UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
“ DILUTORES USADOS EN LA DILUCION,
CONGELACION Y CRIOPRESERVACION
DEL SEMEN OVINO ”
CONSERVACION DE GAMETOS
DOCENTE. DIANA SANCHEZ HERENCIA
PRESENTADO POR:
MVZ . RONAL BENITO TITO ROSAS
INTRODUCCION:
El objetivo de la criopreservación es mantener la viabilidad y funcionalidad de los
espermatozoides a bajas temperaturas; sin embargo, esta provoca daños y deficiencias en
los espermatozoides. Al momento de la criopreservación, los espermatozoides se exponen a
impactos físicos y químicos que dificultan la viabilidad, disminuyen la motilidad, dañan el
acrosoma y disminuyen su fertilidad (Mata-Campuzano et al., 2015).
El mayor avance en diluyentes de semen surgió con el descubrimiento de la yema de huevo
(1939) (Cavestany, 1994). El diluyente más utilizado para semen fresco y refrigerado es la
leche descremada ultrapasteurizada (UHT). Existen también diluyentes comerciales que
agregan a las funciones de protección del equilibrio ácido-base y nutrición del
espermatozoide, la presencia de antibióticos que inhiben la proliferación de gérmenes que
modifican la composición del medio.
La criopreservación de semen y la inseminación artificial (IA) son técnicas reproductivas
utilizadas en la mayoría de especies domésticas (Juliani y Henry, 2008); sin embargo, la IA
con semen congelado no está muy difundida en ovinos, debido principalmente a las bajas
tasas de fertilidad obtenidas (Salamon y Maxwell, 2000; Santiani et al., 2007; Barbas et al.,
2013). La baja fertilidad podría deberse a los daños ocasionados en los espermatozoides
durante el proceso de criopreservación (Aisen et al., 2002; Ruiz et al., 2007;
OBJETIVOS
Evaluar la eficacia de los diferentes diluyentes utilizados en la
congelación y/o criopreservacion del semen ovino.
Determinar que diluyente es el que mantiene mejor las características
de viabilidad, motilidad del semen ovino, pos descongelación para
su uso en la inseminación artificial
CONTENIDO
SEMEN OVINO; Salamon (1990) describe al semen como el líquido generativo del macho, ya que contiene los gametos
masculinos (espermatozoides). Lo forman dos principales constituyentes: el plasma seminal (74%) y los espermatozoides (26%).
CARACTERISTICAS DEL SEMEN FRESCO
1. Macroscópicas
a. Volumen 1,2 ml con una diferenciación del volumen entre 0,8 y 1, 5 ml.
b. Color considera uniformes los colores que van del blanco al amarillento.
c. Densidad va desde un semen acuoso, lechoso, lechoso-cremoso, hasta un cremoso, estando directamente relacionada con la
concentración.
d. pH normal, cuando se encuentra en el rango entre 6.2 y 6.8.
2. Microscópicas
a. Motilidad individual , El porcentaje que se indica son aquellos espermatozoides con movimiento rectilíneo progresivo del total
de espermatozoides aceptados, siendo el valor mínimo aceptable para la inseminación del 50 %. Muy buena: 80 – 100 % de
células móviles. Buena: 60 – 79 % de células móviles. Regular: 40 – 59 % de células móviles. Mala: < 40 % de células móviles.
b. Vigor , se evalúa el vigor. La escala utilizada es de 0 a 4, valorando como 0 los espermatozoides inmóviles y como 4 los que
van avanzando rápidamente por el campo y es muy complicado seguirles visualmente. Se considera como valor mínimo aceptable
de 3.
c. Concentración. El semen de carnero de buena calidad contiene 3,5-6,0 mil millones (3,5 – 6,0 x 109 de espermatozoides/ ml).
DILUTORES
Los diluyentes son compuestos químicos, o conjunto de sustancias que preservan la viabilidad y fertilidad del semen
a la vez que posibilitan el procesamiento de un número previamente establecido de espermatozoides, acondicionado
en envases adecuados, de un tamaño conveniente, los diluyentes evaluados en el presente estudio son:
Glicerol al 6% (fructuosa, Glucosa)
Etilenglicol 4.5% (fructuosa, Glucosa)
Leche entera
Leche descremada
Verde R – IMV (a base de TRIS mas 20% se yema de huevo.
Andromet (contiene fosfolípidos, TRIS, ácido cítrico, azúcares, antioxidantes, tampones, glicerina, agua bidestilada
y antibióticos).
Triladyl (contiene TRIS, un amortiguador sintético y además contiene agua bidestilada, glicerol, ácido cítrico y
fructuosa).
Ovixcell (compuesto por Agua, Sal, Azúcar, Electrolitos, Glycerol, Antibióticos y Proteína animal)
TRIS(hidroximetil aminometano-GLUCOSA-YEMA (T-G-Y),
CITRATO-YEMA (C-Y)
RESULTADOS
Luis Ruiz
Cash Maria - uruguay
Escudero Luis - ecuador
Ramos Lourdes - Bolivia
CONCLUSIONES
El empleo de glicerol, como crioprotector y fructosa, como monosacárido en los
diluyentes de semen ovino para el proceso de criopreservación, previenen la disminución
de la calidad seminal en comparación con el etilenglicol y la glucosa.
Considerando un programa de inseminación artificial con semen fresco se consideran
aptos cualquiera de los tres diluyentes en estudio, leche entera, leche descremada o el
diluyente Verde® -IMV.
Se ha determinado diferencia notables en cuanto a la motilidad masal (98,60 %),
motilidad individual (4,95 ptos) y vitalidad espermática (97,60 %) al utilizar Triladyl que
es mejor en relación a los demás diluyentes usados (andromet y ovixcell) de
criopreservación empleados.
El mejor tiempo de equilibrio es de cuatro horas con el dilutor T-G-Y que mostró mayor
porcentaje de motilidad espermática en el semen diluido, por dilutores y post-
descongelamiento en comparación con los dilutores TRILACYL y C-Y, en ese sentido el
dilutor T-G-Y es la mejor opción para prevenir daños en los espermatozoides durante su
proceso de criopreservación, lográndose mayores tasas de fertilidad al momento de
realizar la inseminación artificial