Tinción de Gram y Echyo-Riv

María Camila Trujillo Montaño

Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca

Microbiología General Laboratorio

  Hans Christian Gram
o Nació 13 de septiembre de 1853
Copenhague (Dinamarca) y falleció el
14 de Noviembre de 1938.

o En 1871 estudió Botánica en la

Universidad de Copenhague.

o En 1878 se graduó en Medicina.

o En 1884 desarrolló la técnica de

Tomado de: coloración o tinción de Gram.
https://elpais.com/sociedad/2019/09/13/actualidad/1568359007_968117.html
 Células Procariotas y Eucariotas
PROCARIOTAS EUCARIOTAS
Conceptos
Bacterias: Las bacterias son microorganismos
unicelulares sin núcleo diferenciado

Tinción de Gram: Es una herramienta

fundamental para diferenciar distintos tipos de
bacterias según su coloración, morfología y
asociación.

Tinción de Echyo-Riv: Es una técnica de

coloración simple que permite observar la
morfología bacteriana, sea esta respectivamente
de cocos, bacilos y espirilos.
 MORFOLOGIA BACTERIANA

BACILOS COCOS ESPIRILOS

 Bacterias Gram positivas y Gram
negativas
GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA

Composición de
su pared celular

• Poseen una pared celular gruesa • La pared celular de las bacterias

constituida por péptidoglicano, Gram negativas está constituida
pero no cuentan con membrana por una capa fina de
celular externa péptidoglicano y una membrana
• ácido Lipoteicoico y ácido celular externa
Teicoico • Lipoproteínas
PEPTIDOGLICANO

• Componente principal de la pared

bacteriana

• Polímero formado por una

secuencia alternante de N-acetil-
glucosamina y el acido N-
acetilmurámico unidos mediante
enlaces B-1,4
 COLORANTES

Son compuestos orgánicos

que tienen alguna
afinidad específica por algún
componente celular y está
basada en la carga de la
célula y el colorante
 TIPOS DE COLORANTES

Catiónicos o Anicónicos Liposolubles

básicos o ácidos
Son aquellos que tienen Con carga negativa. No
carga positiva y tienen la penetran en el interior Se mezclan con los
propiedad de combinarse celular, de modo que no lípidos celulares y los
fuertemente con los tiñen las células, sino el tiñen.
componentes celulares entorno.
cargados negativamente.
Control de Calidad de colorantes
Se recomienda preparar
placas con
microorganismos aislados
en el trabajo rutinario o
cepas de la ATCC frescas.
Ej: Staphylococcus
aureus y Escherichia coli
Las tinciones pueden ser:
Simples:
Utilizan un solo colorante. Las células tienen
una composición química diferente a la de su entorno, de modo que ambos se
comportan de forma diferente frente a un colorante.

Compuestas-diferenciales:
Distintos tipos de células tienen distinta composición química, y por lo
tanto reaccionan de forma diferente frente a una tinción

Selectivas:
Distintas estructuras celulares tienen distinta composición
química, de modo que se tiñen selectivamente con ciertos
colorantes.
 Frotis Frotis
directo indirecto
 Solución madre Maduración

• Solución concentrada
• Organismo crece y se
de la cual se utiliza una
alícuota en la desarrolla hasta su
preparación del medio máximo.
de cultivo.
 Técnica de la coloración de Gram
PASOS
1 Verificación de materiales y reactivos
2 Montaje de cultivo Bacteriológico

3 Aplicación de los colorantes

• Aplicación de cristal violeta 2 minutos
• Lugol 1 minuto
• Alcohol-acetona 15-30 segundos
• Aplicación de safranina o fucsina 1 minuto
4
Lectura e interpretación por el
microscopio
Ejemplos de Tinción

Para el reporte del

informe, es importante,
tener en cuenta:

• Forma
• Agrupación
 Tinción de Echyo-Riv
• Todas las estructuras se tiñen de
la misma tonalidad
• Para esta coloración se usa la
fucsina y el bicarbonato de sodio Espiroquetas coloreadas por la técnica de Echio Riv./ L.Corrales

(NaHCO3)

Técnica:
• Sobre la muestra poner 10 gotas
de fucsina y 3 de bicarbonato
GRACIAS!