Expresin de protenas heterlogas en Pichia Pastoris

Daz Rodrguez Erick Efrn Huicochea Medina Magaly Ocampo Abrajan Ivn

Pichia Pastoris Como sistema de expresin de protenas heterlogas Por qu elegir a Pichia Pastoris?

Pichia Pastoris es una levadura metilotrfica su principal caracterstica es la existencia de un promotor fuerte (elevado nivel de trascripcin) y altamente regulable . El promotor de la alcohol oxidasa, (PAOX1),Levadura que combina la facilidad de la

manipulacin gentica y las caractersticas de crecimiento de las procariotas adems de la maquinaria celular necesaria para llevar a cabo modificaciones postraduccionales.

Caractersticas principales
La biologa molecular de Pichia Pastoris es bien conocida.
El promotor del gen de la enzima alcohol oxidasa (AOX1) es inducible por
metanol

Eficiente crecimiento en metanol como nica fuente de carbono. No tiene tendencia a fermentar.

Como funciona
Mecanismo clsico de represin- desrepresion combinada con un mecanismo de induccin:

El crecimiento en presencia de glucosa reprime la transcripcin incluso en la

presencia del inductor metanol.

La sustitucin de glucosa por glicerol y la simultanea adicin de metanol al

medio induce la expresin del gen AOX1 a altos niveles.

Se puede obtener un potente efecto inductor si solo se utiliza metanol como

fuente de carbono.

Pichia Pastoris Como sistema de expresin de protenas heterlogas

Diseo del plsmido Fragmento del promotor de la enzima alcohol oxidasa Pptido de secrecin (dependiendo del vector empleado). Lugar de clonaje, donde en su momento ira el gen que queremos expresar. Terminador de la trascripcin de l alcohol oxidasa Un extremo 3 homologo a la secuencia que flaquea , tambin en 3 al gen de la enzima alcohol oxidasa

Pichia Pastoris Como sistema de expresin de protenas heterlogas

Principales vectores de expresin en Pichia pastoris

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Algunos ejemplos de la produccin heterloga de Pichia pastoris