AISLAMIENTO E IDENTIFICACION

DE TRICHODERMA SPP
ALUMNA : NOEMI TITO ALVAREZ
LAB-TM VI SEMESTRE
OBJETIVOS

Conocer las diferentes caracteristicas del
genero trichoderma spp.
Conocer su aplicacin
Aislamiento e identificacion de
trichoderma spp.

Trichoderma is.

Agente biolgico muy efectivo
vivir libre
ubicuo
altamente proliferantes
No contaminante
fcilmente accesible
no fitotxico
Sistmico efmera
fcilmente biodegradable
rentable
efecto sinrgico
Vida til ms larga
Mayor compatibilidad
Trichoderma

1671 - Primera encuentran en Alemania

1794 - Identificado por Persoon hace casi 218 aos

1927 - Gilman y Abbott reconocen cuatro especies basada en el
color, la forma y el aspecto de los conidios colonia

> Hace 75 aos el uso potencial de Trichoderma por Weindling
(1932) y el primero en demostrar la actividad parasitaria de la
marchitez del guisante de paloma

Micoparsito Mejor conocido contra muchos patgenos de plantas
del suelo

Trichoderma
Hongo vida libre comn en los
suelos y los ecosistemas raz

Altamente interactiva en la raz, el
suelo y el medio ambiente foliar

Suprime el patgeno por diferentes
mecanismos de biocontrol
Trichoderma harzianum
POSICION TAXONOMICA DE Trichoderma
Trichoderma como fase asexual y Hypocrea como fase sexual
Position Asexual stage
(conidia)
Sexual stage
(ascospore)
Kingdom Fungi Fungi
Phylum Ascomycota Ascomycota
Sub-division Deuteromycotina Ascomycotina
Class Hyphomycetes Pyrenomycetes
Order Monilliales Sphariales
Family Monilliaceae Hypocreaceae
Genus Trichoderma Hypocrea

Caracteristicas generales Trichoderma spp.

Los cultivos estn creciendo rpidamente a 25-
30 C
Los conidios se forma dentro de la semana en
mechones compactos o sueltos en tonos de
verde o amarillo o con menos frecuencia
blanco
Pigmento amarillo puede ser secretada en el
agar, especialmente en PDA

Un olor caracterstico dulce o 'coco' es
producido por algunas especies
figura 1 (A) de Trichoderma en medios slidos (B) vista microscpica (C) de
Trichoderma en medio lquido
Conidiophores
Conidia
Hyphae
Estructura morfologica Trichoderma
Figura 2: La fotografa muestra las colonias de cepas de Trichoderma en la placa
PDA (vista dorsal) y conidiforo con conidios. 1a y 1b. T. virens (IMI-392430),
2a y 2b. T. pseudokoningii (IMI-392431), 3a y 3b. T. harzianum (IMI-392432),
4a y 4b. T. harzianum (IMI-392433) y 5a y 5b.T. harzianum (IMI-392434).

ConidioFOrOs caracteristica DE
Trichoderma spp.

Altamente ramificado, difcil de definir o
medir

Mechn insertado libremente o de
forma compacta

Principales ramas de los conidiforos
producir ramas laterales

Las ramas pueden rebranch, con las
ramas secundarias y ms largas ramas
secundarias est ms cercano al eje
principal
Conidia

Por lo general aparecen en seco,
pero en algunas especies podrn
celebrarse en las gotas de lquido de
color verde o amarillo claro (por
ejemplo, T. virens, T. flavofuscum)
Alrededor de forma oval
Hypocrea teliomorfa de Trichoderma spp.
1mm
Mature perithecia
20 m
Viewed through stereo microscope Samuels et al., 2006, USA

De dnde vienen?
Ellos pueden ser fcilmente aislados de suelo, raz, madera
en descomposicin y otras formas de materia orgnica
vegetal
Produccion
de enzimas
Produccion
de
antibioticos
micoparasi
tismo
SAR
competicon
La
promoci
n del
crecimien
to
Antagonist
a eficaz
Colonizacion
rapida del
sustarto
Las actividades de control biolgicos potenciales expuestos
por Trichoderma
competicion


Por espacio y nutrientes bajo condiciones especficas no reciben
soporte

Reprimir el crecimiento de la poblacin del patgeno

por ejemplo: el tratamiento del suelo con Trichoderma
harzianum esporas suprimi la infestacin de Fusarium
oxysporum f. sp. vasinfectum y F. oxysporum f. sp. melonis





Mecanismo de accion
MICO PARASITO

Hongos antagonistas parasitan a otros hongos patgenos
Las hifas de Trichoderma sea crecer a lo largo de las hifas de
acogida o de la bobina a su alrededor
Por ejemplo : T. harzianum y T. hamatum eran micoparsitode
tanto Scelerotium rolfsii y Rhizoctonia solani
Interaccin -
Arrolla alrededor de las hifas del patgeno,
vacuolizacin,
Penetracin por haustoria y lisis .

Reconocer y adherirse a los hongos patgenos y excretan enzimas lticas
extracelulares como -1,3-glucanasa, quitinasa, proteasas y lipasas
Bobinas alrededor de Trichoderma, penetra, y mata a otros hongos
que son patgenas (es decir, causa la enfermedad) a los cultivos. Se
puede digerir sus paredes celulares

Una visin clara con un microscopio electrnico
Trichoderma spp.(T) fungal strands
coil (C) around the Rhizoctonia (R)
Initial stages of degradation (D) as a result of
Trichoderma generated enzymes.
T: Trichoderma R: Rhizoctonia
Antibiosis
Es la condicin en la que uno o ms metabolitos excretados por el organismo
tienen un efecto perjudicial sobre uno o ms de otros organismos
En tal relacin antagnica spp. A produce una sustancia qumica que es
perjudicial para spp. B sin un Spp. Una deriva ningn beneficio directo
por ejemplo: Trichoderma secretada - Trichodermin, viridine,
Trichothecin, Sesqiterpine etc
La inhibicin del crecimiento de R. solani por el T. virens produjo
gliotoxina antibitico. A: Gliotoxin modificado B: no modificado
Cont

Cepas de Trichoderma solubilizar fosfatos y micronutrientes

La aplicacin de cepas de Trichoderma en la rizosfera de plantas
aumenta el nmero de races profundas, no por el aumento de las
plantas capacidad para resistir la sequa

Promotor de crecimiento de plantas
Fig.: Desarrollo de la raz mejorado cultivado en el campo de las plantas de frijol
como consecuencia de colonizacin de las races por la cepa competente
rizosfera T. harzianum
Cules son los biopesticidas?
El control de patgenos de plantas y enfermedades causadas por ellos a
travs de microorganismos antagonistas o botnicos se denomina agentes
de control biolgico
Segn Baker y Cook (1974) defn: - "El control biolgico es la reduccin de
inculo o actividad productora de la enfermedad de un patgeno a cabo por
o a travs de uno o ms organismos distintos del hombre."
Los microorganismos antagonistas como especies de Trichoderma,
Penicillium, Bacillus, Pseudomonas, etc





Procedimiento para el aislamiento de Trichoderma del suelo

Aislamiento de suelo sobre medio selectivo
AGAR PAPA DEXTROSA se incuba 7 das a
250 C
Cultivo Sub en placas de PDA
purificacin
Inoculacin de la cultura purificada en tubos
inclinados de AGAR PAPA DEXTROSA
Conservacin en congelador (-20C)
La produccin masiva de agentes de control biolgico
Mix
Mezclar 30 gramos de melaza y la levadura de
cerveza 6GM en 1 litro de agua. Distribuir 60 ml en
cada matraz cnico. autoclave
Inocular 8mm discos de micelio de Trichoderma en
medio
Incubar durante 10 das a temperatura ambiente
Utilice para la multiplicacin en el fermentador
Preparar 50 iluminado de melaza + medio de levadura
y esterilizar durante 30 min en el fermentado
Transfer aseptically 1 lit of Trichoderma
Mtodo de fermentacin lquida
Incubar durante 10 das
utilizando hemocitmetro (108 / ml de
esporas)
500 ml de la biomasa fngica + 1 kg
de polvo de talco
Aire seco y y carboximetilcelulosa
(CMC) + sticker 5 g / kg
Almacenar en bolsa de polietileno


DESVENTAJAS
Parsito nocivo de setas

Pierde su efectividad si no se coloca en su estado natal.

No se puede utilizar como pulverizacin foliar

Esto no crecen en pH alcalino (superior a 8).

Zona de crecimiento especfico y lento

PRECAUCIONES

No utilice fungicida qumico despus de la aplicacin de
Trichoderma para 4-5 das.
No utilice Trichoderma en suelos secos. La humedad es un
factor esencial para su crecimiento y supervivencia.
No ponga las semillas tratadas en los rayos directos del sol.
No mantenga el FYM tratados durante un perodo prolongado
FormulaCIONES
Las formulaciones en polvo

Encapsulado en polmero orgnico como el alginato de sodio

Como aerosol a partir de concentrados emulsionables

Melaza grnulos de arcilla enriquecida

Pellating biomasa y el salvado con alginato de sodio

El uso de Trichoderma ha ganado importancia en la gestin de la
mayora de los patgenos de las plantas.

Sin embargo, todava hay un inters considerable en la bsqueda de
hongos mycoparasitic ms eficientes, especialmente dentro de las cepas
de Trichoderma harzianum, que difieren con respecto a su eficacia de
biocontrol.


La tcnica para la produccin en masa y el uso de estos agentes
biolgicos se han comercializado para el propsito de los productores y
los agricultores.
http://en.wikipedia.org/wiki/Trichoderma
http://www.postgradoeinvestigacion.uadec.
mx/CienciaCierta/CC17/cc17trichoderma.ht
ml
http://www.unpa.edu.mx/investigacion/Proy
ecto_Promep_UNPA.pdf
http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S1010-
27522009000100002&script=sci_arttext
U