LA MATRIZ EXTRACELULAR

Concepto
• La matriz extracelular (MEC) representa una
red tridimensional que engloba todos los
órganos, tejidos y células del organismo.
• Constituye un filtro biofísico de protección,
nutrición e inervación celular y el terreno para
la respuesta inmune, angiogénesis, fibrosis y
regeneración tisular.
 Concepto
• Representa el medio de transmisión de
fuerzas mecánicas a la membrana basal, que a
través de las integrinas soporta el sistema
de tensegridad y activa los mecanismos
epigenéticos celulares.
 ESTRUCTURA
Proteínas Glicosaminoglicanos

Fibronectina

Colágeno fibrilar (I, II, Hialuronano

III, V, XI) Proteoglicanos
Decorina

Laminina
Perlecan

Tenascina
Agrecan

Colágeno tipo IV Betaglicano, sindecan-1

Elastina
 Estructura
Actualmente:
• Está organizado jerárquicamente en
complejos compuestos de nanofibras y
proteínas
• Les sirve a las células para regular todas sus
funciones esenciales como migración,
adhesión, proliferación o diferenciación.
 Alteración
• La alteración de la MEC supone la pérdida de: su
función de filtro eficaz
– nutrición
– eliminación
– denervación celular
– pérdida de la capacidad de regeneración y
cicatrización
– alteración de la transmisión mecánica
– alteración en la respuesta inmune ante agentes
infecciosos, tumorales y tóxicos.
 Utilidades
• Ingeniera tisular
• Remodelación tisular
• Biorregeneración
• Terapia neural
Nano-ingeniería de tejidos para medicina
regenerativa
 La ingeniería de tejidos
FINALIDAD:
• Conseguir desarrollar los tejidos a partir de las
propias células del paciente, minimizando de
esta forma el riesgo al rechazo.
 La ingeniería de tejidos
• Es muy importante que el soporte imite las
propiedades del entorno extracelular natural.
• Dan el soporte a las células, de forma que
sean lo más parecidas posible al entorno
natural.
– diseño y la fabricación de nanoestructuras
 La ingeniería de tejidos
• Es un campo de investigación que tiene como
objetivo desarrollar sustitutos para los
órganos y los tejidos dañados por la
enfermedad o por los accidentes, evitando los
trasplantes que requieren un donante
humano.
 La ingeniería de tejidos
• ¿Qué tipos de tejidos cree que son los que
lograrán ser los primeros en pasar de la fase
de investigación a la fase de aplicación en
hospitales?
• La piel
– ya son comerciales distintos tipos de películas que
se adhieren a la parte afectada y que estimulan la
cicatrización y el crecimiento de las células de la
piel de forma más óptima.
Corroboración científica
 Matriz extracelular xenogénico como un
andamio para la reconstrucción de tejidos
• Matrices biodegradables derivados de la matriz extracelular xenogénico (ECM) se
han utilizado en numerosas aplicaciones de ingeniería de tejidos.
• La seguridad y eficacia de tales andamios cuando se utiliza para la reparación y
reconstrucción de numerosos tejidos del cuerpo, incluyendo las estructuras
musculoesqueléticas, cardiovasculares, urogenitales y tegumentario se ha
demostrado tanto en estudios preclínicos en animales y en estudios clínicos en
humanos.
• Más de 200.000 pacientes humanos han sido implantados con xenogeneicas
andamios ECM.
• Estos andamios ECM se preparan típicamente a partir de órganos porcinos, tales
como el intestino delgado o de la vejiga urinaria, que se somete a esterilización
terminal de descelularización y sin pérdida significativa de los efectos biológicos de
la ECM. La composición de estas matrices biodegradables incluye las proteínas
estructurales y funcionales que forman parte de la matriz extracelular de
mamífero nativo. La organización tridimensional de estas moléculas distingue
andamios ECM a partir de materiales de andamios sintéticos y está asociado con la
remodelación del tejido constructivo en lugar de tejido de la cicatriz. La respuesta
biológica a estas matrices biodegradables xenogénicos, incluyendo la respuesta
inmune, se discute en este documento.
 La matriz extracelular como un andamio
para la reconstrucción laríngea
• Derivado de porcino matriz extracelular xenogénico (ECM) ha sido
utilizado con éxito como un andamio para la reparación de tejidos y la
reconstrucción en numerosos estudios preclínicos en animales humanos y
aplicaciones. Estos andamios son rápida y completamente degradado y
sustituido por los tejidos derivados del huésped que con frecuencia imitan
la composición del tejido original y la arquitectura. El propósito de este
estudio fue examinar la morfología de los andamios ECM después de su
uso para la reconstrucción laríngea. Treinta perros hembra adultos se
sometieron a un hemilaringectomía parcial. El cartílago tiroideo derecho y
de las cuerdas vocales fueron reemplazados por ECM patíbulo, y los perros
fueron sacrificados sin dolor desde 1 semana hasta 12 meses después de
la cirugía. El examen histológico del tejido reconstruido mostró la
presencia de una simple revestimiento epitelial escamoso, estructuras
glandulares organizados dentro de la submucosa, cartílago tiroides
reconstruida, y haces de músculo esquelético por 3 meses después de la
cirugía. Llegamos a la conclusión que los andamios de ECM son plantillas
prometedores para la remodelación constructiva de tejido de la laringe.
 La matriz extracelular como un material de
andamiaje biológico: Estructura y función
• Materiales de andamios biológicos derivados de la matriz
extracelular (ECM) de los tejidos de mamíferos intactos se han
utilizado con éxito en una variedad de ingeniería de tejidos /
regenerativos medicina aplicaciones, tanto en estudios preclínicos y
en aplicaciones clínicas. Aunque se reconoce que los materiales
tienen propiedades de remodelación constructivas, los mecanismos
por los cuales se logra la restauración de tejido funcional no se
entienden bien. No hay evidencia para apoyar funciones esenciales
tanto para las características estructurales y funcionales de los
materiales de andamios biológicos. Este documento ofrece una
visión general de la composición y estructura de los materiales
seleccionados ECM andamios, los efectos de los métodos de
fabricación de las propiedades estructurales y de comportamiento
mecánico de los materiales resultantes de andamios y la
degradación in vivo y la remodelación de los andamios de ECM con
un énfasis en la función de los tejidos .
LA MATRIZ INTRACELULAR
 James L. Oschman
Doctor en biofísica y biología
Investigación en diferentes universidades
Investigación en profundidad sobre
peculiaridades de la matriz, más precisamente
los aspectos energéticos
Investigación moderna sobre la matriz viviente
y su base científica en medicina
complementaria holística
 James L. Oschman
A. Atrapamiento mecánico
B. Unión iónica
C. Unión relacionada con la hidrofilia
Matriz extracelular
Matriz intracelular (citoesqueleto y otras
estructuras)
Matriz nuclear
• La acupuntura, la osteopatía, el Reiki, el
masaje, todos estos métodos ejercen su
efecto curativo por medio de la matriz
viviente. También los antihomotóxicos utilizan
las funciones de señalización de la matriz
viviente para crear salud en el organismo
desregulado o intoxicado.
 Líquido intracelular
• Un medio indispensable que hace que sea
posible mantener la homeostasis entre las
zonas intracelular y extracelular
 Composición
El líquido intersticial está formado por un vehículo de
agua que contiene principalmente:
1. ácidos grasos
2. aminoácidos
3. azúcares
4. coenzimas
5. sustancias
6. mensajeras como hormonas, neurotransmisores y
7. otras sustancias como sales minerales, productos de
desecho de las células, etc.
• calidad de la vida depende No sólo debe
haber suficientes componentes nutritivos para
sobrevivir, sino que también debe haber
eliminación de los productos de desecho que
se producen.
• El citoesqueleto es exclusivo de las células
eucariotas.
• Es una estructura tridimensional dinámica que
ocupa el citoplasma.
• Esta estructura actúa como músculo y como
esqueleto, para el movimiento y la estabilidad.
Las largas fibras de citoesqueleto son polímeros
de subunidades.
• Los principales tipos de fibras que forman de
citoesqueleto son icrofilamentos, microtúbulos y
filamentos intermedios.
• También aquí la fina estructura tridimensional
actúa como un sistema de comunicación y
conducción.
• La más mínima modificación extracelular del
potencial eléctrico podría ser un
desencadenante de la contracción de
citoesqueleto.
• La intoxicación extracelular se puede
comunicar a las estructuras celulares más
profundas y al contrario, la disfunción celular
se puede comunicar al entorno celular directo
e incluso a cualquier otra célula del
organismo.
LA MATRIZ NUCLEAR
TERAPIA GÉNICA: Un nuevo
enfoque de la terapeútica
 TERAPIA GÉNICA
DEFINICIÓN: Es el proceso por el cual se inserta material genético en una célula
por medio de vectores, con el fin de hacer que esta produzca una proteína
normal.

UTILIDAD: curar enfermedades unigénicas

modificar totalmente el sistema inmune

La Terapia génica se realiza con las siguientes acepciones:

• somática (tratamiento de las células enfermas),
• germinal (para evitar la transmisión hereditaria de enfermedades)
• perfectiva (manipula los genes para mejorar ciertas características)
• eugénica (que busca mejorar cualidades complejas del individuo, tales como
la inteligencia).

Por lo tanto el propósito principal de la terapia génica es:

Cambiar genotipo para mejorar fenotipo
 TERAPIA GÉNICA
VECTOR: Es aquel medio transportador que nos permitirá insertar el
material genético de interés en las células del paciente en cuestión.

Viral: adeno, herpes, retro

TIPOS DE
VECTORES:
No viral: liposoma
transferencia de genes mediante
receptores
inyecciones de DNA desnudo
bombardeo con partículas de oro
 No virales
 LIPOSOMA: funcionamiento en base a propiedades de carga eléctrica.
-ADN a insertar (-) X fostatos de la doble hélice
-lípidos catiónicos o liposoma (vector) (+)
-celula (-) X ácido siálico presente en su superficie

lípidos (+) + ADN (-)

Liposoma con ADN (+) + membrana celular(-)

cel
Penetra ADN dentro del liposoma, el vector se une
a los fosfolípidos de membrana y se libera el ADN
Por lo tanto el DNA evita la degradación por lisosomas celulares
 Liposoma

Tx. Fibrosis quística defecto gen CFTR que codifica proteína

que mantiene libre de moco tubos aéreos de pulmones.

ADN a insertar: uno que codifique gen CFTR

liposoma catiónico a utilizar: DC-chol/DOPE
Cél. diana: cél. tracto respiratorio.
R: se impide signos de inflamación o necrosis en el tejido
característicos de la enfermedad.
Esquema donde se muestra diversos
tipos de lipidos catiónicos utilizados
como vectores en la Terapia Génica.
 TRANSFERENCIA DE GENES
MEDIANTE RECEPTORES
• En este caso al ADN a insertar se le adiciona un ligante (moléculas
reconocidas por receptores específicos/tipo celular elegido) y un
fusiógeno para evitar su degradación por el lisosoma celular.

L R célula
ADN + ligantes

ADN penetra X endocitosis L R

unión endosoma + lisosoma evitada por fusiógenos L

ADN entra al núcleo durante la división celular

 TRANSFERENCIA DE GENES
MEDIANTE RECEPTORES
Se emplea en: El tratamiento de la hipercolesterolemia

El problema de hipercolesterolemia: gen codificador de receptores LDL

ADN a insertar: Codificador de receptores para LDL
ligando: ASOR-PL
Receptor ASGPr (hígado)
R: colesterol en suero sanguíneo

Nota: Este método a diferencia del liposoma va dirigido contra una célula
específica por medio del reconocimiento ligando/receptor.
INYECCIONES DE DNA DESNUDO:

• Por este método el ADN o ARN puro

circular y cerrado covalentemente es
directamente inyectado dentro del
tejido deseado.
BOMBARDEO DE PARTÍCULAS DE ORO:

1º plásmido de ADN revestido gotas de oro o

tungsteno.
2º Estas partículas son aceleradas por una
descarga eléctrica y son " disparadas" hacia el
tejido.

Utilizado en: inyección directa en el músculo, del

gen que codifica la proteína de matriz del virus
influenza A para el Tx. de dicha enfermedad en
el ratón.
 VECTORES VIRALES
METODOLOGÍA:
El DNA o RNA del vector
es cortado por enzimas de restricción con el fin
Trasfieren de eliminar zonas patógenas e insertar en el lugar de estas el
gen de interés médico
Gen a célula vectores
Eucarionte modificados

En ella “INFECTAN” : vector inicia mecanismos de trascripción y

traducción de proteínas normales, pues sus proteínas patógenas fueron
reemplazadas por estas anteriormente.
genoma vírico modificado secuencias víricas esenciales

VECTOR VÌRICO DNA de interés

componentes estructura del virión
 RETROVIRUS

- ARN de cadena sencilla como genoma viral (huesped x TI ADN)

- tres genes que codifican:
- gag, el grupo específico de antígenos, proteína de la cápsida y
de la matriz
- pol , la transcriptasa inversa, proteasa, integrasa.
- env , proteínas de la envoltura del virus
- LTRs promotor viral
- El genoma también incluye secuencias:
empaquetamiento del ARN vírico
corte y empalme entre donador y aceptor
ARNs mensajeros envueltos de forma separada.
 RETROVIRUS
Obtención del Vector: retrovirus naturales se les reemplaza genes
estructurales (gag, pol, env), por uno o varios genes terapéuticos deseados.

Expresión de genes terapeúticos estará dirigida por el promotor retroviral (LTR)

estos vectores retrovirales (sin genes estructurales pero con LTR) pueden ser
producidos únicamente en unas líneas celulares de empaquetamiento, que
son capaces de aportar por transcomplementación las proteínas retrovirales
estructurales que son necesarias para la estructura del virión.

-desventaja: solo se integran en células que se replican

- ventaja: genes que se integran X retrovirus poseen expresión a largo plazo.
 ADENOVIRUS

- Virus no desarrollados que contienen ADN lineal de cadena doble

- El ciclo de infección productiva comprende dos fases, la primera, la más

importante para la síntesis del ADN, la segunda, durante la cual las
proteínas estructurales y el ADN vírico son ensamblados en viriones.

-cuatro unidades transcripcionales, cada una con su promotor, codifican

ARN mensajero empalmados .

- La transcripción es secuencial en la que los genes E1 se expresan pronto, y

en parte activan la transcripción de otros genes tempranos .
 ADENOVIRUS
-E1 rescata células de la quiescencia, dejándolas capaces de sintetizar
ADN vírico y proteínas, usando predominantemente las funciones del
código del hospedador.
- E2 : replicación del ADN.

- E3 : detener los mecanismos de defensa de la célula hospedadora:

anular los efectos de (TNF) en células infectadas
bloquear el transporte de MHC I, reduce la presentación de péptidos
víricos.

- E4 regula fase primaria y secundaria del ciclo de vida vírico.

 ADENOVIRUS
- Obtención del Vector: se le elimina E1 y E3, crecen en cél. 293 que
aportaran por transcomplementación los genes estructurales
necesarios para integrar el virión.

- Son capaces de infectar células quiescentes y persisten como DNAs no

integrado

- por su baja eficiencia es necesario utilizar virus a títulos muy altos que
podrían desencadenar respuesta inflamatoria inespecífica.

- la expresión de la proteína es limitada a solo semanas o meses por la

falta de integración del DNA, por esto se requiere readministración
que puede desencadenar respuesta inmune y limitar su eficiencia.
 ADENOASOCIADOS
- Es un virus muy pequeño, muy simple, no autónomo,
que contiene ADN lineal de cadena sencilla. El virus
requiere la coinfección con adenovirus u otros para
replicarse
- rep, codifica proteínas para replicación e integración.
- cap, codifica tres proteínas estructurales víricas.
- Los extremos del genoma comprenden repeticiones
terminales (TR) de cerca de 145 nucleótidos
- Vector: Contienen sólo las secuencias víricas TR que
bordean el ADN de interés.
 HERPESVIRUS
- ADN bicatenario lineal
- Dos trozos de ADN bicatenario lineal unidos dando una estructura única
llamadas molécula L y molécula S. Poseen en sus extremos secuencias
repetidas terminales ( TRL y TRS ) que son los sitios mediante los cuales
permite unirse a las dos moléculas.

- Vector: Contienen sólo las secuencias víricas TRL TRS y DNA de interés.
- Lleva grandes secuencias de ADN
- Establece infecciones latentes de larga duración en las cuales el genoma
del virus existe como un episoma con efectos no aparentes en la célula
hospedadora

- El herpes virus puede ser una herramienta muy valiosa en células del
sistema nervioso central.
- Cél. en reposo.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS
APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA
APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA
 APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA

• Distrofia muscular de Duchenne:

APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA
 APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA

• Gen codificador de BMP-7 transducido por adenovirus en el

Tx. De la osteoporosis.
 APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA
OTROS:
-dolor:
• La expresión en forma continua de preproencefalina en
neuronas sensitivas Tx. Dolor cáncer, angina, artritis
y neuropatías periféricas.
-Ateroesclerosis:
• administración de genes que expresan el factor de
crecimiento endotelial vascular (revascularizar la
pierna).
-Disfx. Eréctil e infertilidad:
• adm. gen KL-2 que potencia formación y crecimiento de
cél. Sertoli (ratas).
 APLICACIONES DE LA TERAPIA GÉNICA
OTROS:
Ceguera:
• adm. gen RPE95 x virus impide degeneración y
reanudación de la actividad eléctrica de la retina
(animales).
-Alzhaimer:
• adm. Gen del factor de crecimiento neurológico (NGF)
(monos viejos)
-Parkinson:
• gen de la descarboxilasa glutámica ácida (GAD)/ cél.
hperactivas del núcleo subtalámico.
-Diabetes tipo I:
• gen PDX-1 hígado produce insulina (rata)
CORRABORACION CIENTÍFICA
El nucléolo como un regulador del
envejecimiento celular
Estructura

Funciones
ENVEJECIMIENTO
Estructura nuclear dinámica El envejecimiento celular es
que participa en la una de las diversas
regulación de importantes funciones que son
procesos celulares controladas por el nucléolo.

la carencia de las helicasas

Las mutaciones en las
del ADN localizadas en el
proteínas de localización
nucléolo, favorecen el
nucleolar promueven el
desarrollo de enfermedades
envejecimiento prematuro
asociadas con el
en levaduras y humanos.
envejecimiento acelerado

El nucléolo secuestra
proteínas para regular su
actividad biológica durante
el inicio o término de la vida
replicativa celular.
OTROS
CONCLUSIONES
• La terapia dirigida actúa contra blancos o mecanismos específicos cuyo papel
es crítico en la tumor génesis.

• El anti-estrógeno tamoxifen es importante en el tratamiento de las pacientes con

receptores hormonales positivos.

• Los inhibidores de aromatasa han demostrado superioridad frente al tamoxifen

en pacientes posmenopáusicas con receptores hormonales positivos, en etapas
iniciales de la enfermedad y en etapas avanzadas.

• El fulvestrant, antiestrógeno indicado en cáncer de mama avanzado con

receptores hormonales positivos, ha resultado tan efectivo como el tamoxifen y
anastrozol. Activo en enfermedad HER2+ y en pacientes previamente tratadas
con inhibidores de aromatasa.

• El papel de la supresión ovárica con análogos LHRH no está claramente

definido y se requieren más estudios.
CONCLUSIONES

• Las premenopáusicas con terapia endocrina y ácido zoledrónico asociado al

tratamiento tienen menor probabilidad de recurrencia (ABCSG-12).

• Trastuzumab es activo en enfermedad metastásica HER2+ y su eficacia ha

cambiado la historia natural de la enfermedad en adyuvancia.

• Lapatinib está indicado en pacientes con cáncer de mama metastásico

resistentes a trastuzumab.

• Bevacizumab en combinación con taxanos (paclitaxel y docetaxel) en cáncer

de mama metastásico ha demostrado ventaja en la sobrevida libre de
progresión en comparación al taxano como monodroga.

• Múltiples combinaciones (quimioterapia + terapia biológica, hormonoterapia

+ terapia biológica, terapia biológica+ terapia biológica) ofrecen esperanza
para estas pacientes.