de 10

ANEXO 3 PR 2.1/3
REGISTRO GENERAL DE LIMPIEZA Y/O DESINFECCIN DEL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Pg.____ de ____

Fecha Personal
interviniente en
la limpieza
Sector, zona o rea de
trabajo del laboratorio
Observaciones Firma del
Personal que realiz
la limpieza

LABORATORIO)


de locales
Revisin: 1
PAGINA : 10 de 10

APENDICE 1: Plano del laboratorio

1) Balanza
2) Campana de flujo laminar o cabina de seguridad
3) Microscopio
4) Estufa de cultivo
5) Heladera con congelador
6) Congelador para mantenimiento de cepas de referencia a -70 Celsius.
7) Estufa de esterilizacin
8) Autoclave de descontaminacin
9) Autoclave de esterilizacin
10) Estufa de secado

Sala de
lavado
Droguero Oficina
2
Sala de
preparacin
de muestras
Sala de
preparacin
de material
3 4
5
7
10.2
1
Sala de
siembra
9
8
Area de
acceso
restringido
6
10
LABORATORIO)


Plan de higiene

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 6

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Plan de higiene

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 6

1 OBJETIVO
En este procedimiento se describe y define la metodologa que el laboratorio emplear para tomar
precauciones de higiene durante los ensayos microbiolgicos, con el objetivo de evitar la
contaminacin de las muestras, de los medios de cultivo y adems evitar los riesgos de infeccin
del personal del laboratorio.

2 ALCANCE
Se aplica al laboratorio de microbiologa.

No aplicable

4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Locales y Medio Ambiente.
-Norma ISO 17025:1999 tem 5.3. Instalaciones y condiciones ambientales.
-Norma ISO 7218:1996(E). Microbiologa de alimentos reglas generales para los ensayos
microbiolgicos.

5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL RC JM PT
Confeccin del plan de higiene I P D/E P
Supervisin de tareas con uso de precauciones D/E P
Realizacin de tareas usando precauciones E

PT: Personal tcnico I: recibe informacin

6 RELACIONES
Captulo 2: Condiciones ambientales. Requisitos de la norma 17025.

LABORATORIO)


Plan de higiene

Revisin: 1
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7 DESARROLLO
El laboratorio debe tomar las siguientes precauciones para trabajar en condiciones aspticas:
7.1 Relativo al trabajo propiamente dicho:
Asegurarse que el rea de trabajo est limpia y que no haya corrientes de aire.
Limpiar la superficie de trabajo con un desinfectante adecuado, antes y despus del
trabajo.
Durante la siembra y manipuleo estril de muestras no hablar y evitar toser.
Abrir los tubos de ensayo y botellas cerca de la llama.
Trabajar tan rpido como sea posible, evitando movimientos innecesarios.
Asegurarse de cerrar adecuadamente la bolsa que contenga pipetas, Placas de Petri, etc.
despus de tomar las unidades necesarias, en el caso que no se utilicen todas durante una
operacin.
Esterilizar las ansas metlicas en la llama antes y despus de usarlas. Secar con cuidado el
ansa hmeda sobre la llama, antes de la esterilizacin, para evitar la proyeccin del
material.
Despus de utilizar las pipetas, esptulas, etc., colocarlas en recipientes con desinfectante
o en bolsas plsticas antes de lavarlas y/o esterilizarlas.
Colocar las placas de Petri, medios de cultivo, pipetas y todo otro material que pueda
contener microorganismos en recipientes especiales.
Depositar todo el material plstico que no vaya a ser reutilizado en bolsas plsticas, para
ser incinerado o desinfectado.
Sacar de su lugar los libros, diarios, documentos de administracin del laboratorio, media,
reactiva, etc. solamente mientras sea necesario.
Limpiar inmediatamente cualquier derrame o salpicadura de medio de cultivo o producto
contaminado cubriendo con una toalla de papel impregnada con alcohol 70% (v/v) o
cualquier otro desinfectante, dejar actuar el tiempo que sea necesario y despus limpiar y
desinfectar el rea de trabajo antes de continuar la tarea.
En el momento en que se manipula la muestra, las placas o caldos con crecimiento
microbiano, se debe mantener lejos de la boca, nariz, ojos y cara.
El manipuleo del material patgeno o txico requiere adems otras precauciones, por
ejemplo: trabajar en reas cerradas o bajo campanas de flujo laminar, especialmente
cuando se abren las cajas de Petri.
Usar pipetas de seguridad.
Una causa importante de contaminacin o infeccin del medio ambiente son los aerosoles.
Por lo tanto, se debe evitar su formacin. Los aerosoles se pueden formar al abrir las cajas
de Petri, los tubos, las botellas o los frascos, al usar mezcladores, jeringas, centrfugas,
etc. y cuando se esterilizan ansas hmedas. Tambin se pueden esparcir microorganismos
en el aire al abrir ampollas que contengan cultivos liofilizados.
7.2 Relativo al rea de trabajo:
Utilizar vestimenta de uso exclusivo en el laboratorio, guardapolvo de color claro, limpio
y en buenas condiciones, no debe ser usado fuera del rea de trabajo del laboratorio.
Dejar en zona de oficinas o externa al laboratorio los abrigos. portafolios, etc.
En el rea del laboratorio no comer, beber, fumar.
No colocar alimentos personales en las heladeras destinadas al almacenamiento de
muestras para ser analizadas o medios de cultivo.
LABORATORIO)


Plan de higiene

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7.3 Relativo a la Higiene del personal tcnico:
Antes y al finalizar la labor en el laboratorio, el personal tcnico debe lavarse las manos con
un producto adecuado (jabn desinfectante).
El personal debe tener uas cortas y limpias, el pelo debe estar recogido, no tener anillos ni
pulseras. Uso de barbijo si es necesario.
Llevar delantales limpios sin roturas y agujeros.
El personal que presente infecciones serias en manos o cara no debe realizar exmenes
microbiolgicos.

No aplicable


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

LABORATORIO)


Plan de higiene

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MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Plan de higiene

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N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

Captulo 3: Mtodo de ensayo y validacin de los mtodos
1
CAPTULO 3
MTODO DE ENSAYO Y VALIDACIN DE LOS MTODOS

ndice
MTODO DE ENSAYO Y VALIDACIN DE LOS MTODOS.......................................................................... 1
3.1 MTODOS DE ENSAYO MICROBIOLGICOS: ..................................................................................................1
3.2 MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS:.............................................................................................................3
3.3 VALIDACIN DE LOS MTODOS MICROBIOLGICOS:....................................................................................6
3.4 ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN EN MICROBIOLOGA:.....................................................7
3.5 CONTROL DE LOS DATOS:...........................................................................................................................10
ANEXO 3.A. DOCUMENTOS PARA LA ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN EN MICROBIOLOGA: .......11
3.1 MTODOS DE ENSAYO MICROBIOLGICOS:
3.1.1 Seleccin de Mtodos:
El anlisis microbiolgico tiene como fin proporcionar informacin confiable acerca de la
inocuidad y calidad sanitaria de los alimentos. Es por ello que es indispensable la eleccin de un
mtodo de ensayo adecuado.
El laboratorio debe utilizar los mtodos de ensayo que satisfagan la necesidad del cliente y que
sean apropiados para los ensayos que realiza.
El laboratorio debe aplicar mtodos y procedimientos apropiados para todos los ensayos dentro
de su alcance (incluye muestreo, manipulacin, transporte, almacenamiento, preparacin de las
muestras a ensayar, estimacin de la incertidumbre y empleo de tcnicas estadsticas para el
anlisis de datos de los ensayos).
El laboratorio puede utilizar mtodos oficiales, mtodos normalizados nacionales e
internacionales, o mtodos internos desarrollados por l mismo. Es recomendable la utilizacin
de mtodos normalizados o de referencia, siempre y cuando stos estn disponibles y sean
apropiados.
Sin embargo, el laboratorio no est obligado a utilizar un mtodo normalizado, si dispone de un
mtodo propio con el que obtenga resultados equivalentes o superiores, utilice tecnologa ms
avanzada y presente un grado de validacin adecuado. En todos los casos, el laboratorio debe
demostrar que un mtodo es adecuado para la finalidad pretendida.
Para decidir si un mtodo es apropiado o no, se debe tener en cuenta: si ese mtodo es aplicable al
alimento a analizar, la cantidad de muestra necesaria para el ensayo, el lmite inferior del mtodo
(para ensayos cuantitativos), si usando esta metodologa puedo evaluar el cumplimiento de las
exigencias requeridas para el alimento.
Cuando el muestreo es llevado a cabo por el laboratorio, este debe usar procedimientos
documentados y tcnicas estadsticas apropiadas para seleccionar las muestras. Ver Captulo 6.
Muestreo. Requisitos de la Norma 17025.
La precisin, la especificidad, la sensibilidad, el lmite de cuantificacin y/o de deteccin, los
efectos matriciales y facilidad de uso, son caractersticas que deben tenerse en cuenta antes de
seleccionar un determinado mtodo de ensayo. El laboratorio debe elegir los mtodos que mejor
se adecuen a sus objetivos, y debe documentarlos debidamente.
2
3.1.1.1 Mtodos normalizados: No es necesario anexar o volver a escribir bajo forma de
procedimientos las normas u otras especificaciones reconocidas que tengan suficiente
informacin para realizar los ensayos.
El laboratorio debe confirmar que puede operar correctamente los mtodos normalizados antes de
introducir los ensayos. Si el mtodo normalizado cambia, se debe repetir la confirmacin.
Cuando sea necesario, la norma debe ser complementada con detalles adicionales para asegurar
una aplicacin coherente.
Ejemplo: La metodologa empleada para la leche UAT incluye una incubacin previa siete das a
37 C y luego se realiza el ensayo segn FIL-IDF 100B:1991. Esto debe ser especificado cuando
se hace referencia a la metodologa en el informe de ensayo.
3.1.1.2 Mtodos desarrollados por el laboratorio: debe ser una actividad planificada y debe
ser asignada a personal calificado y proveer los recursos necesarios.
Los planes deben ser actualizados a medida que avanza el desarrollo y deben asegurar que la
comunicacin sea eficaz entre todo el personal involucrado.
3.1.1.3 Mtodos de ensayo no normalizados: Cuando sea necesario utilizarlos deben ser
validados adecuadamente antes del uso. Tambin deben ser acordados con el cliente y deben
incluir una especificacin clara de los requisitos del cliente y del objeto del ensayo.
Para los mtodos de ensayo nuevos es conveniente elaborar procedimientos antes de la
realizacin de los ensayos los que deben contener, como mnimo, la informacin siguiente:
a) Una identificacin apropiada de los mtodos de ensayo.
b) El alcance.
c) La descripcin del tipo de tem a ensayar.
d) Los parmetros o las magnitudes; y los rangos a ser determinados.
e) Los aparatos y equipos, incluidos los requisitos tcnicos de funcionamiento.
f) Los patrones de referencia y los materiales de referencia requeridos.
g) Las condiciones ambientales requeridas y cualquier periodo de estabilizacin que sea
necesario.
h) La descripcin del procedimiento incluida la siguiente informacin:
-marcas para identificacin durante la manipulacin, el transporte, el almacenamiento y la
preparacin de los tems.
- las verificaciones a realizar antes de comenzar el trabajo
- la verificacin del correcto funcionamiento de equipos y, cuando corresponda, su calibracin y
ajuste antes de cada uso;
- el mtodo de registro de las observaciones y de los resultados;
-las medidas de seguridad a ser observadas.
i) Los criterios o requisitos para la aprobacin o rechazo.
j) Los datos a ser registrados y el mtodo de anlisis.
k) La incertidumbre o el procedimiento para estimar la incertidumbre.

3
3.1.2 Modificacin de la metodologa. Si la metodologa empleada por el laboratorio para
realizar el ensayo incurre en algn desvo o modificacin, es aceptable nicamente si:
dicho desvo se documenta.
se realiza una justificacin tcnica
es autorizado y aceptado por el cliente.
3.1.3 Instrucciones para realizar el ensayo.
El personal que realiza el ensayo debe tener disponibles en el laboratorio las instrucciones para:
El uso y el funcionamiento de todo el equipamiento empleado, la manipulacin y la
preparacin de las muestras a ensayar.
Tiene que contar con el diagrama de flujo del ensayo propiamente dicho.
Los mtodos de rutina que se emplean en el laboratorio deben ser claros y deben contener el
detalle de los puntos crticos de la operacin, para que puedan ser fcilmente interpretados por los
analistas menos experimentados. Suele ser de utilidad indicar estos puntos crticos en el diagrama
de flujo del ensayo.

3.1.3.1 Todas las instrucciones, Normas, manuales y datos de referencia necesarios para la
realizacin del ensayo deben mantenerse actualizados y estar disponible para el personal tcnico.
Algunas normas y tcnicas usadas por los laboratorios que realizan ensayos microbiolgicos para
alimentos son desarrolladas por organismos internacionales como AOAC, ISO, ICMSF, FDA
BAM, USDA-FSIS y FIL-IDF.

3.1.4 Comunicacin con el cliente: El cliente debe ser informado del mtodo elegido.
El laboratorio debe informar al cliente si el mtodo propuesto por este ltimo se considera
inapropiado o desactualizado.
3.2 MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS:
El laboratorio debe asegurarse de que la calidad de los medios de cultivo y reactivos sea
apropiada para los ensayos realizados.
3.2.1 El fabricante en el momento de la entrega del producto (medio de cultivo) debe proveer
informacin acerca de las especificaciones de calidad, como mnimo debe incluir lo
siguiente:
Nombre del medio y lista de componentes, incluido cualquier suplemento
Fecha de vencimiento del medio
Condiciones de almacenamiento
Control de esterilidad
Control del crecimiento de los microorganismos de inters (target) y de los
microorganismos no deseados (no target) y criterios de aceptabilidad.
Controles fsicos y criterios de aceptabilidad aplicados
Fecha de emisin de las especificaciones

4
Los lotes de medios deben estar debidamente identificados. Cada lote recibido debe ir
acompaado de evidencias del cumplimiento de las especificaciones de calidad. El laboratorio
debe asegurarse de que el fabricante notifique cualquier cambio en las especificaciones de
calidad.
Cada lote de productos suministrado debe incluir una garanta de que cumple la especificacin.
3.2.2 Preparacin de medios de cultivo: La preparacin adecuada de medios de cultivo es uno
de los pasos fundamentales en el examen del microbiolgico y se le dar un especial cuidado.
3.2.2.1 Los medios de cultivo, soluciones y reactivos deben prepararse, almacenarse y utilizarse
de acuerdo con un procedimiento documentado.
3.2.2.2 Los medios de cultivo se preparan en el laboratorio a partir de sus diferentes
componentes o a partir de productos en polvo deshidratados comerciales, pero tambin pueden
adquirirse medios listos para su uso. Ver IN 3.1Preparacin de medios de cultivo y reactivos.
Para la preparacin y esterilizacin de medios, as como los tiempos de almacenamiento
recomendados se puede tomar como base el documento ISO 7218:1996(E) Microbiology of food
and animal feeding stuff-General rules for microbiological examinations.
3.2.2.3 Para la preparacin de medios, soluciones y tampones, debe utilizarse agua destilada que
haya sido sometida a controles peridicos que aseguren su calidad (conductividad, pH y
contaminacin microbiana, libre de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes) y llevar
un registro actualizado de los mismos.
3.2.2.4 Debe determinarse y verificarse el perodo de validez de los medios preparados en las
condiciones de conservacin especificadas.
En general los medios preparados no se guardan en heladera ms de tres meses o a temperatura
ambiente no ms de un mes en condiciones que impidan que su composicin sea modificada.
3.2.2.5 El laboratorio debe registrar o colocar una etiqueta indicando en los medios de cultivo y
reactivos los siguientes datos: la identificacin, la concentracin, las condiciones de
almacenamiento, fecha de preparacin, fecha de vencimiento, el personal que los prepar.
3.2.2.6 Medios preparados internamente:

Siempre que sea necesario, se verificar que los medios de cultivo y diluyentes preparados por el
laboratorio tengan las caractersticas adecuadas con respecto a:
Recuperacin o supervivencia de los microorganismos de inters.(Productividad)
Inhibicin o supresin de los microorganismos no deseados.(Selectividad)
Propiedades bioqumicas (diferenciales y diagnsticas)
Propiedades fsicas (por ejemplo, pH, volumen).
Sea estril.
Debe verificarse la esterilidad de los medios y diluyentes preparados en el laboratorio.

Los lotes de medios preparados segn formula en el laboratorio deben verificarse para comprobar
que facilitan el crecimiento de determinados cultivos microbianos procedentes de una coleccin
5
reconocida y debe verificarse que los medios selectivos inhiben el crecimiento de
microorganismos no deseado. Ver IN 3.2 Evaluacin de calidad de los medios de cultivo.
Los medios de cultivo, productos en polvo deshidratados y reactivos comerciales deben
consumirse antes de la fecha de caducidad.
3.2.2.7 Medios listos para su uso:
Todos los medios y diluyentes que se suministren en una forma directamente utilizable o
parcialmente completa deben ser validados antes de su utilizacin. La evaluacin del medio
respecto a la recuperacin o supervivencia de los microorganismos de inters y la inhibicin o
supresin de los microorganismos no deseados tiene que ser cuantitativa; los atributos (por
ejemplo, propiedades fsicas y bioqumicas) deben evaluarse utilizando criterios objetivos.
Parte de esa validacin es provista por las especificaciones de calidad del proveedor.
3.2.3 Manejo de los medios de cultivo:
3.2.3.1 El laboratorio debe registrar la fecha de recepcin, la fecha de caducidad y la fecha de
apertura del envase de los medios de cultivo.
3.2.3.2 El almacenamiento debe realizarse en las condiciones apropiadas. Todos los envases,
especialmente los que contengan medios deshidratados, deben estar hermticamente cerrados. No
deben utilizarse medios deshidratados que presenten apelmazamiento o un cambio de color.
3.2.4 Evaluacin de la calidad de los reactivos: El laboratorio debe asegurarse de que la
calidad de los reactivos utilizados sea apropiada para los ensayos realizados.
Debe verificar la idoneidad de cada uno de los lotes de reactivos crticos para el ensayo, al inicio
y durante su perodo de validez, utilizando microorganismos de control positivo y negativo que
sean trazables a colecciones de cultivos nacionales o internacionales reconocidas.
3.2.5 Control de las prdidas de volumen durante la esterilizacin:
Debe verificarse que no haya prdidas significativas de volumen de los diluyentes durante el
proceso de esterilizacin en autoclave.
Debe haber un procedimiento documentado y registro de datos obtenidos realizados en forma
peridica. El laboratorio determina el intervalo en el que se efectan estos controles.
Para evaluar la prdida de volumen de los diluyentes (esto es especialmente importante en
ensayos cuantitativos) colocar un volumen fijo de diluyente en tubos de ensayo o frascos de
dilucin. Medir el peso o volumen antes y despus del proceso de esterilizacin en autoclave.
Luego, con los datos obtenidos, se efecta el clculo y la inferencia estadstica. IN Prdida de
volumen de los diluyentes durante la esterilizacin.
3.2.6 Lavado de material: Otro aspecto a tener en cuenta es el correcto lavado del material
reciclable. El laboratorio de debe contar con un instructivo para esta tarea. IN Lavado de material
para ensayos microbiolgicos
En general, luego de descontaminar el material de vidrio se enjuaga y se lava con agua caliente y
extran neutro diluido al 2%, se enjuaga un n de veces con agua corriente y luego un n de veces
con agua destilada. El material se seca en estufa y se acondiciona para ser esterilizado.
6
3.2.7 Eliminacin de los reactivos: Si bien la eliminacin adecuada de los reactivos no es un
problema que afecte directamente a la calidad, pero debe realizarse de acuerdo con la normativa
vigente en materia de medio ambiente, salud y seguridad.
3.3 VALIDACIN DE LOS MTODOS MICROBIOLGICOS:
3.3.1 Definicin: la validacin es la confirmacin, a travs del examen y el aporte de evidencias
objetivas, de que se cumplen los requisitos particulares para un uso especfico previsto.
3.3.2 El laboratorio debe validar los siguientes mtodos para confirmar que son aptos para el
fin previsto:
a) Los mtodos no normalizados
b) Los mtodos que disea o desarrolla
En este caso, el proceso de validacin es mucho ms arduo, ya que se debe demostrar que cada
paso elegido responde a lo esperado.
c) Los mtodos normalizados empleados fuera del alcance previsto
(Ejemplo: mtodos normalizados aplicados a matrices que no se especifiquen en el procedimiento
normalizado), as como las ampliaciones y modificaciones de los mtodos normalizados.
Para demostrar que una versin modificada de un mtodo cumple las mismas especificaciones
que el mtodo original, deben realizarse comparaciones utilizando replicados.
d) En el caso en que utilice mtodos oficiales, mtodos normalizados o mtodos de
organismos nacionales o internacionales reconocidos, o basados en ellos, antes de analizar
cualquier muestra, los laboratorios debern verificar su capacidad para cumplir de forma
satisfactoria todos los requisitos establecidos en dichos mtodos.
3.3.3 En todos los casos un parmetro para la validacin de ensayos microbiolgicos es la
descripcin del mtodo de ensayo.
3.3.4 Mtodos de ensayo microbiolgicos cualitativos: Son mtodos en los que el resultado se
expresa en trminos de ausencia/presencia.
Los procedimientos de confirmacin e identificacin del microorganismo, deben ser validados
estimando, cuando sea apropiado, su especificidad, exactitud relativa, desviacin positiva,
desviacin negativa, lmite de deteccin, efecto matricial, repetibilidad y reproducibilidad
Las diferencias debidas a las matrices deben tenerse muy en cuenta al analizar diferentes tipos de
muestras. Los resultados deben evaluarse utilizando mtodos estadsticos apropiados.
3.3.5 Mtodos de ensayo microbiolgicos cuantitativos: debe considerarse la especificidad,
sensibilidad, exactitud relativa, desviacin positiva, desviacin negativa, repetibilidad,
reproducibilidad y el lmite de cuantificacin dentro de una variabilidad establecida y, en caso
necesario, determinar cuantitativamente estos parmetros.
Las diferencias debidas a las matrices deben tenerse en cuenta al analizar diferentes tipos de
muestras.
Los resultados deben evaluarse utilizando mtodos estadsticos apropiados.
3.3.6 Los laboratorios deben conservar los datos sobre la validacin de los sistemas de ensayo
comerciales (kits) que utilicen. Estos datos pueden obtenerse de ejercicios de intercomparacin o
de datos sobre validacin remitidos por los fabricantes y sujetos a la evaluacin de una tercera
7
parte (p. Ej., AOAC). Si no se dispone de datos sobre validacin o si stos no son plenamente
aplicables, el laboratorio ser responsable de completar la validacin del mtodo.
3.3.7 Para la validacin de un mtodo se puede aplicar el anlisis de las mismas muestras
usando en paralelo el nuevo mtodo propuesto o mtodo alternativo junto con un mtodo
existente de referencia y validado para la misma determinacin. Referencia: prEN ISO
16140:1999 Microbiology of food and animal feeding stuffs- Protocol for validation of
alternative methods.
3.3.8 Incluso cuando se haya realizado la validacin, el laboratorio tendr que verificar
peridicamente que se cumplen los parmetros documentados, utilizando, por ejemplo, muestras
inoculadas o materiales de referencia incorporados a las matrices ms representativas.
3.3.9 En todos los casos de validacin el diseo experimental y el anlisis de los resultados
tienen que ser estadsticamente vlidos.
3.3.10 La validacin de los mtodos de ensayo debe reflejar las condiciones reales de ensayo.
Esto puede conseguirse utilizando productos contaminados naturalmente o productos inoculados
con un nivel conocido de microorganismos contaminantes. El analista debe ser consciente que la
inoculacin de una matriz con microorganismos contaminantes imita tan slo de una manera
superficial la presencia de contaminantes naturales. No obstante, a menudo es la mejor y la nica
solucin disponible.
3.3.11 La extensin de la validacin necesaria depender del mtodo y su aplicacin.
La validacin es siempre un equilibrio entre costos, riesgos y posibilidades tcnicas.
Esto es muy importante en los mtodos microbiolgicos, ya que los mismos son intrnsecamente
diferentes de otras disciplinas como la fsica o la qumica, por el slo hecho de que se trabaja con
seres vivos que responden, y no siempre, a reglas menos generales que las que rigen a las otras.
Cada laboratorio establecer los requisitos que debe cumplir el mtodo, con objeto de demostrar
que son adecuados para la finalidad establecida.
3.3.12 Toda la informacin referida a la validacin debe documentarse y archivarse:
Los resultados obtenidos, el procedimiento usado para validar y una declaracin sobre la aptitud
del mtodo para el uso previsto.
Los procedimientos para la determinacin del desempeo de un mtodo es conveniente que
incluyan:
Comparacin con resultados obtenidos con otros mtodos.
Ensayos interlaboratorios.
Uso de cepas de Referencia certificadas (microorganismos conocidos, inoculados en
cantidades conocidas), tanto para los anlisis cuantitativos como para los cualitativos
Evaluacin sistemtica de los factores que influyen en el resultado.
Evaluacin de la incertidumbre basada en el conocimiento cientfico de los principios
tericos de mtodo y en la experiencia prctica.
3.4 ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE MEDICIN EN MICROBIOLOGA:
Definicin: la incertidumbre de medicin es un parmetro asociado al resultado de la medicin,
que caracteriza la dispersin de los valores que podran ser razonablemente asignados al
mesurando.
8
3.4.1 Un laboratorio de ensayo competente debe estar en condiciones de poder brindar una
afirmacin sobre la incertidumbre de los resultados de los ensayos realizados.
Los laboratorios de ensayo deben tener y deben aplicar procedimientos para estimar la
incertidumbre de medicin.
3.4.2 La estimacin de las incertidumbres en las medidas y resultados en los laboratorios de
microbiologa de alimentos es parte importante del control de calidad interno de los resultados
obtenidos.
La Incertidumbre de medicin es una indicacin cuantitativa de la calidad del resultado, da idea
de la confiabilidad del resultado.
3.4.3 Los anlisis microbiolgicos de muestras de alimento se componen de varias etapas.
Cada una de dichas etapas del ensayo contribuye, en mayor o menor magnitud, a la incertidumbre
final del resultado. Cuando se repiten varias veces todo el conjunto de pasos, los resultados
obtenidos se aproximan, en general, a una distribucin estadstica pudindose aplicar los
principios de la estadstica paramtrica.

Para resultados obtenidos por recuento en placas de Petri se aconseja, universalmente, utilizar la
distribucin de Poisson.
Para resultados obtenidos por el mtodo de nmero ms probable (NMP) se aconsejan
distribuciones basadas sobre la distribucin binomial.
3.4.4 Los anlisis microbiolgicos se encuadran en la categora de los ensayos que no permiten
realizar un clculo riguroso, metrolgica y estadsticamente vlido de la incertidumbre de
medida.
En general, puede ser apropiado basar la estimacin de la incertidumbre en datos de repetibilidad
y reproducibilidad exclusivamente, aunque lo ideal es incluir los bias o sesgos (Ejemplo: los bias
detectados como resultado de la participacin en ensayos de aptitud).
3.4.5 POSIBLES CRITERIOS A USAR:
Cada laboratorio deber decidir la metodologa que emplear para el clculo de incertidumbre de
sus resultados de ensayo.
Esta decisin es facilitada por las indicaciones existentes en la literatura cientfica internacional
acerca del modelo a adoptar.
Es importante calcular la incertidumbre para un ensayo en una dada matriz por ms de una
metodologa de clculo y comparar los resultados obtenidos. Ver Anexo 3.A
3.4.5.1 Ejemplos:
Una posible forma de obtener la estimacin de la incertidumbre asociada con un resultado sera:
1. Describir el parmetro concreto objeto de medida.
Determinar el mesurando, el principio, el mtodo y el procedimiento a utilizar para la estimacin
de la incertidumbre,
2. Se identifican las posibles fuentes de incertidumbre. stas provienen de los diversos factores
involucrados en el anlisis.
Cada laboratorio debe identificar las diferentes fuentes de incertidumbre individualizando los
diversos efectos que influyen el resultado de una determinacin. Debe estudiar las posibles causas
9
de incertidumbre agrupndolas o bien por etapas (toma de muestra, preparacin de la muestra,
anlisis o determinacin, elaboracin de los datos) o bien por magnitudes implicadas (pesada,
volumen, calidad de reactivos).
No es recomendable desechar alguna de las fuentes de incertidumbre por la suposicin de que es
poco significativa sin una cuantificacin previa de su contribucin comparada con las dems. Es
preferible un exceso de fuentes que ignorar algunas corriendo el riesgo de descartar aquellas
importantes.
Los distintos componentes individuales de la incertidumbre deben identificarse y demostrar que
estn bajo control y evaluar su contribucin a la variabilidad de los resultados.
Ciertos componentes (los efectos de pipetear, la pesada, hacer las diluciones) pueden medirse
directamente y evaluarse fcilmente para demostrar que realizan una contribucin insignificante a
la incertidumbre global. Otros componentes (como la estabilidad y preparacin de las muestras)
no pueden medirse directamente y su contribucin tampoco puede evaluarse por mtodos
estadsticos, pero su importancia en la variabilidad de los resultados debe ser tambin
considerada.
3. Estimar la magnitud de la incertidumbre asociada con cada posible fuente o factor de
incertidumbre.
4. Expresar cada componente de la incertidumbre como una desviacin estndar.
5. Calcular la incertidumbre combinada (u
c
). Para ello se combinan las incertidumbres de cada
componente.
6. Calculo de la incertidumbre expandida (U
e
) multiplicando u
c
por k.
k =factor correspondiente a un nivel de confianza 95%
El resultado (Rdo) se expresa asociado a la U
e
.
De la siguiente manera: Rdo +U
e
( es un intervalo)
Este es solo un esquema general para valorar la incertidumbre de una medida en un laboratorio
microbiolgico. Es importante el criterio profesional, la capacidad, la experiencia y la pericia de
cada operador. La determinacin de la incertidumbre no debe ser algo realizado como una rutina
o como un simple ejercicio matemtico, depende del conocimiento profundo de la naturaleza del
mesurando y de la medida a realizar.
3.4.6 Un laboratorio de ensayo que realiza sus propias calibraciones, debe tener y debe aplicar
un procedimiento para estimar la incertidumbre de medicin para todas las calibraciones y todos
los tipos de calibraciones.
3.4.7 Se espera que los laboratorios acreditados que realizan anlisis microbiolgicos conozcan
la distribucin de microorganismos en las matrices que utilizan para sus ensayos y tener eso en
cuenta a la hora de obtener submuestras. Ahora bien, no se recomienda que este componente de la
incertidumbre se incluya en las estimaciones salvo que las necesidades del cliente dicten lo
contrario. El principal motivo de esto es que la incertidumbre asociada a la distribucin de
microorganismos en la matriz del producto no depende de la actuacin del laboratorio pudiendo
depender exclusivamente de las propias muestras analizadas. Adems, los mtodos de ensayo
deben especificar el tamao de la muestra que debe utilizarse teniendo en cuenta la escasa
homogeneidad de la misma.
3.4.8 Ensayos cualitativos: El concepto de incertidumbre no puede aplicarse directamente a
los resultados de los ensayos cualitativos como los obtenidos en los anlisis de deteccin o en los
10
de determinacin de atributos para fines de identificacin. No obstante, deben identificarse las
distintas fuentes de variabilidad, como la homogeneidad de los reactivos y la interpretacin de los
analistas, y demostrar que se controlan dichas fuentes.
Adems, en los ensayos donde el lmite de deteccin es un importante indicador de la validez del
mtodo, la incertidumbre asociada al inculo empleado para determinar el lmite debe ser
estimada y su importancia evaluada. Los laboratorios deben conocer tambin la incidencia de
resultados falsos positivos y falsos negativos asociada a los ensayos cualitativos que realizan.
3.5 CONTROL DE LOS DATOS:
3.5.1 Los clculos y la transferencia de los datos deben estar sujetos a las verificaciones
pertinentes llevadas a cabo de una manera sistemtica.
3.5.2 Cuando se utilicen computadoras o equipos automatizados para captar, procesar, registrar,
informar, almacenar o recuperar los datos de los ensayos o de las calibraciones, el laboratorio
debe asegurar que:
3.5.2.1 El soporte lgico de computadora (software), desarrollado por el usuario, est
documentado con el detalle suficiente y convenientemente validado, de modo que se pueda
asegurar que es adecuado para el uso. Ver PR 3.5 Control de datos
3.5.2.2 Se establecen e implementan procedimientos para proteger los datos; tales
procedimientos deben incluir, pero no limitarse a, la integridad y la confidencialidad de la entrada
o recoleccin de los datos, su almacenamiento, transmisin y procesamiento.
3.5.3 Se hace el mantenimiento de las computadoras y equipos automatizados con el fin de
asegurar que funcionan adecuadamente y que se encuentran en las condiciones ambientales y de
operacin necesarias para preservar la integridad de los datos de ensayo y de calibracin
11
ANEXO 3.A. DOCUMENTOS PARA LA ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE
MEDICIN EN MICROBIOLOGA:

N Referencias
1 ISO (CIPM):1995 Gua para la expresin de la incertidumbre de medida.
2 EURACHEM / CITAC Guide. Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement
3 CAEAL. Policy on the Estimation of Uncertainty of Measurement in Environmental
Testing
4 NMKL Procedure N 8 (1999) Measurement of uncertainty in microbiological
examination of foods.
5 UKAS Publication ref: LAB 12. The Expression of Uncertainty in Testing
6 Seppo 1. Niemela Uncertainty of quantitative determinations derived by cultivation of
microorganisms Publication J 3/2002
ADVISORYCOMMISSION FOR METROLOGY Chemistry Section Expert Group for
Microbiology

LABORATORIO)


Diseo de mtodos propios

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 5

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 2 de 5

1 OBJETIVO
Este procedimiento describe el diseo de mtodos de ensayo propios.
2 ALCANCE
Se aplica a todos los ensayos realizados por el laboratorio de microbiologa.
Definiciones:

Validacin: Confirmacin, mediante el aporte de pruebas objetivas, de que se han cumplidos los
requisitos para el uso pretendido o una aplicacin especfica.
[ISO 9000: 2000]

Verificacin: Confirmacin, mediante el aporte de pruebas objetivas, de que se han cumplido los
requisitos establecidos. [ISO 9000:2000]
4 REFERENCIAS
Norma ISO 17025:1999. Capitulo 5: Requisitos tcnicos. Punto 5.4: Mtodos de ensayo y de
calibracin y validacin de mtodos
5 RESPONSABILIDADES
En la matriz se definen las responsabilidades y competencias para el desarrollo de mtodos
nuevos.

Actividad DL RC JM PT Cliente
Solicitud de diseo mtodo nuevo E E E E E
Evaluacin de la solicitud D E E I
Confeccin del plan de diseo P E P I
Decisin sobre la realizacin del diseo D/E I I I P
Definicin de las fases del diseo D E P
Realizacin del diseo P P/I E
Evaluacin de las etapas de diseo alcanzadas I D/E I I
Evaluacin del mtodo diseado D/E E E I
Validacin del mtodo diseado P P E E I
Aprobacin del mtodo diseado D/E P P I I
Actualizacin de los servicios I E I I I

PT: Personal tcnico I: Recibe informacin
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 3 de 5

6 RELACIONES
-Captulo 3. Mtodo de ensayo y validacin de los mtodos. Requisitos Norma 17025.
-PR 3.2 Validacin de mtodos microbiolgicos
- PR 3.4 Estimacin de la incertidumbre de mtodos microbiolgicos
7 DESARROLLO
Tomando como base los deseos o un pedido de los clientes, y cuando se dispone de la
competencia necesaria, se disean mtodos nuevos de muestreo y de ensayo.
La Direccin toma la decisin sobre el tipo y la cantidad de diseos nuevos, despus de discutirlo
con el J efe del laboratorio de microbiologa y el Responsable de calidad.
En un plan de accin se definen las fases del diseo, con plazos y responsabilidades, y luego,
mediante evaluaciones se verifica si se pueden implementar.
Una vez realizada la actividad de diseo, todos los mtodos propios se validan.
Todos los mtodos propios recin diseados se validan empleando el procedimiento definido
segn PR 3.2 Validacin de mtodos microbiolgicos y para los mtodos cuantitativos tambin se
estima su incertidumbrePR 3.4 Estimacin de la incertidumbre de mtodos microbiolgicos.
Los documentos para el diseo y la validacin de un mtodo de ensayo generado, pueden llevar a
la elaboracin de instrucciones de Gestin de Calidad, que se integran luego en el sistema de la
calidad.

Todos los documentos relacionados al diseo y la validacin del mtodo de ensayo se archivan
en la oficina del Responsable de calidad.

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 4 de 5


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 5 de 5


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 8

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 8

1 OBJETIVO
El presente documento describe las actividades a llevar a cabo para la validacin y la verificacin
(segn corresponda) de mtodos de ensayo microbiolgicos.
2 ALCANCE
Este documento se aplica a todos los ensayos de alimentos que efecta el laboratorio de
Microbiologa y deben ser validados.
Comprende las siguientes situaciones:
Verificacin de un mtodo normalizado.
Cuando se realiza alguna modificacin de un mtodo normalizado.
Cuando el laboratorio desarrolla mtodos propios.
Cuando se utiliza un mtodo no normalizado.
Cuando se utiliza un mtodo por kit comercial.
Definiciones:

[ISO 9000: 2000]


Lmite de cuantificacin: Aplicado a anlisis microbiolgicos cuantitativos Nmero mnimo
de microorganismos dentro de una variabilidad definida que puede determinarse en las
condiciones experimentales del mtodo evaluado.

Lmite de deteccin: Aplicado a anlisis microbiolgicos cualitativos Nmero mnimo de
microorganismos que pueden ser detectados, pero en cantidades que no pueden estimarse con
precisin.

Desviacin negativa: Ocurre cuando el mtodo alternativo da un resultado negativo sin
confirmacin y el mtodo de referencia da un resultado positivo. Esta desviacin se convierte en
un resultado negativo falso cuando puede demostrarse que el resultado verdadero es positivo.

Desviacin positiva: Ocurre cuando el mtodo alternativo da un resultado positivo sin
confirmacin y el mtodo de referencia da un resultado negativo. Esta desviacin se convierte en
un resultado positivo falso cuando puede demostrarse que el resultado verdadero es negativo.
LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 3 de 8

Mtodo de referencia: Mtodo investigado a fondo, que describe con claridad y exactitud las
condiciones y los procedimientos necesarios para medir los valores de una o ms propiedades y
que ha demostrado tener una exactitud y una precisin apropiadas para el uso que pretende
hacerse del mismo, de manera que puede utilizarse para evaluar la exactitud de otros mtodos
empleados para realizar la misma medicin y, en particular, para caracterizar un material de
referencia. En general se trata de un mtodo normalizado nacional o internacional.

Exactitud relativa: Grado de concordancia entre los resultados del mtodo evaluado y los
obtenidos utilizando un mtodo de referencia reconocido.

Repetibilidad: Grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del mismo
mesurando realizadas en las mismas condiciones de medicin. [VIM: 1993 ISO Vocabulario
internacional de trminos bsicos y generales de metrologa]

Reproducibilidad: Grado de concordancia entre los resultados de mediciones del mismo
mesurando realizadas en diferentes condiciones de medicin.[VIM: 1993 ISO Vocabulario
internacional de trminos bsicos y generales de metrologa]

Sensibilidad: Fraccin del nmero total de cultivos o colonias positivos que son asignados
correctamente con el mtodo utilizado. [ISO 13843:2000]

Especificidad: Fraccin del nmero total de cultivos o colonias negativos que son asignados
correctamente con el mtodo utilizado. [ISO 13843:2000]
4 REFERENCIAS
-G-ENAC-04REV. 2 Marzo 97.Gua para la acreditacin de laboratorios que realizan anlisis
microbiolgicos
-EA-04/10 Accreditation for Microbiological Laboratories.
-Norma ISO 17025:1999. Capitulo 5: Requisitos tcnicos. Punto 5.4: Mtodos de ensayo y de
calibracin y validacin de mtodos.
-Gua para la validacin de mtodos de ensayo. OAA 2003
5 RESPONSABILIDADES
Actividad RC JM PT
Diagramar el estudio de validacin del mtodo a ser llevado a cabo en el laboratorio D/E P
Realizar la validacin del mtodo I E
Evaluacin del estudio de validacin realizado D/E P
Preparacin del informe de validacin E
Aprobacin del estudio de validacin realizado D/E P
Archivar documentos relacionados con la validacin E
Revisin y aprobacin del informe de validacin P D/E
J M: J efe del laboratorio de microbiologa D: Decide
PT: Personal tcnico experto y calificado E: Ejecuta
RC: Responsable de calidad P: Participa
LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 4 de 8

6 RELACIONES
-Captulo 8. Aseguramiento de la calidad de los resultados. Requisitos Norma 17025.
-PR 3.1 Diseo de mtodos propios.
-PR 3.5 Control de datos.
-IN 3.2 Evaluacin de la calidad de los medios de cultivo.
-PR 8.1 Aseguramiento de la calidad de los resultados.
-PR 5.1 Manejo y uso de cultivos de referencia.
7 DESARROLLO
7.1 Se establecen las condiciones y el alcance de la validacin del mtodo de ensayo.
El procedimiento a cumplir para la validacin depender del tipo de mtodo de ensayo.

Caso Mtodo de
ensayo
Objetivo de la validacin

Parmetros a evaluar
1
-Mtodos de
ensayo
normalizados
-Mtodos no
normalizados
ya validados.
Verificar o comprobar que
el laboratorio domina el
mtodo y lo utiliza
correctamente.
Los que indique la norma o lo
establecido en el mtodo validado.
Ejemplo: precisin, exactitud.
2
-Mtodo
normalizado
modificado.
Comprobar que la
repetibilidad, la
reproducibilidad, la
precisin intermedia y la
exactitud del mtodo
original no dependen de la
modificacin introducida
y de que el laboratorio
domina el mtodo y lo
utiliza correctamente.
Ensayos Cualitativos: su especificidad,
exactitud relativa, desviacin positiva,
desviacin negativa, lmite de deteccin,
efecto matricial, repetibilidad y
reproducibilidad
Ensayos Cuantitativos: la
especificidad, sensibilidad, exactitud
relativa, desviacin positiva, desviacin
negativa, repetibilidad, reproducibilidad
y el lmite de cuantificacin

3
-Mtodos
propios
-Mtodos no
normalizados.
Comprobacin de que la
repetibilidad, la
reproducibilidad, la
precisin intermedia y la
exactitud son suficientes
para el objetivo de
aplicacin y de que el
laboratorio domina el
mtodo y lo utiliza
correctamente.
Ensayos Cualitativos: su especificidad,
exactitud relativa, desviacin positiva,
desviacin negativa, lmite de deteccin,
efecto matricial, repetibilidad y
reproducibilidad
Ensayos Cuantitativos: la
especificidad, sensibilidad, exactitud
relativa, desviacin positiva, desviacin
negativa, repetibilidad, reproducibilidad
y el lmite de cuantificacin

4
-Mtodos por
kit
comerciales.
Comprobacin de que el
mtodo cumple con su
objetivo.
Segn lo indicado por el mtodo ms
todos los necesarios mencionados
anteriormente.
LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 5 de 8

7.2 La validacin abarca los siguientes pasos generales:
7.2.1 Determinacin de los datos caractersticos del mtodo.
7.2.2 Aprobacin de los mtodos de ensayos validados.
7.2.3 Control interno permanente.
7.2.4 Documentacin y archivo.
7.3 Informe de validacin:

Cada validacin debe ir acompaada de un informe de validacin.
El Informe de validacin debe elaborarse de acuerdo al modelo del anexo PR 3.2/3 Informe de
validacin Laboratorio de Microbiologa.
Se incluyen datos de Mediciones del aseguramiento de la calidad (registros, grficos, clculos
necesarios, clculo de la incertidumbre). Ver PR 8.1 Aseguramiento calidad de la calidad de los
resultados.

Todos los documentos relacionados la validacin del mtodo de ensayo se archivan en la oficina
del Responsable de calidad.

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 3.2/3 Informe de validacin laboratorio de Microbiologa
LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 6 de 8


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 7 de 8


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Validacin de mtodos
microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 8 de 8

ANEXO 3 PR 3.2/3

Informe de validacin

1. Descripcin del mtodo de ensayo:
2. Referencia documental o normativa.
3. Objetivo del mtodo:
4. Alcance del mtodo:
5. Descripcin de las muestras ensayadas (nmero total de muestras, matriz, nivel de
inculo, etc.):
6. Detalles de insumos, medios de cultivo, reactivos, materiales de referencia y
acondicionamiento de las muestras (desde el muestreo, instrucciones de seguridad hasta
condiciones ambientales).
7. Lista de equipos, instrumentos y dispositivos empleados.
8. Parmetros de validacin a determinar, de acuerdo al punto 7.1 del presente
procedimiento.
9. Mediciones del aseguramiento de la calidad (registros, grficos, clculos necesarios,
clculo de la incertidumbre).
10. Resultados obtenidos.
11. Conclusiones, criterios de aceptacin o rechazo, criterios de revalidacin.
12. Firma del Personal que realiz la validacin del mtodo.
13. Firma del Personal responsable de la aprobacin del informe de validacin.

LABORATORIO)


Mtodo de ensayo cuantitativo
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 10

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 2 de 10

1 OBJETIVO
El presente procedimiento tiene como objeto describir la metodologa llevada a cabo por el
laboratorio de Microbiologa para realizar el ensayo (metodologa empleada en el ensayo).

2 ALCANCE
Este Procedimiento se aplica para realizar el ensayo (metodologa empleada en el ensayo) en
(matriz o matrices). Ejemplo: Recuento de microorganismos a 30 C en matriz leche en polvo.

No aplicable

4 REFERENCIAS
Descripcin del procedimiento: (Metodologa empleada en el ensayo)
Ejemplo Norma FIL 100B:1991 - Enumeracin de microorganismos por recuento de colonias a
30 C.

Norma FIL 122:2001 (E) - Preparacin de las muestras y diluciones para la examinacin
microbiolgica.

ISO 7218:1996(E) Microbiology of food and animal feeding stuff-General rules for
microbiological examinations.

ISO 6887-1 Preparation of dilutions.

5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM PT
Fundir y plaquear los medios de cultivos E
Supervisar todas las actividades relacionadas con el ensayo D
Realizar el ensayo E
Leer las placas o tubos luego de la incubacin y registrar los resultados (PR 3.3/3) E
Revisar y firmar el Informe de Ensayo D/E

J M: J efe del laboratorio de microbiologa
PT: Personal tcnico
D: Decide
E: Ejecuta
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 3 de 10

6 RELACIONES
-PR 1.1 Perfil de puesto, autorizacin y calificacin del personal.
-PR 2.2 Plan de higiene.
-IN 2.1 Monitoreo ambiental
-IN 3.1 Preparacin de medios de cultivo y reactivos
-PR 4.1 Manejo de equipos.
-PR 7.1 Manipulacin de las muestras.

7 DESARROLLO
7.1 La (Metodologa empleada en el ensayo) especifica:

7.1.1 Los medios, diluyentes y reactivos a usar
En el caso del ejemplo: PCA y agua peptona al 0.1%
7.1.2 La tcnica de ensayo a emplear (siembra en profundidad o en superficie, tiempo y
temperatura de los medios de cultivo antes de plaquearlos, etc.).
En el caso del ejemplo la siembra es en profundidad, los medios se funden en horno
microondas y se mantienen en bao de agua a 45 C + 1 C por media hora
aproximadamente antes de plaquear.
7.1.3 Las condiciones de tiempo y temperatura de incubacin de las placas sembradas.
En el caso del ejemplo se incuban 72+ 2 horas a 30 C +1 C.
7.1.4 El clculo del nmero de microorganismos por gramo o por mililitro de producto, a partir
del nmero de colonias obtenidas en las placas o tubos, eligiendo las diluciones que den
un resultado significativo.
En el caso del ejemplo se calcula el nmero de microorganismos (ufc) por gramo de
leche en polvo.
7.1.4.1 Expresin de los resultados:

Mtodo de clculo general para un mtodo cuantitativo nmero de microorganismos obtenidos en
placas de Petri (corresponde a la metodologa del diagrama de flujo Apndice 2):
Considerar las placas que tengan ms de 10 y menos de (300)* colonias.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 4 de 10

Calcular el nmero (N) de microorganismos por ml si el producto es lquido, o por g en el caso de
otros productos, usando la siguiente ecuacin:

C
N =
(1 x n
1
+0,1 x n
2
) d
Donde :

C: es la suma total de las colonias contadas en todas las placas
n
1
: es el nmero de placas contadas en la primera dilucin
n
2
: es el nmero de placas contadas en la segunda dilucin
d : es el factor de dilucin correspondiente a la primera dilucin.

* depende de la metodologa empleada.

Ejemplo:

Un ensayo arroj los siguientes resultados (se inocularon 2 cajas de Petri por cada dilucin):
En la primera dilucin 10
-2
se contaron: 168 y 215 colonias
En la segunda dilucin 10
-3
se contaron: 14 y 25 colonias.

C 168 + 215 + 14 + 25 422
N = = = = 19182
(n
1
+ 0,1 n
2
) d [2 + (0,1 x 2)] x 10
-2
0,022

El resultado obtenido es 19000 o 1,9 x 10
4
microorganismos por g o por ml de producto.

7.2 Equipamiento empleado para la realizacin del ensayo y requisitos tcnicos de
funcionamiento. Ver APENDICE 1.
Tambin figuran aqu verificaciones necesarias a realizar antes del ensayo.
7.3 Disposicin del material necesario en el ensayo:
Lavado y preparacin del material de laboratorio.
El Auxiliar del Laboratorio lava el material necesario de acuerdo a las indicaciones de la
instruccin IN Lavado de material para ensayos microbiolgicos.
Antes del anlisis, todo el material limpio a ser usado, es separado e identificado.
Material necesario para el ensayo: Placas de Petri de vidrio o plstico, pipetas graduadas
esterilizadas en estufa (con tapn de algodn), frascos o botellas y tubos de ensayo, tips estriles
para micropipetas.
7.4 Diagrama de Flujo del Ensayo: se detalla el orden cronolgico de las etapas del ensayo.
APENDICE 2
Los registros correspondientes a los ensayos se archivan en el laboratorio de Microbiologa
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 5 de 10

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 3.3/3 Registro interno de los resultados de ensayo

N
APENDICE
Codificacin Ttulo

1 --- Descripcin del equipamiento necesario
2 --- Diagrama de flujo de un mtodo cuantitativo.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 6 de 10


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 7 de 10


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 8 de 10

ANEXO 3 PR 3.3/3

REGISTRO INTERNO DE LOS RESULTADOS DE ENSAYO

Pg.____ de ____

Fecha de inicio del ensayo:
N PE :
Cliente o solicitante del ensayo:
Metodologa empleada:
Matriz:
Descripcin de la/s muestra/s ( incluye N muestra):

Firma del personal responsable de la realizacin:
Fecha de emisin del informe:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 9 de 10

APNDICE 1
Descripcin del equipamiento necesario:

Mezclador de tubos
Marca:
Modelo:
N inventario:

Balanza
Marca:
Modelo:
N inventario:

Bao termosttico
Marca:
Modelo:
N inventario:

Estufa de cultivo
Marca:
Modelo:
N inventario:

Equipo contador de colonias
Marca:
Modelo:
N inventario:

Lpiz contador de colonias
Marca:
Modelo:
N inventario:

Medidor de temperatura
Marca:
Modelo:
N inventario:

Horno Microondas
Marca:
Modelo:
N inventario:

Micropipetas
Marca:
Modelo:
N inventario:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 10 de 10

APNDICE 2
Diagrama de flujo de un mtodo cuantitativo.

9 ml
diluyente
1 ml
10
-2
10
-3
10
-4
1 ml
1 ml
1ml 1ml 1ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml
90 ml
diluyente
10g o ml de
muestra
1
ra
Etapa: cultivo
Medio de
cultivo
+
muestra
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
Control
del
Medio de
cultivo
Incubacin:
Tiempo y temperatura segn
la metodologa empleada
2
da
Etapa: Lectura de placas

3
ra
Etapa: Clculo del resultado
LABORATORIO)


Estimacin de la incertidumbre
de mtodos microbiolgicos

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 7

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 2 de 7

1 OBJETIVO
Este procedimiento describe la metodologa empleada para la estimacin de la incertidumbre de
medicin de los mtodos de ensayo microbiolgicos.

2 ALCANCE
Se aplica a todos los ensayos realizados por el laboratorio de microbiologa.

Definiciones:

Incertidumbre de medicin: parmetro, asociado al resultado de una medicin, que caracteriza
la dispersin de los valores que podran ser razonablemente asignados al mensurando.

Repetibilidad (r): grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del mismo
mesurando realizadas en las mismas condiciones de medicin. (ISO Vocabulario internacional
de trminos bsicos y generales de la metrologa: 1993)

Reproducibilidad (R): grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del
mismo mesurando realizadas en diferentes condiciones de medicin. (ISO Vocabulario
internacional de trminos bsicos y generales de la metrologa: 1993).

Incertidumbre combinada (u
c
): es la raz de las varianzas totales.
Incertidumbre expandida (U
e
): es la incertidumbre total u
c
multiplicada por el factor k =2.

Abreviaturas:

(u
c
): Incertidumbre combinada
(U
e
): Incertidumbre expandida.
4 REFERENCIAS
-CAEAL. Policy on the Estimation of Uncertainty of Measurement in Environmental Testing.
microbiolgicos

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 3 de 7

5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM PT
Realizar el clculo de las incertidumbres de medicin P E
Verificacin de la determinacin de las incertidumbres de medicin realizado D/E P
Preparacin del informe de incertidumbre E
Revisin y aprobacin del informe de incertidumbre D/E

PT: Personal tcnico calificado
D: Decide
E: Ejecuta
P: Participa

6 RELACIONES
-PR 3.2 Validacin de mtodos microbiolgicos.
7 DESARROLLO
Se revisa, e incorporan nuevos datos y se recalcula la incertidumbre para cada parmetro con una
frecuencia de 1 ao.
Se elabora un informe conteniendo toda la informacin relacionada con el clculo y los resultados
obtenidos de incertidumbre para el ensayo.

A continuacin se detallan los pasos a seguir para estimar la incertidumbre asociada con el
resultado de un ensayo microbiolgico:
7.1 Definir que se medir y cual ser la tcnica de ensayo.
7.2 Estimacin de la incertidumbre:
Se tomar como base las indicaciones existentes en la literatura cientfica internacional.
Todos los aportes a la incertidumbre se determinan en forma de desviaciones estndar y se
suman como varianzas.

7.2.1 Identificacin de las fuentes de incertidumbre:
Se enumeran las posibles fuentes de incertidumbre que pueden afectar el resultado de un ensayo:
7.2.1.1 Tcnicas/instrumentos: fuentes de incertidumbre asociadas al material de referencia, a la
uniformidad de la distribucin de los microorganismos en la muestra, a la exactitud de los
equipos utilizados para establecer medida de masa y volumen, al mezclado de las muestras, al
volumen usado, a la calidad de medio de cultivo, a las condiciones de incubacin, a la lectura e
interpretacin de los resultados, a las pruebas confirmatorias.
LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 4 de 7

7.2.1.2 Humanas: fuentes de incertidumbre asociadas a la lectura de placas, a la experiencia y
pericia del personal en la interpretacin de los resultados, a la reproducibilidad de las
determinaciones por cambio de observadores, a los instrumentos u otros elementos.

7.2.1.3 Ambientales: fuentes de incertidumbre asociadas a las condiciones atmosfricas,
temperatura y humedad, polvo, a las contaminaciones biolgicas, a las vibraciones, interferencias
electromagnticas.

7.2.2 Cuantificacin de cada componente de la incertidumbre: se pueden usar dos
metodologas (segn 7.2.2.1 o 7.2.2.2)
7.2.2.1 Para la cuantificacin de la incertidumbre se tiene en cuenta los componentes tipo A y
tipo B:
Evaluacin tipo A: Evaluacin estadstica de la incertidumbre Standard.
Se estima una desviacin estndar, la cual se obtiene estadsticamente utilizando mediciones
repetidas, actuales o previas. La misma representa la incertidumbre asociada a la falta de
precisin y se obtiene como un promedio de una serie de mediciones.

Evaluacin tipo B: Evaluacin no estadstica de la incertidumbre Standard.
Se utiliza toda la informacin disponible para calcular la variabilidad de cada fuente de
incertidumbre.
La informacin puede provenir por ejemplo de lo siguiente:
datos obtenidos de mediciones previas,
especificaciones del fabricante,
datos provenientes de los certificados de calibracin,
datos tomados de manuales, registros, etc.
experiencia o conocimiento general del comportamiento y propiedades relevantes de los
materiales e instrumentos.

Una vez cuantificados cada componente de la incertidumbre, se procese a expresarlos las mismas
unidades o forma, como una proporcin de la incertidumbre total.
Luego se evala si hay componentes que aporten valores no significativos, los cuales no sern
considerados al calcular la incertidumbre total.
La contribucin de los distintos componentes de la incertidumbre deben quedar expresados como
un desvo standard.

7.2.2.2 Se calcula la incertidumbre standard considerando los datos de validacin y
aseguramiento de calidad del mtodo:
Se realizan estudios de precisin y de bias del mtodo de ensayo con datos obtenidos de Ensayos
de Aptitud o Ensayos intralaboratorios.

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 5 de 7

La incertidumbre se estima combinando cuadrticamente la desviacin standard de
reproducibilidad y repetibilidad.

7.2.3 Clculo de la incertidumbre combinada:

Una vez obtenido la incertidumbre standard de cada componente de la incertidumbre segn
7.2.2.1 o 7.2.2.2 se combinan las mismas para obtener un solo valor, el cual expresar la
incertidumbre combinada.
De esta manera se calcula la incertidumbre Standard combinada a partir del valor de
reproducibilidad y repetibilidad del mtodo. (7.2.2.2)

La incertidumbre combinada u
c
es igual a la raz de la varianza total.

7.2.4 Clculo de la incertidumbre expandida:

Una vez obtenida u
c
se multiplica la misma por un factor (k) para obtener la incertidumbre
expandida U
e
.

La incertidumbre expandida permite obtener un intervalo de confianza donde la probabilidad de
encontrar el valor verdadero del 95%.

El valor del factor (k) considerado, para los propsitos de este procedimiento es 2, aunque el
mismo puede variar de acuerdo al nivel de confianza requerido.

7.2.5 Expresin del resultado de un ensayo y su incertidumbre asociada: El resultado (Rdo) se
expresa asociado a la U
e
.
De la siguiente manera: Rdo +U
e
(es un intervalo)

Los documentos generados se archivan en el laboratorio de Microbiologa.


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 6 de 7


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)



Revisin: 1
PAGINA : 7 de 7


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Control de datos

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 5

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Control de datos

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 5

1 OBJETIVO
Este procedimiento describe las verificaciones que se llevarn a cabo y la manera sistemtica la
transferencia de los datos y clculos.

2 ALCANCE
Se aplica a todas los procedimientos que impliquen la transferencia de los datos y/o clculos
realizados por el laboratorio de microbiologa.

Definiciones:

[ISO 9000: 2000]


4 REFERENCIAS

5 RESPONSABILIDADES
En la matriz se definen las responsabilidades y competencias para Control de datos.

Actividad DL RC JM PT Externo
Realizacin de la transferencia de los datos y clculos E E E E
Verificacin de la transferencia de los datos y clculos E E E E
Documentacin y validacin del software D/E E D/E E E
Proteccin y almacenamiento de datos E E E E
Mantenimiento de las computadoras y equipos E


LABORATORIO)


Control de datos

Revisin: 1
PAGINA : 3 de 5

6 RELACIONES

7 DESARROLLO
7.1 El laboratorio verifica en forma sistemtica la transferencia de los datos y clculos.
En este procedimiento siempre estn implicadas al menos dos personas, una de ellas vuelca los
datos y realiza el clculo y la otra verifica (principio de los cuatro ojos). El personal responsable
de cada actividad debe firmar al pie como Analista en el primer caso o verific en el segundo
caso.
7.2 Cuando se requiera hacer enmiendas de los registros, se debe tachar el dato original y
escribir al lado el nuevo dato junto con la firma de quien realiz la enmienda.

7.3 En ningn caso los registros deben ser escritos con lpiz negro, ni borrados con liquid-
paper.

7.4 Los registros deben ser legibles.

7.5 Cuando se utilicen computadoras o equipos automatizados para captar, procesar,
registrar, informar, almacenar o recuperar los datos de los ensayos o de las calibraciones el
soporte lgico de computadora (software) se documenta y se valida .

7.6 Los datos se protegen mediante una clave de acceso y se almacenan por un perodo no
menor a dos aos.

7.7 Se hace el mantenimiento de las computadoras y equipos automatizados en forma
peridica.

Los documentos generados se archivan en el laboratorio de Microbiologa.
N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

LABORATORIO)


Control de datos

Revisin: 1
PAGINA : 4 de 5


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Control de datos

Revisin: 1
PAGINA : 5 de 5


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Mtodo de Ensayo cualitativo
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 8

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 2 de 8

1 OBJETIVO
El presente procedimiento tiene como objeto describir la metodologa llevada a cabo por el
Laboratorio de Microbiologa para realizar el ensayo (metodologa empleada en el ensayo).

2 ALCANCE
Este Procedimiento se aplica para realizar el ensayo (metodologa empleada en el ensayo) en
(matriz o matrices). Ejemplo: matriz leche en polvo.

No aplicable

4 REFERENCIAS
Descripcin del procedimiento: (Metodologa empleada en el ensayo)
Ejemplo: Norma IDF 93:2001(E): Deteccin de Salmonella spp

ISO 7218:1996(E) Microbiology of food and animal feeding stuff-General rules for
5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM PT
Fundir y plaquear los medios de cultivos E
Supervisar todas las actividades relacionadas con el ensayo D
Realizar el ensayo E
Leer las placas o tubos luego de la incubacin y registrar los resultados (PR 3.3/3) E
Revisar y firmar el Informe de Ensayo D/E

PT: Personal tcnico
D: Decide
E: Ejecuta

6 RELACIONES
-PR 1.1 Perfil de puesto, autorizacin y calificacin del personal.
-PR 2.2 Plan de higiene.
-IN 2.1 Monitoreo ambiental
-IN 3.1 Preparacin de medios de cultivo y reactivos
-PR 7.1 Manipulacin de las muestras.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 3 de 8

7 DESARROLLO
7.1 La (Metodologa empleada en el ensayo) especifica:
7.1.1 Los medios slidos, caldos y reactivos a usar.
En el caso del ejemplo agua tamponada, caldos selectivos, medios slidos selectivos y
diferenciales. Pruebas bioqumicas o kit para identificacin de microorganismos.
Reactivos para revelar pruebas bioqumicas.
7.1.2 Las condiciones de tiempo y temperatura de incubacin
7.1.3 La tcnica de ensayo a emplear.
En general los mtodos tradicionales consisten en la siembra de la muestra en un medio de
preenriquecimiento lquido, incubacin y pasaje a un caldo selectivo, incubacin y pasaje
a medio slido selectivo y diferencial e identificacin de los microorganismos
sospechosos.
7.1.4 Interpretacin del resultado:
Si el microorganismo target fue detectado, el resultado ser:
Presencia en la porcin analizada en ml (para productos lquidos) o en g (para otros
productos)
Si el microorganismo target no fue detectado, el resultado ser:
Ausencia en la porcin analizada en ml (para productos lquidos) o en g (para otros
productos)
En el caso del ejemplo se detecta la presencia o ausencia de Salmonella spp por 25
gramo de leche en polvo
7.2 Equipamiento empleado para la realizacin del ensayo y requisitos tcnicos de
funcionamiento. ver APENDICE 1
Aqu figuran tambin las verificaciones necesarias a realizar antes del ensayo.
7.3 El registro interno de los resultados de ensayo se realizar en la planilla PR 3.3/3 Registro
interno de los resultados de ensayo.
7.4 Disposicin del material necesario en el ensayo:
Lavado y preparacin del material de laboratorio.
El Auxiliar del Laboratorio lava el material necesario de acuerdo a las indicaciones de la
instruccin IN Lavado de material para ensayos microbiolgicos
Antes del anlisis, todo el material limpio a ser usado, es separado e identificado.
Material necesario para el ensayo: Placas de Petri de vidrio o plstico, pipetas graduadas
esterilizadas en estufa (con tapn de algodn), frascos o botellas y tubos de ensayo, tips
estriles para micropipetas.
7.5 Diagrama de Flujo del Ensayo: se detalla el orden cronolgico de las etapas del ensayo.
APENDICE 2

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 4 de 8

Los registros correspondientes a los ensayos se archivan en el laboratorio de Microbiologa
N
ANEXOS
Codificacin Ttulo


N
APENDICE
Codificacin Ttulo

1 --- Descripcin del equipamiento necesario
2 --- Diagrama de flujo de un mtodo cualitativo.

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 5 de 8


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 6 de 8


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 7 de 8

APNDICE 1

Stomacher
Marca:
Modelo:
N inventario:

Balanza
Marca:
Modelo:
N inventario:

Bao termosttico
Marca:
Modelo:
N inventario:

Estufa de cultivo
Marca:
Modelo:
N inventario:

Medidor de temperatura
Marca:
Modelo:
N inventario:

Horno Microondas
Marca:
Modelo:
N inventario:

Micropipetas
Marca:
Modelo:
N inventario:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 8 de 8

APNDICE 2: Diagrama de flujo de un mtodo cualitativo.

Siembra de placas de medio de cultivo selectivo y diferencial
Pasaje a caldo selectivo
Lectura de placas.
Informe de resultados
Incubacin segn metodologa
empleada
Tiempo (por ejemplo 18 h 2h) y
temperatura (por ejemplo 37C 1C)

Una `porcin de
Muestra
Caldo de pre-enriquecimiento
empleada
empleada
Identificacin de colonias sospechosas por
Microscopa
Pruebas bioqumicas
Pruebas serolgicas
LABORATORIO)


Preparacin de medios de
cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 10

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 10

1 OBJETIVO
El presente instructivo tiene como objeto indicar:
la metodologa llevada a cabo para la preparacin de medios de cultivo y de reactivos en el
Laboratorio de Microbiologa.
los controles de esterilidad de los medios de cultivo y diluyentes.
2 ALCANCE
Se aplica todos los medios de cultivo y reactivos preparados en el laboratorio de Microbiologa.
No aplicable
4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Mtodos de ensayo y validacin
de los mtodos.

-Norma ISO 17025:1999 tem 5.4. Mtodos de ensayo y validacin de los mtodos.

- ISO 7218:1996(E) Microbiology of food and animal feeding stuff-General rules for

- EA-04/10 Accreditation for Microbiological Laboratories.

-ISO/TS 11133-1 Microbiology of food and animal feeding stuffs-Guidelines on preparation and
production of culture media-Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of
culture media in the laboratory.

production of culture media- Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media.
5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM AL
Preparar los medios de cultivos y reactivos y registrarlo (IN 3.1/3) I E
Colocar una etiqueta en los medios de cultivo y reactivos (IN 3.1/5) E
Realizar los controles de esterilidad de los medios de cultivo y diluyentes y
registrarlo (IN 3.1/4)
I E
Tomar acciones correctivas en caso de no conformidad D/E

AL: Auxiliar de laboratorio
D: Decide
E: Ejecuta
LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 3 de 10

6 RELACIONES
-Captulo 3.Mtodo de ensayo y validacin de los mtodos: Requisitos de la Norma 17025.

7 DESARROLLO
7.1 Preparacin de los medios de cultivo, diluyentes y reactivos:
Los medios de cultivo y reactivos se preparan siguiendo las instrucciones del fabricante, de la
norma o bibliografa correspondiente.
Las precauciones a tomar con suplementos conteniendo sustancias txicas se especificarn
claramente en cada caso de acuerdo a las instrucciones del fabricante.
El personal responsable de hacer los medios de cultivo y/o reactivos debe llenar la planilla
IN 3.1/3 Registro de preparacin de medios y reactivos.
Los medios de cultivo, reactivos y diluyentes son almacenados por el tiempo y a la temperatura
indicada en la norma o indicacin del fabricante correspondiente.
El personal responsable debe colocar una etiqueta indicando en los medios de cultivo y reactivos
segn IN 3.1/5 Etiqueta medios de cultivo y reactivos.

7.2 Control de esterilizacin de los medios de cultivo y diluyentes:
Para conocer la efectividad del proceso de esterilizacin, los medios de cultivo y diluyentes
estriles se incuban en estufa de cultivo.
La temperatura y tiempo de incubacin para esta prueba se corresponden con las condiciones
usadas durante el ensayo.
Se realiza este ensayo sobre el 1% de las placas o tubo del comienzo y 1% de las placas o tubos
del final de verter o distribuir los medios o diluyentes.
Este procedimiento se realiza por cada vez que se esteriliza un lote de medio de cultivo o
diluyente en autoclave o se esteriliza por filtracin.
El personal responsable registra los resultados en la planilla IN 3.1/4 Registro de Control de
esterilizacin de los medios de cultivo y diluyentes.

Los registros de preparacin de medios de cultivos, reactivos y esterilidad de los medios se
guardan en el laboratorio de microbiologa.

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 4 de 10


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 IN 3.1/3 Registro preparacin de medios de cultivo y reactivos
4 IN 3.1/4 Registro de Control de esterilizacin de los medios de
cultivo y diluyentes
5 IN 3.1/5 Etiqueta medios de cultivo y reactivos

N
APENDICE
Codificacin Ttulo

1 ---- Descripcin del equipamiento necesario
LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 5 de 10


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 6 de 10


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 7 de 10

ANEXO 3 IN 3.1/3

REGISTRO PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS

Pg.____ de ____

Fecha de
preparacin
Medio de
cultivo o
reactivo a
preparar
Marca
y
N de Lote de
polvo
deshidratado
o reactivo
Cantidad
pesada
(en g)
Volumen
medido
(en litros)
pH despus
del proceso
en
autoclave
o filtracin
N ID
Indicacin del
proceso de
esterilizacin
(N correlativo
de proceso en
autoclave o
filtracin)
Observaciones
(se indica color
o consistencia
anmala luego
del proceso de
esterilizacin, u
otras)
Firma del
personal
responsable de
la preparacin

Nota: N ID es la identificacin o nmero de lote del medio de cultivo o reactivo preparado en el laboratorio.
N ID coincide con el nmero del proceso de esterilizacin (N correlativo de proceso en autoclave o filtracin)

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 8 de 10

ANEXO 4 IN 3.1/4

REGISTRO CONTROL DE ESTERILIDAD DE MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS
Pg.____ de ____

Fecha de
realizacin
del control
Medio de
cultivo o
diluyente
Indicacin del
proceso de
esterilizacin
(N correlativo
de proceso en
autoclave o
filtracin)
Tiempo de
incubacin
(en horas)
Temperatura
de
incubacin
(C)
Resultado Conforme
(SI o NO)
Observaciones Firma del
personal
responsable
de la
realizacin
del control

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 9 de 10

ANEXO 5 IN 3.1/5
ETIQUETA MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS

IN 3.1/5
Medio de cultivo/ reactivo:
N ID:
Concentracin:
Condiciones de almacenamiento:
Fecha de preparacin:
Fecha de vencimiento:
Personal responsable de la preparacin:

LABORATORIO)


cultivo y reactivos

Revisin: 1
PAGINA : 10 de 10

APNDICE 1


Estufa de esterilizacin
Marca:
Modelo:
N inventario:

Autoclave
Marca:
Modelo:
N inventario:

Medidor de pH
Marca:
Modelo:
N inventario:

Electrodo de contacto
Marca:
Modelo:
N inventario:

Heladera
Marca:
Modelo:
N inventario:

LABORATORIO)


Evaluacin de la calidad de los
medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 8

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 8

1 OBJETIVO
El objetivo es definir la metodologa para evaluar la productividad y selectividad de medios de
cultivo utilizados en el laboratorio de microbiologa.
2 ALCANCE
Se aplica a los medios de cultivo utilizados en el laboratorio de microbiologa.
N ID o N Lote del medio de cultivo: corresponde a un nmero que identifica un lote de medio de
cultivo segn el proceso de autoclave usado en la preparacin en el laboratorio o un nmero provisto
por el fabricante en el caso de medios ya listos para el uso.

Productividad: rendimiento, recuperacin, crecimiento de un microorganismo que se espera que
desarrolle en el medio de cultivo.

Selectividad: la supresin del crecimiento de un microorganismo que se espera sea inhibido en el
medio de cultivo.
4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Mtodos de ensayo y validacin de
los mtodos.

-Norma ISO 17025:1999 tem 5.4. Mtodos de ensayo y validacin de los mtodos.
- EA-04/10 Accreditation for Microbiological Laboratories.
production of culture media-Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of
culture media in the laboratory.

production of culture media- Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media.
5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM PT
Realizacin del control de calidad por N ID o N de lote de medio de cultivo y
registro en IN 3.2/3
E
Tomar acciones correctivas en caso de no conformidad D/E

J M: J efe del laboratorio de microbiologa.
PT: Personal tcnico.
D: Decide
E: Ejecuta

LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 3 de 8

6 RELACIONES
-Captulo 3.Mtodo de ensayo y validacin de los mtodos: Requisitos de la Norma 17025.
-PR 5.1 manejo y uso de cultivos de referencia.
7 DESARROLLO
7.1 Para evaluar cada lote de medio de cultivo se podr emplear los siguientes mtodos:

a) pruebas cuantitativas
b) pruebas semi-cuantitativas
c) pruebas cualitativas

La eleccin del empleo de una u otra metodologas ser considerada en cada caso en particular segn
las capacidades y necesidades del laboratorio.

Para la interpretacin de los resultados de todas las pruebas es necesario comparar la cantidad de
crecimiento sobre el medio a evaluar con respecto al crecimiento sobre un medio de referencia.

El uso de un medio de referencia especfico es obligatorio en los mtodos de cuantitativos (ver anexo
B de la norma ISO/TS 11133-2:2000)
Para las pruebas semi-cuantitativas o cualitativas, el uso de un medio especfico de referencia o un
medio de cultivo que da una 'la reaccin positiva" ayuda al interpretar los resultados. El medio de
referencia debe ser de conocida buena calidad (por ejemplo ser un medio listo para el uso de calidad
asegurada por el proveedor).
En medios selectivos y/o diferenciales, adems de evaluar el crecimiento de las cepas target hay que
prestar atencin tambin a la apariencia, tamao y morfologa de las colonias (especificidad) y el
crecimiento de las cepas no-target debe estar en parte o completamente inhibido.

7.1.1 Cultivo de trabajo: se prepara un cultivo en fase estacionaria de la cepa a partir de la cepa de
reserva en un caldo no selectivo (ver PR 5.1 manejo y uso de cultivos de referencia).

Se usa una cepa apropiada de referencia target para evaluar la productividad y no-target para evaluar
la selectividad (ver anexo B de la norma ISO/TS 11133-2:2000)

7.1.2 Productividad:

Para evaluar la productividad de los medios de cultivo slido, semislido o lquidos ya preparados y
esterilizados, los mismos deben ser inoculados con un microorganismo target apropiado o cultivo de
trabajo.
Para las pruebas semi-cuantitativas y cualitativas se emplea un nivel de inculo entre 10 ufc a 100 ufc
por placa o tubo de medio.
LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 4 de 8

a) Para las pruebas cuantitativas la Proporcin de Productividad P
R
es definido como sigue:

P
R
=Ns /No

donde
Ns: es el recuento total de colonias obtenido en el medio de cultivo a probar (obtenido de uno o ms
placas)
No: es el recuento total de colonias obtenido en el medio de cultivo de referencia definido obtenido
de uno o ms placas que debe ser 100 ufc.

Criterio de conformidad: La productividad alcanza un lmite mnimo definido que se encuentra
documentado en el anexo B de la norma ISO/TS 11133-2:2000.
All figuran los microorganismos, tiempo y temperatura de incubacin, los criterios y el medio de
referencia que debe usarse segn el medio a evaluar.
Dicho de otra manera, P
R
debe ser mayor o igual a un valor lmite para que el medio de cultivo sea
conforme.
En general para que los medios no selectivos como el PCA sea conforme, el P
R
debe ser a 0,7.

b) Para las pruebas semi-cuantitativas en medios de cultivos slidos se inoculan con asa por estras
los sectores A, B, C y D de la placa segn el modelo que figura en la Norma ISO/TS 11133-2:2000
(mtodo ecomtrico modificado).
Las placas inoculadas se incuban a temperatura y tiempo que depende del medio de cultivo evaluado
y se observa el crecimiento.
El crecimiento de cada estra tiene un valor que vara segn el medio de cultivo, se suma los sectores
A, B, C y D dando un ndice de crecimiento G". Los ndice de crecimiento G" se comparan con los
obtenidos anteriormente y/o con G de un medio de la referencia, para asegurar que las variaciones no
son excesivas.
Un rango de variacin aceptado para cada medio de la cultivo debe ser establecido en base a la
experiencia.

c) Las pruebas cualitativas se llevarn a cabo visualmente asignando un score de crecimiento.
Score para medios slidos:
0 no hubo crecimiento, 1 hubo crecimiento dbil, 2 hubo buen crecimiento
Score para medios lquidos:
0 no hubo turbidez, 1 hubo turbidez muy tenue, 2 hubo buena turbidez

7.1.3 Selectividad:
Para llevar a cabo la prueba de la selectividad, el medio de cultivo selectivo y un medio de la
referencia se inoculan con un microorganismo y nivel apropiado.
Para las prueba selectividad se emplea una suspensin del microorganismo de no-target que contiene
10
4
cfu a 10
6
cfu por ml se inocula en la placa o en el tubo de medio.

LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 5 de 8

Prueba cuantitativa:
El Factor de Selectividad S
F
es calculado como sigue:

S
F
=Do- Ds

donde
Do: es la ms alta dilucin que muestra crecimiento de por lo menos 10 colonias sobre el medio de
referencia.

Ds: es la ms alta dilucin que muestra crecimiento comparable sobre el medio a evaluar.

S
F
, Do y Ds se expresan en unidades log
10

Para medios selectivos un microorganismo no-target debe dar un S
F
por lo menos de 2.

Si por ejemplo Do 10
-4
: log
10
es 4,0 y Ds 10
-3
: el log
10
es 3,0 entonces el factor de selectividad es S
F
:
1,0.

Ejemplo:
Para el medio Baird Parker un microorganismo target es el Staphylococcus aureus, un
microorganismo no target es la Escherichia coli.
En este medio la Escherichia coli ATCC 25922 debe estar totalmente inhibida (se prueba la
selectividad del medio) y con Staphylococcus aureus ATCC 25923 se evala su productividad.
Los registros de control de calidad de medios se conservan en el laboratorio de microbiologa

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 IN 3.2/3 Registro evaluacin de medios de cultivo

N
APENDICE
Codificacin Ttulo

1 ---- Productividad: Pruebas semi-cuantitativas medio slidos.
patrn de inoculacin por el mtodo de estra modificado
LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 6 de 8


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 7 de 8


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


medios de cultivo

Revisin: 1
PAGINA : 8 de 8

ANEXO 3 IN 3.2/3

REGISTRO EVALUACION DE MEDIOS DE CULTIVO

Pg.____ de ____

Medio de cultivo evaluado:

N ID
o
N lote de
medio
evaluado

Fecha de
realizacin
del anlisis

Cepa usada
(Gnero y
especie del
microorganismo
y tipo y N de
coleccin)
Medio de
referencia
para evaluar la
productividad
Medio de
referencia
para evaluar
la
Selectividad
Resultado de
productividad
(unidades)
Resultado de
selectividad
(unidades)
Medio
conforme
(SI/NO)

Personal
responsable

CAPTULO 4
EQUIPOS

ndice
CAPTULO 4 EQUIPOS...........................................................................................................................1
4.1 REQUISITOS............................................................................................................................1
ANEXO 4.A. DIRECTRICES PARA CALIBRACION DE EQUIPOS EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA.................................................................................................................................4
ANEXO 4.B DIRECTRICES PARA LA PUESTA EN SERVICIO Y VERIFICACION DE EQUIPOS
EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA..................................................................................5
ANEXO 4.C DIRECTRICES PARA EL MANTENIMIENTO DE EQUIPOS......................................7
ANEXO 4.D INSTRUCTIVO DE USO DE EQUIPOS...........................................................................8

4.1 REQUISITOS
4.1.1 El laboratorio debe estar provisto de todos los equipos necesarios para la
correcta ejecucin del ensayo.
4.1.2 Cuando el laboratorio utilice equipos que estn fuera de su control permanente
debe asegurarse que se cumplan los requisitos de esta norma.
4.1.3 Los equipos y su soporte lgico usados en la realizacin del ensayo y muestreo
deben tener la exactitud requerida y cumplir con las especificaciones
establecidas para los ensayos o calibraciones.
Hay equipos cuya exactitud es clave en el impacto sobre la incertidumbre de los
resultados por lo que es imprescindible que cumplan siempre con las
especificaciones ms relevantes del mtodo.
Captulo 4. Equipos.
1
4.1.4 Antes de poner en servicio un equipo (incluido el empleado para el muestreo) se
lo debe calibrar o verificar con el fin de asegurar que responde a las exigencias
especificadas del laboratorio y est conforme a las especificaciones
normalizadas pertinentes. El equipo debe ser verificado o calibrado antes de su
uso.
4.1.5 Como parte de un sistema de calidad, el laboratorio debe documentar e
implementar programas para la limpieza, mantenimiento, calibracin y/o
verificacin y esterilidad de los equipos cuando sea necesario.
El laboratorio debe establecer un programa para la calibracin y/o verificacin
de los equipos que tengan una influencia directa en los resultados de los
ensayos. La frecuencia de estas calibraciones y/o verificaciones se establecer en
funcin de la experiencia documentada y se basar en el uso, tipo y resultados
previos de las calibraciones de los equipos. Los intervalos entre sucesivas
calibraciones y/o verificaciones deben ser ms cortos que el perodo de tiempo
durante el cual se observan desviaciones del equipo fuera de los lmites
aceptables.
4.1.5.1 Los equipos habituales de un laboratorio microbiolgico pueden clasificarse
como siguen:
A) Material de uso general: Material de vidrio o plstico (Ejemplo: tubos de ensayo,
placas de Petri, etc.), instrumentos de muestreo, ansas de siembra, etc.
B) Estufas, autoclaves, baos termostticos, heladeras, congeladores, campanas de flujo
laminar, equipos de filtracin, etc.
C) Equipos volumtricos como pipetas, distribuidores automticos, sembradores en
espiral, etc.
D) Instrumentos de medida: termmetros, cronmetros, balanzas, medidor de pH,
contadores de colonias, etc.

4.1.6 El mantenimiento de los equipos esenciales debe realizarse a intervalos
especificados.
En el documento ISO 7218: 1996 (E), se facilitan directrices sobre el mantenimiento de
los equipos.

La frecuencia de calibracin, verificacin y mantenimiento de los equipos establecida
en los ANEXOS I, II y III es orientadora.
Captulo 4. Equipos.
2
4.1.7 Los resultados de la calibracin y verificacin deben quedar registrados.
4.1.8 Deben estar disponible las instrucciones actualizadas de uso y mantenimiento
del equipo (incluido el manual suministrado por el fabricante) para el uso del
personal del laboratorio.
4.1.9 Debe estar inequvocamente identificado cada equipo con su soporte lgico
utilizado para los ensayos (incluido su estado de calibracin).
Los equipos bajo el control del laboratorio que requieren una calibracin deben ser
rotulados y identificados de alguna manera para indicar el estado de calibracin,
incluida la fecha en la que fueron calibrados por ltima vez y su fecha de vencimiento o
el criterio para la prxima calibracin.
4.1.10 Debe haber registros de cada componente del equipamiento y su soporte lgico.
4.1.11 Los registros deben incluir como mnimo:
Nombre del fabricante, modelo, nmero de serie u otros datos que lo identifique.
Verificacin de la conformidad del equipo con la especificacin. datos de
comprobacin de cumplimiento de las especificaciones a su ingreso.
Ubicacin del equipo dentro del laboratorio (cuando corresponda). (Ver PR 2.1
Limpieza y desinfeccin de locales. Plano del laboratorio)
Fecha de adquisicin y puesta en servicio.
Instrucciones del fabricante o la referencia a su ubicacin.
Informes de todas las calibraciones (debe contener fecha de calibracin y
resultados), fecha prevista de la prxima calibracin, los ajustes, los criterios de
aceptacin.
Plan de mantenimiento (cuando corresponda ) y mantenimiento llevado a cabo hasta
la fecha
Todo dao, mal funcionamiento, modificacin o reparacin del equipo.

Esto debe mantenerse durante toda la vida til del equipo y hasta dos aos despus de
sacarlo de servicio.

4.1.12 Los equipos que den resultados dudosos deben puestos fuera de servicio.
4.1.13 Se debe aislar para evitar su uso. Se deben colocar etiquetas de identificacin en
los equipos indicando que el equipo est fuera de servicio.
4.1.14 Las comprobaciones intermedias se deben efectuar segn un procedimiento
definido.
Captulo 4. Equipos.
3
ANEXO 4.A. DIRECTRICES PARA CALIBRACION DE EQUIPOS EN EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.

Tipo de Equipamiento Requisitos Frecuencia sugerida
Termmetro de referencia
Recalibrado y plenamente
trazable
Cada 5 aos
Termocupla de referencia
Recalibrado y plenamente
trazable
Anualmente.
Termmetro de trabajo
Frente a un termmetro de
referencia en punto de
congelacin y/o rangos de
temperatura de trabajo
Anualmente.
Termocupla de trabajo
Frente a un termmetro de
referencia en punto de
congelacin y/o rangos de
temperatura de trabajo
Anualmente.
Balanza
Calibracin plenamente
trazable
Anualmente.
Pesas de calibracin
Calibracin plenamente
trazable
Bianualmente/
Anualmente.
Pesas de control
Frente a pesa calibrada o
verificar en la balanza
inmediatamente despus de
la calibracin trazable
Anualmente.
Microscopios
Calibracin trazable al
micrmetro (cuando sea
apropiado)
Inicialmente
Centrifuga
Calibracin trazable o
verificacin con un
tacmetro independiente
Anualmente.
Cronmetro Frente a la hora oficial Anualmente.
Captulo 4. Equipos.
4

Captulo 4: Equipos
Autor: Alicia Cuesta. INTI. Argentina.
5
ANEXO 4.B DIRECTRICES PARA LA PUESTA EN SERVICIO Y VERIFICACION DE
EQUIPOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.

Equipos con temperatura
controlada
(estufas de cultivo, baos ,
heladeras, congeladores)
a) Verificar la estabilidad
y uniformidad de la
temperatura
b) Verificar la temperatura
a) Inicialmente, cada 2
aos y luego de una
reparacin o modificacin
b) Diariamente o con cada
uso.
Estufas de esterilizacin
y uniformidad de la
temperatura
aos y luego de una
b) Diariamente o con cada
uso.
Autoclave
y uniformidad de la
temperatura
c) Verificar el tiempo
aos y luego de una
b) Con cada uso.
c) semestralmente
Cabinas de seguridad
a) Verificar las
caractersticas tcnicas
b) Verificar la velocidad
del aire
c) Monitoreo microbiolgico
a) Inicialmente y luego de
una reparacin o
modificacin
b) Anualmente.
c) semanalmente
Campana de flujo laminar
a) Verificar las
caractersticas tcnicas
b) Verificar la esterilidad
a) Inicialmente y luego de
una reparacin o
modificacin
b) Mensualmente.
Peachmetros
Ajuste de la respuesta
usando como mnimo dos
buffers de calidad
aceptable.
Diariamente o con cada
uso
Balanzas
Ajuste a cero y verificacin
con la pesa control
Diariamente o con cada
uso
Destilador, desionizador y
unidad de smosis inversa
a) Verificar la
Conductividad
b) Verificar la
contaminacin microbiana
a) Semanalmente
b) Mensualmente.

Captulo 4: Equipos
6
Diluidores gravimtricos
a) Verificar peso y volumen
(peso) dispensado.
b) Verificar coeficiente de
dilucin
a) Diariamente
b) Mensualmente.
Distribuidores de medios
Verificar el volumen
distribuido.
Inicialmente y
peridicamente
dependiendo de la
frecuencia y naturaleza
de su uso.
Pipetas automticas
Verificar la precisin y
exactitud del volumen
distribuido
a) Inicialmente y
peridicamente
dependiendo de la
frecuencia y naturaleza
de su uso.
Sembradores en espiral
a) Verificar las caractersticas
tcnicas frente al mtodo
convencional
b) Verificar el estado del
punzn y puntos de inicio y
fin.
c) Verificar volumen distribuido.
a) Inicialmente y
anualmente.
b) Diariamente o con
cada uso.
c) Mensualmente
Contadores automticos
de colonias
Verificar frente al recuento
manual
Anualmente.
J arra de anaerobiosis Indicador de anaerobiosis Con cada uso
Centrifugas
Verificar la aceleracin contra
un tacmetro calibrado y
independiente
Anualmente.

Captulo 4: Equipos
7
ANEXO 4.C DIRECTRICES PARA EL MANTENIMIENTO DE EQUIPOS
EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.
Estufas de cultivo,
heladeras, congeladores
Estufas de esterilizacin
Limpiar las superficies
internas y desinfectar si es
necesario
Semestralmente
Baos de agua
Vaciar, limpiar, desinfectar
y rellenar
Mensualmente
Centrifugas Limpiar y desinfectar Trimestralmente
Autoclaves
Verificar visualmente la
junta, limpiar/drenar la
cmara
Mensualmente
Cabinas de seguridad y de
flujo laminar
Revisin /cambio de filtros Anualmente
Microscopios Limpieza de objetivos Anualmente
Peachmetros
a)limpiar los electrodos
b)revisar/rellenar
electrolito
a)con cada uso b)cuando
sea necesario
Balanzas/ Diluidores
gravimtricos
a)limpiar
b)revisar

a) con cada uso b)
Anualmente
Destilador Limpiar y desincrustar Segn sea necesario
Desionizador y unidad de
smosis inversa
sustituir cartucho y
membrana
Segn recomendacin del
fabricante
J arra de anaerobiosis Limpiar y desinfectar Despus de cada uso
Distribuidores de medios,
Pipetas automticas,
equipos volumtricos, etc.
Limpiar y desinfectar
segn sea apropiado
con cada uso
Sembradores en espiral
a) descontaminar, limpiar y
esterilizar.
b)revisar
a) con cada uso
b) Anualmente

Captulo 4: Equipos
8
ANEXO 4.D INSTRUCTIVO DE USO DE EQUIPOS

Equipos para medir la temperatura:
Cuando la temperatura tenga un efecto directo en el resultado de un anlisis o sea crtica para el
correcto funcionamiento de un equipo, los equipos utilizados para medir la temperatura, como
termmetros de columna lquida, termopares y termomtros de resistencia de platino (TRP)
utilizados en estufas y autoclaves, tendrn que ser de una calidad apropiada para conseguir la
precisin requerida.
La calibracin de estos equipos debe ser trazable a patrones nacionales o internacionales de
temperatura. Cuando la precisin lo permita, podrn utilizarse instrumentos que puedan
demostrar el cumplimiento de especificaciones de fabricacin apropiadas y aceptadas en el
mbito nacional o internacional (por ejemplo la norma ISO 1770 para los termmetros de
columna lquida). Estos instrumentos pueden utilizarse, por ejemplo, para controlar la
temperatura de heladeras y congeladores, tambin de estufas y baos termostticos cuando lo
permita la tolerancia admitida en torno a la temperatura definida. El laboratorio debe verificar el
correcto funcionamiento de estos instrumentos.

Incubadores, baos termostticos y estufas:
El laboratorio debe establecer inicialmente y documentar la estabilidad de la temperatura, la
uniformidad de su distribucin y el tiempo necesario para conseguir las condiciones de equilibrio
en incubadores, baos termostticos, estufas y salas con temperatura controlada, en particular con
respecto a los usos tpicos (por ejemplo, posicin, espacio entre y altura de las pilas de placas
Petri).
La constancia de las caractersticas registradas en la validacin inicial de los equipos debe
verificarse y registrarse despus de cualquier reparacin o modificacin importante. Los
laboratorios deben controlar la temperatura de funcionamiento de este tipo de equipos y
conservar registros.

Autoclaves, incluidos los preparadores de medios:
(IN Autoclave)
Un posible procedimiento a seguir para la calibracin, verificacin inicial y control del
funcionamiento del autoclave figura a continuacin:

Los autoclaves deben cumplir las tolerancias de tiempo y temperatura especificadas.

No es aceptable la utilizacin de autoclaves provistos slo de un manmetro. Los sensores
utilizados para controlar o vigilar los ciclos tienen que ser calibrados, adems de verificar el
correcto funcionamiento de los cronmetros.

La validacin inicial debe incluir estudios de funcionamiento (estudios de la distribucin
espacial de la temperatura) para los distintos ciclos y las distintas configuraciones de la carga que
se utilicen en la prctica. Este proceso tiene que repetirse despus de cada reparacin o
modificacin importantes (como sustitucin del termostato o programador, disposicin de la

Captulo 4: Equipos
9
carga, ciclo de operacin) o cuando as lo indiquen los resultados de los controles de calidad
realizados a los medios.
Debe colocarse un nmero suficiente de sensores de temperatura dentro de la carga (p. ej., en
recipientes llenos de lquido o medio) para poder demostrar diferencias segn la colocacin.

En el caso de preparadores de medios, cuando no se pueda demostrar un calentamiento uniforme
de otra manera, en general es necesario utilizar dos sensores, uno colocado al lado del sensor de
temperatura y el otro lejos de l.

Tanto en la validacin inicial como en las validaciones posteriores debe considerarse la
idoneidad de los tiempos de subida y bajada de la temperatura, as como el tiempo que se
mantiene la temperatura de esterilizacin.

El laboratorio debe establecer instrucciones claras de funcionamiento basndose en los
perfiles de calentamiento determinados para los usos tpicos durante la validacin inicial y las
posteriores. Debe establecer criterios de aceptacin/rechazo y mantener un registro de las
operaciones del autoclave, incluida la temperatura y el tiempo, para cada ciclo.

El control puede realizarse mediante una de las siguientes formas:
utilizando un termocupla y un aparato registrador para obtener un grfico impreso
por observacin directa y registro de la temperatura mxima alcanzada y el tiempo que se
mantiene esa temperatura.

Adems de controlar directamente la temperatura del autoclave, se comprueba la eficacia
de su funcionamiento durante cada ciclo mediante la utilizacin de indicadores qumicos o
biolgicos para fines de esterilizacin y descontaminacin.
La cinta de autoclave o las tiras indicadoras (controles qumicos) deben utilizarse slo para
distinguir que una carga ha sido procesada, pero no para demostrar que ha finalizado un ciclo
aceptable.
Los controles biolgicos contienen esporas de gnero Bacillus, evalan la efectividad de la
totalidad del ciclo de esterilizacin.
En todos los casos los resultados obtenidos de controles qumicos y biolgicos deben registrarse.
Pesas y balanzas:
Las pesas y balanzas deben calibrarse a intervalos regulares, demostrando su trazabilidad de
acuerdo al uso previsto.

Material volumtrico:
Los laboratorios de microbiologa pueden utilizar material volumtrico como dispensadores
automticos, dispensadores/diluidores, pipetas manuales o automticas y pipetas desechables.
Los laboratorios deben realizar una verificacin inicial del material volumtrico y, a partir
de ah, controles peridicos para garantizar que los equipos cumplen en todo momento las

Captulo 4: Equipos
10
especificaciones requeridas. Dicha verificacin no ser necesaria con el material de vidrio
que haya sido certificado para una tolerancia especfica.
En los equipos se verificar la exactitud del volumen dispensado frente al volumen
prefijado (para varios volmenes cuando se trate de instrumentos de volumen variable) y se
determinar la precisin de los volmenes dispensados repetidas veces.(IN verificacin de la
pipeta automtica)
Es conveniente que el material volumtrico desechable de un solo uso sea suministrado
por empresas con un sistema de calidad reconocido y relevante.
Despus de la validacin inicial de la idoneidad del material, se recomienda realizar controles
aleatorios de su exactitud. Si la empresa proveedora no tiene un sistema de calidad reconocido, el
laboratorio debe verificar cada lote de material.

Otros equipos:
Los conductivmetros, los medidores de oxgeno, los pH-metros y otros instrumentos
similares deben verificarse peridicamente o antes de cada uso.

Los tampones utilizados en estas verificaciones deben conservarse en condiciones
apropiadas y marcarse con la fecha de caducidad.

Si la humedad influye en el resultado del ensayo, los higrmetros debern calibrarse,
siendo la calibracin trazable a patrones nacionales o internacionales.

Los cronmetros, incluido los de los autoclaves, deben verificarse utilizando un
cronmetro calibrado o la seal horaria nacional u hora oficial.

Cuando se utilizan centrifugadoras en los procedimientos de ensayo, debe evaluarse si la
fuerza centrfuga se puede considerar crtica. En el caso de que sea crtica, la centrifugadora
tendr que ser calibrada.

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 15

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 2 de 15

1 OBJETIVO
El objetivo de este procedimiento es establecer la identificacin, calibracin, verificacin y
mantenimiento de los equipos utilizados por el laboratorio de microbiologa.

2 ALCANCE
Se aplica al equipamiento usado para la realizacin de los ensayos bajo el alcance de la
acreditacin.

Definiciones:
Calibracin : Conjunto de operaciones que permiten establecer, en condiciones especficas, la
relacin existente entre los valores indicados por un instrumento de medida o un sistema de
medida, o los valores representados por una medida material o un material de referencia, y los
valores correspondientes a una magnitud obtenidos mediante un patrn de referencia. [UNE-EN
30012-1, 3.23: 94] [ISO/IEC GUIDE 25, 3.4:90]

Verificacin: confirmacin por examen y evidencia de que los requerimientos especificados han
sido satisfechos.

4 REFERENCIAS
-Norma IRAM-IACC-ISO E 10012-1:1996. Requisitos de aseguramiento de la calidad para los
equipos de medicin. Parte 1. Sistema de confirmacin metrolgica para los equipos de medicin.
microbiolgicos

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
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5 RESPONSABILIDADES
Asegura los recursos y verifica el cumplimiento de las
actividades vinculadas con el mantenimiento y calibracin
y/o verificacin de equipos
D/E
Solicita la adquisicin o baja del equipamiento P D/E
Confeccionar y actualiza PR 4.1/6 Ficha de Equipamiento D/E P
Calibracin, verificacin y mantenimiento de los equipos E D/I E E
Confeccionar el Programa Anual de
Calibracin/Verificaciones y Mantenimiento de equipos y
verificar su cumplimiento.
P D/E P
Verificar el buen funcionamiento de los equipos necesarios
para el ensayo
I D/E
Llevar registros de control del autoclave, de la estufa de
esterilizacin y ajuste de la balanza
E
Tomar la temperatura de la heladera, la estufa y el bao
termosttico
E
Archiva los certificados de calibracin de equipos E
Identifica los equipos (PR 4.1/3) E


6 RELACIONES
- Captulo 4 Equipos Requisitos de la Norma 17025

7 DESARROLLO
7.1 Instalacin y puesta en servicio:
El J efe del laboratorio de microbiologa supervisa que la instalacin de los equipos se realice de
acuerdo a las especificaciones recomendadas por el fabricante, o su representante, o citadas en los
manuales operativos o de servicio del equipo.
A algunos equipos como por ejemplo estufas y baos termostticos, se la har el perfil trmico
antes de la puesta en servicio y/o reparacin.
La aprobacin del equipo se hace una vez verificado el cumplimiento las especificaciones y que
funciona correctamente.
LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 4 de 15

7.2 Identificacin de los equipos y actividades a realizar sobre el equipamiento:
El Responsable de la Calidad lo incorpora al inventario, lo identifica con una etiqueta con un
nmero previamente asignado.
Se confecciona PR 4.1/4 Referencia de actividades a realizar sobre el equipamiento y PR 4.1/5
Programa Anual de Calibraciones, Verificaciones y Mantenimiento de equipos.

7.2.1 Cada equipo tiene una carpeta que contiene la PR 4.1/6 Ficha de equipamiento, donde se
registra los datos generales del equipo, reparaciones y se definen las necesidades de calibraciones
y verificaciones a realizar al equipo. Adems se adjunta una copia del certificado de calibracin
anual, el manual provisto por el fabricante con las instrucciones de uso y otros datos relevantes de
los equipos.

7.2.2 El n de inventario lo asigna el responsable de calidad al ingreso del equipo al
laboratorio. Cada equipo tendr pegado su n de inventario PR 4.1/3 Planilla de puesta en
servicio del nuevo equipamiento laboratorio de microbiologa.

7.2.3 Los equipos cuentan con una identificacin que indica su estado de calibracin.
Esta identificacin est constituida por tres etiquetas:
7.2.3.1 Etiqueta superior:
color rojo: equipo/patrn fuera de perodo de calibracin/verificacin
color verde: equipo/patrn en estado de calibracin/verificacin

7.2.3.2 Etiqueta del medio: indican fecha de calibracin/verificacin
7.2.3.3 Etiqueta inferior: indican fecha de la prxima calibracin/verificacin.
En los equipos cuya parte a calibrar sea un termmetro, en la etiqueta inferior se indica la
correccin a cada temperatura de uso del equipo.
Inmediatamente despus de inventariado un equipo nuevo, se le incorpora la identificacin
de estado de calibracin.
Los responsables de los equipos mantienen actualizadas estas etiquetas.

7.3 Calibraciones y/o verificaciones peridicas de equipos
Las calibraciones son trazables a patrones nacionales o internacionales.

7.3.1 Cuando la calibracin es realizada por un laboratorio externo se contrata un laboratorio
acreditado.
7.3.2 En el caso que la calibracin o verificacin la realicen los representantes de los equipos, el
responsable del equipo archiva el informe o documentacin entregada por quien realiz la
tarea.
7.3.3 En el caso que la calibracin y/o verificacin sea interna, quien realiz la actividad
completa un registro prediseado o elabora un certificado con los siguientes datos:
LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 5 de 15

7.3.3.1 Fecha
7.3.3.2 Identificacin unvoca del certificado (por ejemplo mediante un nmero)
7.3.3.3 Nmero de pgina del total de pginas
7.3.3.4 Objetivo del trabajo realizado
7.3.3.5 Descripcin del equipo de medicin o patrn de medida
7.3.3.6 Metodologa empleada, para que cualquier medicin pueda ser reproducida en
condiciones similares a las originales
7.3.3.7 Resultados, indicados con suficiente detalle como para demostrar la capacidad de
medicin de cada equipo. Tambin se incluye una estimacin de la incertidumbre,
calculada de acuerdo a la Instruccin de calibracin correspondiente. Antes de los
resultados se indica la fecha de realizacin de la calibracin/verificacin.
7.3.3.8 En el caso de verificaciones puede ser necesario agregar las tolerancias asignadas, para
indicar la conformidad con un requisito.
7.3.3.9 Observaciones, cuando sea necesario. En este espacio se puede indicar la trazabilidad de
las mediciones.
7.3.3.10 Firma de las personas involucradas en la calibracin y/o verificacin

El Responsable de la Calidad verifica el cumplimiento de PR 4.1/5 Programa Anual de
Calibraciones, Verificacin y Mantenimiento.

7.3.4 Intervalos de calibracin y/o verificacin de los equipos PR 4.1/4 Referencia de
actividades a realizar sobre el equipamiento
La frecuencia de la calibracin y/o verificacin depende de:
naturaleza del equipo
condiciones de uso
gravedad de las consecuencias de una falta de calibracin y/o verificacin
historia previa del equipo o patrn de referencia
recomendaciones del fabricante

7.3.5 Control de los equipos entre perodos de calibracin:
Los responsables de los equipos verifican que se realicen las calibraciones y/o verificaciones
peridicas documentadas PR 4.1/5 Programa Anual de Calibraciones, Verificacin y
Mantenimiento, para asegurar la deteccin temprana de las deficiencias y poder adoptar
correcciones a tiempo.
El responsable del equipamiento puede someter los equipos de ensayo en servicio a controles
entre calibraciones peridicas, cada vez que lo crea conveniente, o cuando sospeche un
funcionamiento no apropiado. Esta actividad se documenta.

El responsable del equipamiento se ocupa de que se efecte la reparacin o recalibracin del
equipo y de verificar que se hayan eliminado las causas de la no conformidad, antes de volver a
utilizarlo. Anota en la PR 4.1/6 Ficha de Equipamiento las tareas realizadas.
LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
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7.3.6 Verificacin de la temperatura de trabajo:
Se realizar un monitoreo continuo de las temperaturas de las estufas, heladeras, congeladores
usados para la realizacin del ensayo.
Al bao termosttico se registra la temperatura antes del momento de su uso.
El personal tcnico del laboratorio toma y registra la temperatura del equipamiento en la planilla
PR 4.1/7 Registro de Control de Temperatura.
Los termmetros se calibran en un laboratorio que permita seguir la trazabilidad a patrones
nacionales o internacionales.

7.4 Equipos daados

El jefe del laboratorio de microbiologa es responsable de que no se realicen ensayos con equipos
deteriorados o en malas condiciones de trabajo, funcionamiento o calibracin.

Identifican adecuadamente el equipo daado y gestionan la reparacin registrando esta accin en
la planilla de PR 4.1/6 Ficha de Equipamiento. El Responsable del Laboratorio es el encargado
de estimar la validez de los resultados de los ensayos realizados previamente con dicho
equipamiento y notificar a los clientes cuyos resultados puedan haber sido afectados.

Antes de volver a poner el equipo en servicio verifican su buen funcionamiento y calibracin.

7.5 Baja de equipamiento

Cuando un equipo est daado y sea imposible su reparacin, sea por obsolescencia o cualquier
otra circunstancia, el jefe del Laboratorio, solicita a la direccin darlos de baja. Se indica en la PR
4.1/6 Ficha de Equipamiento.

7.6 Si por mal funcionamiento de los equipos, no se realizan los ensayos en la forma descripta
por este Sistema de la Calidad, se registra la No Conformidad, como se describe en el
procedimiento PR: Reclamos de clientes, no conformidades y acciones correctivas.

Los registros, manuales y toda la informacin relacionada con los equipos estarn guardados en
el laboratorio de microbiologa junto con una copia del certificado de calibracin.
El certificado de calibracin original y la informacin relacionada con el n de inventario de los
equipos lo archiva el sector de calidad.
LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 7 de 15


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 4.1/3 Planilla de puesta en servicio del nuevo equipamiento
4 PR 4.1/4 Referencia de actividades a realizar sobre el equipamiento
5 PR 4.1/5 Programa Anual de Calibraciones, Verificaciones y
Mantenimiento de equipos
6 PR 4.1/6 Ficha de equipamiento
7 PR 4.1/7 Registro de control de temperatura

N
APENDICE
Codificacin Ttulo

1 ---- Verificacin de equipos en el laboratorio de
microbiologa
LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 8 de 15


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 9 de 15


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 10 de 15

ANEXO 3 PR 4.1/3

PLANILLA DE PUESTA EN SERVICIO DEL NUEVO EQUIPAMIENTO
Pg.____ de ____

AO:.

Equipo N
inventario
Fecha de
recepcin
Ubicacin Fecha
prevista
puesta en
servicio
Fecha real
puesta en
servicio
Fecha
primera
calibracin
Fecha alta Observaciones Firma
personal
responsable

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 11 de 15

ANEXO 4 PR 4.1/4

REFERENCIA DE ACTIVIDADES A REALIZAR SOBRE EL EQUIPAMIENTO

NOTA: Esta planilla es elaborada por la organizacin teniendo en cuenta el anexo 4A, 4B y 4C
Capitulo 4 Equipos Requisitos de la Norma 17025

EQUIPO CALIBRACIN VERIFICACIN MANTENIMIENTO LIMPIEZA
Estufas

Baos termostticos

Heladeras

Autoclave

Balanzas

Estufa de
esterilizacin

Medidor de pH

Centrfuga
Destilador

Pipeta automtica
y dispensers

Stomacher
Microscopio

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
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ANEXO 5 PR 4.1/5

PROGRAMA ANUAL DE CALIBRACIONES, VERIFICACIONES Y
MANTENIMIENTO

Ao:

Equipo enero febrero marzo abril mayo junio julio agosto setiembreOctubrenoviembre diciembre

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
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ANEXO 6 PR 4.1/6
FICHA DE EQUIPAMIENTO

A. Detalles del equipo:
Equipo
Marca
Modelo
N de inventario
Estado en el momento de la recepcin
Ubicacin del equipo dentro del laboratorio
Caractersticas generales
Fecha de recepcin del equipo
Fecha de puesta en servicio
Fecha de baja del equipo
Parmetros a calibra y/o verificar y frecuencia PR 4.1/4
Necesidades de mantenimiento PR 4.1/4
Responsable del equipo

B. Detalles de Calibracin y/o verificacin del equipo:

fecha Operacin Empresa/ persona
que
calibr/verific
Prxima
calibracin/
verificacin
N de
informe
Criterio de
aceptacin
del informe
de
calibracin
Aceptacin
del informe
(SI/NO)
Observaciones

C. Detalles de mantenimiento del equipo:
fecha Operacin Persona que realiz
el mantenimiento
Prximo
mantenimiento
Observaciones

D. Detalles de reparaciones del equipo:
fecha Operacin Persona que repar
el equipo
Tiempo fuera de
servicio
Descripcin de
defectos y detalles de
reparacin, costo

E. Defectos ms comunes:

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 14 de 15

ANEXO 7 PR 4.1/7
REGISTRO DE CONTROL DE TEMPERATURA

Laboratorio: Correccin del termmetro:
Equipo: Rango de aceptacin:
N de inventario:
Tolerancia:
Instrumento:
N inventario: Segn norma:

Fecha Hora Temperatura leida Observaciones
Firma personal
que realiz la
lectura

LABORATORIO)


Manejo de equipos
Revisin: 1
PAGINA : 15 de 15

APENDICE 1: Verificacin de equipos en el laboratorio de microbiologa

EQUIPO VERIFICACIN
Estufas

Verificacin de la temperatura diaria de trabajo
Llevar Registros PR 4.1/7
Baos
termostticos

Verificacin una vez cada da de uso de la temperatura de trabajo
Heladeras

Verificacin temperatura diaria
Autoclave

-Control qumico con cada uso
-Control biolgico (frecuencia sugerida: una vez al mes).
Llevar Registros
Balanzas

Control con pesas calibradas
(Frecuencia sugerida: una vez por semana.)
Llevar Registros
Estufa de
esterilizacin
-Control qumico con cada uso.
-Monitoreo de temperatura durante esterilizacin.
Llevar Registros
Medidor de pH

Verificacin antes de cada uso y en el rango de trabajo con soluciones
buffer.
Llevar Registros
Destilador

Control mensual del agua destilada:
Conductividad, pH calidad microbiolgica
Llevar Registros
Pipeta automtica
y dispensers

Control de volumen por gravimetra con agua destilada y correccin de
temperatura.
Llevar Registros
Frecuencia para pipetas automticas: 4 meses.
Frecuencia para dispensers antes del uso.

LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 1 de 7

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 2 de 7

1 OBJETIVO
Organizar las tareas de limpieza de equipos y fijar la frecuencia de realizacin de las mismas.
2 ALCANCE
Est dirigido a todos los equipos del laboratorio de microbiologa.
D: frecuencia diaria.
S: frecuencia semanal.
M: frecuencia mensual.
T: frecuencia trimestral.
4 REFERENCIAS
-Norma ISO 17025:1999 punto 5.5 Equipos

microbiolgicos.

5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL JM AL Externo
Control servicios empresa de limpieza contratada E
Verificar cumplimiento de las tareas de limpieza que
realiza el laboratorio de microbiologa
D/E
Control de que se lleve a cabo la limpieza y el
mantenimiento adecuado de los equipos
E
Realizar el mantenimiento, la limpieza y/o
desinfeccin de equipos.
E E

J M: J efe del laboratorio de microbiologa D: Decide
AL: Auxiliar de laboratorio P: Participa

6 RELACIONES
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Equipos
-Captulo 4. Equipos: Requisitos de la norma 17025 ANEXO 4C. DIRECTRICES PARA EL
MANTENIMIENTO DE EQUIPOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.

LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 3 de 7

7 DESARROLLO
Las tareas realizadas quedan registradas en la IN 4.1/3 Registro general de limpieza y
mantenimiento de equipos del Laboratorio de microbiologa
El personal encargado de la limpieza debe estar instruido en cuanto a las condiciones que debe
realizar las tareas, uso adecuado de los desinfectantes, posibles peligros que puede acarrear la
negligencia.
A continuacin se detallan el modo y la frecuencia de la limpieza de equipos.

7.1 HELADERAS Y FREEZER:

Personal que
realiza la tarea
Heladeras:
M
Limpieza
interna de
heladeras y
congeladores
1. Desconectar la fuente de alimentacin
2. Vaciar
3. Descongelar (en el caso del congeladores)
4. Absorber el agua con un trapo
5. Limpiar con agua y jabn neutro
6. Secar
7. Conectar
8. Volver a llenar
congeladores:
cuando el
espesor del
hielo supera
los 6 mm
Auxiliar de
laboratorio
de
microbiologa
Limpieza
externa de
heladeras y
congeladores
Pasar un trapo hmedo, previamente embebido en
Se puede pasar tambin un trapo hmedo,
previamente embebido en lavandina diluida al
10% u otro desinfectante similar

S
Personal de
limpieza
externo
contratado.

7.2 OTROS EQUIPOS:

la tarea
Limpieza
interior
Limpiar las superficies internas
y desinfectar si es necesario
M o cuando se
requiera
Auxiliar de
laboratorio
de microbiologa
Limpieza
exterior
Pasar un trapo hmedo,
Se puede pasar tambin un
trapo hmedo, previamente
embebido en lavandina diluida
al 10% u otro desinfectante
similar

S

Auxiliar de
laboratorio
de microbiologa

LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 4 de 7

Los registros se conservan en el laboratorio de microbiologa.

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 IN 4.1/3 Registro general de limpieza y mantenimiento de equipos del
Laboratorio de microbiologa
LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 5 de 7


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 6 de 7


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Limpieza de equipos

Revisin: 1
PAGINA : 7 de 7

ANEXO 3 PR 4.1/3

REGISTRO GENERAL DE LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO DE EQUIPOS
DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Pg.____ de ____

Fecha Personal
interviniente en
la limpieza
Equipo N de inventario Observaciones Firma del
Personal que
realiz la
limpieza

.

Captulo 5: Trazabilidad de las mediciones
1
CAPTULO 5
TRAZABILIDAD DE LAS MEDICIONES

ndice
CAPTULO 5 TRAZABILIDAD DE LAS MEDICIONES............................................................1
5.1 DEFINICIN..................................................................................................................................................1
5.2 REQUISITOS .................................................................................................................................................2
5.3 PATRONES DE REFERENCIA Y MATERIALES DE REFERENCIA:........................................................................3
5.4 MATERIALES DE REFERENCIA (CERTIFICADOS) ............................................................................................4
5.5 COMPROBACIONES INTERMEDIAS ................................................................................................................4
5.6 CULTIVOS DE REFERENCIA:..........................................................................................................................4

5.1 DEFINICIN
Se entiende por el trmino trazabilidad : Propiedad de los resultados de una medicin o del valor
de un patrn tal que pueda relacionarse con referencias determinadas, generalmente a patrones
nacionales o internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo
todas las incertidumbres determinadas
El concepto es que todo el proceso de medicin, con sus correspondientes resultados e
incertidumbre de medicin total, se convierte en la cosa trazable, ms que el mero artefacto
patrn.
La trazabilidad est caracterizada por una serie de elementos esenciales:
a- Una cadena ininterrumpida de comparacin: frente a estndares aceptables por las partes,
usualmente estndares nacionales o internacionales.
b- Medicin de la incertidumbre: la medicin de la incertidumbre en cada etapa de la cadena
de trazabilidad debe ser calculada de acuerdo a mtodos adecuados
c- Documentacin: cada etapa de la cadena debe ser realizada de acuerdo a lo documentado y
generalmente utilizando procedimientos reconocidos; los resultados deben ser igualmente
documentados.
d- Competencia: el laboratorio que realiza una o ms etapas en la cadena, debe demostrar
evidencia de su competencia tcnica.
e- Referencia a unidades SI (Sistema Internacional): la cadena de comparacin debe terminar
en estndares primarios para la realizacin de las unidades SI.
f- Re-calibracin: las calibraciones deben ser repetidas a intervalos apropiados; el periodo
depende de variables como la incertidumbre requerida, la frecuencia y los modos de uso y
la estabilidad del equipo.

En algunos campos el material de referencia toma la posicin de estndar de referencia fsico.
Esto es vlido si dichos materiales son trazables y relevantes a las unidades del SI. La
2
certificacin de materiales de referencia es un mtodo frecuentemente usado para demostrar la
trazabilidad a las unidades del SI.
La Calibracin es la determinacin y documentacin de las desviaciones en la indicacin de un
instrumento de medicin (o de los valores de un material de medicin) del valor verdadero del
mensurando establecido por convencin.
5.2 REQUISITOS
5.2.1 Todos los equipos utilizados para los ensayos que tengan efecto significativo en la
exactitud o en la validez de los resultados del ensayo o del muestreo, deben ser calibrados
antes de ser puestos en servicio.
5.2.2 El laboratorio debe establecer un programa de calibracin y verificacin de los equipos
que puedan influir directamente en los resultados de los ensayos. Ver PR 4.1 Manejo de
equipos
La frecuencia de esas calibraciones y verificaciones la establecer el laboratorio, considerando la
experiencia documentada, el uso que se le da al equipo, el tipo y el funcionamiento previo de los
equipos.
El criterio a adoptar debe tener en cuenta que los intervalos entre sucesivas calibraciones y
verificaciones sean ms cortos que el perodo de tiempo durante el cual se han observado
desviaciones de los equipos fuera de los lmites aceptables.
El programa global de calibracin de los equipos de medida de un laboratorio microbiolgico
deber ser diseado para garantizar que con los certificados que disponga el laboratorio todas las
medidas realizadas sean trazables a un patrn nacional o internacional o a un Material de
Referencia Certificado (MRC).
Se deben establecer programas individuales de calibracin dependiendo de los requisitos
especficos de cada anlisis.
Los procedimientos para realizar las calibraciones deben estar debidamente documentados, ya sea
como parte de los mtodos analticos correspondientes o como un documento general sobre
calibracin. Dicha documentacin deber indicar la manera de realizar la calibracin, la
frecuencia, las medidas que deben tomarse en caso de que se produzca un fallo de calibracin,
etc. Asimismo, deben indicarse los intervalos de calibracin de patrones.
Cuando la precisin de la medida de la temperatura no tenga un efecto directo en el resultado del
ensayo, por ejemplo, en el caso de heladeras y congeladores, los laboratorios pueden cumplir
tambin los requisitos de acreditacin utilizando termmetros de trabajo debidamente verificados
por el laboratorio.
El laboratorio debe realizar una verificacin independiente de los indicadores y termmetros
integrados en preparadores de medios y autoclaves para demostrar su precisin. Esto se puede
hacer mediante termocuplas para vigilar las temperaturas alcanzadas en el interior del autoclave a
diferentes niveles y con diferentes cargas.
Debe mantenerse un registro de todos los controles realizados y detalles sobre cualquier accin
correctiva adoptada.
5.2.3 La calibracin de los equipos debe ser llevada a cabo por laboratorios de calibracin que
demuestren su competencia y su capacidad de medicin y trazabilidad. Estos laboratorios
de calibracin deben tener un programa de calibracin de los equipos diseado y operado
3
de modo de asegurar que las calibraciones y las mediciones hechas por el laboratorio de
calibracin sean trazables al Sistema Internacional de Unidades (SI).
El laboratorio de calibracin debe establecer la trazabilidad de sus propios patrones de medicin e
instrumentos de medicin al SI por medio de una cadena in interrumpida de calibraciones o de
comparaciones que los vinculen a los pertinentes patrones primarios de las unidades de medida
del SI.
Los certificados de calibracin emitidos por estos laboratorios deben contener los resultados de la
medicin, incluida la incertidumbre de la medicin o una declaracin sobre la conformidad con
una especificacin metrolgica identificada.

Existen ciertas calibraciones llevadas a cabo por el laboratorio de calibracin que actualmente no
se pueden hacer estrictamente en unidades. En estos casos la calibracin debe proporcionar
confianza en las mediciones al establecer la trazabilidad a patrones de medicin apropiados, tales
como:
- el uso de materiales de referencia certificados provistos por un proveedor competente con
el fin de caracterizar fsica o qumicamente un material de manera confiable; la utilizacin
de mtodos especificados o de normas consensuales, claramente descritos y acordados por
todas las partes concernientes.
- Siempre que sea posible se requiere la participacin en un programa adecuado de
comparaciones interlaboratorios.

5.3 PATRONES DE REFERENCIA Y MATERIALES DE REFERENCIA:
Material de referencia: Material o sustancia uno o ms de cuyas propiedades tienen valores
suficientemente homogneos y claramente establecidos como para poder ser utilizados en la
calibracin de un aparato, la evaluacin de un mtodo de medida o la asignacin de valores a
materiales.
[Gua ISO 30:1992]

Los materiales de referencia y los materiales de referencia certificados proporcionan la
trazabilidad esencial en las mediciones y son utilizados para:
demostrar la exactitud de los resultados
calibrar equipos.
controlar la calidad del laboratorio
validar mtodos.
permitir la comparacin de mtodos.
Siempre que sea posible, los materiales de referencia deben utilizarse con matrices apropiadas.
El laboratorio debe tener un programa y un procedimiento para la calibracin de sus patrones de
referencia. Los patrones de referencia deben ser calibrados por un organismo que pueda proveer
la trazabilidad. Dichos patrones de referencia para la medicin, conservados por el laboratorio,
deben ser utilizados solo para la calibracin y para ningn otro propsito, a menos que se pueda
4
demostrar que su desempeo como patrones de referencia no ser invalidado. Los patrones de
referencia deben ser calibrados antes y despus de cualquier ajuste.
5.4 MATERIALES DE REFERENCIA (CERTIFICADOS)
Cada vez que sea posible se debe establecer la trazabilidad de los materiales de referencia a las
unidades de medicin SI o a materiales de referencia certificados.
Los materiales de referencia internos deben ser verificados en la medida que sea tcnica y
econmicamente posible.
5.5 COMPROBACIONES INTERMEDIAS
Se deben llevar a cabo las comprobaciones que sean necesarias para mantener la confianza en la
condicin de calibracin de los patrones de referencia, primarios, de transferencia o de trabajo y
de los materiales de referencia de acuerdo con procedimientos y cronogramas definidos.
5.6 CULTIVOS DE REFERENCIA:
5.6.1 Las cepas de referencia son necesarias para demostrar que los medios (incluidos los kits
de anlisis) poseen unas caractersticas aceptables, para validar mtodos y para realizar
controles de calidad interno durante la ejecucin de los ensayos.
5.6.2 Definiciones:
Cultivos de referencia: Trmino colectivo que se refiere a cepas de referencia, cepas de reserva y
cultivos de trabajo.
Cepas de referencia: Microorganismos definidos por lo menos a nivel de gnero y especie,
catalogados, muy caracterizados y de origen conocido. [ISO 11133-1:2000] Se obtienen de una
coleccin de cultivo de referencia reconocido.
Cepas de reserva Cepas idnticas obtenidas mediante un nico subcultivo de una cepa de
referencia. [ISO 11133-1:2000]
5.6.3 Esquema de cultivos de referencia:
CEPA DE REFERENCIA
Reconstitucin
(Slo se acepta un nico repique)
*
OBTENCIN DE LAS CEPAS DE RESERVA
5

( * ) Deben realizarse los controles de pureza y pruebas bioqumicas de la cepa.
En este proceso es necesario tener trazabilidad.
Para demostrar la trazabilidad, las cepas de referencia se obtienen a partir de una coleccin
nacional o internacional reconocida.
5.6.4 Segn establecen las directrices contenidas en la norma ISO 11133-1, las cepas de
referencia podrn ser subcultivadas una vez para obtener cepas de reserva, realizando en
paralelo los controles de pureza y ensayos bioqumicos que sean necesarios.
5.6.5 Las cepas de reserva deben conservarse en alcuotas utilizando, una tcnica que mantenga
las caractersticas tpicas, minimice la contaminacin y la mutacin de las cepas de
referencia, como por ejemplo liofilizacin, congelacin (a -20 C o -70 C).
5.6.6 La tcnica a adoptar depende del tipo de microorganismo, la disponibilidad de equipos del
laboratorio, la frecuencia de uso, las medidas de bioseguridad al alcance, etc. El mtodo
de preservacin adoptado debe asegurar el mnimo nmero de repiques de la cepa
original. (En general no se acepta ms all de los cinco repiques)
5.6.7 Si las cepas de reserva se han descongelado, no deben volver a congelarse y reutilizarse.
CONSERVACIN MEDIANTE DISTINTOS MTODOS
(Liofilizacin, nitrgeno lquido, ultracongelacin rpida, etc.)
Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento
CEPAS DE TRABAJO
(Especificar tiempo y condiciones de almacenamiento)
UTILIZACIN EN EL CONTROL DE CALIDAD DE
LOS MEDIOS, VALIDACIN DE MTODOS Y
CONTROLES INTERNOS DE CALIDAD
*
Descongelacin / reconstitucin
*
Se subcultiva
una sola vez.
6
5.6.8 Las cepas de trabajo para uso de rutina deben ser un subcultivo primario de las cepas de
reserva.
5.6.9 Las cepas de trabajo, se conservan en refrigeracin durante un periodo de tiempo que
asegure la viabilidad del microorganismo.
5.6.10 Las cepas de trabajo no deben ser subcultivadas salvo que as se requiera y se defina en un
mtodo normalizado o que el laboratorio pueda aportar evidencias documentadas de que
no se ha producido ningn cambio en ninguna propiedad importante.
5.6.11 Todas las fases del proceso han de estar documentadas y se debe mantener un registro
detallado de todas las operaciones realizadas: registro de entrada, procedencia de la cepa,
nmero de repiques, procedimientos de identificacin y control de calidad, mtodo de
conservacin, hoja de seguridad, etc.
LABORATORIO)


Manejo y uso de cultivos de
referencia
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 10

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 2 de 10

1 OBJETIVO
El presente procedimiento tiene como objetivo:
asegurar la trazabilidad a cultivos de referencia de las cepas utilizadas para la evaluacin
de la performance de los medios de cultivos, controles internos de calidad y validacin de
mtodos.
minimizar al mximo la contaminacin cruzada, la mutacin o la alteracin de las
caractersticas tpicas de dichas cepas.

2 ALCANCE
Se aplica a cepas obtenidas a partir de colecciones de microorganismos nacional o
internacionalmente reconocidos que se usan en el laboratorio de microbiologa.

Cepas de referencia (C ref): microorganismos obtenidos de una coleccin nacional o
internacional reconocida.
Cepas de reserva (C r): cepas obtenidas a partir del cultivo de un microorganismo de referencia
conservadas por un laboratorio.
Cepas de trabajo (Ct): subcultivos de microorganismos obtenidos a partir de las cepas de
reserva para ser utilizados en los ensayos que lo precisen.

4 REFERENCIAS
- EA-4/10Acreditacin de Laboratorios de Microbiologa
- G-ENAC-04 Rev Marzo 97: Gua para la Acreditacin de laboratorios que realizan anlisis
microbiolgicos.
- ISO/TS 11133-1:2000 (E): Gua general para el aseguramiento de la calidad para la preparacin
de medios de cultivo en el laboratorio.

5 RESPONSABILIDADES
Actividad JM PT
Realizar manejo de cultivos de referencia en el laboratorio y registro I E
Realizar control de pureza y viabilidad de cepas en el laboratorio y registro I E
Tomar acciones correctivas apropiadas ante un desvo D/E P

PT: Personal tcnico calificado
D: Decide
E: Ejecuta
P: Participa

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 3 de 10

6 RELACIONES
- IN 3.2 Evaluacin de la calidad de los medios de cultivo.
- PR 8.1 Aseguramiento de la calidad de los resultados de ensayo.
- PR 3.2 Validacin de mtodos microbiolgicos.
7 DESARROLLO
7.1 Diagrama de flujo para el manejo de los cultivos de referencia:

Recepcin
C ref
Registro
PR 5.1/3
Subcultivo nico C ref
Control de pureza y viabilidad
en la recepcin C ref
Registro
PR 5.1/5

7.2 Reconstitucin de las cepas de referencia:

7.2.1 El laboratorio de Microbiologa utiliza como cepas de referencia los cultivos provistos
por colecciones de microorganismos nacional o internacionalmente reconocidos.
Almacenamiento Cr
hastasuuso
Preparacin Ct
Control de pureza y
viabilidad peridico
Control de pureza y
viabilidad C r
Registro
PR 5.1/5
Registro
Preparacin Cr
PR 5.1/4
Subcultivo Cr
Almacenamiento
hasta su vencimiento
LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 4 de 10

7.2.2 Las C ref ingresan al laboratorio de microbiologa se registran en PR 5.1/3.
7.2.3 Las C ref se almacenan entre 0-5 C hasta su uso.
7.2.4 Las C ref se reconstituyen y se siembran utilizando el medio de cultivo, las condiciones
de incubacin y el procedimiento indicado en las instrucciones para cada tipo de
microorganismo del organismo proveedor de las cepas.
7.2.5 Luego, a las C ref, se les realiza un control de calidad de pureza y viabilidad y se registra
en el PR 5.1/5.
7.3 Obtencin de las cepas de reserva:

7.3.1 Las cepas C r se obtienen a partir de C ref
7.3.2 Los tubos o crioviales donde se almacenan las Cr, se rotulan (previamente a la
inoculacin) indicando: Identificacin de la cepa, Tipo y N de coleccin, N de repique,
fecha de realizacin del C r, fecha de vencimiento del criovial, y N de tubo o criovial.
Antes de su uso, los crioviales, se almacenan a temperatura ambiente y en oscuridad.
7.3.3 El desarrollo microbiano obtenido en el punto 7.2.4, se inocula aspticamente en el medio
lquido sobrenadante que contienen los crioviales.
7.3.4 Mezclar invirtiendo los tubos para obtener una completa distribucin de los
microorganismos y remover el lquido sobrenadante cuidadosamente con una pipeta
estril.
7.3.5 Las cepas de reserva se mantienen por congelamiento a -70 C en crioviales.
7.3.6 Para los crioviales con Cr obtenidos a partir de cada Cref se completar una planilla PR
5.1/4.
7.3.7 El tiempo lmite de conservacin de Cr depende de la cepa, ser determinado segn
informacin suministrada por el proveedor de crioviales.
7.3.8 Se realiza el control de calidad de Cr cada 6 meses y se registra en PR 5.1/5.
7.3.9 La manipulacin de la Cr para la produccin de cepas de trabajo Ct se realizar de manera
de prevenir el descongelamiento y la contaminacin del criovial, mediante el traslado en
caja termostatizada del mismo y repique en campana de flujo laminar.
7.3.10 En el caso de descongelamiento de las cepas de reserva no deben volver a congelarse.
7.3.11 El criovial vencido se elimina del cepario y se registra en PR 5.1/4.
7.4 Obtencin de cepas de trabajo:

7.4.1 Los cultivos de trabajo se obtienen a partir de la Cr sobre un medio slido o lquido
adecuado utilizando un ansa estril e incubando en condiciones adecuadas.
7.4.2 Las cepas de trabajo no deben ser subcultivadas.

7.5 Control de calidad de los cultivos de referencia: Ensayos para asegurar la pureza y
viabilidad de los cultivos.

7.5.1 Coloracin de Gram
7.5.2 Caractersticas de las colonias en medios selectivos.
7.5.3 Pruebas bioqumicas y serolgicas dependiendo del microorganismo que se trate.

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 5 de 10

Los registros correspondientes al manejo de cultivos de referencia se archivan en el laboratorio de
Microbiologa.


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 5.1/3 Registro de cepas de referencia
4 PR 5.1/4 Registro de cepas de reserva
5 PR 5.1/5 Registro control de pureza y viabilidad de las cepas
LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 6 de 10


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 7 de 10


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 8 de 10

ANEXO 3 PR 5.1/3
REGISTRO DE CEPAS DE REFERENCIA

Pg.____ de ____

Identificacin
de la cepa
Gnero y especie
del
microorganismo
TIPO y N
de coleccin
N de lote
Fecha de
incorporacin
al cepario
Control de
calidad de
la cepa de
referencia
Conforme
(SI/NO)
Fecha de
caducidad
de la cepa

Personal
responsable

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 9 de 10

ANEXO 4 PR 5.1/4
REGISTRO DE CEPAS DE RESERVA

Identificacin de la cepa:
Gnero y especie del microorganismo:
TIPO y N de coleccin:
N de Lote (C ref):
Fecha de recepcin (C ref):
Exp (C ref):

N de
criovial
Fecha de
repique
N de repique
Frasco en
uso
Fecha
de baja
Ubicacin de
almacenamiemto
Observaciones

LABORATORIO)


referencia
Revisin: 1
PAGINA : 10 de 10

ANEXO 5 PR 5.1/5

REGISTRO CONTROL DE PUREZA Y VIABILIDAD DE LAS CEPAS

Pg.____ de ____

Fecha
del
control
Identificacin
de la cepa
Gnero y
especie del
microorganismo
TIPO y
N de
coleccin:

Tipo de cepa
(C ref / C r
o Ct)
Coloracin
de Gram
Caractersticas
de las colonias
en medios
selectivos
Pruebas
bioqumicas
y
serolgicas

LABORATORIO)


Manejo de patrones y
materiales de referencia
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 9

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 2 de 9

1 OBJETIVO
El objetivo de este procedimiento es establecer la identificacin, calibracin, verificacin y
mantenimiento de los patrones y material de referencia utilizados por el laboratorio de
microbiologa.

2 ALCANCE
Se aplica a los patrones y material de referencia usado para actividades relativas al ensayo bajo el
alcance de la acreditacin.

Definiciones:

Patrn: medida materializada, instrumento de medida, material de referencia o sistema de
medida destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o varios valores
de una magnitud para que sirvan de referencia.

Patrn de referencia: patrn, en general de la mas alta calidad metrolgica disponible en un
lugar dado o en una organizacin determinada, del cual se derivan las mediciones realizadas
en dicho lugar.

Material de referencia: material o sustancia en la cual uno o mas valores de sus propiedades
son suficientemente homogneos y estn bien definidos para permitir utilizarlos para la
calibracin de un instrumento, la evaluacin de un mtodo de medicin, o la asignacin de
valores a los materiales.

Trazabilidad: propiedad del resultado de una medicin o de un patrn tal que pueda
relacionarse con referencias determinadas, generalmente a patrones nacionales o
internacionales, por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas las
incertidumbres determinadas.
4 REFERENCIAS
microbiolgicos
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 3 de 9

5 RESPONSABILIDADES
Asegurar los recursos y verificar el cumplimiento de las
actividades vinculadas con el mantenimiento y calibracin
y/o verificacin de patrones y material de referencia
D/E
Solicitar la adquisicin o baja del patrones y material de
referencia
P D/E
Confeccionar y actualiza PR 5.2/3 Ficha del patrn D/E P
Calibracin, verificacin y mantenimiento de los patrones E D/I E E
Confeccionar el Programa Anual de
Calibracin/Verificaciones y Mantenimiento de patrones y
verificar su cumplimiento. (PR 5.2/5)
P D/E P
Archivar los certificados de calibracin de los patrones de
referencia
E
Identificar los patrones (PR 5.2/3) E

6 RELACIONES
- CAPTULO 5 Trazabilidad de las mediciones Requisitos de la Norma 17025
7 DESARROLLO
7.1 Recepcin de patrones y material de referencia:
Se completa una PR 5.2/3 Ficha del Patrn luego de la recepcin de los patrones de
referencia. Se verifica que cumplan con las especificaciones solicitadas y se los calibra
antes de su uso y segn el PR 5.2/5 Programa Anual de Calibraciones/Verificaciones y
Mantenimiento.
7.2 Identificacin de los patrones
Los patrones de referencia se identifican mediante una etiqueta que indica su naturaleza
de patrn y el nmero de inventario. En el caso que no sea posible rotular el patrn, se
rotula su caja.
Los materiales de referencia se rotulan de manera de evitar su confusin con otros
materiales.

7.2.1 El n de inventario lo asigna el responsable de calidad al ingreso del patrn al laboratorio.
7.2.2 Los patrones cuentan con una identificacin que indica su estado de calibracin.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 4 de 9

7.3 Calibraciones y/o verificaciones peridicas de patrones
El Responsable de la Calidad elabora PR 5.2/4 Referencia de actividades a realizar sobre
los patrones y PR 5.2/5 Programa Anual de Calibraciones, Verificacin y Mantenimiento
y verifica su cumplimiento.

7.3.1 La frecuencia de la calibracin y/o verificacin depende de:
naturaleza del patrn
condiciones de uso
gravedad de las consecuencias de una falta de calibracin y/o verificacin
historia previa del patrn de referencia
recomendaciones del fabricante

7.3.2 En el certificado de calibracin de los termmetros o registradores continuos de
temperatura se informa la correccin y la incertidumbre. Teniendo en cuenta la tolerancia
(por ejemplo 37 C +1C) se calcula un rango de aceptacin de las temperaturas medidas.
7.4 Patrones y material de referencia daados:
El J efe del laboratorio de microbiologa es responsable de que no se realicen actividades
relativas al ensayo con patrones o materiales de referencia deteriorados o en malas
condiciones de trabajo, funcionamiento o calibracin. Se identifica adecuadamente el
patrn o material de referencia daado y gestionan la reparacin registrando esta accin
en la planilla de PR 5.2/3 Ficha de Patrn.
7.5 Baja del Patrones
Cuando se decide dar de baja los patrones se indica en la Ficha del Patrn PR 5.2/3.
7.6 ARCHIVO Y REGISTROS
El certificado de calibracin y la informacin relacionada con el n de inventario de los
patrones de referencia lo archiva el sector de calidad.

N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 5.2/3 Ficha del patrn
4 PR 5.2/4 Referencia de actividades a realizar sobre los patrones
5 PR 5.2/5 Programa anual de calibraciones, verificaciones y
mantenimiento
LABORATORIO)


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MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


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N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


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ANEXO 3 PR 5.2/3
FICHA DEL PATRON

A. Detalles del patrn:
Patrn
Marca
Modelo
N de inventario
Estado en el momento de la recepcin
Ubicacin del patrn
Caractersticas generales
Fecha de recepcin del patrn
Fecha de puesta en servicio
Fecha de baja del patrn
Responsable del patrn

B. Detalles de Calibracin y/o verificacin del patrn:

fecha Operacin Empresa/ persona
que
calibr/verific
Prxima
calibracin/
verificacin
N de
informe
Observaciones

C: Observaciones:

LABORATORIO)


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ANEXO 4 PR 5.2/4

REFERENCIA DE ACTIVIDADES A REALIZAR SOBRE LOS PATRONES

NOTA: Esta planilla es elaborada por la organizacin.

PATRONES DE REFERENCIA
Patrn Calibracin
Termmetro Anual
Pesas Anual
Registrador continuo de
temperatura
Anual

PATRONES DE TRABAJO
Patrn Calibracin
Termmetros de trabajo Calibracin anual segn
IN 5.1: Calibracin de
termmetros

LABORATORIO)


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ANEXO 5 PR 5.2/5

PROGRAMA ANUAL DE CALIBRACIONES, VERIFICACIONES Y
MANTENIMIENTO

Ao:

Patrn de
referencia
enero febrero marzo abril mayo junio julio agosto setiembreOctubre noviembrediciembre

LABORATORIO)


Calibracin de termmetros

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NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)



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1 OBJETIVO
Indicar la metodologa de calibracin y de verificacin de los termmetros usado por el
laboratorio de microbiologa.

2 ALCANCE
Se aplica a las calibraciones y verificaciones de termmetros de trabajo, de lquido en vidrio, en
un rango de 0-100 C.

Definiciones:

Calibracin : conjunto de operaciones que establecen, en condiciones especificadas, la relacin
entre los valores de una magnitud indicados por un instrumento de medida o un sistema de
medida, o los valores representados por una medida materializada o por un material de
referencia, y los valores correspondientes de esa magnitud realizados por patrones. (VIM)

Verificacin: confirmacin por examen y aporte de evidencias objetivas que los requisitos
especificados han sido satisfechos. (IRAM-IACC-ISO 8402).

Exactitud: grado de concordancia entre el resultado de una medicin y un valor verdadero del
mensurando. (VIM)

Valor verdadero (de una magnitud): valor en consistencia con una magnitud particular dada.
(VIM).

Patrn : medida materializada, instrumento de medida, material de referencia o sistema de
medida destinado a definir, realizar, conservar o reproducir una unidad o uno o varios valores de
una magnitud para que sirvan de referencia. (VIM).

Incertidumbre: parmetro, asociado al resultado de una medicin, que caracteriza la dispersin
de los valores que podran razonablemente ser atribuidos al mensurando. (VIM).

LABORATORIO)



Revisin: 1
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4 REFERENCIAS
-NIST Special Publication 819. A Procedure for the Effective Recalibration of Liquid-in Glass
Thermometers. August 1991.
-J acquelyn A. Wise. Liquid-in-Glass Thermometers, ASTM Standarization News (pag 48-50).
May 1988
-Vocabulario Internacional de Trminos Fundamentales y Generales de Metrologa (VIM).
Centro Espaol de Metrologa, Ministerio de Obras Pblicas, Transporte y Medio Ambiente.
Madrid, Espaa. 2 edicin. 1994.
-Norma IRAM-IACC-ISO E 8402:1994. Gestin de la calidad y aseguramiento de la calidad.
Vocabulario.

5 RESPONSABILIDADES
Actividad RC PT Externo
Realizacin de la calibracin y verificacin de los
termmetros
E E E
Confeccin del informe de calibracin o verificacin E P E
Archivar los certificados de calibracin de los termmetros E
RC: Responsable de calidad E: Ejecuta
PT: Personal tcnico P: Participa

6 RELACIONES
-PR 5.2 Manejo de patrones y material de referencia.
7 DESARROLLO
7.1 Calibraciones

7.1.1 Prueba de estabilidad del cero del termmetro
El responsable de la calibracin:

7.1.1.1 Deja el termmetro en "reposo" durante un tiempo mnimo de tres das a temperatura
ambiente.
7.1.1.2 Mide la temperatura de 0 C introduciendo el termmetro en un vaso con hielo de agua
destilada en equilibrio con agua destilada lquida. Registra la temperatura.
7.1.1.3 Somete al termmetro a una temperatura alta (en el entorno del mximo valor de la
temperatura de la escala, no menor 80 C, dependiendo de la escala del termmetro),
durante un tiempo mnimo de 5 minutos, en un bao apropiado.
7.1.1.4 Retira el termmetro del bao y lo deja enfriar en contacto directo con el aire,
permitindole llegar a temperatura ambiente antes de realizar una nueva observacin a la
temperatura de 0 C. Registra la temperatura.

7.1.2 Eleccin de los puntos de calibracin sobre la escala del termmetro
LABORATORIO)



Revisin: 1
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El termmetro a calibrar es comparado con un termmetro calibrado, trazable a un patrn
nacional o internacional. La comparacin se hace a una temperatura cercana a la temperatura
de trabajo del termmetro que se desea calibrar.

7.1.3 Preparacin de los termmetros antes de realizar la calibracin
El responsable de la calibracin permite al termmetro que permanezca un tiempo, por
ejemplo durante tres das, sin uso, a temperatura ambiente.

Luego del reposo, la primera observacin que realiza en el termmetro a calibrar, es la
correspondiente a la temperatura de 0C. Para ello, introduce el termmetro en un vaso con
hielo hecho con agua destilada en equilibrio con la misma en estado fundido y despus que se
estabiliza, lee sus indicaciones y las registra. Luego sumerge el termmetro conjuntamente con
un termmetro patrn en un bao termosttico de comparacin.

7.1.4 Realizacin de la calibracin

El responsable de la calibracin

7.1.4.1 Coloca los termmetros calibrados (P) e incgnita (I) en un bao de agua a la
temperatura a la que se desea calibrar.
7.1.4.2 Los mantiene el tiempo suficiente para que alcancen la temperatura.
7.1.4.3 Lee las indicaciones de los termmetros y registra los valores. La lectura de las
temperaturas del termmetro calibrado y del termmetro incgnita se hacen en el
siguiente orden, de modo que cada instrumento es ledo cuatro veces:

P I I P I P P I

7.1.4.4 Repite el proceso por lo menos una vez ms, con un intervalo de unos 30 minutos.
7.1.4.5 En el caso que un termmetro sea calibrado en ms de un punto, se hace variar la
temperatura del bao en forma creciente.
7.1.4.6 Despus de haber efectuado la comparacin de todos los puntos de calibracin del
termmetro, el responsable de la calibracin retira los termmetros incgnita y patrn
del bao de comparacin y toma la temperatura de cero, para verificar la estabilidad.

7.1.5 Clculo de la correccin del termmetro

El responsable de la calibracin:

LABORATORIO)



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7.1.5.1 Calcula, en cada punto, la diferencia de temperatura entre la indicacin del termmetro
patrn y la del termmetro incgnita. La temperatura del termmetro patrn debe estar
corregida por el valor suministrado en el informe de calibracin.
7.1.5.2 Calcula el promedio de estas diferencias y toma este valor como correccin del
termmetro.
7.1.5.3 Procede de igual forma con los restantes puntos de inters de la escala, hasta determinar
todas las correcciones.
7.1.5.4 Calcula la incertidumbre.
2
2
+
=
k
u
k U
e

Siendo :
U
e
: incertidumbre expandida
k: factor de cubrimiento. En el caso de realizar mas de 10 lecturas se usa el factor =2 (95% de
los datos dentro del nivel de probabilidad deseado). En el caso de tener menos de 10
lecturas se usa el valor t student correspondiente.
u: incertidumbre de calibracin del termmetro patrn, indicada en el certificado de
calibracin
k
2
: factor de cubrimiento indicado en el certificado de calibracin.
: desvo estndar de las diferencias entre las lecturas del termmetro patrn e incgnita (en la
temperatura que se est calculando la incertidumbre).

7.2 Verificaciones

Termmetros de lquido en vidrio
Se repiten los puntos 7.1.1.1 y 7.1.1.2.

El responsable de realizar la verificacin realiza los siguientes pasos:

7.2.1.1 Coloca el termmetro calibrado (P) e incgnita (I) en un bao de agua a la temperatura
cercana a la que necesita realizar la verificacin.
7.2.1.2 Los mantiene el tiempo suficiente para que alcancen la temperatura.
7.2.1.3 Lee las indicaciones de los termmetros y los registra.
7.2.1.4 Repite las lecturas por lo menos una vez mas, con un intervalo de unos 30 minutos.
7.2.1.5 Comprueba que el termmetro cumpla con la especificacin.
Los registros de calibracin y verificacin de los termmetros se archivan en el sector de
calidad y una copia en las carpetas de los equipos.

LABORATORIO)



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N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

1 IN5.1/1 Hoja de modificaciones
2 IN5.1/2 Lista de distribucin del procedimiento
3 IN5.1/3 Planilla de calibracin de termmetros
LABORATORIO)



Revisin: 1
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MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)



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N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)



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ANEXO 3 IN 5.1/3
PLANILLA DE CALIBRACIN DE TERMMETROS

N inventario del termmetro:
Temperatura a calibrar C

Fecha:
Patrn(C) Incgnita (C)
Inicial
Control del cero:
Final

Lectura del cero: Incgnita

Patrn(C) Incgnita(C)
De izquierda a derecha
Observador 1:
De derecha a izquierda
Observador 2
Observador 1
Observador 2
Promedio

la tabla de calibracin
Temperatura

Correccin de escala
Incertidumbre (C)

Clculo de incertidumbre:

Firma observador 1

Firma observador 2

Captulo 6: Muestreo
1
CAPTULO 6
MUESTREO

ndice
CAPTULO 6 MUESTREO............................................................................................................1
6.1 DEFINICIN.......................................................................................................................1
6.2 REQUISITOS:......................................................................................................................1
6.3 PLANES DE MUESTREO: .....................................................................................................2
6.4 ELECCIN DE LOS PLANES DE MUESTREO: .........................................................................3
ANEXO 6.A: CATEGORAS DE RIESGO.........................................................................................5
ANEXO 6.B: ESPECIFICACIONES MICROBIOLGICAS POR GRUPO DE ALIMENTO.............................7
ANEXO 6.C: EJ EMPLOS DE PLANES DE MUESTREO PARA LECHE EN POLVO..................................8

6.1 DEFINICIN
El muestreo es un procedimiento definido por el cual se toma a partir del alimento una muestra
representativa del total para su anlisis.
Frecuentemente los laboratorios de ensayo no realizan el muestreo inicial para obtener los
especmenes del ensayo. Para aquellos laboratorios que son responsables del muestreo, es muy
recomendable que el mismo est cubierto por un sistema de aseguramiento de la calidad, y mejor
an por una acreditacin.
6.2 REQUISITOS:
La norma 17025 establece los siguientes requisitos relativos al muestreo:
6.2.1 Cuando el laboratorio sea el responsable de realizar el muestreo debe tener un plan y
procedimientos.
6.2.2 El plan y los procedimientos de muestreo deben estar disponibles en el lugar donde se
realiza el muestreo
6.2.3 Los planes de muestreo deben ser razonables y estar basados en mtodos estadsticos
apropiados.
6.2.4 El laboratorio debe tener procedimientos para registrar los datos y operaciones
relacionados con el muestreo.
Estos registros deben incluir: procedimiento de muestreo usado, identificacin del
muestreador, condiciones ambientales, tcnicas estadsticas en las que se basa el
procedimiento de muestreo y identificacin del lugar del muestreo (puede ser a travs de
un diagrama).Ver PR 6.1 Muestreo
6.2.5 Identificar correctamente la muestra y acompaarla de la documentacin requerida
6.2.6 El muestreo debe ser realizado nicamente por personal debidamente entrenado y
calificado. Ver PR 1.1 Perfil de puesto, autorizacin y calificacin del personal
Captulo 6: Muestreo
2
6.2.7 Se debe vigilar y registrar en el lugar del muestreo las condiciones ambientales (Cuando
sea aplicable) Ejemplo: la contaminacin atmosfrica y la temperatura.
Tambin es recomendable registrar la hora en que se realiza el muestreo.
6.2.8 Para asegurar la validez de los resultados de ensayo, el proceso de muestreo debe tener en
cuenta los factores a ser controlados.
6.2.8.1 Una adecuada seleccin de la/s muestra/s o sea que las muestras son representativas.
Una muestra representativa se selecciona en forma aleatoria y las caractersticas son
similares al lote de donde procede.
Al obtener muestras representativas del lote o partida, el nmero de muestras recogidas
deber guardar una estrecha proporcin con la cantidad del producto existente en el
lugar de muestreo. En los casos que la muestra no pueda ser representativa se deber, de
ser posible realizar un muestreo al 100%.
6.2.8.2 Prevenir cualquier contaminacin o alteracin de sus caractersticas fisicoqumicas o
microbiolgicas de las muestras.
6.2.8.3 La correcta toma de la muestra, son aspectos de suma importancia. Se emplear el
equipamiento y envases adecuados a la naturaleza y estado fsico del producto. Se
deber observar durante la toma de muestra las mayores precauciones posibles de
asepsia.
El muestreo se efectuar en condiciones aspticas utilizando material estril.
Ejemplo: en este punto, para productos lcteos se usar la normativa correspondiente
FIL-IDF 50C:1995.
6.2.9 En caso que el cliente solicite desviaciones al procedimiento establecido, ests se deben
registrar en detalle junto con los datos del muestreo correspondiente e incluirlas en el
informe de ensayo. El laboratorio debe comunicar dichas modificaciones en el
procedimiento de muestreo al personal involucrado en la realizacin del mismo.
6.3 PLANES DE MUESTREO:
Tienen como objetivo decidir entre dos hiptesis (aceptar o rechazar el lote) en funcin de lo
observado sobre la/s muestra/s.
Es conveniente que los procedimientos de muestreo describan el plan de muestreo, o sea la forma
de seleccionar, extraer y preparar las muestras a partir de un producto alimenticio para obtener la
informacin requerida
Sistema de muestreo: se entiende por sistema de muestreo a un conjunto de instrucciones de
muestreo con reglas para su aplicacin.
Los planes de muestreo pueden ser por atributos o de variables.
6.3.1 Planes de muestreo por atributos: El procedimiento en que se estipula el tamao de la
muestra (n) y el criterio de aceptacin o rechazo (c), de forma que pueda tomarse una
decisin respecto a si se acepta o rechaza el alimento inspeccionado, basndose en los
resultados del anlisis. Se aplican a datos cualitativos y cuantitativos; se utiliza cuando no
se posee informacin previa del producto (proceso, datos de muestreo anteriores), como
suele ocurrir en la mayora de los casos. Este tipo de plan de muestreo se divide adems
en planes por atributos de dos clases y de tres clases.
Captulo 6: Muestreo
3
6.3.1.1 PLAN DE DOS CLASES: Se aplican generalmente a anlisis cualitativos. Puede
aplicarse tambin a anlisis cuantitativos si se define previamente un valor lmite que
defina si un resultado es no satisfactorio (si supera ese valor) o satisfactorio (si se
encuentra por debajo de ese valor). En ambos casos la calidad de un producto de
acuerdo a los criterios microbiolgicos puede dividirse en dos grados de calidad o
clases: aceptable o rechazable, basado en comprobar la presencia o ausencia de
determinados microorganismos, o si la tasa microbiolgica es superior o inferior a un
nivel crtico establecido.
Un plan de dos clases queda descrito por n y c.
Ejemplo: un plan de muestreo para un alimento que incluye el ensayo Deteccin de
Salmonella spp con n =5 y c =1, se interpreta como: se toman y analizan 5 unidades de
muestreo; si se detecta la presencia de Salmonella en una o ninguna unidad, el lote es
aceptado; si se detecta la presencia de Salmonella en dos o ms unidades, el lote es
rechazado.
6.3.1.2 PLAN DE TRES CLASES: Se aplican a anlisis cuantitativos.
La calidad de un producto de acuerdo a los criterios microbiolgicos puede dividirse en
tres grados de calidad o clases: aceptable, medianamente aceptable o rechazable
La clase aceptable tiene como lmites 0 y m; la clase medianamente aceptable tiene
como lmites m y M y la clase rechazable aquellos valores superiores a M.
Un plan de tres clases queda descrito por n, m, M y c.
n; el nmero de unidades de muestras a analizar.
m : valor del parmetro microbiolgico para el cual o por debajo del cual el alimento no
representa un riesgo para la salud.
c: el nmero mximo de unidades de muestra que puede contener un nmero de
microorganismos comprendidos entre m y M para que el alimento sea aceptable.
M: valor del parmetro microbiolgico por encima del cual el alimento representa un
riesgo para la salud.
Ejemplo: un plan de muestreo para un alimento que incluye el ensayo Recuento de
Escherichia coli con n =5, c =3, m=50 ufc/g, M=500 ufc/g , implica que se toman y
analizan 5 unidades de muestreo; el lote ser aceptado si todos los recuentos se
encuentran por debajo de 50 ufc/g, o si como mximo en tres unidades los recuentos se
encuentran entre 50 y 500 ufc/g; o el lote ser rechazado si al menos en una unidad se
obtiene un recuento superior a 500 ufc/g, o si en ms de 3 unidades se obtiene un
recuento superior a 50 ufc/g.
6.3.2 Planes de muestreo por variables:
Se aplican a datos cuantitativos y se puede utilizar slo si se conoce previamente que el logaritmo
de los recuentos de los microorganismos se distribuye en el lote con una distribucin normal.
Como generalmente esto no ocurre, estos planes son poco aplicables en microbiologa.
6.4 ELECCIN DE LOS PLANES DE MUESTREO:
En este punto se recomienda seguir la publicacin de la Comisin Internacional de
Especificaciones Microbiolgicas para Alimentos (ICMSF).
Segn el caso se tendr en cuenta la Norma Internacional especfica que trata sobre el producto
involucrado.
Captulo 6: Muestreo
4
Si no hay ninguna Norma Internacional especfica, se recomienda que las partes involucradas se
pongan de acuerdo en este asunto.

6.4.1 Parmetros a establecer:
6.4.1.1 Eleccin de los microorganismos que se determinarn. Ejemplo: microorganismos
indicadores, microorganismos patgenos, etc..
6.4.1.2 Mtodo de ensayo (puede ser deteccin o recuento).
6.4.1.3 Naturaleza del lote: tipo de alimento (ver Anexo 2), homogeneidad y heterogeneidad del
producto.
6.4.1.4 Lmites microbiolgicos apropiados de aceptacin o rechazo.
Criterio microbiolgico: es el valor o la gama de valores microbiolgicos, establecidos
mediante el empleo de procedimientos definidos, para determinar la aceptacin o
rechazo del alimento muestreado.
6.4.1.5 Nmero de muestras tomadas por lote (n)
6.4.1.6 Nmero de muestras de defectuosas toleradas de n (c)

6.4.2 Los planes de muestreo se determinan en funcin de los factores riesgo: naturaleza del
peligro para la salud, del producto, del proceso, condiciones de uso posterior del alimento
y tipo de consumidores (por ejemplo: un grupo de riesgo para la Escherichia coli
O157:H7 son los nios menores de cinco aos).
Se establecen categoras de riesgo ver Anexo 6A y 6C
Captulo 6: Muestreo
5
ANEXO 6.A: CATEGORAS DE RIESGO
A modo de ejemplo:
Condiciones normales en las que se supone ser manipulado y
consumido el alimento tras el muestreo
Clase de peligro
Grado de
peligrosidad
reducido
Sin cambio de
peligrosidad
Aumenta la
peligrosidad
Sin peligro directo para la
salud
Categora 1
3 clases
n:5 c:3
Categora 2
3 clases
n:5 c:2
Categora 3
3 clases
n:5 c:1
Peligro para la salud bajo,
indirecto
Categora 4
3 clases
n:5 c:3
Categora 5
3 clases
n:5 c:2
Categora 6
3 clases
n:5 c:1
Peligro para la salud
moderado, directo, difusin
limitada
Categora 7
3 clases
n:5 c:2
Categora 8
3 clases
n:5 c:1
Categora 9
3 clases
n:5 c:1
Peligro para la salud
moderado, directo, difusin
extensa
Categora 10
2 clases
n: 5 c:0
Categora 11
2 clases
n:10 c:0
Categora 12
2 clases
n: 20 c:0
Grave, directo
Categora 13
2 clases
n:15 c:0
Categora 14
2 clases
n: 30 c:0
Categora 15
2 clases
n: 60 c:0
A continuacin se detalla una clasificacin de microorganismos o grupos de microorganismos de
acuerdo al grado de peligrosidad:
Peligro severo: patgenos que presentan un peligro alto; Ejemplo: Clostridium botulinum,
Salmonella Typhi, Salmonella Paratyphi, Vibrio cholerae O1, Listeria monocytogenes para
grupos de riesgo.
Peligro moderado con diseminacin potencial: patgenos que presentan un menor peligro y la
posibilidad de producir infecciones secundarias a partir de personas infectadas; generalmente
poseen dosis infectivas bajas y pueden producir una enfermedad grave en personas susceptibles;
ejemplo: Escherichia coli patgena, otras serovariedades de Salmonella no consideradas en el
punto anterior, Listeria monocytogenes.
Peligro moderado con diseminacin limitada: patgenos que producen enfermedades sin
provocar en general infecciones secundarias; ejemplo: Bacillus cereus, Clostridium perfringens
A, Staphylococcus aureus.
Peligro bajo, indirecto: microorganismos o grupos de microorganismos que se consideran
indicadores de falta de higiene, de un subproceso u otros, pero no se puede establecer una
relacin entre su presencia y la de patgenos; ejemplo: coliformes, enterobacterias.
Sin peligro para la salud: microorganismos o grupos de microorganismos que pueden dar una
idea de las condiciones de higiene durante el proceso, o bien de la vida til de un producto, y que
no estn relacionados con un peligro para la salud; ejemplo: recuento de aerobios, Lactobacilos.
Captulo 6: Muestreo
6

Con respecto a la manipulacin del producto luego del muestreo se pueden considerar las
siguientes posibilidades:
Reduccin del peligro: el producto estar expuesto a una condicin que reducir el peligro;
ejemplo: Salmonella en carnes crudas que sern cocidas.
Sin cambio en el peligro: el producto no estar expuesto a condiciones en que los
microorganismos se puedan multiplicar; ejemplo: Escherichia coli en helados.
El peligro puede incrementarse: el producto estar expuesto a la posibilidad de un incremento
en los microorganismos; ejemplo: Listeria monocytogenes en fiambres cocidos refrigerados.

Si el producto est destinado a una poblacin susceptible se deben aplicar planes de muestreo
ms exigentes.
Captulo 6: Muestreo
7
ANEXO 6.B: ESPECIFICACIONES MICROBIOLGICAS POR GRUPO DE ALIMENTO.

Se clasifican los alimentos segn:
Los factores de riesgo que estos presentan y que dependen de sus caractersticas, tales
como: composicin, pH, acidez, actividad de agua, etc.
Grupo consumidor a quin va dirigido: adultos, nios, lactantes, personas sensibles y
otros grupos de alto riesgo.
La forma de preparacin y consumo: consumo directo, reconstituido, rehidratado,
cocinado, etc.
La forma de almacenamiento.

A modo de ejemplo o ttulo indicativo:
Categoras de alimentos de acuerdo a la clase de peligro, condiciones de manipulacin y
consumo:
Grupo Alimentos
1 Leche y productos lcteos
2 Helados y mezclas para helados
3 Productos grasos
4 Caldos, sopas, cremas y mezclas deshidratadas
5 Productor elaborados a partir de cereales
6 Azcares y miel
7 Productos de confitera
8 Productos de panadera y pastelera
9 Alimentos de uso infantil
10 Carnes y productos crnicos
11 Pescados y productos de la pesca
12 Huevos y ovoproductos
13 Salsas, aderezos, especias y condimentos
14 Frutas y verduras
15 Comidas y platos preparados
16 Bebidas
17 Estimulantes y fruitivos
18 Conservas

Captulo 6: Muestreo
8
ANEXO 6.C: EJ EMPLOS DE PLANES DE MUESTREO PARA LECHE EN POLVO
A modo de ejemplo o ttulo indicativo
(Segn reglamento tcnico para la fijacin de identidad y calidad de leche en polvo).

MICROORGANISMOS CRITERIO DE
ACEPTACION
CATEGORIA
I.C.M.S.F.
METODO DE
ENSAYO
Recuento de Microorganismos a
30 C(ufc/g )
n=5, c=2, m=30000
M=100000
5 FIL 100:B 1991
Recuento de Coliformes
a 30 C (NMP/g )
n=5, c=2, m=10
M=100
5 FIL 73B: 1998
parte 2
Recuento de Coliformes
a 45 C (NMP/g )
n=5, c=2, m<3
M=10
5 APHA 1992
Cap.24(*)
Recuento de Staphylococcus coag.
pos.(ufc/g)
n=5, c=1, m=10
M=100
8 FIL 60B: 1990
Deteccin de Salmonella spp/25g n=10, c=0, m=0 11 IDF 93: 2001 (E)

(*) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods.

LABORATORIO)


MUESTREO
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NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


MUESTREO
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1 OBJ ETIVO
Definir los procedimientos de muestreo de las muestras que emplea el laboratorio de
microbiologa (Nombre del Laboratorio), cuando es responsable de realizarlo.
2 ALCANCE
Se aplica a todos los procedimientos de muestreo realizado por el laboratorio de microbiologa.
Lote: cantidad de un alimento que es producido en condiciones uniformes. Ejemplo: produccin
en un turno de un determinado da o produccin delimitada por dos procedimientos de limpieza y
desinfeccin completos.
Muestra: grupo de unidades tomadas de una poblacin para estimar uno o varios parmetros. Para
que la muestra sea representativa las unidades deben ser seleccionadas en forma aleatoria de
manera que reflejen, tanto como sea posible, el lote del cual proceden.
Unidad de muestreo: porcin individual que se extrae de una muestra. Ejemplo: un envase de un
alimento.
Unidad analtica: parte de la muestra que es utilizada en el laboratorio para el anlisis. Ejemplo:
25 gramos para la investigacin de Salmonella spp.
4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad del (Nombre del Laboratorio). Captulo: Muestreo.
-Norma ISO 17025:1999 tem 5.7. Muestreo.
-ICMSF. Microorganisms in Foods, Volume 2. Sampling for Microbiological Analysis:
Principles and Specific Applications. 2
nd
Ed., 1986.
5 RESPONSABILIDADES
Planificacin del muestreo (PR 6.1/3) E P D/E I
Definicin del procedimiento de muestreo (PR 6.1/3) E P D/E I
Supervisin y cuidado del equipamiento de
muestreo; equipos de medicin en el lugar
D/P E E
Capacitacin del personal del laboratorio para realizar el
muestreo
D/E E/P
Puesta a disposicin de recipientes y embalajes P D/P E E
Realizacin del muestreo de las muestras I D E
Autorizacin del personal para realizar el muestreo D P E
Confeccin y elaboracin del plano o diagrama en dnde se
realiza el muestreo.
P E
Elaboracin del informe de muestreo(PR 6.1/4) I I D/P E
PT: Personal tcnico
Externos: Empresa contratada.
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MUESTREO
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6 RELACIONES
- Captulo 6 Muestreo Requisitos de la Norma 17025

7 DESARROLLO
7.1 Planificacin y confeccin del plan de muestreo:
Los muestreos se planifican y se confecciona un plan de muestreo. Adems se toman
disposiciones sobre la forma de realizar el muestreo y las indicaciones de documentacin, como
el lugar de muestreo, las condiciones ambientales, etc.

7.1.1 Lugar de muestreo:
J unto con la documentacin relativa al ensayo, se adjunta el plano o diagrama dnde se realiza el
muestreo. Se especifican los lugares dnde se tomaron las muestras.
(Adjuntar al PR 6.1/3)

Un plan de muestreo comprende: la extraccin de una muestra, el anlisis de una determinada
cantidad de unidades de muestreo y la toma de decisin al comparar los resultados obtenidos
respecto a un criterio establecido.
Ese criterio puede ser obligatorio de cumplir (est definido en leyes, cdigos o reglamentos),
pueden ser especificaciones establecidas por una empresa o una agencia o guas determinadas por
una empresa o una agencia regulatoria para monitorear un proceso.

Las disposiciones de muestreo son definidas por personal competente del laboratorio de
microbiologa. Ver PR 1.1 Perfil de puesto, autorizacin y calificacin del personal.

7.2 Muestreo:
El plan y los procedimientos de muestreo estarn disponibles en el lugar del muestreo ver PR
6.1/3.
La toma de muestra la realiza personal competente y autorizado del laboratorio de microbiologa.
PR 1.1 Perfil de puesto, autorizacin y calificacin del personal.
El personal responsable de la toma de muestra se registrar en PR 6.1/4

7.2.1 Elementos necesarios para realizar el muestreo:
7.2.1.1 Instrumentos o utensilios de muestreo: se pueden utilizar cucharas, caladores, cuchillos,
bistures, pipetas, marcos, tijeras de acero inoxidable u otro material resistente que no
provoque cambio alguno en la muestra y afecte los resultados de los anlisis. Sus
superficies deben ser lisas, libres de asperezas y con esquinas redondeadas para su fcil
limpieza. Si el utensilio presenta soldaduras, stas deben soportar la temperatura de
esterilizacin. Tambin se pueden realizar muestreos mediante hisopos o esponjas.
En todos los casos los elementos de muestreo deben estar limpios, secos y estriles.

7.2.1.2 Recipientes para colocar la/s muestra/s: deben ser de un material no txico,
impermeable, con cierre hermtico, tales como frascos de vidrios o plstico de boca
ancha, o bolsas de plstico descartables. Los recipientes deben estar limpios, secos y
LABORATORIO)


MUESTREO
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estriles. La capacidad debe ser la adecuada para tomar la unidad de muestra deseada.
En el caso de recipientes reutilizables, la calidad de los mismos debe ser la adecuada
como para tolerar esterilizaciones repetidas.
7.2.2 Esterilizacin de los elementos de muestreo:
Los mtodos de esterilizacin a usar son:

7.2.2.1 Para materiales acondicionados previo al muestreo que no soportan altas temperaturas:
Equipo: autoclave, Tiempo y temperatura de esterilizacin: 121 C durante 15 minutos.
7.2.2.2 Para materiales de vidrio o metal acondicionados previo al muestreo:
Equipo: estufa , Tiempo y temperatura de esterilizacin: 160-180 C durante 2 horas
7.2.2.3 Para materiales esterilizados en el lugar de realizacin del muestreo:
Inmersin del utensilio en alcohol etlico 96 y posterior flameado este procedimiento se
repite dos veces ms asegurndose que se haya apagado la llama antes de sumergirlo
nuevamente en alcohol.

7.2.3 Obtencin de la muestra:
El personal interviniente en la ejecucin del muestreo debe obtener una muestra
representativa del alimento y el traslado de la muestra debe ser de manera tal que la
misma llegue al laboratorio en las mismas condiciones que tena en el momento la toma
de muestra.
Se emplea un muestreo mediante nmeros aleatorios de modo que todas las unidades
del lote tengan igual posibilidad de formar parte de la muestra.

7.2.4 Recoleccin de las muestras
Se extrae un nmero de unidades de muestreo especificado en el plan de muestreo.
(PR 6.1/3).
Para la recoleccin de muestras se utilizan instrumentos estriles y adecuados al estado
de las mismas (sacabocados, palas o paletas, pipetas u otros) y recipientes estriles
apropiados para el traslado de modo que no haya prdida de contenido.
En caso de un alimento a granel, se extraen porciones de diferentes puntos del
contenedor (si no se puede homogeneizar previamente), a menos que se conozca por
experiencia previa la homogeneidad del alimento o que se haya determinado un punto
especfico que resulte representativo.
Si se toma una muestra de un conducto de salida, se debe evitar tomar de las primeras
fracciones con el fin de limpiar la salida del flujo.
En caso que el operador no pueda tomar una muestra en forma estril por la naturaleza
de la misma, deber informarlo al laboratorio y extremar los cuidados durante el
transporte a fin de evitar al mximo la proliferacin microbiana.
Si corresponde se registra la temperatura del alimento del que se obtiene la muestra y la
temperatura ambiente donde se almacena (PR 6.1/4).

7.2.5 Tamao de la unidad de muestreo:
La unidad de muestreo debe tener un tamao mnimo de alrededor de 200 gramos
dependiendo de los ensayos a realizar y tambin debe ser suficiente para repetir el
anlisis en caso de ser necesario. Las condiciones de mantenimiento de la reserva debe
ser tal que no haya variacin significativa en la carga microbiana de la muestra, en caso
de volver a realizar el ensayo.

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MUESTREO
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7.2.6 Identificacin de las unidades de muestreo:
Es importante registrar toda la informacin necesaria para su correcta identificacin.
Ejemplo: nmero de unidad de muestreo, contenedor, identificar muestra original, nmero
de acta, firma y aclaracin del responsable del muestreo.
7.3 Informe de muestreo:
Es necesario elaborar un informe detallado del muestreo, firmado por la persona
responsable de la obtencin de las muestras. (PR 6.1/4)
Los registros correspondientes al muestreo se archivan en el laboratorio de Microbiologa


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

1 PR6.1/1 Hoja de modificaciones
2 PR6.1/2 Lista de distribucin del procedimiento
3 PR6.1/3 Registro general del plan de muestreo laboratorio de
microbiologa
4 PR6.1/4 Informe de muestreo
LABORATORIO)


MUESTREO
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MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


MUESTREO
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N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


MUESTREO
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ANEXO 3 PR 6.1/3
REGISTRO GENERAL DEL PLAN DE MUESTREO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Pg.____ de ____
1. Nmero de acta (nmero de identificacin del muestreo):

2. Fecha de ejecucin del muestreo:

3. Personal interviniente en la elaboracin del plan de muestreo:

4. Sector, zona o rea donde se realiza el muestreo:

5. Plan de muestreo:

5.1 Tipo de alimento:

5.2 Metodologa de toma de muestra (referencia a la tcnica o descripcin):

5.3 Metodologa empleada de ensayo (aqu se detallan los microorganismos que se
determinan y la referencia/s de la tcnica/s de ensayo):

5.4 Criterio microbiolgico usado:

5.5 Tcnica estadstica en la que se basa:

a) Nmero de muestras tomadas por lote (n):
b) Nmero de muestras de defectuosas toleradas de n (c):
c) m:
d) M:

Observaciones:

Nombre y Apellido del responsable:
Firma del responsable:

Nota: se adjunta a este registro el plano o diagrama dnde se realiza el muestreo.
LABORATORIO)


MUESTREO
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ANEXO 4 PR 6.1/4

Pg.____ de ____

INFORME DE MUESTREO

Nmero de acta (nmero de identificacin del muestreo):

Fecha de ejecucin del muestreo:

Nombre y direccin oficial de la persona que obtuvo la muestra:

Nombre y direccin de los representantes de las partes interesadas:

Sector, zona o rea donde se realiza el muestreo:

Razn o razones del muestreo:

Nombre y descripcin del alimento (asignar un nmero de identificacin a cada unidad de
muestreo):

N Lote del alimento muestreado:

Nombre del fabricante, vendedor o comprador, segn proceda:

1. TOMA DE MUESTRA:

1.1 Descripcin de la forma de seleccin de la muestra:
1.2 Uso de conservantes (cuando corresponda especificar el tipo de conservante Ejemplo:
azidiol):
1.3 Condiciones ambientales durante la toma de muestra (completar cuando corresponda):
1.3.1 Temperatura ambiental:
1.3.2 Temperatura de la muestra:
1.3.3 Monitoreo ambiental:
Metodologa empleada (referencia a la tcnica):
Resultado (unidades):

1.4 Hora de realizacin del muestreo:

1.5 Instrumentos empleados en la toma de muestra:

Nombre y Apellido del Personal que realiz la toma de muestra:
Firma del Personal que realiz la toma de muestra:

NOTA: lo que figura entre parntesis se da a ttulo indicativo, no ir impreso en el informe.

Captulo 7: Manipulacin de los tems de ensayo
1
CAPTULO 7
MANIPULACIN DE LOS TEMS DE ENSAYO

ndice
CAPTULO 7 MANIPULACIN DE LOS TEMS DE ENSAYO................................................1
7.1 GENERALIDADES .........................................................................................................................................1
7.2 TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS:.................................................................................................................1
7.3 RECEPCIN DE LAS MUESTRAS:....................................................................................................................2
7.4 MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS:.............................................................................................................3
7.5 ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS:.......................................................................................................3
7.6 DISPOSICIN FINAL DE LAS MUESTRAS: .......................................................................................................4

7.1 GENERALIDADES
7.1.1 El laboratorio debe tener procedimientos para el transporte, la recepcin, la manipulacin,
la proteccin, el almacenamiento, la conservacin o la disposicin final de las muestras a
ensayar.
7.1.2 El laboratorio debe tener un sistema para la identificacin de las muestras a ensayar. La
identificacin debe ser conservada a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio. El
sistema debe ser diseado y operado de modo tal que asegure que las muestras no puedan
ser confundidas fsicamente o cuando se haga referencia a ellas en registros u otros
documentos.
7.1.3 El laboratorio debe tener procedimientos e instalaciones apropiadas para evitar el
deterioro, la prdida o dao de las muestras durante manipulacin, preparacin y
almacenamiento.
7.2 TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS:
Se debe evitar durante el transporte al laboratorio cualquier alteracin de las muestras.
Se documentar quin es el responsable del transporte y la conservacin de las muestras entre el
muestreo y su entrega al laboratorio de ensayo.
El tipo de acondicionamiento depender del estado fsico del producto (lquido, slido o
semislido). Deber tomarse en cuenta la naturaleza del producto, y su presentacin.
El transporte debe realizarse en recipientes adecuados donde se respeten las temperaturas de
conservacin del alimento.
2
Dependiendo del tipo de alimento que se trate, se prestar particular atencin en mantener las
temperaturas de almacenamiento durante el transporte en los rangos aceptables segn figura en el
cuadro a continuacin*:
Tipos de Productos Temperaturas de almacenamiento
durante el transporte( C)
Estables temperatura ambiente
Fresco o refrigerados Entre 0 a +4
Congelados debajo de -18
Pasteurizados y productos similares Entre 0 a +4
Unidades estables daadas Entre 0 a +4
*Referencia: Norma ISO 7218:1996 (E)
Las muestras deben ser enviadas con la mayor brevedad posible al laboratorio.
Se debe proteger las muestras de las condiciones ambientales que pueden producir algn cambio
en sus caractersticas. Dichas condiciones deben ser controladas, manteniendo un registro de las
mismas.
7.3 RECEPCIN DE LAS MUESTRAS:
Las condiciones de llegada al laboratorio de las muestras deben ser verificadas por el personal
perteneciente al mismo.
Es importante tener en cuenta que la flora microbiana que poseen las muestras a ensayar puede
ser sensible a factores tales como temperatura o duracin del almacenamiento y transporte, por lo
que es importante verificar y registrar el estado de la muestra cuando se recibe en el laboratorio.
Se deben registrar los apartamientos de las condiciones especificadas para las muestras en el
momento de su recepcin en el laboratorio.
Si la muestra es insuficiente o se encuentra en mal estado por deterioro fsico, temperatura
inapropiada, envase roto o etiquetado defectuoso, el laboratorio debe consultar con el cliente
antes de decidir si analiza o rechaza la muestra. En cualquier caso, debe indicar su estado en el
informe del ensayo.
Ejemplo: muestras de leche cruda que llegan al laboratorio a una temperatura de 20 C, (el
mximo dado por la especificacin adoptado por el laboratorio es 5 C).
Una vez recibidas las muestras se analizarn lo antes posible.
7.3.1 El laboratorio debe registrar toda la informacin relevante y, en particular, lo siguiente:
7.3.1.1 Una identificacin nica y sin ambigedades que pueda utilizarse para el seguimiento de
las muestras desde su llegada al laboratorio hasta su disposicin final.
7.3.1.2 Fecha y, cuando sea oportuno, hora de la llegada de la muestra.
7.3.1.3 Nombre del solicitante o cliente y domicilio.
7.3.1.4 Descripcin del producto alimenticio.
7.3.1.5 Lista de ensayos requeridos.
3
7.3.1.6 Estado de la muestra en el momento de su entrega.
7.3.1.7 Registro de Temperatura. (Cuando sea necesario)
7.3.1.8 Caractersticas de la operacin de muestreo (fecha de muestreo, condiciones de
muestreo, etc.).
7.4 MANIPULACIN DE LAS MUESTRAS:
El envase y etiquetado de las muestras puede estar contaminado y las muestras deben
manipularse y almacenarse con precaucin para evitar que se propague la contaminacin.
La preparacin de las muestras y porciones de ensayo realizado por el laboratorio
inmediatamente antes del ensayo debe efectuarse conforme a procedimientos documentados
basados en normas nacionales o internacionales, si es que existen, o a mtodos internos
validados. Los procedimientos de preparacin de las muestras y porciones de ensayo deben
disearse teniendo en cuenta las directrices generales contenidas en los documentos en ISO 6887
e ISO 7218.
7.5 ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS:
Las muestras que se encuentren a la espera de ser analizadas deben almacenarse en condiciones
adecuadas para reducir al mnimo cualquier modificacin en la poblacin microbiana presente. El
laboratorio debe definir y registrar dichas condiciones de conservacin.

Los tiempos lmites de almacenamiento dependern del tipo de producto*:

Tipos de Productos Tiempos lmites de almacenamiento (horas)
Estables Tan rpido como sea posible y
antes de su fecha de vencimiento
Fresco o refrigerados dentro de 24 horas de la recepcin la muestra (1)
Pasteurizados y productos similares Tan rpido como sea posible y
antes de su fecha de vencimiento
Unidades estables daadas Tan rpido como sea posible y dentro de 48 horas
*Referencia: Norma ISO 7218:1996 (E)

(1) Si no se puede procesar en ese tiempo, las muestras se pueden congelar por debajo -18 C.
Esto debe ser mencionado en el informe de ensayo.
Precaucin: En algunos productos el congelamiento produce un cambio de la composicin de la
flora.
En algunos casos existe la posibilidad de agregar un conservante permitido para prolongar el
tiempo permitido de almacenamiento y su procesamiento posterior.
4
7.6 DISPOSICIN FINAL DE LAS MUESTRAS:
Debe existir un procedimiento documentado para la conservacin y eliminacin de muestras.

Las muestras deben conservarse hasta que se hayan obtenido los resultados del ensayo, o ms
tiempo segn sea necesario. Cuando se sepa que algunas porciones de muestras de ensayo del
laboratorio estn altamente contaminadas, deben descontaminarse antes de su eliminacin.

La correcta eliminacin de materiales contaminados puede no afectar directamente a la calidad de
los anlisis de las muestras, aunque los procedimientos deben disearse para reducir al mnimo la
posibilidad de contaminacin del lugar donde se realiza el ensayo o los materiales utilizados en el
mismo. No obstante, es un aspecto de la correcta gestin de un laboratorio y debe respetarse la
legislacin nacional e internacionales sobre medio ambiente, salud y seguridad (vase tambin
ISO 7218).

LABORATORIO)


Manipulacin de las muestras
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PAGINA : 1 de 13

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 2 de 13

1 OBJETIVO
Indicar y describir la metodologa que el laboratorio emplear en el transporte, la recepcin, la
manipulacin, el almacenamiento y la disposicin final de las muestras de alimentos a ensayar.
2 ALCANCE
Se aplica a todas las muestras de alimentos a analizar por el laboratorio de microbiologa.

N PE: nmero de pedido de ensayo.
N muestra: nmero de muestra.

Definiciones:

PE: cuando un cliente externo solicita ensayos de muestras que ingresan al laboratorio se abre un
pedido de ensayo (PE).
N PE: numeracin nica y correlativa de las muestras recepcionadas, asignada por el
laboratorio.
N muestra: numeracin correlativa de cada muestra asociada a cada N PE.
4 REFERENCIAS
-Manual de la Calidad. Captulo Manipulacin de las muestras.
-Norma ISO 17025:1999. Capitulo 5: Requisitos tcnicos. Punto 5.8.: Manipulacin de los tems
de ensayo.
-Norma ISO 7218:1996 (E): Microbiology of food and animal feeding stuffs- general rules for
LABORATORIO)


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5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL S RC JM PT AL Externos
Realizar la recepcin, la manipulacin, el
almacenamiento de las muestras de alimentos
a ensayar.
P P D/P E
Identificacin de PE E I D/P
Identificacin de las muestras E I D/P
Autoriza y designa al personal tcnico del
laboratorio encargado de realizar cada
actividad.(PR 1.1/3 Planilla de personal
autorizado Laboratorio de microbiologa)
D/E P P I
Verificar cumplimiento de las tareas de
transporte, recepcin, manipulacin, el
almacenamiento y disposicin final de las
muestras de alimentos a ensayar en el
laboratorio de microbiologa, por parte del
personal externo, tcnico y auxiliar de
laboratorio.
I P E I I
Realizar el registro del transporte, la
recepcin, la manipulacin, el
almacenamiento y la disposicin final de las
muestras de alimentos a ensayar.
I I I E E
Rechazar o realizar el ensayo de muestras en
condiciones inadecuadas de ingreso al
laboratorio previa consulta con el cliente.
D P E P
Realizar la disposicin final de las muestras
de alimentos a ensayar.
I I E
Realizar el transporte de las muestras de
alimentos a ensayar.
P P D/P I E

S: secretaria D: Decide
RC: Responsable de calidad P: Participa
J M: J efe del laboratorio de microbiologa. I: Recibe informacin
PT: Personal tcnico
AL: auxiliar de laboratorio

6 RELACIONES
- Captulo 7 Manipulacin de los tems de ensayo Requisitos de la Norma 17025

LABORATORIO)


Revisin: 1
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7 DESARROLLO
A continuacin se describen el recorrido (con sus registros correspondientes) que seguir la
muestra desde el transporte al laboratorio hasta su eliminacin:

7.1 Transporte de las muestras de alimentos a ensayar:
El personal responsable deber registrar las condiciones de transporte de las muestras que
ingresarn al laboratorio en PR 7.1/3 Registro general de los procedimientos de
acondicionamiento y transporte de las muestras laboratorio de microbiologa.

7.2 Recepcin de las muestras de alimentos a ensayar:
Las muestras se identifican durante la apertura de PE segn el PR de gestin N Se le asigna a
cada PE un nmero compuesto por el nmero de ao en curso y un nmero correlativo. Ejemplo:
2005/0001: primera tarea del ao 2005.
Esto se anota en el libro de recepcin de muestras (paginado) con tinta indeleble, con los datos
del cliente, los parmetros de estudio, la fecha de recepcin, la descripcin de la muestra incluye
informacin acerca de tipo de alimento, lote, identificacin dada por el cliente acerca de la
muestra.
Las muestras ingresan al laboratorio ya codificadas.
Si las muestras no son adecuadas para su procesamiento (es insuficiente la cantidad de alimento,
el envase se encuentra roto o su etiquetado defectuoso o abierto o agujereado, la muestra se
encuentra en mal estado por deterioro fsico o sufri temperatura inapropiada durante el trasporte,
la temperatura de recepcin inadecuada, etc.) el laboratorio consultar con el cliente antes de
decidir si analiza o rechaza la muestra. En caso de ser analizadas las muestras, su estado se
indicar en el informe del ensayo.
El personal responsable de la recepcin de las muestras deber completar los registros
correspondientes PR 7.1/4 Planilla tcnica de apertura de PE laboratorio de microbiologa y PR
7.1/5 Registro de ingreso, informe y disposicin de las muestras laboratorio de microbiologa.
En el caso que se hayan recibido muestras precintadas o con faja de seguridad, el analista verifica
que el envase no haya sido abierto, antes de tomar la muestra para su anlisis. Si la faja ha sido
abierta se informar al responsable asignado.

7.3 Manipulacin de las muestras de alimentos a ensayar:
El personal tcnico debe etiquetar y almacenar cada muestra segn PR 7.1/6 Etiquetado o Rtulo
con la identificacin individual de cada muestra que ingresa al laboratorio de microbiologa y
llevar los registros del desarrollo del trabajo PR 3.3/3 Registro interno de los resultados de
ensayo.
La persona que rotula la muestra le coloca una identificacin sobre el envase primario,
entendindose por envase primario aquel que est en contacto con el producto a analizar.

7.4 Almacenamiento de las muestras de alimentos a analizar y analizadas:
Inmediatamente despus de la recepcin se proceder a almacenarlas en el sitio previamente
establecido segn el tipo de producto del que se trate.
El laboratorio elabora, teniendo en cuenta la experiencia y la bibliografa correspondiente, la
tabla indicada en PR 7.1/7 Condiciones y tiempo de almacenamiento de las muestras para
realizar ensayos microbiolgicos.
LABORATORIO)


Revisin: 1
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En dicha tabla figuran los tiempos mximos de almacenamiento y las temperaturas a las que se
deben conservarse las muestras. Las muestras se almacenan en las condiciones ambientales
indicadas all.
Tambin sobre ella se basa el personal tcnico para completar el vencimiento de la muestra en la
etiqueta PR 7.1/6.
Luego de cumplido el plazo establecido de almacenamiento se proceder a la disposicin final de
la muestra.

7.5 Disposicin final de las muestras de alimentos analizadas:
El personal auxiliar de laboratorio descarta las muestras de las heladeras cuyo plazo de
almacenamiento se haya cumplido.
Las muestras, antes de su eliminacin, se descontaminarn en autoclave.

Los registros correspondientes al transporte, la recepcin, la manipulacin, el almacenamiento y
la disposicin final de las muestras se archivan en el laboratorio de Microbiologa


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 7.1/3 Registro general de los procedimientos de acondicionamiento
y transporte de las muestras laboratorio de microbiologa
4 PR 7.1/4 Planilla tcnica de apertura de PE Laboratorio de
Microbiologa
5 PR 7.1/5 Registro de ingreso, informe y disposicin de las muestras
6 PR 7.1/6 Etiquetado o rtulo con la identificacin individual de cada
muestra que ingresa al laboratorio de microbiologa.
7 PR 7.1/7 Condiciones y tiempo de almacenamiento de las muestras
para realizar ensayos microbiolgicos
8 PR 7.1/8 Diagrama de flujo de manipulacin de las muestras

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 6 de 13


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 7 de 13


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 8 de 13

ANEXO 3 PR 7.1/3

REGISTRO GENERAL DE LOS PROCEDIMIENTOS DE ACONDICIONAMIENTO Y
TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
Pg.____ de ____

REGISTRO DE TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ALIMENTOS
PARA REALIZACIN DE ENSAYOS MICROBIOLGICOS
Nmero de acta (nmero de identificacin del muestreo):

Nombre , descripcin y N Lote /s del alimento muestreado:

Fecha de ejecucin del muestreo:

Nombre y Apellido del Personal responsable que realizar el transporte:

Nombre, direccin y Telfono del fabricante, vendedor o comprador,
segn proceda el alimento:

Sector, zona o rea donde se realiz el muestreo:

Registro de Temperatura durante el transporte de las muestras ( C):

Tipo de embalaje de las muestras transportadas:

Tipo e identificacin del vehculo de transporte:

Nombre, empresa, direccin y telfono del Cliente o solicitante del
ensayo:

Ensayos sugeridos a realizar:

Nombre y direccin del laboratorio que analizar las muestras:

Observaciones:
(puede incluir condiciones ambientales durante el transporte)

Firma del Personal que realiz el transporte:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 9 de 13

ANEXO 4 PR 7.1/4

PLANILLA TCNICA DE APERTURA DE PE

1. N PE:

2. Cliente o solicitante del ensayo:
2.1 Nombre o contacto:
2.2 Empresa:

3. Analista responsable de la recepcin de muestra:

4. Ensayos requeridos por el cliente:

5. Ensayos ofrecidos por el laboratorio:

6. Aceptacin de la oferta del laboratorio (tache lo que no corresponda): SI NO

7. Fecha de recepcin de la/s muestra/s:

8. Descripcin de la/s muestra/s recibida /s:

9. Transporte conforme (tache lo que no corresponda): SI NO

Observaciones:

10. Condiciones de la/s muestra/s en el momento de su recepcin en el laboratorio de microbiologa:
10.1 Registro de Temperatura en la recepcin de la muestra ( C):
10.2 Condiciones de esterilidad de la muestra en la recepcin:
10.3 Condiciones generales de la/s muestra/s en la recepcin:

Condiciones de conservacin Muestra Fecha de
toma de
muestra
Refrigerada Temperatura
ambiente
Congelada
Presencia de
conservante
(SI/NO)
Muestra
Apta para
ensayar
(SI/NO)

11. Fecha prevista de entrega del informe de ensayo:
12. Firma del Personal responsable de la recepcin de las muestras:
13. Aceptacin de la oferta por parte del cliente:
14. Firma del cliente:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 10 de 13

ANEXO 5 PR 7.1/5

REGISTRO DE INGRESO, INFORME Y DISPOSICION DE LAS MUESTRAS
Pg.____ de ____

N PE N
muestra
Fecha
Ingreso
al
laboratorio
Descripcin
de las
muestras
Anlisis
solicitados
Ubicacin

Fecha de
realizacin
del
Informe
Firma del
Personal
de realizar el
informe
Fecha de
eliminacin
de la muestra
Firma del
Personal
de
eliminar la
muestra

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 11 de 13

ANEXO 6 PR 7.1/6

Etiquetado o Rtulo con la identificacin individual de cada muestra que ingresa al laboratorio
de microbiologa:

PR 7.1/4

N PE:
N muestra:
Fecha de ingreso al laboratorio:
Descripcin de la muestra:
Fecha vencimiento de la muestra:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 12 de 13

ANEXO 7 PR 7.1/7

CONDICIONES Y TIEMPO DE ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS
PARA REALIZAR ENSAYOS MICROBIOLGICOS

Tipo de Producto
alimenticio
Tiempo de
almacenamiento
(das)
Temperatura de
almacenamiento
(C)

LABORATORIO)


Revisin: 1
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ANEXO 8 PR 7.1/8

Diagrama de flujo de manipulacin de las muestras

Muestreo
Transporte

Conformidad de las
condiciones de recepcin
de las muestras
Recepcin e identificacin de las
muestras
Apertura de PE
Si
No
Acuerdo de
procesamiento
de las muestras
Comunicarse
con el cliente
Si
Almacenamiento
No
Rechazo de la muestra
Realizacin del
ensayo
Emisin del
informe de ensayo
Disposicin final de las
muestras
Captulo 8: Aseguramiento de la calidad de los resultados 1
CAPTULO 8
ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS

ndice
CAPTULO 8 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS.....................................................1
8.1 GENERALIDADES .........................................................................................................................................1
8.2 CONTROLES DE CALIDAD.............................................................................................................................1
8.3 EVALUACIN DE LAS TENDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS...........................................................3
APNDICE 8.A. EJ EMPLO DE GRFICO DE CONTROL ...................................................................................................4

8.1 GENERALIDADES
El aseguramiento de la calidad es un programa de actividades llevadas a cabo por el laboratorio
con la finalidad de verificar que los resultados obtenidos tienen una precisin y exactitud
aceptable y mejorar en conjunto el funcionamiento del mismo.
Dicho programa debe abarcar todos los ensayos incluidos en el alcance de acreditacin del
laboratorio.
La frecuencia de realizacin de cada uno de estos Programas queda establecida por el laboratorio.
8.1.1 El laboratorio debe tener procedimientos de control de calidad para monitorear la validez
de los ensayos llevados a cabo.
8.2 CONTROLES DE CALIDAD
Son las actividades que se deben realizar para todos los ensayos acreditados y comprenden:
8.2.1 Control de calidad interno: El control de calidad interno consiste en todos los
procedimientos realizados por un laboratorio para la evaluacin continua de su trabajo.
El principal objetivo es asegurar la coherencia de los resultados obtenidos diariamente y el
cumplimiento de los criterios establecidos.
8.2.1.1 Uso de cepas de referencia durante la realizacin del ensayo (control positivo, negativo
o muestras inoculadas para control) o como control de productividad y selectividad de
los medios de cultivos usados.
8.2.1.2 Participacin en Ensayos Intralaboratorio: para ensayos cualitativos y cuantitativos.

A) En los ensayos cualitativos se verifica que los resultados entre analistas sean concordantes y
conformes.
B) Para ensayos cuantitativos:
El laboratorio, en forma peridica, planifica, realiza y verifica que est bajo control:
El anlisis por duplicado de una misma muestra por los distintos analistas que realizan el
ensayo (determino la repetibilidad de cada analista y la repetibilidad del laboratorio).
Ejemplo:
El analista A ensay, con la metodologa Z, una muestra de un alimento por duplicado.
Los resultados obtenidos fueron: x
1=
2.0x10
3
ufc/g y x
2=
1.5x10
3
ufc/g.
Los resultados se pasan a logaritmo en base 10:
log
10
x
1
=3.30 log ufc/g y log
10
x
2=
3.18 log ufc/g
El valor de repetibilidad (r) obtenido por el analista A ser: r = log
10
x
1-
log
10
x
2

r =0.12 log ufc/g
El valor lmite mximo de repetibilidad para la metodologa Z es r =0.18 log ufc/g
Lo cual quiere decir la repetibilidad del analista A es conforme.
Los recuentos cruzados entre analistas o con mtodos diferentes, etc. (determino la
reproducibilidad).
Ejemplo:
El analista B y C ensayaron, con la metodologa Y, una muestra de un alimento.
Los resultados obtenidos fueron: x
B=
2.4x10
2
NMP/g y x
C=
1.1x10
3
NMP/g.
Los resultados se pasan a logaritmo en base 10:
log
10
x
B
=2.38 log NMP/g y log
10
x
C=
3.04 log NMP/g
El valor de reproducibilidad (R) obtenido entre el analista B y C ser:
R = log
10
x
B-
log
10
x
C

R =0.66 log NMP/g
El valor lmite mximo de reproducibilidad para la metodologa Y es R =0.50 log NMP/g
En este caso el responsable asignado deber abrir una no conformidad y se determinarn sus
correspondientes acciones correctivas.
Otro modo de realizar controles de calidad en microbiologa se describen en ISO/FDIS
14461-1:2005(E) IDF 169-1:2005(E) Milk and milk products Quality control in
microbiological laboratories Part 1:Analyst performance assessment for colony counts.
8.2.2 Control de calidad externo:
Comprende la participacin en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio (Proficiency Testing)
Los programas de ensayos de aptitud organizados externamente por un proveedor de ensayos
interlaboratorio constituyen un medio independiente por el cual un laboratorio se puede evaluar
objetivamente y demostrar la veracidad y precisin de los resultados obtenidos por sus mtodos
analticos.
La participacin en estos ensayos permite al laboratorio comparar sus resultados frente a los de
otros laboratorios. Es importante evaluar los resultados obtenidos en los ensayos de aptitud como
una manera de comprobar la calidad de los ensayos, adoptando las medidas oportunas, si son
necesarias.
La organizacin proveedora de Ensayos de Aptitud Interlaboratorio enva muestras cuyo
contenido en tipo y nmero de microorganismos es desconocido por el participante.
El laboratorio participante las analiza y remite el/los resultado/s obtenido/s al organizador,
posteriormente recibe un informe con su/s anlisis y evaluacin/es.

Los laboratorios no slo deben usar la valoracin de calidad externa para evaluar el bias o
sesgo del laboratorio sino tambin para verificar la validez del sistema de calidad entero.
J usteza o veracidad (trueness): grado de concordancia entre el promedio de una gran serie de
mediciones y el mesurando (ISO 5725).
Sesgo (bias): resultado de la medicin menos el valor de referencia o valor asignado.
Los resultados de los laboratorios participantes de una ronda interlaboratorio se clasificarn
dependiendo del mtodo estadstico usado para evaluar los resultados en: satisfactorios e
insatisfactorios (Ejemplo: ensayos cualitativos y D-score) o satisfactorios, cuestionables e
insatisfactorios (Ejemplo: Z-score).
Los laboratorios deben participar regularmente en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio que sean
pertinente al alcance de la acreditacin, se debe dar preferencia a esquemas de Ensayos de
Aptitud Interlaboratorio que usen matrices apropiadas.

8.3 EVALUACIN DE LAS TENDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS.
Los grficos de control son una herramienta de trabajo para el control estadstico de los
resultados de ensayo y sirven para monitorearlos. Ver apndice 8.A
8.3.1 Los datos obtenidos a travs del programa el aseguramiento de la calidad deben ser
registrados en forma tal que se puedan detectar las tendencias y aplicar tcnicas
estadsticas para la revisin de los resultados.
8.3.2 Apndice 8.A. Ejemplo de grfico de control

RONDA Z score Ensayo de Aptitud Interlaboratorio:
Feb-02 0,40 Matriz : Queso
Feb-02 0,44 Metodologa: FIL-IDF 73B:1998 parte I
Feb-02 0,52 Ensayo: recuento de Coliformes a 30 C (ufc/g)
May-02 -0,56 Ao: 2002 2003 y 2004
May-02 0,96
Ago-02 0,72
Ago-02 1,36
Nov-02 -0,24
Nov-02 0,00
Mar-03 0,30
J un-03 1,04
Sep-03 -0,59
Dic-03 0,40
Mar-04 -0,42
J un-04 -0,32
Sep-04 0,60
Sep-04 0,13
Dic-04 -0,42

Valor de z-score Clasificacin
|z| <2 Satisfactorio
2 < |z| <3 Cuestionable
|z| >3 Insatisfactorio
GRAFICO DE TENDENCIAS PARA
VALORES DE Z-SCORE
-4
-3
-2
-1
0
1
2
3
4
Abr-01 Sep-02 Ene-04 May-05
Fecha de participacin mes/ao
Z
-
s
c
o
r
e

o
b
t
e
n
i
d
o

LABORATORIO)


Aseguramiento de la calidad de
los resultados de ensayo
Revisin: 1
PAGINA : 1 de 15

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NOMBRE Y APELLIDO
FIRMA
FECHA

NDICE
1 OBJETIVO
2 ALCANCE
4 REFERENCIAS
5 RESPONSABILIDADES
6 RELACIONES
7 DESARROLLO


REVISION N : 001


LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 2 de 15

1 OBJETIVO
En este procedimiento se indica y define la metodologa a seguir por el laboratorio para evaluar
el desempeo durante la participacin en los Programas de Aseguramiento de la Calidad de los
Resultados de Ensayos.

2 ALCANCE
Se aplica al anlisis y evaluacin de los resultados obtenidos por (NOMBRE DEL
LABORATORIO) en los Programas de Aseguramiento de la Calidad de los Resultados de
Ensayos.
Dichos programas comprenden:
a) Participacin en Ensayos Intralaboratorio.
b) Uso rutinario durante la realizacin del ensayo de un control de calidad interno o
cepas de referencias.
c) Participacin Ensayos de Aptitud Interlaboratorio (Proficiency Testing).
d) Evaluacin de las tendencias de los resultados obtenidos por el laboratorio a travs de la
realizacin de grficos de control.

Definiciones:

Aseguramiento de la calidad (QA): Conjunto de acciones planificadas y sistemticas que son
necesarias para proporcionar la adecuada confianza de que un producto o servicio satisfar los
requisitos dados sobre la calidad (ISO 8402:1986 Vocabulario relacionado con la calidad).

Control de calidad (QC): Tcnicas y actividades operacionales que se usan para cumplir los
requisitos de calidad (ISO 8402:1986 Vocabulario relacionado con la calidad).

Programas de aseguramiento de la calidad de los resultados de ensayos: metodologas
utilizadas para comprobar y monitorear la validez de los ensayos que realiza el laboratorio. Estos
programas son planificados y revisados peridicamente.

Ensayos de Aptitud Interlaboratorio: constituye una herramienta para la evaluacin externa de
la calidad de los resultados de ensayo o desempeo del laboratorio.

Ensayos Intralaboratorio: son las verificaciones de calidad para evaluar el desempeo de los
analistas del laboratorio para un ensayo.
Se efectan comparaciones de resultados obtenidos entre analistas del mismo laboratorio para un
ensayo (reproducibilidad entre analistas) y los anlisis de la muestras por duplicado realizada por
cada analista perteneciente al laboratorio (repetibilidad del analista).

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 3 de 15

Repetibilidad (r): grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del mismo
mesurando realizadas en las mismas condiciones de medicin. (ISO Vocabulario internacional
de trminos bsicos y generales de la metrologa: 1993)
Las mismas condiciones significa resultados obtenidos con el mismo mtodo de ensayo, sobre el
mismo material de ensayo, bajo las mismas condiciones (mismo operador, mismos equipos,
mismo laboratorio y un corto intervalo de tiempo).

Reproducibilidad (R): grado de concordancia entre los resultados de sucesivas mediciones del
mismo mesurando realizadas en diferentes condiciones de medicin. (ISO Vocabulario
internacional de trminos bsicos y generales de la metrologa: 1993)
El ensayo se realiza sobre el mismo material de ensayo pero en diferentes condiciones. Esto es:
resultados obtenidos con diferentes mtodos de ensayo o equipos (reproducibilidad entre
mtodos), diferentes operadores o analistas (reproducibilidad entre analistas), diferentes
laboratorios (reproducibilidad entre laboratorios) o diferente tiempo.

Valor verdadero convencional (de una magnitud): Valor atribuido a una magnitud particular,
y aceptado a veces por convencin, porque la representa, con una incertidumbre apropiada, para
un fin dado.

Mensurando: Magnitud particular sometida a medicin.

Incertidumbre de medida: Parmetro, asociado al resultado de una medicin, que caracteriza la
dispersin de los valores que podran se razonablemente atribuidos al mensurando.

Exactitud de una medicin: Proximidad entre el resultado de una medicin y el valor verdadero
del mensurando.

Cepas de referencias: microorganismos obtenidos de una coleccin nacional o internacional
reconocida.
4 REFERENCIAS
-Norma ISO 17025:2000. Captulo 5 Requisitos tcnicos. Punto 5.9. Aseguramiento de la
calidad de los resultados de ensayo y de calibracin.

-International IDF Standard 135B:1991. Precision characteristics of analytical methods outline
of collaborative study procedure.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 4 de 15

5 RESPONSABILIDADES
Actividad DL RC JM PT
Determinacin de las acciones de aseguramiento de la
calidad
D E E I
Ejecucin de las medidas de aseguramiento de la calidad P E
Supervisin de la ejecucin E D/E
Evaluacin del desempeo de la participacin en el
Programa de Aseguramiento de la Calidad de los
Resultados de Ensayos
I I D/E I
Evaluacin de los resultados de las acciones de
aseguramiento de la calidad
I D/E I I
Conservacin de los documentos E
Detectar las no conformidades y tomar las acciones
correctivas y preventivas necesarias
E E E E
Realizar el seguimiento de las no conformidades detectadas I E I I
Verificacin del cumplimiento de las acciones correctivas y
preventivas propuestas
I D/E I I


6 RELACIONES
-Captulo 8: Aseguramiento de la calidad de los resultados. Requisitos Norma 17025
-PR 5.1 Manejo y uso de cultivos de referencia.
7 DESARROLLO
7.1 Ensayos Intralaboratorio: mediante este programa se determinan los valores de precisin
del laboratorio (o sea r y R) para ensayos cuantitativos y en ensayos cualitativos se
chequean los resultados obtenidos entre analistas.
Se efectan en forma peridica. La frecuencia de realizacin para cada matriz y ensayo es
mnimo cuatro veces al ao; para ensayos cualitativos (chequeo de todos los analistas
entre s) y para ensayos cuantitativos la repetibilidad de cada analista y la reproducibilidad
entre analistas.

7.1.1 Ensayos cualitativos: El J efe del laboratorio de microbiologa registra en la planilla
PR 8.1/3 Ensayos cualitativos: participacin en ensayos intralaboratorio laboratorio de
microbiologa y evala los resultados.
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 5 de 15

7.1.2 Ensayos cuantitativos:
Todos los analistas del laboratorio autorizados o en vas de autorizacin para realizan el
ensayo, analizan por duplicado una misma muestra. Con los datos obtenidos se calcula la
repetibilidad de cada analista para esa matriz y esa metodologa.
El J efe del laboratorio de microbiologa registra en la planilla PR 8.1/4 Ensayos
cuantitativos: planilla individual de cada analista ensayos intralaboratorio laboratorio
de microbiologa, evala y verifica que los valores de repetibilidad de cada analista estn
dentro de los valores lmites establecidos.

Tambin se efectan recuentos cruzados entre analistas para calcular la reproducibilidad
entre analistas se registran en la planilla PR 8.1/5 Ensayos cuantitativos: planilla
reproducibilidad entre analistas ensayos intralaboratorio laboratorio de microbiologa,
se evala y verifica que los valores de reproducibilidad entre analistas estn dentro de los
valores lmites establecidos.

Los recuentos entre diferentes metodologas se pueden evaluar para calcular la
reproducibilidad entre mtodos se registran en la planilla PR 8.1/6 Ensayos cuantitativos:
planilla reproducibilidad entre metodologas ensayos intralaboratorio laboratorio de
microbiologa se evala y verifica que los valores de reproducibilidad entre metodologas
estn dentro de los valores lmites establecidos.

7.2 Uso rutinario durante la realizacin del ensayo de un control de calidad interno o
cepas de referencias. Se registrar en la planilla correspondiente de cada ensayo PR 3.3/3
Registro interno de los resultados de ensayo.

7.3 Participacin Ensayos de Aptitud Interlaboratorio (Proficiency Testing).
Frecuencia mnima es una vez al ao para todas las matrices.
El anlisis consiste en comparar los resultados obtenidos por el laboratorio con los
resultados esperados establecidos por la entidad organizadora del interlaboratorio a travs
de metodologa estadstica.

7.3.1 Ensayos cualitativos: El J efe del laboratorio de microbiologa registra en la planilla
PR 8.1/7 Participacin en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio para ensayos cualitativos
laboratorio de microbiologa y evala los resultados.
7.3.2 Ensayos cuantitativos: la evaluacin de los resultados obtenidos figuran en la planilla
PR 8.1/8 Participacin en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio para ensayos cuantitativo
laboratorio de microbiologa.
7.4 Evaluacin de las tendencias de los resultados: obtenidos por el laboratorio a travs de la
realizacin de grficos de control.
Cada vez que se obtienen resultados de Ensayos Interlaboratorio se grafican de modo de
evaluar su tendencia.
7.4.1 Cuando en los ensayos de aptitud la clasificacin del laboratorio se realiza teniendo en
cuenta un parmetros a y su desviacin estndar SDa se debe confeccionar para cada
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 6 de 15

ensayo involucrado 2 grficos de tendencias, los cuales estn intrnsecamente
relacionados.
7.5 Cuando los resultados de los ensayos no resultan dentro del intervalo de conformidad o se
visualice una tendencia determinada, el J efe del laboratorio de microbiologa toma
respectivamente acciones correctivas o preventivas, siguiendo los lineamientos
establecidos en el Procedimiento PR Reclamos, sugerencias, no conformidades,
acciones correctivas y acciones preventivas.

Los registros correspondientes al aseguramiento de calidad de los resultados de ensayos se
archivan en el laboratorio de Microbiologa.


N
ANEXOS
Codificacin Ttulo

3 PR 8.1/3 Ensayos cualitativos: participacin en ensayos intralaboratorio
4 PR 8.1/4 Ensayos cuantitativos: planilla individual de cada analista
ensayos intralaboratorio laboratorio de microbiologa
5 PR 8.1/5 Ensayos cuantitativos: planilla reproducibilidad entre analistas
Ensayos intralaboratorio laboratorio de microbiologa
6 PR 8.1/6 Ensayos cuantitativos: planilla reproducibilidad entre
metodologas ensayos intralaboratorio laboratorio de
microbiologa
7 PR 8.1/7 Participacin en ensayos de aptitud interlaboratorio para
ensayos cualitativos laboratorio de microbiologa
8 PR 8.1/8 Participacin en ensayos de aptitud interlaboratorio para
ensayos cuantitativos laboratorio de microbiologa
9 PR 8.1/9 Grfico de tendencias modelo del laboratorio de microbiologa
LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 7 de 15


MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

VERSIN N:

HOJA N:
MODIFICACIONES:

FECHA: FIRMA:

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 8 de 15


N COPIA
SECTOR/
AREA
RECUPERA
VERSIN N

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 9 de 15

ANEXO 3 PR 8.1/3

Pg.____ de ____

Ensayos cualitativos: Participacin en Ensayos Intralaboratorio
Ensayo:
Matriz:

Identificacin
de las Muestras

Analistas

Fecha de
anlisis
de las
muestras

Metodologa
usada por el
laboratorio

Resultado
obtenido
por el
analista

Valor
asignado
a la
muestra
Desempeo
del analista
Satisfactorio
/Insatisfactorio

Observaciones
Firma del
responsable

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 10 de 15

ANEXO 4 PR 8.1/4

Pg.____ de ____

Ensayos cuantitativos: Planilla individual de cada analista
Ensayos Intralaboratorio

Ensayo:
Matriz:
Analista:

Identificacin
de las Muestras

Fecha de
anlisis de
las
muestras

Metodologa

Resultado 1
( unidades)

Resultado2
( unidades)
log Resultado 1
(log 10 unidades)
log Resultado 2
(log 10unidades)
r
del
analista
Clasificacin
obtenida
Conforme
/no conforme

Firma del
responsable

Valores lmites mximos establecidos para:
r (log 10 unidades):

NOTA: el valor de r se obtiene de restar log10 Resultado 1 con el log10 Resultado 2.

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 11 de 15

ANEXO 5 PR 8.1/5

Pg.____ de ____

Ensayos cuantitativos: Planilla reproducibilidad entre analistas

Ensayo:
Matriz:

Identificacin
de las Muestras

Fecha de
anlisis de
las
muestras

Metodologa

Analista
1
Analista
2
log Resultado
Analista 1

log Resultado
Analista 2
R
entre
analistas
Clasificacin
obtenida
Conforme
/no conforme

Firma del
responsable

R (log 10 unidades):

NOTA: el valor de R se obtiene de restar log 10 Resultado analista 1 con el log10 Resultado
analista 2 para la misma muestra y la misma metodologa.

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 12 de 15

ANEXO 6 PR 8.1/6

Pg.____ de ____

Ensayos cuantitativos: Planilla reproducibilidad entre metodologas

Ensayo:
Matriz:

Identificacin
de las Muestras

Fecha de
anlisis de
las
muestras

Analista
Metodologa
1
Metodologa
2
log Resultado
Metodologa 1

log Resultado
Metodologa 2
R
entre
Metodologa
Clasificacin
obtenida
Conforme
/no conforme

Firma del
responsable

R (log 10 unidades):

NOTA: el valor de R se obtiene de restar log10 Resultado Metodologa 1 con el log10
Resultado Metodologa 2 para la misma muestra y el mismo analista.

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 13 de 15

ANEXO 7 PR 8.1/7

Pg.____ de ____

Participacin en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio para Ensayos cualitativos

Ensayo:
Matriz:

Proveedor del
Ensayo
Interlaboratorio

Identificacin
de las
Muestras

Fecha de
anlisis
de las
muestras

Analista
Metodologa
usada por el
laboratorio

Resultado
obtenido
por el
laboratorio
Valor
asignado
Clasificacin
obtenida
Satisfactorio
/Insatisfactorio

Firma del
responsable

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 14 de 15

ANEXO 8 PR 8.1/8

Pg.____ de ____

Participacin en Ensayos de Aptitud Interlaboratorio para Ensayos cuantitativos

Ensayo:
Matriz:

Proveedor del
Ensayo
Interlaboratorio

Identificacin
de las Muestras

Fecha de
anlisis de
las
muestras

Analista
Metodologa

Resultado
obtenido
por el
laboratorio
(log
unidades)
Valor
asignado
(log
unidades)
Criterio de
organizador
para
clasificar
Clasificacin
obtenida
Satisfactorio
/Cuestionable
/Insatisfactorio

Firma del
responsable

LABORATORIO)


Revisin: 1
PAGINA : 15 de 15

ANEXO 9 PR 8.1/9

Pg.____ de ____

GRAFICO DE TENDENCIAS MODELO

Ensayos cuantitativos:
Grfico de tendencias de clasificacin obtenidas
en ensayos de aptitud

-4
-3
-2
-1
0
1
2
3
4
Fecha de participacin
mes/ao

C
l
a
s
i
f
i
c
a
c
i
n

o
b
t
e
n
i
d
a

NOTA: Se grafican los datos de la planilla PR 8.1/8.
Importante: Para confeccionar este grfico, el criterio empleado por el proveedor de Ensayo de
Aptitud para clasificar los participantes debe ser el mismo. Ejemplo los valores obtenidos por el
laboratorio que se grafican sern todos analizados segn puntuacin Z score.
Captulo 9: Informe de los resultados
1
CAPTULO 9
INFORME DE LOS RESULTADOS

ndice
CAPTULO 9 INFORME DE LOS RESULTADOS......................................................................1
9.1 GENERALIDADES...............................................................................................................1
9.2 CORRECCIONES A LOS INFORMES DE ENSAYO....................................................................3

9.1 GENERALIDADES
9.1.1 Los resultados del ensayo deben ser informados en forma exacta, clara, no ambigua y
objetiva, de acuerdo a las instrucciones especficas del mtodo de ensayo.
9.1.2 Los resultados se informan en un informe de ensayo. Dicho informe debe incluir toda la
informacin requerida por el cliente, el mtodo utilizado y necesaria para la interpretacin
de los resultados de ensayo.
9.1.3 Los informes de ensayo pueden ser entregados al cliente como copia o por transferencia
electrnica de los datos.
9.1.4 Cada informe de ensayo debe incluir la siguiente informacin:
(Ver documento modelo de Informe de ensayo)
Ttulo: Informe de ensayo
Nombre, direccin o lugar donde se realizaron el/los ensayo/s.
Una identificacin nica del informe de ensayo. Dicha identificacin debe figurar en todas las
pginas para asegurar que todas las pginas sean reconocidas como parte del informe.
Los informes deben incluir el nmero de pgina y nmero total pginas.
Nombre y direccin del cliente.
Descripcin o referencia de la metodologa utilizada.
Descripcin e identificacin unvoca de las muestras analizadas.
Fecha de recepcin de las muestras en el laboratorio.
Resultados de los ensayos con sus unidades de medida.
Firmas, nombre, apellido y funcin de las personas que autorizan el informe de ensayo.
2
Se recomienda incluir una declaracin indicando que no se debe reproducir parcialmente el
informe de ensayo sin la aprobacin escrita del laboratorio.
Cuando sea necesario para la interpretacin de los resultados o lo requiera el cliente se debe
incluir en el informe: desviaciones respecto de las condiciones de ensayo, una declaracin de
cumplimiento o no de una especificacin o requisito, la incertidumbre de medicin estimada,
opiniones e interpretaciones de los resultados (9.1.6), informacin adicional.
9.1.5 Cuando los informes contienen resultados del muestreo y sea necesario para la
interpretacin de los resultados, adems de lo expuesto en el punto 9.4, deben incluir:
La fecha de muestreo.
Una identificacin unvoca de las muestras.
Lugar de muestreo (puede incluir diagrama, fotografa, croquis).
Referencia al plan y procedimiento de muestreo usado.
Detalles de condiciones ambientales durante el muestreo que puedan afectar los resultados
de los ensayos.
Especificacin sobre el mtodo o procedimiento de muestreo y desviacin a dicha
especificacin.
9.1.6 El laboratorio debe registrar los fundamentos de las opiniones e interpretaciones que se
incluyan en el informe de ensayo.
Las opiniones e interpretaciones deben estar claramente identificadas como tales en el
informe de ensayo.
Las opiniones e interpretaciones pueden consistir en: una opinin sobre la conformidad o
no conformidad de los resultados con los requisitos, cumplimiento con los requisitos
contractuales, recomendaciones sobre la forma de utilizar los resultados o
recomendaciones a seguir para la mejora.
Las opiniones e interpretaciones comunicadas al cliente en forma oral es conveniente
registrarlos por escrito.
9.1.7 Deben estar claramente identificados cuando el informe de ensayo incluya resultados de
ensayos obtenidos por subcontratistas.
9.1.8 El subcontratista debe informar los resultados por escrito o en forma electrnica.
9.1.9 Transmisin electrnica de los resultados: Cuando los resultados de ensayo se transmiten
por telfono, fax u otros medios electrnicos o electromagnticos debe cumplir con el ver
PR 3.5 Control de datos.
9.1.10 La presentacin del Informe de ensayo debe minimizar la posibilidad de mal
interpretacin o mal uso.
Es conveniente que los encabezados sean normalizados.
3
9.2 CORRECCIONES A LOS INFORMES DE ENSAYO.
Si el laboratorio necesita corregir el informe de ensayo luego de su emisin, estas
correcciones deben ser hechas solamente en la forma de un nuevo documento o de una
transferencia de datos que incluya un nmero de serie u otra identificacin unvoca y la
declaracin: Suplemento de Informe de ensayo.
Las correcciones deben cumplir con todos los requisitos de la Norma 17025.
Si el laboratorio necesita emitir un nuevo Informe de ensayo complemento, ste debe estar
unvocamente identificado y debe contener la referencia del informe original que
reemplaza. Este se encabezar como: Complemento de informe de ensayo
Logo del laboratorio Oferente
Nombre del laboratorio Oferente
Direccin del oferente

INFORME DE ENSAYO

N (nmero correlativo de identificacin unvoca del informe de ensayo):
Pgina x de .y.... ( nmero de pginas y total de pginas)
Fecha de emisin del informe:
Cliente: (Nombre del cliente)
Domicilio: (direccin del cliente)
Localidad: (direccin del cliente)
C. P: (direccin del cliente)

OBJ ETIVO: (figura el tipo de ensayo solicitado)

MATERIAL: (describe e identifica sin ambigedades el material a ensayar, incluyendo
las caractersticas y estado del mismo)
Fecha de recepcin de la muestra/s:

MUESTREO:
Fecha de muestreo:
Identificacin unvoca de las muestras:
Lugar de muestreo (puede incluir diagrama, fotografa, croquis):
Plan y procedimiento de muestreo usado.
Condiciones ambientales durante el muestreo:*

METODOLOGA EMPLEADA: (hace referencia a la norma aplicada; o al
procedimiento cuando se trate de una norma modificada; o al mtodo de ensayo
utilizado; o a una breve descripcin de cualquier mtodo no normalizado utilizado, cuya
documentacin estar disponible).

RESULTADOS OBTENIDOS:
Fecha de inicio de anlisis de anlisis de muestras:

Observaciones:
(Firma personal autorizado 1) (Firma personal autorizado 2)
(Nombres personal autorizado 1) (Nombres personal autorizado 2)
(Funcin en el laboratorio) (Funcin en el laboratorio)

Nota: las palabras que se encuentran entre parntesis no estarn presentes en el informe
de ensayo, figuran a ttulo indicativo.
*cuando corresponda
REFERENCIAS:
CAEAL. Policy on the Estimation of Uncertainty of Measurement in
Environmental Testing.
CAN-P-1589 September 2002.Microbiology checklist for the technical
Assessment of Agriculture and Food Products Testing Laboratories.
EA-04/10 Accreditation for Microbiological Laboratories.
EURACHEM / CITAC Guide. Quantifying Uncertainty in Analytical
Measurement
FIL-IDF 50C:1995 Guidance on sampling.
G-ENAC-04REV. 2 Marzo 97.Gua para la acreditacin de laboratorios que
realizan anlisis microbiolgicos
Gua para la validacin de mtodos de ensayo. OAA 2003
ICMSF. Microorganisms in Foods, Volume 2. Sampling for Microbiological
Analysis: Principles and Specific Applications. 2
nd
Ed., 1986.
International IDF Standard 135B:1991. Precision characteristics of analytical
methods outline of collaborative study procedure.
IRAM 301* Tercera edicin 2000-06-23, ISO/IEC 17025 edicin 1999,
Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y de
calibracin.
ISO (CIPM):1995 Gua para la expresin de la incertidumbre de medida.
ISO 6887-1 Preparation of dilutions.
ISO 7218:1996(E) Microbiology of food and animal feeding stuff-General rules
for microbiological examinations.
ISO/FDIS 14461-1:2005(E) IDF 169-1:2005(E) Milk and milk products
Quality control in microbiological laboratories Part 1:Analyst performance
assessment for colony counts
ISO/TS 11133-1 Microbiology of food and animal feeding stuffs-Guidelines on
preparation and production of culture media-Part 1: General guidelines on quality
assurance for the preparation of culture media in the laboratory.
ISO/TS 11133-2 Microbiology of food and animal feeding stuffs-Guidelines on
preparation and production of culture media- Part 2: Practical guidelines on
performance testing of culture media.
MICROAL 2000Grupo de trabajo: Acreditacin de Laboratorios de
Microbiologa de Alimentos. VI Congreso Latinoamericano de Microbiologa de
Alimentos. II Simposio Argentino de conservacin de Alimentos. I Congreso
Argentino de Microbiologa de Alimentos. I Encuentro Hispano Latinoamericano de
Microbiologa de Alimentos.
NMKL Procedure N 8 (1999) Measurement of uncertainty in microbiological
examination of foods.
Norma FIL 100B:1991 - Enumeracin de microorganismos por recuento de
colonias a 30 C.
Norma FIL 122:2001 (E) - Preparacin de las muestras y diluciones para la
examinacin microbiolgica.
Norma IDF 93:2001(E): Deteccin de Salmonella spp
Norma IRAM-IACC-ISO E 10012-1:1996. Requisitos de aseguramiento de la
calidad para los equipos de medicin. Parte 1. Sistema de confirmacin metrolgica
para los equipos de medicin.
Norma ISO/IEC 17025:1999 Requisitos generales para la competencia de los
laboratorios de ensayo y de calibracin.
Referencias
1
Normas IRAM 14071-1:2002 Control de carga microbiana en el aire. Parte 1:
Mtodo pasivo, por sedimentacin.
Normas IRAM 14071-2:2002 Control de carga microbiana en el aire. Parte 2:
Mtodo activo, por impacto.
prEN ISO 16140:1999 Microbiology of food and animal feeding stuffs- Protocol
for validation of alternative methods.
Seppo 1. Niemela Uncertainty of quantitative determinations derived by
cultivation of microorganisms Publication J 3/2002 advisorycommission for
metrology Chemistry Section Expert Group for Microbiology.
UKAS Publication ref: LAB 12. The Expression of Uncertainty in Testing

Referencias
2

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