Ut5 Ácidos Nucleicos y Enzimas Asociadas

BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA
TEMA 5
ÁCIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS ASOCIADAS
LAURA ESPEJO MORENO
laura.espejo6@educa.Madrid.org
CICLO FORMATIVO DE GRADO SUPERIOR DE LABORATORIO CLÍNICO Y BIOMÉDICO

CONTENIDOS
I. LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
II. El ADN
III. El ARN
IV. FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA
V. ENZIMAS EMPLEADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR
2
I. LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
1. Estructura y composición química
2. Propiedades fisicoquímicas
3
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
• Son biomoléculas que 1. LOS ÁCIDOS
contienen, NUCLEICOS
almacenan
y transmiten la información genética.
• Polímeros de gran tamaño —> peso molecular

muy elevado
○ 3,6 x 10^12 daltos = 5,6 x 10^9 pares de
nucleótidos
• Los nucleótidos se unen por enlaces

fosfodiéster.
• TIPOS de ácidos nucleicos

1. ADN = ácido desoxirribonucleico
2. ARN = ácido ribonucleico
4
1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. COMPOSICIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Ácidos nucleicos = Biopolímero = Polinucleótidos

○ NUCLEÓTIDO = Pentosa + BN + fosfato
○ NUCLEÓSIDO = Pentosa + BN
5

NUCLEÓSIDO
Nucleósido = base nitrogenada + pentosa
UNIÓN:
1. Enlace N-glicosídico
Unión BN – Azúcar: enlace covalente
Se une el C1’ de la pentosa con:
● Base pirimidínica: N-1
● Base purínica: N-9
6

CLASIFICACIÓN DE LOS NUCLEÓSIDOS
Según la BN
● Nucleósido purínico 🡪 (A) / (G)
● Nucleósido pirimidínico 🡪 (C) / (T) / (U)
Según la PENTOSA
● Ribonucleósidos 🡪 ARN
● Desoxirribonucleósido 🡪 ADN
7

NOMENCLATURA NUCLEÓSIDO
● Recibe el nombre de la base nitrogenada acabado en:
○ -osina 🡪 bases puricas (A G)
○ -idina 🡪 bases pirimidínicas ( C T U )
EJEMPLO
Citosina
ADN: 2’-
desoxicitidina
ARN: Citidina
ADN pentosa = desoxirribosa 🡪 prefijo DESOXI- 8


COMPLETA LA TABLA
NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS

Sufijo “-osina” Sufijo “-idina”
Base Adenina Guanina Citosina Timina Uracilo
ADN
ARN
9


ADN 2’-desoxiadenosina 2’-desoxiguanosina 2’-desoxicitidina 2’-desoxitimidina
ARN Adenosina Guanosina Citidina Uridina
10

NUCLEÓTIDOS
Nucleótido = nucleósido + fosfato(s)
● Dinucleótido 🡪 unión de 2 nucleótidos mediante enlace fosfo-diester típico
● Oligonucleótido 🡪 Cadena lineal de hasta 10 nucleótidos
● Polinucleótido 🡪 Cadena lineal de muchos nucleótidos (>10 nucleótidos)
11

NUCLEÓTIDOS
UNIONES EN NUCLEÓTIDOS:
1. Enlace N-glicosídico
Unión BN – Azúcar: enlace covalente
2. Enlace Éster
Unión Azúcar – Fosfato(s): enlace fosfoéster
o Posibles sitios de unión 🡪 C5’ o C3’
UNIÓN ENTRE NUCLEÓTIDOS:

1. Enlace Fosfo-Di-Ester
Unión mediante grupo fosfato
Unión entre C5’ y C3’ 12

NOMENCLATURA NUCLEÓTIDOS
1. Eliminar la -a- terminal del nucleósido + 5´ Fosfato
Ejemplo: Adenina 🡪 Adenosina 🡪 Adenosín 5’-fosfato
2. Sufijo -ilato
Ejemplo: Adenina 🡪 Adenilato
3. Ácido + sufjijo -ilico

Ejemplo: Adenina 🡪 Ácido Adenílico
13

BN PENTOSA NUCLEÓSIDO NUCLEÓTIDO

Adenina D ribosa Adenosina
Citosina D ribosa Citidina
Guanina D ribosa Guanosina
Timina D ribosa
Uracilo D ribosa Uridina
Adenina 2 desoxi D ribosa Desoxiadenosina
Citosina 2 desoxi D ribosa Desoxicitidina
Guanina 2 desoxi D ribosa Desoxiguanosina
Timina 2 desoxi D ribosa Desoxitimidina
Uracilo 2 desoxi D ribosa
14

COMPLETA LA TABLA
BN PENTOSA NUCLEÓSIDO NUCLEÓTIDO
Adenina D ribosa Adenosina Adenosin 5´P Adenilato Ác. Adenílico
Citosina D ribosa Citidina Citidin 5´P Citidilato Ác. Citidílico
Guanina D ribosa Guanosina Guanosín 5´P Guanilato Ác. Guanílico
Timina D ribosa
Uracilo D ribosa Uridina Uridín 5´P Uridilato Ác. Uridílico
Adenina 2 desoxi D ribosa Desoxiadenosina Desoxiadenosin 5´ P Desoxiadenilato Ác. Desoxiadenílico
Citosina 2 desoxi D ribosa Desoxicitidina Desoxicitidin 5´ P Desoxicitidilato Ác. Desoxicitidílico
Guanina 2 desoxi D ribosa Desoxiguanosina Desoxigunaosín 5´ P Desoxiguanilato Ác. Desoxiguanílico
Timina 2 desoxi D ribosa Desoxitimidina Desoxitimidín 5´ P Desoxitimidilato Ác. Desoxitimidílico
Uracilo 2 desoxi D ribosa 15

1. Componente ácido: Fosfatos
2. Componente neutro: Azúcares

Pentosa (5 átomos de carbono)
● Ribosa (D-ribosa) 🡪 ARN
● Desoxirribosa (D-2-desoxirribosa) 🡪 ADN
1. Componente básico: Bases nitrogenadas

● Bases pirimidínicas 🡪 Citosina, Timina y Uracilo
● Bases púricas 🡪 Adenina y Guanina
16

1. FOSFATOS
● Son las sales o los ésteres del ácido
fosfórico.
● Tienen en común un átomo de fósforo

rodeado por cuatro átomos de oxígeno
en forma tetraédrica.
● Se une al carbono 5’ de la pentosa

mediante un enlace éster
17

1. FOSFATOS. TIPOS
● Monofosfatos (Pi): Del ácido fosfórico (H3PO4) 🡪 Nucleótido

● Difosfatos (PPi): Del ácido pirofosfórico (H4P2O7) 🡪 ADP
● Trifosfatos (PPPi): Del ácido trifosfórico (H5P3O10) 🡪 ATP
18

2. PENTOSA
Las pentosas son monosacáridos (glúcidos simples) formados por una
cadena de cinco átomos de carbono que cumplen una función estructural.
Ribosa (ARN) Desoxirribosa (ADN)
19

3. BASES NITROGENADAS
Son moléculas heterocíclicas con
más de un átomo de nitrógeno,
formadas por un anillo único
(pirimidina) o por dos anillos
condensados (purina).
ADN 🡪 (A) / (C) / (G) / (T) ARN 🡪 (A) / (C) / (G) / (U) 20

3. BASES NITROGENADAS. REGLAS DE CHARGAFF
Edwin Chargaff (1950)
o Las proporciones de las bases nitrogenadas

eran diferentes en los distintos organismos,
aunque seguían algunas reglas.
o Estas reglas se cumplen en el ADN de doble

hélice.
21

3. BASES NITROGENADAS. REGLAS DE CHARGAFF
22

2. ESTRUCTURA DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
M. H. F. Wilkins
o Descubrimientos en relación con la

estructura molecular de los ácidos
nucleicos y su significación para la
transmisión de la información en la materia
viva (Premio Nobel, 1962).
23

1. Estructura primaria
2. Estructura secundaria
3. Estructuras de orden superior
24

1. ESTRUCTURA PRIMARIA
• Unión de nucleósidos mediante enlace fosfodiéster (nucleótido)

• Da un polímero lineal
• Dirección 5’-P 🡪 3’-OH
• Dos tipos de representaciones

o Abreviada
o Esquemática
25

ESTRUCTURA PRIMARIA ESTRUCTURA PRIMARIA
ABREVIADA ESQUEMÁTICA
Cada letra = un nucleótido ● cada letra = la base
● la pentosa = trazo vertical cuyo
ACGTACTTACGAATCAA extremos superior corresponde al
C1’ y el inferior al C5’
pAGATCGTGCACT
pApGpApTpCpGpCpApCpT
26

2. ESTRUCTURA SECUNDARIA
• Primer nivel de estructura espacial según conformación local
• DNA asociación de dos cadenas distintas de polinucleótidos

○ Doble hélice
• RNA una única molécula.
• El caso más representativo hoja de trébol del tRNA
27

3. ESTRUCTURA DE ORDEN SUPERIOR
• Incluyen las estructuras tridimensionales de mayor complejidad
• Muy complejas, variables y poco conocidas (ARN)
• ADN 🡪 superenrollamiento y estructuras resultantes
• ARNt 🡪 forma de «taladradora» del tRNA.

• Estructura = proteínas
28
2. PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS
● Densidad
○ A mayor contenido en G+C mayor densidad posee el ADN.
● Desnaturalización: temperatura de fusión

○ Mayor contenido G+C de una molécula 🡪 mayor cantidad de triples enlaces 🡪
mayor temperatura de fusión (Tm).
● Absorción de luz en el UV 🡪 máx. de absorción a 260nm (2600 Å)
● Propiedades en disolución
○ Carácter ácido
○ Carácter de las cadenas hidrofílicas
○ Viscosidad
29
2. PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS
• Formación de complejos quelato 🡪 P afinidad por cationes divalentes (Mg2+)
• Nucleótidos como moléculas de reserva energética
• Hidrólisis 🡪 en medio alcalino y ácido.
• Reactividad 🡪 ARN (hidrólisis en alcalino) /DNA (estable)

Hidrólisis en medio alcalino:
ADN 🡪 enlaces fosfodiéster – no / enlaces N-glicosídicos – no
ARN 🡪 enlaces fosfodiéster – sí / enlaces N-glicosídicos – no
Hidrólisis en medio ácido fuerte:
ADN 🡪 enlaces fosfodiéster – sí / enlaces N-glicosídicos – sí
ARN 🡪 enlaces fosfodiéster – sí / enlaces N-glicosídicos – sí
Hidrólisis en medio ácido débil:
ADN 🡪 enlaces fosfodiéster – no / enlaces N-glicosídicos – sí
ARN 🡪 enlaces fosfodiéster – no / enlaces N-glicosídicos – sí 30
II. EL ADN
1. Estructura
2. Organización. Condensación
31
EL ADN
1. CONCEPTOS
• Es un ácido nucleico que posee laBÁSICOS
información genética que determina
las características y el funcionamiento de un individuo.
• Es un polímero formado por cadenas de desoxirribonucleótidos.

o Eucariota: varios millones de pb
o Plásmidos y ADNmitocondrial: unos pocos miles de pb.
FUNCIÓN
• Depositario y transmisor de la información genética, organizada en genes
que codifican productos génicos (proteínas o ARNs)
• Expresión de información del ADN a la síntesis proteica.
32
EL ADN
¿DÓNDE SE ENCUENTRA EL ADN?
• Eucariotas: Animales, plantas, levaduras y hongos

o Núcleo
o Matriz mitocondrias
o Estroma cloroplastos
• Procariotas: Bacterias
o Citosol (no núcleo)
o Plásmidos
• Virus
o Dentro de la cápsida (sólo en algunos tipos)
33
EL ADN
COMPOSICIÓN: 1. CONCEPTOS BÁSICOS

o Azúcar 🡪 Pentosa (2-desoxi-D-ribosa)
o Ácido fosfórico 🡪 enlace fosfoéster
o Bases nitrogenadas 🡪 enlace N-glicosídico

⮚ Bases púricas: Adenina (A) y Guanina (G)
⮚ Bases pirimidínicas: Timina (T) y Citosina (C)
34
EL ADN
1. ESTRUCTURA
DISTINTAS FORMAS DE ADN
• ADN-B 🡪 Es la que presenta el ADN en

interacción con las proteínas
nucleares.
• ADN-A
• ADN-C
• ADN-Z
35
EL ADN
1. ESTRUCTURA
TIPOS DE HÉLICE DEL ADN
ADN-A ADN-B ADN-Z

Sentido de giro de la Dextrógiro Dextrógiro Levógiro
hélice
Forma y tamaño Más ancha y corta Intermedia Más estrecha y larga
Surco mayor Estrecho y profundo Amplio y profundidad Sin profundidad
media
Surco menor Amplio y no profundo Estrecho y profundidad Estrecho y profundo
media
Diámetro 25,5 Å 23,7 Å 18,4 Å
Distancia PB 2,3 Å 3,4 Å 3,8 Å
36
EL ADN
1. ESTRUCTURA
MODELO DE LA DOBLE HÉLICE (ADN-B)
Rosalin Franklin
Estudios de cristalografía y
difracción de rayos X
Imágenes del ADN por difracción

de rayos X (ADN-A y ADN-B)
37
EL ADN
1. ESTRUCTURA
Watson y Crick (1953)
Proponen una estructura para los ácidos

nucleicos en doble hélice (Premio Nobel, 1962)
Para realizar su trabajo emplearon dos tipos de

datos ya existentes:
• Los datos obtenidos por Chargaff (1950)
• Datos procedentes de estudios de difracción
de rayos X sobre fibras de ADN.
38
EL ADN EXTRA: https://www.ucm.es/data/cont/media/www/pag-56185/02-Estructura%20de%20los%20%C3%A1cidos%20nucl%C3%A9icos.pdf
1. ESTRUCTURA
● Doble hélice enrollada helicoidalmente “a
derechas” Dextrógira
● Enrollamiento plectonémico: Gira una respecto a

la otra
5´ 3´ 5´ 3´
● Nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster A T A
A T T
C G A
● Hélices unidas mediante puentes de hidrógeno T A
T
C
entre las bases C G G
○ Adenina = Timina (dos puentes de H). G C T
○ Guanina = Citosina (tres puentes de H) 3´ 5´
A
C 39
EL ADN
1. ESTRUCTURA
● Cadenas antiparalelas. 5’P → 3’ OH / 3’OH → 5’P.
○ Grupos fosfato opuestos
● El diámetro de la doble hélice es de 20 Å.
● Bases nitrogenadas estructuras planas

perpendiculares al eje de la doble hélice. Apiladas
unas sobre otras a una distancia de 3,4 Å.
Cada 10 bases, cada 34 Å se produce una vuelta Surco menor
completa de la doble hélice (360º).
Surco mayor
● Bases: reglas de apareamiento A-T y G-C.
40
EL ADN
1. ESTRUCTURA
41
EL ADN
1. ORGANIZACIÓN. CONDENSACIÓN
• Eucariotas: Animales, plantas, levaduras y hongos

o Núcleo: Bicatenario - Lineal
o Matriz mitocondrias: Bicatenario - Circular
o Estroma cloroplastos: Bicatenario – Circular
• Procariotas: Bacterias
o Citosol :Bicatenario circular de gran tamaño
o Plásmido: bicatenario circular
• Virus
o Monocatenario, bicatenario y lineal o circular
42
EL ADN
• ADN se asocia a proteínas de dos tipos (cromatina):
o Proteínas histónicas (histonas)
▪ Función: estabilizar la estructura del ADN
▪ Tipos: H1, H2A, H2B, H3, H4
o Proteínas no histónicas.
▪ Función: estructural y enzimática.
H2a, H2b, H3 y H4
H1
43
EL ADN
GRADOS DE CONDENSACIÓN
1. Nivel 1: Nucleosomas
2. Nivel 2: Solenoide
3. Nivel 3: Cromosoma interfásico
4. Nivel 4:Cromosoma metafásico
44
EL ADN
NIVEL 1. NUCLEOSOMAS. FIBRA 10 nm
• Unidad básica de la cromatina (146pb)
• “Estructura en cuentas de rosario”
• Cada nucleosoma está formado por 8

histonas + cadena de ADN doble.
• Grosor de 10 nm = diámetro
45
EL ADN
NIVEL 2. SOLENOIDES. FIBRA 30 nm
• Estructura observada in vitro.
• Contiene 6 nucleosomas por

cada vuelta de solenoide.
• Presencia de H1
46
EL ADN
NIVEL 3. CROMOSOMA INTERFÁSICO
• Presencia de lazos y superenrollamiento de la estructura anterior.
• Eucromatina: menor condensación.

o Replicación al principio Fase S Temprana
o Genes sí se expresan
• Heterocromatina: Máxima condensación.

o Replicación al final Fase S Tardía
o Genes no se expresan
47
III. EL ARN
1. Estructura
2. Tipos y organización
48
EL ARN
LOCALIZACIÓN Y ORGANIZACIÓN DEL BÁSICOS
1. CONCEPTOS ARN
● Eucariotas. Animales, plantas, levaduras y hongos: Monocatenario

○ Núcleo
○ Matriz mitocondrias
○ Estroma cloroplastos
○ Citosol
○ Ribosomas
● Procariotas. Bacterias: Monocatenario

○ Citosol
● Virus: Monocatenario / Bicatenario

○ Algunos dentro de la cápside 49
EL ARN
1. CONCEPTOS BÁSICOS
• Es un ácido nucleico que dirige la expresión de la información genética
del ADN a la síntesis de proteínas.
FUNCIÓN:
• Almacenar, regular, conservar y transmitir información.
• Interviene en la transmisión de la información desde el ADN hasta los

productos génicos.
50
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
FUNCIÓN:
• Eucariotas y Procariotas
o Función común relacionada con la expresión génica
✔ Maduración postranscripcional
✔ Traducción
• Virus
o En algunos el ARN juega el papel de portador de la información
genética.
51
INTRODUCCIÓN
COMPOSICIÓN:
o Azúcar 🡪 Pentosa (D-ribosa)
o Ácido fosfórico 🡪 enlace fosfoéster
o Bases nitrogenadas 🡪 enlace N-glicosídico

⮚ Bases púricas: Adenina (A) y Guanina (G)
⮚ Bases pirimidínicas: Uracilo (U) y Citosina (C)
52
EL ARN
1. ESTRUCTURA
• Son polirribonucleótidos formados por cadenas lineales (hebra sencilla)
• Longitud inferior al ADN
• Dirección de la cadena: 5’ 🡪 3’
• No se cumplen las reglas de Chargaff
• Tipos de estructura:
1. Primaria
2. Secundaria: solo en ARNt y ARNr
3. Terciaria: única para cada tipo de ARN 53
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
CARACTERÍSTICA EUCARIOTAS PROCARIOTAS
ARN mensajero (ARNm) Citoplasma. Estructura sencilla lineal SI SI
ARN de transferencia (ARNt) Específico para cada aa SI SI
ARN ribosómico (ARNr) SI SI
ARN nuclear heterogéneo (ARNhn) Precursor del ARNm SI NO
ARN nuclear pequeño (ARNsn) Forma parte de ribonucleoproteínas SI NO
nucleares pequeñas (snRNPs)
ARN mitocondrial (ARNmt) SI NO
ARN cloroplastos (ARNcl) SI NO
ARN citoplasmático pequeño SI NO
(ARNsc)
54
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
A. ARNm
• Es una copia de la información contenida en la secuencia de ADN
o Es complementaria a una sección de una cadena de la secuencia de
bases del ADN.
• Cadena lineal formada por ribonucleósidos (A,U,C y G)
• No tiene una conformación definida.
55
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
B. ARNt
Es el mediador entre el mensaje del ARNm y la secuencia de aminoácidos
del polipéptido que se está sintetizando. Transportan los aa hasta los
ribosomas para su incorporación en la cadena proteica que se se está
sintetizando.
Diferentes tipos de ARNt específicos para los aminoácidos
FUNCIÓN
● Actúan como moléculas adaptadoras en la síntesis de proteínas.
56
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
B. ARNt
ESTRUCTURA
• Secundaria (“hoja de trébol”):
o Brazo aceptor Unión aa
o Tres brazos o asas principales

✔ Brazo T: TΨC
✔ Brazo D: DHU (Dihidrouridina)
✔ Brazo del anticodón Unión codón (ARNm)
o Un brazo variable o asa menor

57
EL ARN
B. ARNt
ESTRUCTURA
• Terciaria (“L”):
58
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
C. ARNr
• Es el soporte estructural y
componente principal de los
ribosomas
• Conformación compleja
o Una hebra con regiones
helicoidales cortas
o Repliegues, flexible y deformable.
• Estructura terciaria
59
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
C. ARNr
ARNr Procariotas ARNr Eucariotas

18S Subunidad pequeña
16S Subunidad pequeña
28S Subunidad grande
23S Subunidad grande
5,8S Subunidad grande
5S Subunidad grande
5S Subunidad grande
60
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
C. ARNr
RIBOSOMAS
• Son conjuntos plurimoleculares de proteínas y ARNr (tamaño 20 - 23 nm)
• FUNCIÓN: síntesis de proteínas.
LOCALIZACIÓN EN EUCARIOTAS:
● Citosol
● Matriz mitocondrial
● Estroma de los cloroplastos
LOCALIZACIÓN EN PROCARIOTAS:
● Citosol 61
EL ARN
2. TIPOS DE ARN
C. ARNr
RIBOSOMAS
ESTRUCTURA:
• Dos subunidades:
o Las dos subunidades se asocian por interacciones no covalentes
o La S hace referencia al coeficiente de sedimentación: (ver notas)
PROCARIOTAS (70S)*
1. Subunidad grande (50S)
2. Subunidad pequeña (30S)
EUCARIOTAS (80S)
1. Subunidad grande (60S)
2. Subunidad pequeña (40S) 62
IV. EL FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA
1. Replicación de ADN
2. Transcripción ADN a ARN
3. Traducción
63
EL FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA
1. REPLICACIÓN 🡪 Duplicar el material
1. REPLICACIÓN genético
2. TRANSCRIPCIÓN 🡪 Síntesis de moléculas de ARNm
3. TRADUCCIÓN 🡪 ARNm 🡪 secuencia de aminoácidos de la proteína.
64
1. REPLICACIÓN
La molécula de ADN se duplica para dar lugar a

dos moléculas idénticas, con la misma secuencia a
la cadena madre.
Replicación Semiconservativa
● cada molécula "hija” contiene una cadena de la
molécula original y otra de nueva síntesis.
Origen de la replicación:
● Procariotas (bacterias): único Experimento Meselson y Stahl (1958)
● Eucariotas: múltiples orígenes de replicación https://www.youtube.com/watch?v=oQp7VlWpzNw
https://www.youtube.com/watch?v=4gdWOWjioBE
65
1. REPLICACIÓN
EXTRA: Experimento Meselson y Stahl (1958)
66
1. REPLICACIÓN
67
1. REPLICACIÓN
68
1. REPLICACIÓN
Es bidireccional y secuencial.
● En ambas direcciones
● En las dos cadenas
Es semi-discontinua
Síntesis siempre en 5’ 3’
● Hebra adelantada: continua
● Hebra retardada: discontinua
○ Fragmentos de Okazaki
69
1. REPLICACIÓN
70
1. REPLICACIÓN
FASES DE LA REPLICACIÓN
1. INICIACIÓN
1. Helicasas avanzan hacia el extremo 3’ desenrollando y abriendo el ADN
2. Girasas y Topoisomerasas eliminan la tensión
3. Las cadenas sencillas se recubren de la proteína SSB

• Estabiliza la cadena abierta e impide que se vuelva a enrollar
71
1. REPLICACIÓN
1. INICIACIÓN. ENZIMAS
HELICASA:
● Desenrolla y separa las cadenas de la doble hélice
● Rompe puentes de Hidrógeno entre bases
SSBP (PROTEINA DE UNION A CADENA SENCILLA):

● Estabiliza las cadenas sencillas
GIRASA Y TOPOISOMERASA:
● Relajan la tensión del resto de la molécula de ADN.
72
1. REPLICACIÓN
73
1. REPLICACIÓN
2. ELONGACIÓN
1. Primasa sintetiza cebadores (primers) en dirección 5´ 🡪 3´.
• Hebra adelantada 🡪 un cebador
• Hebra retardada 🡪 varios cebadores próxima a la horquilla pero
alejada del origen.
2. ADN Polimerasa III incorpora nucleótidos en la posición 3´ libre.
• Hebra adelantada 🡪 elongación continua
• Hebra retardada 🡪 la Polimerasa se separar cuando alcanza el cebador
del fragmento de Okazaki anterior.
74
1. REPLICACIÓN
2. ELONGACIÓN
3. ADN polimerasa I
• Elimina los cebadores (exonucleasa 5´🡪 3´).
• Sustituye cebadores por ADN (polimerasa 5´🡪 3´).
4. Ligasa une los fragmentos de Okazaki consecutivos
75
1. REPLICACIÓN
2. ELONGACIÓN. ENZIMAS
• ADN POLIMERASA:
✔ Función polimerasa:
⮚ Síntesis de la nueva cadena añadiendo un nuevo nucleótido al
extremo 3´ de la cadena en crecimiento.
⮚ No puede iniciar el crecimiento 🡪 solo puede elongar
⮚ El nucleótido que añade es complementario a la secuencia de la
cadena molde que está leyendo.
✔ Función exonucleasa 🡪 Eliminar nucleótidos 76

1. REPLICACIÓN
• PRIMASA:
✔ Sintetiza cortos fragmentos de ARN denominados cebadores o
primers complementarios a la molécula de ADN que se está
replicando.
✔ Se forman híbridos ARN-ADN que son reconocidos por la ADN
polimerasa para iniciar su función de elongación.
• LIGASA:
✔ Une los fragmentos de Okazaki entre sí y con la hebra conductora
para conseguir la continuidad de la cadena de nueva síntesis.
77
1. REPLICACIÓN
78
1. REPLICACIÓN. EUCARIOTAS
• Origen de replicación múltiple, iniciándose de manera simultánea en varios puntos
de cada cromosoma
• Cinco polimerasas en lugar de tres, que comparten las funciones de elongación,

exonucleasa, y corrección de errores
• El ADN se encuentra unido a histonas, por lo que durante la replicación se deshacen

y se reconstruyen de nuevo los nucleosomas.
79
2. TRANSCRIPCIÓN.
La transcripción es el proceso por el cual se sintetiza una molécula de ARN
utilizando como molde una cadena de ADN.
● Enzima ARN 🡪 polimerasa-ADN dependiente o Transcriptasa.

○ Dependiente de ADN
● En Eucariotas existen 3 tipos principales (5 tipos totales)

○ ARN polimerasa I: Síntesis del ARNr.
○ ARN polimerasa II: Síntesis del ARNm.
○ ARN polimerasa III: Síntesis del ARNt
● En procariotas existe 1 tipo 80

2. TRANSCRIPCIÓN.
FASES DE LA TRANSCRIPCIÓN
1. INICIACIÓN
1. ARN polimerasa reconoce y se une a una región
de ADN denominada promotor
2. La unión activa la helicasa que provoca la

separación de la doble hélice de ADN y puede
comenzar la síntesis de ARN.
Caja TATAAT
Caja TTGACA
- 10 – 35 nucleotidos de distancia Desplazamiento
ARN pol
- Hebra “sin sentido” 81
2. TRANSCRIPCIÓN.
2. ELONGACIÓN
1. Adición de ribonucleótidos por parte de la ARN polimerasa.
2. Solo se transcribe una cadena de ADN 🡪 cadena molde o codificadora.

○ La que no se transcribe 🡪 sin sentido, informativa o no molde.
3. ARN polimerasa se desplaza por el ADN en dirección 3´🡪 5 leyendo la

secuencia de bases nitrogenadas y seleccionando el ribonucleótido que
tiene una base complementaria a la del ADN.
○ El crecimiento del ARN tiene lugar en dirección 5´🡪3
82
2. TRANSCRIPCIÓN.
2. ELONGACIÓN
83
2. TRANSCRIPCIÓN.
3. TERMINACIÓN
1. Polimerasa alcanza una secuencia de ADN denominada señal de
terminación
2. La polimerasa se separa de la cadena de ADN
3. El ADN recupera su estructura de doble hélice
84
2. TRANSCRIPCIÓN.
4. MADURACIÓN
Es el proceso que requieren las moléculas de ARN transcrito para dar lugar a los
principales tipos de ARN (ARNm ARNt ARNr).
El ARNm sintetizado se denomina preARNm (ARNhn) que contiene intrones no

codificantes.
Eucariotas
• Exones 🡪 Sí transcripción / Sí traducción / Sí información para proteína.
• Intrones 🡪 Sí transcripción / No traducción / No información para proteína.
85
2. TRANSCRIPCIÓN.
4. MADURACIÓN
MADURACIÓN DEL ARNhn 🡪 ARNm:
1. Adición caperuza (CAP) en 5´

○ para proteger al ARN.
2. Adición cola poliA en 3´

○ Permite al ARNm salir al citoplasma.
3. SPLICING.
○ Eliminación de intrones: corte y empalme. 86
2. TRANSCRIPCIÓN.
4. MADURACIÓN
87
3. TRADUCCIÓN.
Proceso por el cual a partir de una molécula

de ARNm se sintetiza una proteína.
Los aminoácidos se van incorporando de

manera secuencial y precisa a la cadena de
polipéptidos en crecimiento con la
información contenida en la secuencia de
nucleótidos de ARNm.
Obtención de proteínas es posible gracias al

código genético.
88
3. TRADUCCIÓN.
CÓDIGO GENÉTICO
● UNIVERSAL. Es válido para todos los organismos sin excepción.
● NO es AMBIGUO. cada codón codifica un único aminoácido.
● DEGENERADO. varios codones pueden codificar un mismo aminoácido.

Este fenómeno se denomina redundancia
Los codones que codifican para el mismo aminoácido se denomina
sinónimos.
● CONTINUO y NO SOLAPADO. En el ARNm los codones se sitúan uno a

continuación del otro sin espacios y sin compartir ninguna base.89
3. TRADUCCIÓN.
● Para la síntesis de proteínas o traducción se requiere:
○ ARN mensajero
○ Aminoácidos (20)
○ Ribosomas
○ ARNt
○ Enzimas
90
3. TRADUCCIÓN.
● CODÓN 🡪 triplete de bases nitrogenadas que codifica un aminoácido.
● De los 64 codones posibles 🡪 4 bases / 3 repeticiones 🡪 4^3=64

○ 61 codifican para aminoácidos
■ Codón inicio = AUG = Metionina
○ 3 son secuencias de terminación

■ UAA
■ UAG
■ UGA Varios codones 🡪 un mismo aa
Un codón 🡪 un mismo aa
91
3. TRADUCCIÓN.
CÓDIGO GENÉTICO
92
3. TRADUCCIÓN.
CÓDIGO GENÉTICO
ACTIVIDAD
A PARTIR DEL SIGUIENTE ADN Y DE SU CADENA MOLDE (ROJO):

1. DEDUCE LA SECUENCIA DE ARNm
2. ELABORA LA SECUENCIA DE AMINOÁCIDOS
5´ATGGAGTGTGCCGACTTCTACGAGGGCGGAGCCGCGGCCCCCGAT 3´
3´TACCTCACACGGCTGAAGATGCTCCCGCCTCGGCGCCGGGGGCTA 5´
93
3. TRADUCCIÓN.
FASES DE LA TRADUCCIÓN
1. INICIACIÓN
1. El ribosoma se une al ARNm a la altura del
codón de inicio AUG.
2. Formación del Complejo de Iniciación.

○ El ARNt con el anticodón complementario al
inicio (UAC) se incorpora con el aminoácido
Metionina.
94
3. TRADUCCIÓN.
2. ELONGACIÓN
1. Incorporación de aminoacil ARNt
2. Enzima peptidil transferasa libera el aminoácido y

los une entre sí formando un dipéptido mediante
un enlace peptídico.
3. El ribosoma se desplaza en dirección 5´🡪 3´
Este proceso se repite cada vez que se incorpora un

nuevo aminoácido a la cadena polipeptídica.
95
3. TRADUCCIÓN.
3. TERMINACIÓN
1. Ribosoma alcanza en el ARNm un codón de
terminación 🡪 no existe un ARNt
complementario 🡪 Factores de liberación
2. Liberación de las subunidades del ribosoma, el

ARNm y el ARNt
96
3. TRADUCCIÓN.
Sitio P- Formación enlace peptidico
Sitio A- Entrada de Aminoacil RNA t
Met-ARNt 🡪Entra al sitio P

Resto ARNt🡪 Sitio A
97
3. TRADUCCIÓN.
98
V. ENZIMAS EMPLEADAS EN
BIOLOGÍA MOLECULAR
1. Nucleasas
2. Endonucleasas de Restricción
3. ADN Polimerasas
4. Otras
99
ENZIMAS EMPLEADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR
1. NUCLEASAS.
Las nucleasas son enzimas que cortan y degradan ácidos nucleicos mediante
hidrólisis del enlace fosfodiéster entre dos nucleótidos.
TIPOS
• Según el tipo de ácido nucleico que atacan podemos encontrar:
A. Ribonucleasas: rompen enlaces entre ribonucleótidos (ARN).
B. Desoxirribonucleasas: rompen enlaces entre desoxiribonucleótidos (ADN).
100
1. NUCLEASAS.
TIPOS
• Según el tipo de cadena que atacan:
A. Nucleasas bicatenarias
B. Nucleasas monocatenarias
• Según la situación del punto de corte:

A. Exonucleasas 🡪 último nucleótido
B. Endonucleasas 🡪 en el interior de un polinucleótido
• Según la especificidad del corte:

A. Nucleasas que cortan aleatoriamente.
B. Nucleasas que cortan en sitios concretos.
101
1. NUCLEASAS.
102
2. ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN.
• Origen bacteriano
• Cortan enlaces fosfodiéster del ADN 🡪 Rotura

de la doble hélice
• Reconocimiento de secuencias cortas de

ADNbc = Dianas de restricción
○ Cada enzima 🡪 una secuencia
• Tres tipos: enzimas de restricción de tipo I,

tipo I y tipo III.
103
104
A. TIPO I
• Efectúan un corte a una distancia aleatoria de hasta 1000 pb.
• No generan patrones específicos de fragmentos.
B. TIPO II. TIJERAS MOLECULARES

• Reconocen la diana de restricción 🡪 cortan puntos específicos
• Siempre cortan por los mismos puntos 🡪 Sí generan patrones específicos
• Son una herramienta fundamental en biología molecular
C. TIPO III
• Reconocen secuencias invertidas
• Cortan fuera de la diana a corta distancia. 105
APLICACIONES
• Creación de moléculas de ADN recombinante
1. Se cortan dos moléculas distintas de ADN con el mismo enzima de restricción.
2. Cuando los fragmentos de extremos cohesivos se mezclan, se unirán por la
complementariedad de bases de sus respectivas regiones monocatenarias.
3. Los nick que quedan en cada cadena se unen con una ligasa y se obtiene una
molécula híbrida recombinante.
4. De esta manera se puede insertar un determinado gen de un organismo en otro
diferente con la finalidad de producirla en grandes cantidades.
Ejemplo: la insulina humana de uso terapéutico es producida por

bacterias gracias a la tecnología de ADN recombinante.
106
APLICACIONES
• Patrones de restricción
1. La digestión con ese enzima genera un número discreto de
fragmentos de distintos tamaños.
2. Estos fragmentos se pueden separar según su tamaño por
electroforesis.
Con este procedimiento se obtiene un patrón de restricción que es único

para cada ADN 🡪 identificación de muestras, estudios filogenéticos o
detección de anomalías en el diagnóstico prenatal.
107
3. ADN POLIMERASAS.
• Permiten realizar copias de ADN mediante replicación.
• Las ADN polimerasas requieren que en el medio de reacción estén

presentes los cuatro desoxinucleótidos trifosfato, el ADN molde, los
cebadores y el Mg como cofactor.
• APLICACIÓN:
o PCR: Reacción en cadena de la polimerasa, permite obtener millones
de copias de una secuencia de interés.
o Las muestras se someten a ciclos de desnaturalización, hibridación
y polimerización.
108
4. OTRAS.
RETROTRANSCRIPTASA (TRANSCRIPTASA INVERSA)
• Son ADN polimerasas-ARN dependientes

o Sintetizan ADN utilizando ARN como molde.
• LOCALIZACIÓN:
o Retrovirus (ARN) 🡪 Se retrotranscribe a ADN en la célula infectada.
o APLICACIÓN:
o Amplificación de ARN 🡪 RT-PCR (Reverse transcription polymerase
chain reaction) ¡NO confundir con PCR Real Time!.
109
4. OTRAS.
LIGASAS
• Unen dos moléculas de ADN mediante la formación de enlaces

fosfodiéster entre los extremos 3´y 5´ de cada una de ellas.
• Pueden también reparar mellas en una de las cadenas
• APLICACIÓN:
o Unir fragmentos de ADN de distinta procedencia.
110
111
BIBLIOGRAFÍA
LIBROS:
• Manuel Mota Caparrós, Juan Bautista Cuenca Pardo y María Cruz Sipán Sarrión. 2016. Biología molecular y citogenética. Sanidad Anatomía patológica y citodiagnóstico;
laboratorio clínico y biomédico, Paranninfo ciclos formativos. Madrid, España.
• José Luque y Ángel Herráez. Texto ilustrado de biología molecular e ingeniería genética. Conceptos, técnicas y aplicaciones en ciencias de la salud . Elsevier. Madrid, España.
ISBN:84-8174-505-7
APUNTES
• Propios del grado en Biología
• https://www.ucm.es/genetica1/apuntes-de-genetica
VIDEOS CORTOS
https://www.youtube.com/watch?v=kIjXCLk7SmQ
https://www.youtube.com/watch?v=zo6QxDfO8Zo
https://www.youtube.com/watch?v=j8sLw_fdoY0&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=35
https://www.youtube.com/watch?v=aD70pdmrsfU&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=36
https://www.youtube.com/watch?v=dVDrdyEKF7Y&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=40
https://www.youtube.com/watch?v=wW90gn-M4kI&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=38
https://www.youtube.com/watch?v=_vsNWjMVRbY&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=46
https://www.ted.com/talks/richard_resnick_welcome_to_the_genomic_revolution
https://www.ted.com/talks/james_watson_on_how_he_discovered_dna
112
IMÁGENES COMPLEMENTARIAS
113
114
115
116
117
118
119
120

ADN 2’-desoxiadenosina 2’-desoxiguanosina 2’-desoxicitidina 2’-desoxitimidina
ARN Adenosina Guanosina Citidina Uridina
121
NUCLEÓTIDOS PURÍNICOS NUCLEÓTIDOS PIRIMIDÍNICOS

Sufijo “-ilico”
ADN dAMP dGMP dCMP dTMP
desoxiadenilato desoxiguanilato desoxicitidilato desoxitimidilato
Desoxiadenosina-5’- Desoxiguanosina-5’- Desoxicitidina-5’- Desoxitimidina-
fosfato fosfato fosfato 5’-fosfato
ARN AMP GMP CMP UMP

Adenilato Guanilato Citidilato Uridilato
Adenosina-5’-fosfato Guanosina-5’-fosfato Citidina-5’-fosfato Uridina-5’-fosfato
122
UT5 ÁCIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS ASOCIADAS
Ver videos
https://www.ted.com/talks/richard_resnick_welcome_to_the_genomic_revolution
https://www.ted.com/talks/james_watson_on_how_he_discovered_dna

Ut5 Ácidos Nucleicos y Enzimas Asociadas

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BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA

CICLO FORMATIVO DE GRADO SUPERIOR DE LABORATORIO CLÍNICO Y BIOMÉDICO

I. LOS ÁCIDOS NUCLEICOS

IV. FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA

V. ENZIMAS EMPLEADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR

• Polímeros de gran tamaño —> peso molecular

• Los nucleótidos se unen por enlaces

• TIPOS de ácidos nucleicos

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

Ácidos nucleicos = Biopolímero = Polinucleótidos

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

Nucleósido = base nitrogenada + pentosa

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

ADN pentosa = desoxirribosa 🡪 prefijo DESOXI- 8

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS

ARN Adenosina Guanosina Citidina Uridina

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

● Dinucleótido 🡪 unión de 2 nucleótidos mediante enlace fosfo-diester típico

● Oligonucleótido 🡪 Cadena lineal de hasta 10 nucleótidos

● Polinucleótido 🡪 Cadena lineal de muchos nucleótidos (>10 nucleótidos)

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

UNIÓN ENTRE NUCLEÓTIDOS:

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

3. Ácido + sufjijo -ilico

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

BN PENTOSA NUCLEÓSIDO NUCLEÓTIDO

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

2. Componente neutro: Azúcares

1. Componente básico: Bases nitrogenadas

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

● Tienen en común un átomo de fósforo

● Se une al carbono 5’ de la pentosa

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

● Monofosfatos (Pi): Del ácido fosfórico (H3PO4) 🡪 Nucleótido

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

Ribosa (ARN) Desoxirribosa (ADN)

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

Edwin Chargaff (1950)

o Las proporciones de las bases nitrogenadas

o Estas reglas se cumplen en el ADN de doble

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

o Descubrimientos en relación con la

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

3. Estructuras de orden superior

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

• Unión de nucleósidos mediante enlace fosfodiéster (nucleótido)

• Dos tipos de representaciones

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

• DNA asociación de dos cadenas distintas de polinucleótidos

• RNA una única molécula.

• El caso más representativo hoja de trébol del tRNA

1. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

• Muy complejas, variables y poco conocidas (ARN)

• ADN 🡪 superenrollamiento y estructuras resultantes

• ARNt 🡪 forma de «taladradora» del tRNA.