ENTEROBACTERIAS OPORTUNISTAS

PROTEUS. Existen dos especies de inters mdico: P. mirabilis y P. vulgaris Bacilo gram - , anaerobio facultativo, tolera bilis, pH alcalino, olor desagradable, movil. Produce infeccin solo fuera del tubo intestinal: infeccin urinaria, bacteriemia, neumona y lesiones focales en pacientes debilitados o en los que reciben lqs. por va intravenosa.

  

Proteus es un genero de bacterias gramnegativas, que incluye patgenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario. Las especies de Proteus normalmente no fermentan lactosa por razn de tener una galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI. Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mtiles. Tienden a ser organismos pleomrficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa. Con la excepcin de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan negativos con la prueba del indol.

IDENTIFICACIN DE LABORATORIO
   

Produce ureasa. Se diferencian por la prueba del Indol: M- V+ La ureasa hidroliza la urea y libera NH3. La orina se vuelve alcalina fomentando la formacin de clculos. La motilidad rpida de Proteus contribuye a su capacidad invasora de las vas urinarias. Cepas motiles tienen ag. H adems del ag.O

Morfologa
  

La estructura antignica est compuesta por antgeno somtico O, flagelar H y superficial K. El antgeno flagelar H contribuye a la capacidad invasora de las vas urinarias. La variante X del antgeno somtico O est presente en algunas cepas de P. mirabilis. Otros grupos antignicos definidos son el OX2, OX19 y OXK. El grupo OX19 (y a veces el grupo OX2) da reacciones cruzadas (aglutinacin) en pacientes con Rickettsia prowazekii y sa es la base de la prueba de Weil Flix.

Serologa, cepas OX-19,2,K comparte polisc. especif. (Ag.) con rickettsias productoras del tifus y fiebre maculosa, y aglutinan con Acs. del suero de pacientes infectados por este ltimo: Prueba de Weil-Felix.

Patogenia
 

Hay tres especies que causan infecciones oportunistas en el hombre: P. vulgaris, P. mirabilis, y P. penneri. Causan infecciones urinarias (ms del 10% de complicaciones del tracto urinario incluyendo clculos y lesiones celulares del epitelio renal), enteritis (especialmente en nios), abscesos hepticos, meningitis, otitis media y neumona. Es un frecuente invasor secundario de quemaduras y heridas, as como infecciones nosocomiales. Todas las especies de Proteus son resistentes a la ampicilina. P. mirabilis es sensible a la penicilina.

Transmisin: el habitad normal es el intestino humano, agua y suelo. Diseminacin por contacto, la infeccin es con frecuencia endgena. Tratamiento: varan en su sensibilidad Penicilinas, Aminoglucsidos y cefalosporinas. P. vulgaris suele ser mas resistente. Prevencin: con buena tcnica de asepsia intrahospitalaria. No se dispone de vacuna.

Factores de virulencia
     

Flagelos Fimbrias Protenas de membrana Ureasa Hemolisinas Endotoxinas

Factores Predisponentes


Las infecciones causadas por estas y otras enterobactereas se producen por la aparicin de factores patolgicos predisponentes. F. P. Locales Facilitan la penetracin microbiana por rotura fsica o fisiolgica de las barreras cutneo-mucosas: ciruga, intubacin, quemaduras. F.P.Generales Disminucin de defensas inespecficas: fagocitosis y respuesta inmune del husped, por diabetes, cirrosis, hemopatas malignas.

Klebsiella: K. Pnuenoniae, K. Oxytoca, y K. rhinoscleromatis

   

 

Rara vez se asocia con infeccin excepto como germen oportunista en pacientes comprometidos. Caractersticas: Bacilo gram -, cpsula+/, respiracin aerobia y anaerobia Identificacin: Fermentan lactosa, toleran bilis, oxidasa negativos. Diferenciacin bioqumica. Muestras: Orina, sangre, pus, cfalo-raqudeo, esputo u otro segn la localizacin del proceso patolgico. Frotis: presencia de cpsula. Cultivo, desarrollan colonias grandes y mucoides

Patogenia: Todas poseen endotoxinas y fimbrias u otras adhesinas. Capsulas, cuando existen inhiben la fagocitosis Habitad normal intestino del hombre y animales, y medio inanimado hmedo: suelo y agua. Transmisin: Infeccin endgena o por contacto. Gran capacidad de sobrevivir en las manos. La Klebsiella es uno de los indicadores de contaminacin intrahospitalaria.

Enfermedades


K. pneumoniae, presente en vas respiratorias y en excremento del 5% de individuos normales. Causa 3% de neumonas bacterianas, posible necrosis hemorrgica extensa del pulmn. En ocasiones infecta vas urinarias y produce bacteriemias con lesiones focales en pacientes debilitados. K. pneumoniae y K. oxytoca produce infecciones adquiridas en el hospital. K.ozaenae produce infeccin mucosa nasal. K. rhinoscleromatis aislado del granuloma destructivo de nariz y faringe (Rinoscleroma).

Tratamiento: Presenta resistencia a antibiticos mediada por plsmidos. Determinar la sensibilidad si est indicado el tratamiento. Prevencin: atencin escrupulosa a las tcnicas de asepsia y lavado de manos en hospitales.

Overview of Differential Features of TSI and LIA

Triple Sugar Iron (TSI) Agar source of amino acids which may be deaminated (alkaline rx.) amino acid added to note its decarboxylation (alkaline rx.) fermentable sugar(s) (acid rx.) peptone, proteose peptone, beef extract, yeast extract none lactose (1%), sucrose (1%), glucose (0.1%) phenol red: net acid = yellow, net alkaline = red sodium thiosulfate

Lysine Iron Agar (LIA) peptone, yeast extract, lysine

lysine

glucose (0.1%) brom-cresol purple: net acid = yellow, net alkaline = purple sodium thiosulfate

pH indicator source from which H2S may be produced indicator of H2S production

ferrous sulfate

ferric ammonium citrate

Triple Sugar Iron (TSI) Agar Note the relative amounts of sugars in TSI Agar according to the table seen above. By the degree of acid produced from fermentation, differentiation can be made between non-fermenters, glucose-fermenters (which produce a relatively small amount of acid) and those which ferment lactose and/or sucrose in addition to glucose (producing a relatively large amount of acid which diffuses througout the medium and easily overneutralizes the aerobic deamination reaction in the slant). Organisms which produce hydrogen sulfide from the reduction of thiosulfate are easily detected; the H2S reacts with the iron in the medium to produce ferrous sulfide, a black precipitate. The medium is inoculated with the needle, first stabbing down the center to the bottom of the tube and then streaking up the slant. Incubation is for one day at 37C. The various combinations of reactions are explained and illustrated below. (Tube "C" is the uninoculated control tube which shows an orange (neutral) reaction throughout.)

corresponding tube no. above

4*

deamination of amino acids (aerobic alkaline rx.)

glucose fermentation (minor acid rx.)

lactose and/or sucrose fermentation (major acid rx.)

H2S production (black color)

+**

typical examples

Pseudomonas (a non-enteric)

Morganella Providencia Shigella

Citrobacter Salmonella Edwardsiella

E. coli Enterobacter Klebsiella

Proteus H2S+ E. coli lactose+ Salmonella

* Tube 4: Much gas is often seen for this tube, evidenced by cracks in the medium. Also, methyl red-negative organisms which ferment lactose and/or sucrose may show a "reversion" toward an alkaline reaction as neutral products are formed from some of the acid. Note the slight orange to red color at the tip of the slant in tube 4A. How might such a tube look at two or more days of incubation? (Regarding the methyl red test, recall the activities of enterics in MR-VP Broth which are illustrated here.) ** Tube 5: It should be noted that an excessive amount of acid may be produced such that the black iron sulfide precipitate will break down and not be seen. In this case, the tube will look like tube 4.

Lysine Iron Agar (LIA) Here is another multipurpose medium in one tube. Reactions for lysine decarboxylation (anaerobic alkaline reaction overneutralizing the acid formed from glucose fermentation), lysine deamination (formation of redcolored products at the top of the medium) and H2S production (black precipitate) can be made as seen and explained below. (Tube "C" is an uninoculated "control" tube showing the neutral, purple color.)

correspondin g tube no. above deamination of amino acids (aerobic alkaline rx.) deamination of lysine (dark red slant) decarboxylat ion of lysine (anaerobic alkaline rx.) glucose fermentation (acid rx.)

4*

typical examples

Citrobacter

Proteus Providencia Morganella

E. coli Enterobacter

Salmonella Edwardsiella

* H2S-positive reaction usually seen for Salmonella and Edwardsiella is shown for Tube 4. LIA is not as reliable an indicator of H2S as are KIA and TSI.