Características morfológicas

José Marín Rosas Castor

Aspergillus SETAS, Saccharomyces Amoeba Paramecium

FILAMENTOSOS Organsimos cerevisiae
macroscópicos LEVADURAS
Bacterias
Morfología Morfología
Macroscópica Microscópica

 La observada sin  Es observada con la ayuda de

microscopio un microscopio

 Se puede observar el  Se pueden observar las células

conjunto de células o individuales
colonias
Morfología microscópica de BACTERIAS
Morfología microscópica de BACTERIAS

bacterias
 Morfología macroscópica de BACTERIAS
Crecimiento en medio sólido (Colonias)

 Color
 Consistencia : Cremosa, lisa, algodonosa,
etc
 Aspecto del reverso
 Morfología macroscópica de BACTERIAS

Crecimiento en medio líquido

 Crecimiento superficial (nata)
 Crecimiento sedimental (sedimento)
 Crecimiento homogéneo (turbidez)
 Coloración
Morfología de hongos

¿Qué es un hongo?

 Son organismos eucarióticos que producen

esporas, no contienen clorofila y son
heterótrofos.
 Tienen paredes celulares compuestas de
quitina.
 Casi todos son multicelulares.

9
 Importancia de los hongos
En las Blue Mountais de Oregón, en el noroeste de Estados Unidos, existe una
alfombra, con un grosor unicelular y 965 hectáreas de extensión, de micelio de
la especie de hongos Armillaria Ostoyae, también conocida como Seta de la
Miel. 
Dicha alfombra perdura desde hace más de 2200 años y se considera el
organismo terrestre más grande que existe. 

Las hifas que componen el

micelio constituyen una
enmarañada red que se
extiende sobre y bajo la
superficie.
 13

Ascomicetos  Grupo más numeroso.

 Se encuentran en todo tipo de hábitat.
o Ascomycota  Pueden ser unicelulares y talófitos.
Basidiomycota o Basidiomicetos
Zygomicetos
Chytridiomycota
Hongos
Poseen pared celular
y esporas

Aspergillus
FILAMENTOSOS

Saccharomyces
cerevisiae
LEVADURAS SETAS,
Organsimos
macroscópicos
 Morfología de hongos
 Los hongos filamentosos están formados por hifas

Micelio
aéreo

Micelio
Micelio vegetativo
septado

 Los hifas aéreas constituyen el Micelio aéreo

 Las hifas del micelio aéreo forman las esporas
 Las esporas de los hongos suelen ser pigmentadas
 CRITERIOS MORFOLÓGICOS PARA IDENTIFICAR Y
CLASIFICAR HONGOS FILAMENTOSOS

TIPOS DE HIFAS

 Septadas
 No septadas
 Lisas o rugosas
 Mononucleadas
 Multinucleadas Aseptadas mononucleadas Septadas mononucleadas

Septadas polinucleadas
 Morfología de Hongos
Esporas fúngicas formadas a Esporas fúngicas formadas a
partir del micelio vegetativo partir del hifas especializadas

Blastosporas Macroconidios

Clamidosporas
Microconidios

Artrosporas
Esporangiosporas
 Colonia elevada, Hifas tabicadas.
blanca verdosa con
Macroconidias que
bordes regulares y
micelio aéreo se tabican en
algodonoso microconidias con
blastosporas

Colonia blanca, Hifas tabicadas con

algodonosa, con centro vacuolas en su inteior
beige, bordes del cual se desprenden,
regulares, micelio microconidias
aéreo algodonoso redondas unidas

Colonia algodonosa,
Fálides
blanquecina, elevada,
multiverticiladas con
esponjosa, centro beige
filosporas unicelulares
y miceleo aéreo
en cadenas largas en
blanquecino
hifas aseptadas

Colonia blanca elevada,

Hifas tabicadas,
esponjosa, tupida y
micelio aéreo
esporas sueltas
blanquecino, esponjoso, como blastosporas
con fondo anaranjado
claro
Morfología microscópica de LEVADURAS

 Hongos unicelulares

 Son ovales, esféricas o cilíndricas

 Se dividen por gemación o fisión

 REPRODUCCIÓN DE LEVADURAS

SEXUAL ASEXUAL

 Producción de Ascosporas  Gemación

 Fisión binaria
REPRODUCCIÓN SEXUAL Y ASEXUAL DE LEVADURAS
Morfología de LEVADURAS
 Características de las algas
 Son organismos autótrofos
 En su pared celular esta formada
principalmente por celulosa y otros
polisacáridos.
 Algunas tienen pared celular de sílice o
proteínas.
 pH mínimo 1.-2
 Temperaturas: 0°C-10°C, 20°C- 35°C, 40°C
-Psicrófila: Fragilaria sublinearis (0 -7-12°C)
-Termófila: Cyanidium caldarium (56°C)
Criterios de clasificación

 Composición química de la
pared celular
 Tipo de pigmento fotosintético
 Tipo de material de reserva
 Tipo de flagelo
 Ciclo de vida
Clasificación de las algas
 Algas verdes

Sphaerocystis Vólvox Pediastrum duplex

Algas doradas o Chrysophytea y

diatomeas

Synura Asterionella Diatomeas

 Algas pardas (Phaeophyceae)

Sargassum muticum
Melanosiphon intestinalis

Algas rojas
(Rhodophyta)

Gelidium Botryoglossum farlowianum Aglaothamnion tripinnatum

 Diversidad de Algas

Algas Unicelulares Algas Coloniales

Filamentosas No Filamentosas

Ramificadas No Ramificadas
Cloroplastos: Encierran los pigmentos fotosintéticos
MORFOLOGÍAMICROSCÓPICASDEALGAS
EJERCICIO DE IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA MACROSCÓPICA
 José Marín Rosas Castor

Microscopia y
tinciones
 Historia del microscopio

Zacharias Janssen

Hans and Zacharias Janssen

1590

Antonie van Leeuwenhoek

1676

Ernst Ruska and Max Knoll

1931
Microscopia óptica
Microscopia de contraste
Microscopia de interferencia
Microscopia de fuerza atómica
Microscopia confocal
Microscopia electrónica de barrido
Microscopia electrónica de transmisión
 Microscopia óptica
Campo Claro
 El poder de resolución del microscopio esta
restringido por los valores limitados de la AN
y de la longitud de onda visible.
Microscopia óptica Campo Claro
Resolución de un microscopio óptico
l
𝒅= l= Longitud de onda de la luz visible (300-
𝟐 𝑵𝑨 700 nm)
n= Índice de 𝑵𝑨=𝒏𝐬𝐢𝐧
( )
𝜶
refracción del material NA= Apertura numérica
𝟐 máximo que puede entrar y
= La mitad del ángulo de aceptancia
salir de la lente

Máxima resolución alcanzable es de 0.2mm con

objetivos de 1000 aumentos

Para objetivos mayores a 100 aumentos:

ACEITE DE INMERSIÓN

Evita el aire entre la preparación y el objetivo

Aumenta la capacidad de captación de la luz
 Positivas Negativas
Preparaciones para
Preparaciones para análisis
análisis microscópico
microscópico

Frescas Secas Microcultivos

Frotis

Cultivos en
Gota portaobjetos
pendiente
Tinciones

Entre porta y
cubre
Simples Específicas
Diferenciales o
selectivas
Técnicas para incorporación de
muestras en fresco
 PREPARACIONES FRESCAS

Entre porta y cubre Gota Pendiente

PREPARACIÓN DE MICROCULTIVO

Para hongos filamentosos

Evita daños morfológicos
El hongo crece sobre un cubreobjetos se coloca sobre
un portaobjetos
 TINCIONES

Sin tinción Tinción simple Tinción diferencial

Candida sp Cryptococcus neoformans Levaduras

Al aumentar el contraste se facilita su observación

Colorantes orgánicos
Afinidad entre los colorantes y los componentes celulares

Azul de metileno Safranina Cristal violeta

 TIPOS DE COLORANTES

Tipo Usos Parte celular Ejemplos

Básicos Tiñen la célula Cromatina nuclear de pro y Clorhidrato (-) de azul de metileno
bacteriana eucariotas (+). la safranina, la fucsina básica,
uniformemente (ácidos el cristal violeta
nucleicos y los
polisacáridos ácidos)

Äcidos No tiñen la célula Tiñen estructuras Eosinato (-) de sodio (+),la fucsina
bacteriana, pueden usarse citoplasmáticas de las ácida y el rojo Congo.
como color de contraste
células eucariotas (Rx
(coloración negativa).
básicas)
Ej:
Liposolubles Se combinan con los Negro Sudán.
componentes lipídicos de
la célula, usados para
revelar la localización de
los depósitos de grasa.
 TINCIONES
Tinción Uso Técnicas
Tinciones simples Un colorante; proporciona Se tine con un colorante básico (azul de metileno, cristal violeta, o fucsina básica) durante
contraste para observar mejor un unos 5 minutos. Aclarar brevemente con agua. Se tiñen casi todas las bacterias; la
organismo completo rnayoría de los tejidos no se tiñen.
Tínciones    
diferenciales
Tinción de Gram Dos o más colorantes; distingue Se cubre la preparación de bacterias fijadas con cristal violeta y después con una solución
entre bacterias Gram positivas y de iodo (mordiente). Todas las células quedan tenidas de color violeta oscuro. Se decolora
Gram negativas con acetona al 95%.
Las células Gram positivas permanecen tenidas, pero las negativas pierden el colorante.
Se tiñe con safranina (contraste). El color violeta de las Gram positivas se vuelve más
oscuro y las Gram negativas se tiñen de rosa.

Tinción de ácido- Dos colorantes; distingue entre las
alcohol resistencia micobacterias (ácido-alcohol
(Ziehl-Neelsen) resistentes) y el resto de las
bacterias
Se tiñen las células con fucsina básica y se calienta a emisión de vapores durante 5
minutos. Todas las bacterias se tinen de rojo. Se decolora brevemente con una mezcla de
alcohol-HCl. Las bacterias resistentes permanecen teñidas de rojo; todas las demás se
decoloran. Se trata con el colorante de contraste azul de metileno. Las bacterias ácido-
alcohol resistentes continúan tenidas de rojo, las otras se tiñen de azul.

Tinciones    
especificas
Tinción de esporas Tiñe selectivamente las Se cubre la preparación con verde de malaquita y se calienta a emisión de vapores durante
de Wirtz-Cortitlin endosporas 60 segundos. Se lava con agua durante 30 segundos y se tiñe con safranina. Las
endosporas retienen el color verde; el resto de la célula toma el color rosa.

Tinción de flagelos Permite observar los flagelos A las células previamente fijadas, se le añade una mezcla de ácido tánico (mordiente) y
de Leifson del colorante rosanilina. El mordiente engruesa los flagelos y el colorante los fine.

Tinción negativa Revela la presencia de cápsulas Se utiliza tinta china o nigrosina para tenir una preparación en fresco del espécimen. Las
particulas de colorante no pueden penetrar en la cápsula, que se observa como una región
clara alrededor de la célula.
FROTIS
TINCIÒN SIMPLE

1.- Cubrir la preparación con Azul de 2.- Lavar con agua, dejar secar
Metileno 5’ y observar al microscopio

Micrococcus luteus
 TINCIÓN DIFERENCIAL
1. No tiñen igual todos los tipos de células
Tinción de Gram 2.
3.
Útil para visualizar estructuras (flagelos..)
Utiliza al menos dos colorantes

Tinción del frotis

Previamente fijado al calor,
Paso 1 con cristal violeta
Durante 1 minuto.
Todas las células se tiñen
Gram +
de color azul-violeta.

Añadir Lugol,
Paso 2 dejar actuar 2 minutos

Todas las células siguen

de color azul-violeta.

Decolorar con alcohol

Paso 3 Las células Gram +
siguen de color azul-violeta. Gram -
Las Gram negativas
se decoloran.

Tinción de contraste
Con safranina 2 minutos.

Las células G+
se ven azul-violeta.
Paso 4
Las G- rosas o rojas.
 TINCIÓN DIFERENCIAL

COLORACIÓN DE ZIEHL- NEELSEN TINCIÓN DE ÁCIDO-

ALCOHOL RESISTENCIA
Reactivo Composición Indicaciones
• Fucsina básica 2.5 g Mezcle bien, filtre dentro Las bacterias ácido-alcohol
de recipiente ámbar.
resistente se ven de color violeta y
• Agua destilada 250 mL La disolución es estable
por un año.
las no acido-alcohol resistentes de ácidos micoli
Carbolfucsina color azul.
• Etanol 25 mL Precaución: carcinógeno.

• Cristales de 12.5 mL
fenol, fundido

Alcohol ácido • Ácido 10 mL La disolución es estable

1% clorhídrico por un año.
Precaución: corrosivo.
• Etanol 70% 990 mL
Azul de metileno • Mezcla 0.15%p/v en agua La disolución es estable Fucsina
destilada. por dos meses.

1 2

Aplicación de Aplicación de Aplicación de azul de

Aplicación de alcohol ácido
carbolfucsina calor (decolorante) metileno (contracolor)

Ej. Para ver si esta Mycobacterium tuberculosis

 TINCIÓN ESPECIFICA

TINCIÓN DE SCHAFFER-FULTON
Esporas teñidas de
verde y células
Verde malaquita Safranina Lavar con
por 2-3 minutos vegetativas teñidas de
por 30 agua
en calor rosa. 
segundos

Dejar
enfriar la Enjuagar
con agua
secar
laminilla

Esporas

Bacterias
 Lunes
TINCIÓN ESPECIFICA

Tinción negativa.

1.- Colocar una gota de

Nigrosina en un porta
2.- Tomar muestra del
microorganismo con el asa,
flamear el tubo y tapar
3.- Mezclar con la
Nigrosina y extender por
todo el porta. Secar al aire
y observar

cápsulas tanto bacterianas como de levaduras, esporas que se observan como cuerpos
refringentes y espiroquetas
 Lunes
TINCIÓN ESPECIFICA

TINCIÓN DE LEIFSON
Tinción de flagelos
1.Preparación del colorante de Leifson
1. Mezclar a volúmenes iguales las soluciones
A: Fucsina básica al 1.2% en etanol al 95%.
B: Ácido tánico al 3.0% en agua destilada Humedecer el frotis con el
C: Cloruro de sodio al 1.5% en agua destilada. colorante de Leifson y
2. Ajustar el pH a mayor a 5 con NaOH 1N. dejarla en reposo a
3. Envasar en alícuotas de 50 ml, guardar en refrigeración temperatura ambiente
durante 10 minutos.

Bordetella bronchiseptica
 ¿Que tinción es?
 Utiliza el simulador de microscopio óptico para familiarizarte con los componentes:
 https://learn5.open.ac.uk/course/format/sciencelab/section.php?name=histology_microscope
 Ver VIDEO de Práctica de diferentes tipos de tinciones
 https://www.youtube.com/watch?v=z94fpmv7t2M&feature=youtu.be
 Completa el siguiente reto en el material diáctico:
 https://view.genial.ly/5f1e6d19204af70d99162398/presentation-bm-tinciones