UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

“ DILUTORES USADOS EN LA DILUCION,

CONGELACION Y CRIOPRESERVACION
DEL SEMEN OVINO ”
CONSERVACION DE GAMETOS
 DOCENTE. DIANA SANCHEZ HERENCIA

 PRESENTADO POR:
 MVZ . RONAL BENITO TITO ROSAS
INTRODUCCION:
 El objetivo de la criopreservación es mantener la viabilidad y funcionalidad de los
espermatozoides a bajas temperaturas; sin embargo, esta provoca daños y deficiencias en
los espermatozoides. Al momento de la criopreservación, los espermatozoides se exponen a
impactos físicos y químicos que dificultan la viabilidad, disminuyen la motilidad, dañan el
acrosoma y disminuyen su fertilidad (Mata-Campuzano et al., 2015).
 El mayor avance en diluyentes de semen surgió con el descubrimiento de la yema de huevo
(1939) (Cavestany, 1994). El diluyente más utilizado para semen fresco y refrigerado es la
leche descremada ultrapasteurizada (UHT). Existen también diluyentes comerciales que
agregan a las funciones de protección del equilibrio ácido-base y nutrición del
espermatozoide, la presencia de antibióticos que inhiben la proliferación de gérmenes que
modifican la composición del medio.
 La criopreservación de semen y la inseminación artificial (IA) son técnicas reproductivas
utilizadas en la mayoría de especies domésticas (Juliani y Henry, 2008); sin embargo, la IA
con semen congelado no está muy difundida en ovinos, debido principalmente a las bajas
tasas de fertilidad obtenidas (Salamon y Maxwell, 2000; Santiani et al., 2007; Barbas et al.,
2013). La baja fertilidad podría deberse a los daños ocasionados en los espermatozoides
durante el proceso de criopreservación (Aisen et al., 2002; Ruiz et al., 2007;
OBJETIVOS

 Evaluar la eficacia de los diferentes diluyentes utilizados en la

congelación y/o criopreservacion del semen ovino.
 Determinar que diluyente es el que mantiene mejor las características
de viabilidad, motilidad del semen ovino, pos descongelación para
su uso en la inseminación artificial
CONTENIDO
 SEMEN OVINO; Salamon (1990) describe al semen como el líquido generativo del macho, ya que contiene los gametos
masculinos (espermatozoides). Lo forman dos principales constituyentes: el plasma seminal (74%) y los espermatozoides (26%).
 CARACTERISTICAS DEL SEMEN FRESCO
 1. Macroscópicas
 a. Volumen 1,2 ml con una diferenciación del volumen entre 0,8 y 1, 5 ml.
 b. Color considera uniformes los colores que van del blanco al amarillento.
 c. Densidad va desde un semen acuoso, lechoso, lechoso-cremoso, hasta un cremoso, estando directamente relacionada con la
concentración.
 d. pH normal, cuando se encuentra en el rango entre 6.2 y 6.8.
 2. Microscópicas
 a. Motilidad individual , El porcentaje que se indica son aquellos espermatozoides con movimiento rectilíneo progresivo del total
de espermatozoides aceptados, siendo el valor mínimo aceptable para la inseminación del 50 %. Muy buena: 80 – 100 % de
células móviles. Buena: 60 – 79 % de células móviles. Regular: 40 – 59 % de células móviles. Mala: < 40 % de células móviles.
  b. Vigor , se evalúa el vigor. La escala utilizada es de 0 a 4, valorando como 0 los espermatozoides inmóviles y como 4 los que
van avanzando rápidamente por el campo y es muy complicado seguirles visualmente. Se considera como valor mínimo aceptable
de 3.
 c. Concentración. El semen de carnero de buena calidad contiene 3,5-6,0 mil millones (3,5 – 6,0 x 109 de espermatozoides/ ml).
DILUTORES
 Los diluyentes son compuestos químicos, o conjunto de sustancias que preservan la viabilidad y fertilidad del semen
a la vez que posibilitan el procesamiento de un número previamente establecido de espermatozoides, acondicionado
en envases adecuados, de un tamaño conveniente, los diluyentes evaluados en el presente estudio son:
 Glicerol al 6% (fructuosa, Glucosa)
 Etilenglicol 4.5% (fructuosa, Glucosa)
 Leche entera
 Leche descremada
 Verde R – IMV (a base de TRIS mas 20% se yema de huevo.
 Andromet (contiene fosfolípidos, TRIS, ácido cítrico, azúcares, antioxidantes, tampones, glicerina, agua bidestilada
y antibióticos).
 Triladyl (contiene TRIS, un amortiguador sintético y además contiene agua bidestilada, glicerol, ácido cítrico y
fructuosa).
 Ovixcell (compuesto por Agua, Sal, Azúcar, Electrolitos, Glycerol, Antibióticos y Proteína animal)
 TRIS(hidroximetil aminometano-GLUCOSA-YEMA (T-G-Y),
 CITRATO-YEMA (C-Y)
 RESULTADOS

Luis Ruiz
Cash Maria - uruguay
Escudero Luis - ecuador
Ramos Lourdes - Bolivia
CONCLUSIONES
 El empleo de glicerol, como crioprotector y fructosa, como monosacárido en los
diluyentes de semen ovino para el proceso de criopreservación, previenen la disminución
de la calidad seminal en comparación con el etilenglicol y la glucosa.
 Considerando un programa de inseminación artificial con semen fresco se consideran
aptos cualquiera de los tres diluyentes en estudio, leche entera, leche descremada o el
diluyente Verde® -IMV.
 Se ha determinado diferencia notables en cuanto a la motilidad masal (98,60 %),
motilidad individual (4,95 ptos) y vitalidad espermática (97,60 %) al utilizar Triladyl que
es mejor en relación a los demás diluyentes usados (andromet y ovixcell) de
criopreservación empleados.
 El mejor tiempo de equilibrio es de cuatro horas con el dilutor T-G-Y que mostró mayor
porcentaje de motilidad espermática en el semen diluido, por dilutores y post-
descongelamiento en comparación con los dilutores TRILACYL y C-Y, en ese sentido el
dilutor T-G-Y es la mejor opción para prevenir daños en los espermatozoides durante su
proceso de criopreservación, lográndose mayores tasas de fertilidad al momento de
realizar la inseminación artificial