METODOLOGIA T1 PRUEBA

El colapso de gota, una gota de una

suspensión de células se coloca en una
superficie recubierta de aceite. Las gotas
que contienen biosurfactantes colapsan,
Evaluación del biosurfactante como agente Tensoactivo mientras que las gotas que no contienen
surfactante permanecen estables
Para comprobar el biosurfactante extraído de la Pseudomona aeruginosa como agente Tensoactivo se toman
10 µl del biosurfactante y depositan encima de la gota de petróleo.
Como control positivo se hace el mismo montaje de la caja de Petri con agua y la gota de petróleo y se le
adiciona una gota de Tego, un desinfectante líquido que tiene una alta capacidad como agente Tensoactivo
Evaluación del biosurfactante en reducción de metales pesados
Se pesan 10 gramos de suelo para cada tubo Falcon y se le agregan 10 ml de agua destilada a cada uno.
Esta mezcla se coloca en el Vortex para posteriormente secar en la incubadora de 36ºC toda la noche.
Cumplido este tiempo, se adiciona 1 ml de metales a uno de los tubos y 1 ml de metales y 1 ml de
biosurfactante a otro tubo, el tercer tubo se le deja sin metales y sin biosurfactante
Para después ser filtrado con papel filtro para café:
La muestra sin metales filtro 0.8 ml de muestra y se diluye con 49 ml de agua destilada,
La muestra con metales filtro 2.9 ml de muestra y se diluye con 47 ml de agua destilada
La muestra con metales y biosurfactante filtro 2.8 ml de muestra y se diluye con 47 ml de agua destilada
RESULTADOS T1
• Evaluación del biosurfactante como agente Tensoactivo
Al realizar la prueba se observa una eficacia de reacción de milésimas de segundo, un efecto
inmediato de degradación por parte del biosurfactante

• Evaluación del biosurfactante en reducción de metales pesados

Como blanco se tomo el filtrado del suelo sin metales y se evalúan las otras dos muestras para
Aluminio, Arsénico, Bario, Boro, Cadmio, Cromo, Manganeso, Mercurio, Plata y Selenio.
El informe debía presentar un aumento en la concentración de metales de la muestra de solo
metales a la muestra de metales con biosurfactante. Esto debido a que, si el biosurfactante
remueve los metales pesados del suelo, al filtrarse debe llevarse los metales con el filtrado y
resultar en una concentración mayor en esta muestra, Este resultado no fue así, las
concentraciones de metales pasados no fueron mayores en la muestra con biosurfactante
 METODOLOGIA T2
Tolerancia de Pseudomonas aeruginosa frente a metales pesados
• Procedimos a probar el crecimiento de la bacteria en diferentes
concentraciones de metales: 2 mM, 5 mM y 10mM
• La bacteria cultivada en concentraciones ascendentes de metales en la
formulación 1, (Na, Zn, Al, Ti, Cd, Cu y Pb), para el Al y Ti, la bacteria
únicamente fue capaz de resistir la mínima concentración ensayada: 2mM
La resistencia de P. aeruginosa mostró una resistencia alta en las 3
concentraciones de Cu, sugiriéndonos que la bacteria también podría ser útil
para disminuir la cantidad de este metal en el suelo
En este estudio se evaluaron tres medios de cultivo para el crecimiento de P.
aeruginosa: un medio mínimo y dos medios enriquecidos con glucosa y una
concentración mínima de Agar Tripticasa Soya (TSA) respectivamente.
A la capacidad de los microorganismos para sobrevivir y crecer de manera óptima bajo condiciones de estrés por
metales pesados, sin que esto influya en su funcionamiento normal reproductivo, fisiológico y bioquímico
En cuanto a la formulación 2, pese a que la resistencia bacteriana se evidenció para todos los
metales, el metal frente al cual la bacteria mostró una mayor resistencia fue el Zn, cuyo valor
en la muestra 3 del suelo sin tratar fue el más alto (89.5 mg/Kg), sugiriéndonos que la cepa
podría ser empleada para un proceso de bioaumentación eficaz
 RESULTADOS T2
• En cuanto al Al todas las muestras de suelo presentan una reducción significativa (60% • Este tuvo una disminución de más del 50% en las muestras 1, 2 y 4, mientras que la
aproximadamente), siendo este elemento el que tuvo concentraciones iniciales por muestra 3 tuvo una disminución de 21 veces su concentración inicial, indicándonos la gran
sobre los 10000 mg/Kg capacidad de la bacteria a tolerar este metal.

• En cuanto al Cu no tuvo una mayor reducción de su concentración en las 4 muestras de suelo • Un suelo sea considerado como contaminado por Zinc, este elemento debe sobrepasar
probadas, manteniéndose los valores casi iguales a los iniciales, niveles de contaminación bajo. valores por encima de los 1000 mg/Kg. En los estudios el mineral no sobrepaso los limites
permisibles , considerando zonas no contaminadas, sin embargo presento reducción en
aproximadamente un 50% en las muestras 1 y 2, y de un 25% en la muestra 3.