UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS-ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA

CARRERA DE INGENIERÍA AGROPECUARIA

“Determinación de las especies de Varroa

presentes en apiarios del Valle de los
Chillos (Ecuador), mediante morfometría
geométrica”

Christyna Fernanda Cruz Araujo

Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Justificación 1500 apicultores
(MAGAP, 2015)

Importancia de Problemas
Abeja melífera occidental : la Apicultura: sanitarios:
Apis mellífera
miel, propóleo, Varroasis
cera, polen (Varroa spp.)
• Disminución en la producción
de la colmena (pérdidas
económicas)
• Contaminación de la miel con
Falta de residuos tóxicos por uso de
estudios productos para su control
Polinización:
epidemiológicos
Disminución de
y de
la masa
Grave repercusión en la caracterización
producción frutícola, hortalizas, entomófila
de especies de
forrajeras y oleaginosas polinizante
Varroa a nivel
Enfermedades nacional

Determinar las especies de Varroa presentes

en apiarios del Ecuador Primer paso para diseñar un plan de acción
Fuente: Martínez et al., (2011) sanitario específico
Ibacache, (2006) Técnicas morfométricas y moleculares
 Las abejas son el
Introducción sostenimiento de la
vida en el planeta
Las abejas en la
polinización Importancia
económica y
ecológica en los
ecosistemas

Gran parte de alimentos

que se consumen y
71 de los 100 cultivos comercializan
Aumento en la masivamente dependen de
agrícolas más
producción y mejora la polinización
importantes en el
de la calidad de
mundo son
vegetales, frutas,
polinizados por Realizar investigación
granos y semillas
abejas sobre las causas del
descenso de la Presencia de
población de enfermedades
polinizadores es de vital
Generan el 90% del suministro importancia.
Fuente: Elika, (2012)
FAO, (2014) de alimentos a nivel mundial
 Daños
Varroasis producidos

Daños en el sistema
nervioso.
Desorientaciones en el
vuelo, comportamiento
Ectoparásito Varroa spp. desordenado.

Reducción de
Consumo de hemolinfa
hasta el 65 %
Descubierto por Edward de producción
Jacobson (1904) – Isla de Su vida media presenta
Java en colonias de Apis una disminución entre El 30 % de total de
abejas presentan
cerana el 30 y 70%
malformaciones

Llega a América del Sur por

importación de abejas
desde Japón (Paraguay –
1971)
Vector de transmisión
de otras enfermedades
inyección de saliva)

Fuente: Moreno, (2004)

Goodwin & Van Eaton, (2001)
 Morfología de Varroa

Macho Pedipalpos

Placa esternal Quelíceros

Hembra Apotele
Patas

 Forma elipsoidal Placa genital

 Deprimida dorso-ventralmente Setas

 Coloración marrón rojizo

Placa anal Placa metapodal
Fuente: Giacomelli et al., (2013)
Bolois, (2012)
 Ciclo de Vida de Varroa

• Abejas adultas
• Salida del ácaro hembra de la celda de cría
Fase forética con su hospedero
• Fase de propagación de la especie

• Fecundación dentro de la celda de cría

• Consume la hemolinfa del hospedero (larva)
Fase reproductiva • Ovoposición de la hembra (5 a 7 huevos)

Fuente: Goodwin & Van Eaton, (2001)

 Especies de Varroa

Varroa rindereri parasita

Apis koshchevnikovi

Varroa underwoodi parasita

Apis cerana

Varroa jacobsoni y Varroa

destructor parasitan
Apis mellifera

• Morfológicamente distintas
• Diferencias en las secuencias de su ADNmt
Fuente: Anderson & Trueman, (2000)
Morfometría Geométrica

Estudio de la forma en espacio La forma de un objeto

Fusión entre la geometría y la bi y tridimensional para
biología investigar cambios se descompone en
morfológicos tamaño y en forma
(conformación)
propiamente dicha
Estudia los cambios en el
tamaño y forma a partir del
Uso de herramientas
desplazamiento 2D o 3D de un
informáticas
conjunto de puntos
morfométricos (landmarks)

Fuente: Van der Molen et al., (2007)

 Tamañ
Forma Todas las características
geométricas de un objeto
o El tamaño es
matemáticamente
a excepción de su independiente de la
tamaño, posición y forma
orientación
Medir la “forma” y el
“tamaño” de manera
independiente, no pierde
Ubicación, escala y
información sobre las
efectos de rotación se
relaciones entre ellos
eliminan

Determinar la ubicación
del centro de la forma.
Tamaño Centroide “Tamaño Centroide”
“Centro de Gravedad”

Es una medida de tamaño que cuantifica la

extensión de los landmarks entorno a su
centro de gravedad

Fuente: Toro et al., (2010)

Landmarks o Puntos
Punto en el espacio que tiene un nombre y
Anatómicos de posee coordenadas cartesianas en forma
Referencia (PAR) bidimensionales (x,y) o tridimensionales (x,y,z),
que son las que describen su posición en el
espacio

Tipo 1 Tipo 2 Tipo 3

• Intersección de • Curvaturas • Poseen al menos

estructuras, máximas una coordenada
centros de ambigua (punto
estructuras inferior de
pequeñas e concavidad)
intersección de Cochliomya hominivorax
curva

Megalobulimus leucostoma

Cichlidae

Fuente: Toro et al., (2010)

Análisis Generalizado de Traslación
Se elimina el efecto de posición al trasladar las
Procrustes (AGP) configuraciones de landmarks a un mismo origen del
sistema de coordenadas

 Colocar una Rotación

configuración de puntos Las configuraciones de landmarks se rotan para minimizar
las desviaciones entre ellos (cambio de orientación
anatómicos sobre otra. alrededor de un eje)

Escalamiento
Las configuraciones de landmarks son escaladas a un
mismo tamaño para remover el efecto de este factor
 Los puntos anatómicos
homólogos coincidan lo
máximo posible de
manera que se obtenga
una mínima medida de
distancia entre ambas
configuraciones.

Fuente: Van der Molen et al., (2007)

Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Objetivos

Objetivo General

Determinar mediante análisis

morfométrico, la especie de Varroa
presente en apiarios localizados en el Valle
de los Chillos – Ecuador.
Objetivos Específicos

• Determinar los Puntos Anatómicos de Referencia (landmarks) adecuados para el

análisis de muestras de Varroa spp., e interpretación de las variaciones de forma.

• Caracterizar morfométricamente a muestras de Varroa spp., recolectadas en

apiarios del Valle de los Chillos (Ecuador), mediante el uso de morfometría geométrica.

• Elaborar una ficha técnica con las características de la especie de Varroa que se
encuentra parasitando a Apis mellífera, en los apiarios analizados.

• Recomendar un plan de acción sanitario para el control de Varroa spp., para uso de
los apicultores del Valle de los Chillos (Ecuador).
Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Muestreo de especímenes

Tabla 3.1. Localización de los apiarios muestreados en el Valle de los Chillos -

Zona de muestreo de Varroa destructor
Ecuador

Fuente: Cherrez, (2015)

Tabla 3.2. Colmenas muestreadas y especímenes
de Varroa recolectados por apiario

Clasificación y etiquetado de especímenes de Varroa

según apiario y colmena.

Elaborado por: El Autor

Montaje y fotografiado de los
especímenes de Varroa

Estereomicroscopio aumento 30 x.
Las fotografías se obtuvieron con la ayuda de la cámara
fotográfica para acople directo al ocular y el software
Future WinJoe.

Cajas petri pláticas con

medio PDA M096 HIMEDIA,
para facilitar la toma de
fotografías.
Determinación y digitalización de los
puntos anatómicos de referencia
(landmarks)

En base a referentes bibliográficos

(Maggi et al., 2009)

(Delfinado-Baker & Houck, 1989)

En base a análisis previos

Análisis Generalizado de Procrustes

 TPSDig
 MorphoJ
Análisis Estadístico

Análisis de
Análisis de Variables
Componentes Análisis Cluster
Canónicas (CVA)
Principales (ACP)

• Clasificación taxonómica, descripción

morfológica, distribución, biología de
Medición del tamaño
Análisis del Tamaño la especie e información sobre el
corporal (ancho y nuevo registro.
Centroide
largo) • Revisión bibliográfica citada en el
Ficha Técnica proyecto de investigación.

 MorphoJ
Archivo de membresía
Bloc de Notas  Neighbor • Revisión bibliográfica
Tipo de archivo que contiene la
codificación o identidad de los grupos
 SOFA • (Silvia, 2006)
(apiarios) que ingresaron en los análisis  Past Plan de Acción
Sanitario
• (Proaño, 2014)
multivariados (ACP o CVA).
Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Determinación de los Puntos
Anatómicos de Referencia (landmarks)

Los resultados del análisis

sugirieron la eliminación de
los landmark (n=3) que
aportaban menor información
para la determinación de las
variaciones de forma entre
especímenes, descartando el
landmark 1, landmark 2 y
landmark 7

Figura 4.1: Puntos anatómicos de referencia Gráfico 4.1: Análisis Generalizado de Procrustes
(landmark) digitalizados en especímenes de en base a landmarks (n=11) digitalizados para
Varroa (n=818) presentes en apiarios (n=24) especímenes de Varroa (n=818) presentes en
del Valle de los Chillos – Ecuador. apiarios (n=24) del Valle de los Chillos – Ecuador.

Varroa jacobsoni y Varroa destructor, al examinar las dimensiones de las placas esternal, anal y
metapodal – Similitud entre poblaciones de Varroa (Delfinado-Baker & Houck, 1989), (Maggi et
Elaborado por: El Autor
al., 2009).
 Usar los landmark descritos en futuras
investigaciones para análisis morfométrico de Varroa

• Ya no es necesaria la realización de análisis previos para

su selección.

• Disminuir el número de especímenes a recolectar

(conoce el número de landmark necesarios para
evidenciar e interpretar las variaciones de forma)

Figura 4.2: Puntos anatómicos de referencia (landmark) • Se encuentran en placas o estructuras rígidas, las cuales
digitalizados en especímenes de Varroa (n=818) no presentan deformaciones
presentes en apiarios (n=24) del Valle de los Chillos –
Ecuador. • Fueron digitalizados solamente en hembras de Varroa en
estado adulto
Número mínimo de Apiarios con
especímenes Parámetros que permiten realizar un análisis uniforme.
especímenes por grupo
≥ landmark × 2 n ≥ 16

Apiarios n = 17
Elaborado por: El Autor Especímenes n = 770
Análisis Estadístico

Gráfico 4.2: Diagrama de Análisis de Componentes Principales para

especímenes de Varroa (n=818) presentes en apiarios (n=24) del Valle de
los Chillos – Ecuador.

Elaborado por: El Autor

Análisis Estadístico

Número mínimo de
especímenes por grupo
n ≥ 16

Gráfico 4.3: Diagrama de Análisis de Variables Canónicas para especímenes de

No existían diferencias
Varroa (n=770) presentes en apiarios (n=17) del Valle de los Chillos – Ecuador. significativas entre
grupos
Elaborado por: El Autor
Análisis Estadístico

Gráfico 4.4: Rejilla de deformación de Análisis de

Variables Canónicas para especímenes de Varroa Landmark 1, 6, 7 y 8, que se encuentran en la placa esternal de
(n=770) presentes en apiarios (n=17) del Valle de Varroa, son los que aportaron más información para la
los Chillos – Ecuador. diferenciación entre apiarios, los mismos que se comprimieron
hacia el interior de los especímenes en estudio.

Elaborado por: El Autor

Análisis Estadístico
Tabla 4.1. Valores de significancia para distancia
Mahalanobis para especímenes de Varroa (n=770)
presentes en apiarios (n=17) del Valle de los Chillos –
Ecuador.
GRUPO A

GRUPO B

GRUPO C

Gráfico 4.5: Diagrama de agrupamiento UPGMA (Análisis

Cluster) a partir de Distancia Mahalanobis para especímenes de
Varroa (n=770) presentes en apiarios (n=17) del Valle de los Argentina, identificación de morfotipos de Varroa destructor en
Chillos – Ecuador. colonias de Apis mellifera. Existencia de morfotipos de acuerdo
a la ubicación geográfica (Maggi et al, 2009).
APIARIO 4: Guayllabamba-Quito Ubicación geográfica
No tiene monte natural ni presencia de Medio ambiente
trébol rojo y blanco
Elaborado por: El Autor
Análisis Estadístico

Gráfico 4.6: Diagrama Box - Plot para el Tamaño Centroide de especímenes de Varroa (n=770)
presentes en apiarios (n=17) del Valle de los Chillos – Ecuador.

Prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis para el tamaño

centroide de los apiarios
p=0,09016
No existían diferencias significativas para el tamaño centroide.
Elaborado por: El Autor
Medición (µm) de la talla
de especímenes de Varroa

Tabla 4.2. Mediciones (µm) de la talla de especímenes de Varroa (n=48) presentes en

apiarios (n=24) del Valle de los Chillos - Ecuador, en comparación con los de V. jacobsoni y
V. destructor según lo informado por Anderson y Truman (2000); Zhang (2000); Boudagga et
al. (2003) y Rahmani et al. (2006).

Fragmentos de ADNmt que codifican el

gen de la subunidad 1 de citocromo
oxidasa (Cox-1, 458pb). Las 8 muestras
analizadas presentaron identidad del
100% a la secuencia perteneciente al
genoma completo de ADNmt de Varroa
destructor (Cherrez, 2015).

Onore (1990), presencia de Varroa

jacobsoni en las provincias de El Oro
y Loja.
• Técnicas de morfometría
La especie de Varroa que se encuentra parasitando a geométrica.
Apis mellifera en los apiarios del Valle de los Chillos - • Análisis un número extenso de
especímenes (n=818).
Ecuador, es Varroa destructor. • Las zonas de estudio en las
investigaciones fueron diferentes.

Elaborado por: El Autor

Ficha técnica de Varroa destructor

Información General Descripción

• Clasificación
taxonómica
• Especie que parasita
Morfología (Hembra y
Macho)
Ciclo de Vida

Distribución

Nuevo Registro
• Técnica de recolección
• Técnica de
identificación
• Lugar de conservación

Elaborado por: El Autor

Plan de acción sanitario para control de
Varroa destructor
Protocolo tratamiento con Amitraz (Silvia, 2006) Protocolo tratamiento con Ácido Oxálico (Proaño, 2014)

Colocar sobre los marcos de las colmenas azúcar impalpable Preparar una solución azucarada en proporción 2:1
de manera uniforme (50 g/colmena). (agua/azúcar) y calentar a 30°C para facilitar su disolución.

Relizar una solución de Amitraz al 12,5% (12,5 g Amitraz en Preparar una solución de ácido oxálico al 10% (10,0 g ácido
100 ml de agua). oxálico en 100 ml de solución azucarada).

Obtener tiras de papel filtro de 3 mm de espersor, 5 cm de Colocar la solución previamente elaborada en una jeringuilla de
ancho y 28 cm de largo. 50 ml.

Empapar las tiras de papel filtro en 8 ml de la solución de Aplicar una dosis de 5 ml entre marco o nebulizar 3 a 4 ml de
Amitraz preparada previamente (dosis equivalente a 1g Amitraz la solución sobre ambas caras del marco de la colmena.
/ colmena).

Colocar las tiras de papel filtro con la solución de Amitraz sobre

los marcos de las colmenas.

• Rotación de principios activos • Aplicación antes y después de la cosecha de miel

• Utilización de acaricidas orgánicos
• Evaluación del grado de infestación antes y después del
tratamiento
Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Conclusiones
• Mediante caracterización morfométrica se determinó que el ácaro presente
en apiarios del Valle de los Chillos (Ecuador), es Varroa destructor.

• Los puntos anatómicos de referencia o landmarks ubicados en la placa

esternal, placa metapodal y placa anal, son los referentes más importantes
para la identificación de especies de Varroa.

• El análisis de la forma y tamaño centroide de los especímenes analizados

determinó que todos los individuos pertenecen a Varroa destructor.
• Mediante el uso de morfometría geométrica fue posible la elaboración de
una ficha técnica guía, sencilla y muy práctica, para la identificación de
Varroa destructor.

• La aplicación de planes de acción sanitarios para el control de Varroa

destructor (Amitraz y Ácido oxálico) presentados en la presente
investigación deben ser usados en las dosis y protocolos establecidos
Introducción y Justificación

Objetivos

Materiales y Métodos

Resultados y Discusión

Conclusiones

Recomendaciones
Recomendaciones
• La morfometría geométrica es una herramienta de identificación y caracterización de
especies, de bajo costo y de fácil implementación, por lo que se recomienda usarla
como un paso previo a la caracterización molecular.

• Se recomienda el uso de landmarks ubicados en la zona ventral (placa esternal, placa

metapodal y placa anal anal) de Varroa para caracterización de especies, ya que son
estructuras que permiten evidenciar variaciones en la forma.

• Para realizar un adecuado control sanitario de Varroa se recomienda usar una solución
de Amitraz al 12,5% y Ácido oxálico al 10%, sobre los marcos de las colmenas,
tomando en cuenta la rotación de principios activos y épocas de aplicación.