Pruebas bioqumicas:

O-F ~ metabolismo oxidativo

 Pruebas bioqumicas:
O-F ~ metabolismo oxidativo
 Pruebas bioqumicas:

Medio O-F~
metabolismo fermentativo
Pruebas bioqumicas:
Gelatina~ positivo
 Pruebas bioqumicas:
Movilidad~ positivo
 Pruebas bioqumicas:
Test de oxidasa~positivo
 Pruebas bioqumicas:
Test de oxidasa ~positivo
 Pruebas bioqumicas:
Test de oxidasa~positivo
 Pruebas bioqumicas:
Medio de Mac Conkey~
colonias rosadas lactosa positivas
 Pruebas bioqumicas:
Medio de Mac Conkey~
colonias rosadas lactosa positivas
 Pruebas bioqumicas:

Medio de lactosa rojo fenol~

colonias lactosa positivas
 Pruebas bioqumicas:

Medio de lactosa rojo fenol~

Colonias lactosa positivas

 Pruebas bioqumicas:
Citrato de Simons~negativo
Este medio indica la capacidad de las bacterias de metabolizar el citrato.
Contiene citrato como nica fuente de carbono, fosfato de amonio como nica
fuente de fosfato y azul de bromotimol como como indicador de pH.
nicamente las bacterias capaces de metabolizar citrato podrn multiplicarse
en este medio, al utilizar los fosfatos presentes liberan iones amonio (bsicos)
que junto con la eliminacin de citrato (cido) generar una fuerte basificacin
del medio que ser aparente con un cambio de color del indicador de pH de
verde a azul..
 Pruebas bioqumicas:
Citrato de Simons~negativo
Prueba de citratos (+) izquierda,
(-)derecha.Utilizacin de Citrato
como nica fuente de carbono.
Indicador de pH: azul de bromotimol.
Enterotubos
 Pruebas bioqumicas:
Rojo de metilo~positivo
Para la realizacin de estas dos pruebas se
cultiva el microorganismo en caldo RMVP
(medio de Clark y Lubs) y se incuba a 30C
durante un periodo de 3 das como mnimo y
5 como mximo. Al revelar las pruebas, se
separa el cultivo en dos porciones de unos
2,5ml que servirn para cada uno de los ensayos.

Rojo de Metilo: A uno de los tubos se le aade unas gotas (4-5) de solucin indicadora
de Rojo de Metilo. Se agita para homogeneizar y se observa la coloracin. Se considera
positiva si vira al rojo y negativa si permanece amarillo.
 Pruebas bioqumicas:
Voges-Proskauer~negativo
Las enterobacterias son anaerobios facultativos que utilizarn la
glucosa en 2 fases:
1. Metabolismo aerbico (respiracin oxibintica) consumiendo
rpidamente el oxgeno del medio
2. Metabolismo anaerbico (fermentacin) que puede ser de 2
tipos dependiendo de los productos finales obtenidos:
2.1 fermentacin cido-mixta: productos finales son cidos
orgnicos (frmico, actico, lctico y succnico) y etanol
2.2 fermentacin butiln gliclica: productos finales son
compuestos neutros como el butanodiol y el etanol, producindose
acetona como intermediario.
La liberacin de cidos orgnicos generar un acusado descenso
del pH que podr ser detectado aadiendo al medio un indicador de
pH como el rojo de metilo (rojo a pH 4.0).
Si la fermentacin que se ha llevado a cabo produce acetona
puede ser detectada aadiendo al medio KOH y alfa-naftol que
reaccionarn con este compuesto produciendo rojo caracterstico.
 Pruebas bioqumicas:
Voges-Proskauer~negativo
Pruebas bioqumicas:
Ornitina~positivo

Descarboxilasas de aminocidos
(arginina, lisina, ornitina) Los aminacidos al
perder el grupo carboxilo se convierten en
aminas lo que incrementa el pH del medio y el
indicador (prpura del bromocresol) vira a
violeta. Las descarboxilasas son tiles en la
diferenciacin de enterobacterias.
Las bacterias se inoculan en medios complejos
que contienen lisina, ornitina o arginina al 1% y
un indicador de pH (prpura de bromocresol).
Pruebas bioqumicas:
Ornitina~positivo
Sistema API para
enterobacterias
Pruebas bioqumicas:

Fermentacin de H. de
Carbono
Glucosa~positivo
Pruebas bioqumicas:

Fermentacin de H. de
Carbono
Manosa~negativo
 Haemophilus-influenzae
Satelitismo con Staphilococcus aureus
Pruebas bioqumicas:

Fermentacin de H. de
Carbono
Glucosa~positivo
(con formacin de gas)
 Pruebas bioqumicas:
Prueba de indol~positiva
Mediante esta prueba se detecta la liberacin de indol en un
cultivo bacteriano. Dicha liberacin se debe a la degradacin
del aminocido triptfano mediante el enzima triptofanasa.
Para la realizacin de esta prueba la bacteria se cultiva durante
24-48 horas en un caldo de triptona con NaCl al 0,5% (la
triptona presenta abundante triptfano). Para la posterior
deteccin del indol se usa el reactivo de Kovacs que se puede
preparar con los siguientes ingredientes:
Alcohol amlico o isoamlico (puede sustituirse por
alc.butlico).....-------------------------------------------------------...150ml
p-dimetilamino-benzaldehdo.............................................10g
HCl (concentrado)................................................................50ml
Se disuelve primero el aldehdo en el alcohol y despus se
agrega lentamente a esta mezcla el cido. Para el control de
calidad del reactivo se pueden utilizar cultivos conocidos. Las
ms convenientes son Escherichia coli (indol+) y todas las
especies de Klebsiella (indol-).
 Pruebas bioqumicas:
Prueba de indol~positiva
 Pruebas bioqumicas:
Prueba de fenilalanina~positiva

Esta prueba determina la capacidad de un organismo

para desaminar el aminocido fenilalanina en cido
fenilpirvico por su actividad enzimtica de
fenilalanina desaminasa, con la consiguiente acidez
resultante.
Se cultiva el microorganismo en agar fenilalanina
sembrando la superficie con abundante inculo e
incubando durante 12-16 horas. Seguidamente se
aade 0,2ml de una solucin de cloruro frrico al 10%
de manera que inunde todo el crecimiento. La
presencia de cido fenilpirvico (prueba positiva) se
manifiesta por la aparicin de un color caracterstico
verde oscuro o verde-azulado.
 Pruebas bioqumicas:
Prueba de fenilalanina~positiva
Pruebas bioqumicas:
Test de catalasa ~ positivo
+

-
Pruebas bioqumicas:
Test de coagulasa~positivo
 Pruebas bioqumicas:
Test de catalasa ~ negativo
 Pruebas bioqumicas:
Fermentacin de manitol~positivo
 Prueba de la DNAsa

Se basa en la presencia de la enzima

termoestable DNAsa que es capaz de
clivar los enlaces fosfodiester internos de
la molcula de DNA. Se utiliza un medio
slido que contiene verde de metilo el cual
se combina con DNA altamente
polimerizado. Cuando la combinacin no
ocurre, por accin de la enzima DNAsa,
se produce una decoloracin del medio.
 Pruebas bioqumicas:
Prueba de optoquina ~ negativo
Pruebas bioqumicas:
Bilis esculina~ negativo
Pruebas bioqumicas:
Bilis esculina~ positivo
 Pruebas bioqumicas:
Fermentacin de
carbohidratos~manitol +
(API)
 Pruebas bioqumicas:

Prueba de bacitracina ~positivo (A)

 Prueba de CAMP- positiva (B)
Se basa en que los estreptococos(B)
producen un factor llamado CAMP (factor de mono-
fosfato de adenina cclica) que aumenta la zona de
hemlisis producida por un estafilococo productor
de lisina
Pruebas bioqumicas:
Sal tolerancia~ positivo
 Pruebas bioqumicas:

Produccin de cido a partir

de:
glucosa ~ positivo
maltosa ~ positivo
lactosa ~ negativo