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MICROPROPAGACIÓN DE SEIS ACCESIONES DE

PAPA RUNA (Solanum tuberosum ssp.


andigena) EN VÍAS DE OBTENER
MICROTUBÉRCULOS PARA LA PRODUCCIÓN DE
SEMILLA DE PAPA

TESIS DE GRADO PARA OBTENER EL TÍTULO DE INGENIERO


AGRÓNOMO

Jhonny Delgado Condori

CBBA - 2017
INTRODUCCIÓN
Papa (Solanum tuberosum L.)

Tn (millones )
1000
900 872

800
680 663
700
600
500
400 320
300
200
100
0
Maiz Arroz Trigo Papa

Fuente: FAOSTAT, 2011


INTRODUCCIÓN
Origen y distribución
INTRODUCCIÓN

Países productores de papa

31.501.354

96.136.320

46.395.000

1.103.995
INTRODUCCIÓN
Papa Runa (solanum Tuberosum ssp. andigena)
Yana runa Puka runa Bola runa
OBJETIVOS

General
Propagar mediante técnicas de
cultivo in vitro, seis accesiones papa
Runa (Solanum tuberosum ssp.
andigena).
OBJETIVOS

Específicos
1.Establecer in vitro las accesiones de
papa Runa, en los medios Murashige
y Skoog (MS) y CIP, a partir de brotes
desinfectados.
2.Multiplicar los explantes establecidos
in vitro.
3.Inducir los explantes a producir
microtubérculos.
MARCO TEORICO

Dificultades en la producción de papa

Factores Bióticos Factores abióticos

El nulo o poco uso de


semilla certificada
MARCO TEÓRICO

Esquemas de establecimiento, micropropagación


y tuberización in vitro de papa

Fase 1

fase 2

fase 3
MATERIALES Y MÉTODOS
 Ubicación
MATERIALES Y METODOLOGÍA

 Material vegetal

N° Número de Nombre accesión


accesión
1 BOL4263
2 BOL4321
3 BOL4421
4 BOL4541
5 BOL4571 RUNA
6 BOL5233
7 BOL5360
8 BOL5704
9 BOL5783
10 BOL4651
11 BOL4926 PUKA RUNA
12 BOL5384
13 BOL5856
14 BOL4913
15 BOL5296 YANA RUNA
16 BOL7027
17 BOL7155
18 BOL4648 BOLA RUNA
19 BOL4311 YURAJ RUNA
20 BOL6909
21 BOL4580
22 BOL4637 SANI RUNA
23 BOL4659
MATERIALES Y METODOLOGÍA

 Materiales del laboratorio

Agentes desinfectantes
Reactivos
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Cristalería y varios
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Equipos
MATERIALES Y METODOLOGÍA

 Procedimiento experimental

Fase de
establecimiento

Fase de
multiplicación

Fase de
microtuberización
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Fase de establecimiento

Ruptura de la dormancia Preparación del medio


de cultivo
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Fase de establecimiento
Esterilización asepsia del
material del laboratorio
Desinfección de brotes
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Fase de establecimiento

Etapa de la cámara de Variable de respuesta


flujo laminar

A los 21 días

Porcentaje de
contaminación
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Fase de multiplicación

Análisis estadístico Variable de respuesta


Diseño experimental…………. DCA
Croquis de experimento
Factor A…….Accesiones de papa Runa (R, A los 21 días
PR, YR, BR, yR y SR)
Factor B……..Medios de cultivo (MS y CIP) Coeficiente de
multiplicación

Número de nudos por


explante
MATERIALES Y METODOLOGÍA

Fase microtuberización

Análisis estadístico
Variable de respuesta
Diseño experimental…………. DCA
Croquis de experimento
Factor A…….Accesiones de papa Runa (R, PR, A los 45 días:
YR, BR, yR y SR)
Factor B……..Medios de cultivo (MS y CIP)
• Número de
microtubérculos por
explante

• Peso fresco de
microtubérculos

• Diámetro de
microtubérculos
RESULTADOS
Establecimiento y desinfección de los brotes
N° Número de Nombres de las Altura del Altura del Contaminación
accesión accesiones explante MS explante CIP (%)
(cm) (cm) hongo bacteria

1 BOL4263 0.3 3.5


2 BOL4321 3.5 1.5
3 BOL4421 2.3 3.7
4 BOL4541 3.2 6
5 BOL4571 RUNA 3 2 10 3
6 BOL5233 0 3.5
7 BOL5360 0 1.5
8 BOL5704 0.8 0.5
9 BOL5783 0.3 1
10 BOL4651 1.5 1
11 BOL4926 PUKA RUNA 0 2
12 BOL5384 0 0.8
13 BOL5856 0.7 0.6
14 BOL4913 2 4
15 BOL5296 YANA RUNA 0.6 1.5 5 1
16 BOL7027 2.7 2.7
17 BOL7155 6.5 2
18 BOL4648 BOLA RUNA 0.3 0.6
19 BOL4311 YURAJ RUNA 0.6 2
20 BOL6909 1,5 1.8
21 BOL4580 4.5 3.5
22 BOL4637 SANI RUNA 1 7 2 1
23 BOL4659 0 0
RESULTADOS
Porcentaje de contaminación

EXPLANTE VIVO HONGO BACTERIA

100%

100%

100%

97%
94%
87%
10%

5%
3%

2%
1%

1%
0
0
0

0
0

0
RUNA PUKARUNA YANA RUNA BOLA RUNA YURAJ RUNA SANI RUNA
RESULTADOS
Número de nudos por explante
Fuentes de variación Grados de Valor F Pr > F
libertad
Accesiones 5 20.08 <.0001 **
Medio 1 17.12 0.0001 **
Accesiones *medio 5 1.41 0.2384 ns
7

5
Nudos/explante

0
4541R 4926PR 4913YR 4648BR 4311yR 4647SR
Accesiones
CIP MS
RESULTADOS

Explantes en multiplicación
RESULTADOS

Número de microtubérculos por explante


Fuentes de variación Grados de Valor F Pr > F
libertad
Accesiones 5 0.20 0.9593 ns
Medio 1 4.76 0.0391 ns
Accesiones *medio 5 0.39 0.8519 ns

2.5
Microtuberculos/explante

1.5

0.5

0
4541R 4926PR 4913YR 4648BR 4311yR 4647SR
Accesiones
CIP MS
RESULTADOS
Microtubérculos/ magenta

Puka runa Yuraj runa

Bola runa Yana runa


RESULTADOS

Peso fresco de microtubérculos


Fuentes de variación Grados de Valor F Pr > F
libertad
Accesiones 5 96.31 <.0001 **
Medio 1 37.77 <.0001 **
Accesiones *medio 5 14.79 <.0001 **
0.35

0.3

0.25
Peso (gr)

0.2

0.15

0.1

0.05

0
4541R 4926PR 4913YR 4648BR 4311yR 4647SR
Accesiones
CIP MS
RESULTADOS

Diámetro de los microtubérculos


Fuentes de variación Grados de Valor F Pr > F
libertad
Accesiones 5 0.67 0.6523 ns
Medio 1 6.00 0,0220 ns
Accesiones *medio 5 0.70 0.6288 ns

3.5

2.5
Diametro (mm)

1.5

0.5

0
4541R 4926PR 4913YR 4648BR 4311yR 4647SR
Accesiones
CIP MS
RESULTADOS
CONCLUSIONES
De acuerdo a los objetivos planteados y los
resultados obtenidos se concluye:
• La desinfección con formol o formaldehido
al 37% ha sido el apropiado en brotes de
papa.
• El medio de cultivo CIP, resultó
consistentemente mejor, con valores
significativamente superiores en él número
de entrenudos, en los síes accesiones de
papa Runa.
CONCLUSIONES

• En la tuberización in vitro, el medio de


cultivo CIP, resultó superior
estadísticamente en número de
microtubérculos por explante, diámetro,
y peso fresco de los microtubérculos.

Con un 99 % de seguridad que las


accesiones de papa runa del Banco
Nacional de Germoplasma de Raíces y
Tubérculos Andinos, no tienen la misma
respuesta y comportamiento en los dos
medios (MS y CIP).
La técnica de cultivo in vitro en papa es
una etapa importante para multiplicar y
limpiar fitopatógenos, para producción de
semilla masivamente y libres de
enfermedad. También es una técnica de
conservación ex situ, que se puede
conservar recursos genéticos.
Gracias…