Colorante.

Coloraciones y
Anticoagulantes
Lic, Christiam Albornos Andrade
Instituto Superior Tecnológico Daniel A. Carrión
Curso: Hematología I
Colorantes y Coloraciones
O Coloración: es el proceso mediante el cual
un cuerpo es teñido por una sustancia
colorante sin perder el color cuando es
lavado con el disolvente utilizado al preparar
la solución colorante.
O Colorante: son aquellas sustancias que
pueden conferir color a otros cuerpos. Es
una estructura molecular no saturada (sales
neutras)
 Tipos de Coloración
O Progresiva: es aquella en donde se hace
actuar el colorante hasta que llegue a su
punto optimo teniendo un control en los
tiempos de coloración (Hematoxilina de
Mayers)
O Regresiva: es en donde se realiza primero
una sobre coloración y luego se elimina el
resto del colorante por medio d
diferenciadores. (Diferenciación)
O El mecanismo fisicoquímico de la coloración tisular
esta vinculado a la formación de uniones
intermoleculares por atracción electrostática (entre
cargas contrarias-electro adsorción) o por fuerzas d
tensión superficial (interacción molecular entre los
líquidos por fuerzas de gravitación generadas al
dispensar las moléculas muy próximas entres si)
Tinciones de Romanowsky
O Tinción Giemsa (protozoos)
1g colorante, 66ml metanol y 66 ml
glicerol
Buffer a pH 6.8
O Tinción Wright
0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml de
glicerol.
Buffer a pH 7.2
O Tinción de May-Grünwald o Jenner (variante
del Wright), no produce efecto cromático
pero si ayuda a observar las granulaciones
leucocitarias.
Característica General
O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una
combinación de colorantes básicos y ácidos
O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich
Romanowsky
O Conformados por:
O Colorante catiónico (Azur B)
O Colorante aniónico (Eosina)
O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y
Wright
O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar
estabilidad)
Anticoagulantes usados en
Hematología
O Anticoagulante: sustancia que bloquea el
mecanismo de coagulación evitando la
formación de fibrina (coagulo)
O Uso: obtención de plasma
O Mantienen la morfología y fisiología sanguínea.
O No usarlo por mas de 24h a 4°C
O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica,
Heparina de litio, citrato trisodico, ACD, Oxalato
de potasio.
 EDTA (C10H16N2O8)
O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica.
(etilendiaminotetraacético)
O Acción quelante (Ca++)
O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis
sanguíneo.
O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio
(solubilidad)
O ICSH recomienda la sal dipotasica
O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de
calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de
4.8+/-1,0
O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
 HEPARINA SODICA,
HEPARINA DE LITIO
O Anticoagulante fisiológico
O Impide la transformación de protrombina a
trombina.
O No es recomendado para el usado de frotis
sanguíneo.
O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por ml
de sangre
O Usado para pruebas de fragilidad osmótica.
Citrato Sódico (C6H5O7Na3)
O Impide que el calcio se ionice.
O Utilizado para las pruebas de hemostasia y
pruebas de sedimentación
O Proporción 9: 1 (hemostasia)
O Proporción 4:1 (pruebas de sedimentación)
O Se utiliza en una concentración de de 0.106
mol/l (31,3 g/L de C6H5O7Na3.2H2O).
 ACD
O Usado fundamentalmente en Banco de
Sangre para la conservación de unidades.
O Proporción usada: un volumen de ACD con 4
volúmenes de sangre
O Composición:
O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g,
Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.