BALANCE DE MATERIA

EN BIOPROCESOS
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Sistema se encuentra separado de los alrededores, los cuales son el resto del
universo.
El limite del sistema puede ser real como las paredes de un fermentador o
imaginario.
Sistema cerrado Sistema abierto
proceso discontinuo proceso continuo
ALREDEDORES
SISTEMA
ALREDEDORES
Sistema continuo en estado estacionario
Cuando Acumulacin = 0
Entrada + generacin = Salida + consumo
SISTEMA ESTACIONARIO
Cuando todas las propieades del sistema como son
temperatura, presion, concentracion, volumen, masa, etc no
varian con el tiempo.
ECUACION GENERAL DE BALANCE DE MATERIA
Entrada - salida + generacin consumo = acumulacin
CUANTIFICACION DEL
CRECIMIENTO MICROBIANO
Estudio cuantitativo de la cintica de
fermentaciones.
Mtodos experimentales sencillos para
determinar el crecimiento de poblaciones
microbianas
Considerar el modo de reproduccin de
las clulas
Las clulas procariticas bacterianas se
reproducen por fisin binaria sin que sea
posible diferenciar una clula madre de una
clula hija.
Edad mxima c/clula es el lapso
comprendido entre dos replicaciones
sucesivas
Edad de cultivo es el tiempo transcurrido
desde la inoculacin.
Las bacterianas se presentan en forma
individual o en asociaciones dbiles de
pocos individuos,pudiendo ser
dispersadas homogneamente en el
medio de cultivo
Las eucariticas como levaduras se
desarrollan en clulas individuales
fcilmente dispersables que se
reproducen por gemacin produciendo
una clula hija y una clula madre.
Cultivo de levaduras es heterogneo en
cuanto a la edad y por lo tanto el
estado fisiolgico de las clulas que lo
componen.
Los hongos por crecimiento apical
formando hifas
Caractersticas reolgicas no-
newtonianas.
Mtodos de cuantificacin
del crecimiento microbiano
Mtodo
Fundamento Observaciones
Recuento en celda Requiere clulas individuales
Nefelometra
RCI Influencias de las
condiciones de incubacin
N.M.P.
Dispersin de luz
Requiere cultivo
homog. y traslcido
Peso Seco Estadstico RCI y medio limpio
Turbimetra Transmisin de luz RCI y medio limpio
Vol. empacado Centrifugacin Poco preciso
Fsico Qumicos Variados indirectos
, pH, anlisis de
Comp. celulares, etc
Balance de masa
Conservacin de
masa
Gran cantidad de datos
analticos
Conteo directo N
o
de clulas
Conteo directo N
o
de clulas
X .
dt
dX
=

=
t
0
dt .
X
X X
dX
0
t
(lnX)
dt
d(lnX)
dt
dX
.
X
1
= = =
X = X
o
. e
.t
X
Ln X

X = X
o
. e
.t
t
(lnX)
dt
d(lnX)
dt
dX
.
X
1
= = =
t
t
Se estudia el crecimiento celular de un microorganismo
obteniendo los siguientes datos
t X
dias celulas/ml
0 4.50E+05
0.2 5.20E+05
0.5 6.50E+05
1 8.10E+05
1.5 1.22E+06
2 1.77E+06
2.5 2.13E+06
3 3.55E+06
3.5 4.02E+06
4 3.77E+06
4.5 2.20E+06
a) Calcular la velocidad especfica del crecimiento celular
durante la fase de crecimiento
b) El tiempo de duplicacin del cultivo
0.0E+00
5.0E+05
1.0E+06
1.5E+06
2.0E+06
2.5E+06
3.0E+06
3.5E+06
4.0E+06
4.5E+06
0 1 2 3 4 5
Tiempo (dias)

X
12
12.5
13
13.5
14
14.5
15
15.5
16
L
n

X
ln X = 13.01+0.67 t
R
2
= 0.99
12.5
13
13.5
14
14.5
15
15.5
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
Tiempo (dias)
L
n

(
X
)
El crecimiento de las clulas obedece la ley de
Conservacin de Energa y Materia
Los tomos de (C), (O), (N) y otros elementos
consumidos durante el crecimiento se incorporan a las
nuevas clulas o se expulsan como productos
Estequiometra del crecimiento
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ b H
g
O
h
N
i
c CH

+dCO
2
+ eH
2
O (I)
SUSTRATO Biomasa o clulas Fuente de N
W=6, X=12, Y=6 y Z=0 a, b, c, d y e Coef. Estequiom.
Aprox. macroscpica C,H,O y N 95%
C
N
50
O
20
14
H 8
P 3
S
1
K 1
Na 1
Ca
0 .5
Mg 0 .5
Cl 0 .5
Fe 0 .2
Otros 0 .3
Composicin de la bacteria Escherichia coli
Calculo de Coeficientes
Balance de C : w = c + d
Balance de H
: x + b g = c + 2e
Balance de O
y + 2a + bh = c + 2d + e
Balance de N
z + bi = c
a
b
c
d
e
a
d
consumidos
producidos
O
CO
de
de
Moles
Moles
RQ
2
2
= =
: (i)
: ii)
(iii)
(iv)
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ b H
g
O
h
N
i
c CH

+dCO
2
+ eH
2
O (I)
COEFICIENTE
RESPIRACION
Debemos estar seguros que el sustrato no se utiliza para sintetizar
otros productos extracelulares que no sean CO
2
y H
2
O
Resolviendo el sistema de ecuaciones Lineales
Las bacterias tienden a tener contenidos de nitrogeno
ligeramente mayores (11-14%).
Los hongos tiene (6.3 9%)
Cuando no se dispone de la composicin puede utilizarse como
formula general : CH
1.8
O
0. 5
N
1.2
este es el peso molecular medio de la biomasa basado en los contenidos
C,H,O,N es por lo tanto 24.6, aunque existe normalmente un 5 - 10%
de ceniza residual que no se incluye en la formula.
y = -0.461x + 11.675
R
2
= 0.9999
0
2
4
6
8
10
12
14
0 10 20 30
Sustrato [g/l]
C
{
e
l
u
l
a
s


[
g
/
l
]
consumido
producidas
sustrato
clulas
g
g
Y
x/s
=
Rendimiento de biomasa
DURANTE el CRECIMIENTO existe una relacin lineal
entre [Biomasa] producida y el [Sustrato] consumido
Y
x/s
= k durante el crecimiento, su valor deter. experim.
puede utilizarse para calcular el coef. estequiom. C
Mw = peso molecular.
Para utilizar esta ecuacin el sustrato no se debe utilizar
para sintetizar otros productos que no sean CO
2
y H
2
O.
( Y
x/s
)
Sustrato
Clulas
MW
MW
c Y
x/s
=
Estequiometra del producto
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ b H
g
O
h
N
i
cCH

+dCO
2
+eH
2
O+fC
j
H
k
O
l
N
m
SUSTRATO Fuente de N Biomasa Producto
(II)
Rendimiento de producto a partir del sustrato: Y
p/s
consumido
formado
sustrato
producto
g
g
Y
p/s
=
Sustrato
roducto
p/s
MW
MW
f Y
P
=
Se debe asegurare de que el sistema
experimental utilizado para medir Y
p/s
corresponde a la ecuacin (II)
No puede aplicarse a la produccin
metablica secundaria como la fermentacin
de la penicilina
Formacin de producto debe estar asociado
directamente con el crecimiento celular
Balance de electrones
y grado de reduccin
Balances de H y O pueden presentar dificultades
[H
2
O]= k
Conservacin de potencia reductora o electrones
disponibles
Si no se conoce la composicin de las celulas el
B
puede
tomarse como 4.2
Electrones disponibles
Al nmero de electrones disponibles
para transferir al O
2
en la combustin
del sustrato a CO
2
, H
2
O y compuestos
que contengan nitrgeno
C 4
N
H
1
O -2
P 5
S 6
-3
0
5
NH
3
N
2
NO
3
Se calcula a partir de la valencia de su elementos
Se define como el nmero de equivalentes de electrones disponibles
en aquella cantidad de materia que contenga 1 g tomo de carbono
Origen
Biomasa
Sustrato
Producto
Frmula
CH

C
w
H
x
O
y
N
z
C
j
H
k
O
l
N
m
# de electrones
disponibles
4 + - 2 - 3
4w + x - 2y - 3z
4j + k - 2l 3m
Grado de
reduccin
4+ -2-3
(4w + x 2y-3z)/w
(4j + k - 2l - 3m)/j
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ b H
g
O
h
N
i
cCH

+dCO
2
+eH
2
O+fC
j
H
k
O
l
N
m
Composicin elemental y grado de
reduccin para algunos microorganismos
(en relacin al NH
3
)
BALANCE DE MASA Y ENERGIA
Demanda terica de oxigeno
La demanda de oxgeno (a) est directamente
relacionado con los electrones disponibles
O
2
es el sustrato limitante en las fermentaciones
aerbicas
Cuando existe sntesis de producto, como
el representado por la ecuacin (II) el
balance de electrones es:
Demanda terica de oxigeno
w
s
4 a = c
B
+f j
p
(1)
La Ec.(2) es muy til porque si se conoce el microorganismo (
B
),
el sustrato (w y
s
) y el producto (j y
p
) involucrados en el
cultivo celular, y el rendimiento de biomasa (c ) y de producto (f),
la demanda de oxgeno (a) puede calcularse rpidamente.
a puede determ. resolviendo los coef. Esteq.de la ecuacin (II).
La ec. (2) permite una evaluacin ms rpida y no es necesario
conocer las cantidades de NH
3
, CO
2
y H
2
O involucrados.
a = ( w
s
- c
B
- f j
p
) (2)
Reparto de electrones disponibles en el sustrato
Rendimiento mximo posible.
1
s
w.
p
f.j .
s
w.
B
c
s
w.
4 a
= + +
(
s
)
fraccin de e
disponibles transf
desde el Sust al O
2
(
B
)
fraccin de e
disponibles transf
a la Biomasa
(
P
)
B
s
max

w
c =
si todos los e disponibles
se utilizaran para la sntesis
de biomasa
B
= 1
p
s
max
j
w
f =
el rendimiento mximo
de producto en
ausencia de sntesis de
biomasa
Fraccion de e
transferidos al
Producto
Rendimientos termodinmicos mximos de biomasa
Requerimientos nutricionales
del Medio de Cultivo
para la construccin de una nueva clula esta contenida en los
cromosomas.
La materia debe ser suministrada a travs de los componentes del
medio de cultivo.
La E se obtiene del catabolismo de la fuente de C de cultivo.
Crecimiento microbiano una ecuacin qumica.
C, H, O y N y Mg, S, P,Ca, Na y K
Otros compuestos a niveles muy bajos y deben ser suministrados
como compuestos aptos para ser metabolizados.
La fuente de C: Carbohidrato-orgnico, CO
2
, CO
3
-2
HCO
3
-1
(caso
de clulas quimioautotrficas o fotosintticas).
La fuente de N : Amonio, nitrgeno amino de aminocidos y
protenas, rea, nitrato o nitrgeno elemental
Medios complejos
Son formulados en base a desechos, subproductos y
extractos naturales.
la melaza, licor de maceracin de maz, extracto de
levadura y otros
Su composicin qumica es compleja y variable.
Contiene varias fuentes de cada elemento.
Pueden requerir ser suplementados con compuestos que
proporcionen cantidades adicionales de algunos
elementos, tales como, N, Mg y P
Muy utilizados en microbiologa bsica (taxonoma,
fisiologa y gentica), microb. analtica, produccin de
algas, alimentos, suelos y en fermentaciones
industriales
Componentes de medios complejos industriales
a nivel industrial Baratos Mejores rendimientos
Medios definidos
Se formulan en base a compuestos puros, tales
como la glucosa, sulfato de amonio, metionina,
fosfatos, etc
composicin qumica es conocida y reproducible.
fuentes de cada elemento y los nutriente
esenciales que pueden ser requeridos.
investigacin y desarrollo de Proceso de
fermentacin.
permiten un mejor control de las condiciones
ambientales de crecimiento y produccin.
resultan ms productivas cuando se utilizan
medios definidos.
Ejemplo de medios definidos
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1
Continua.
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Problema 1
Corrida del Programa
Ejercicios resueltos de Balance de Materia
Ejercicio de Balance resuelto en Excel