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BIOQUÍMICA
TESIS
Presentado por:
QUÍMICO FARMACÉUTICO
Asesor:
1
IQUITOS-PERÚ
2016
2
ÍNDICE
RESUMEN 10
I INTRODUCCIÓN 12
II OBJETIVOS 15
2.1 Objetivo General 15
2.2 Objetivos Específicos 15
CAPÍTULO I
III. MARCO TEÓRICO 16
3.1 Antecedentes 16
3.2 Marco conceptual 17
3.2.1 Bioactividad de la familia Annonaceae 17
3.2.2 Descripción taxonómica de Unonopsis 17
3.2.3 Descripción botánica 18
3.2.4 Distribución Geográfica 19
3.2.5 Clima 19
3.2.6 Lugares de crecimiento 19
3.2.7 Usos Tradicionales 20
3.3 Farmacognosia 20
3.3.1 Aspectos que estudia la Farmacognosia 22
3.3.2 Control de Identidad 23
3.4 Tamizaje Fitoquímico 25
3.5 Compuestos del Metabolismo Primario 26
3.6 Compuestos del Metabolismo Secundario 28
3.7 Metodología en el Análisis Fitoquímico 32
3.7.1 Recolección y Clasificación de la especie botánica 32
3.7.2 Extracción, separación y purificación de constituyentes químicos 32
3.7.3 Análisis fitoquímico de metabolitos secundarios 33
3.7.3.1 Identificación de alcaloides 33
3.7.3.2 Identificación de triterpenos y esteroides 33
3.7.3.3 Identificación de quinonas 34
3.7.3.4 Identificación de sesquiterpenolactonas 35
3.7.3.5 Identificación de carotenos 35
3.7.3.6 Identificación de aceites esenciales 35
4
3.7.3.7 Identificación de azúcares reductores 36
3.7.3.8 Identificación de principios amargos 36
3.7.3.9 Identificación de saponinas 36
3.7.3.10 Identificación de fenoles y taninos 37
3.7.3.11 Identificación de flavonoides 37
3.7.3.12 Identificación de aminoácidos y aminas 38
3.7.3.13 Identificación de glicósidos cardiotónicos 38
3.7.3.14 Identificación de mucílagos 38
3.7.3.15 Identificación de glucósidos 38
3.7.3.16 Identificación de glicósidos cianogénicos 39
3.7.4 Parámetros fisicoquímicos 39
3.7.4.1 Determinación de humedad residual 39
3.7.4.2 Determinación de cenizas totales 40
3.7.4.3 Determinación de cenizas solubles en agua 40
3.7.4.4 Determinación de cenizas insoluble en ácido clorhídrico 40
IV Definiciones Operacionales 41
4.1 Variables de estudio 41
4.2 Indicadores 41
4.3 Operacionalización de variables 42
CAPITULO II
V METODOLOGÍA 43
5.1 Tipo de investigación 43
5.2 Población y muestra 43
5.3 Criterios de inclusión y exclusión 43
5.4 Materiales, equipos e instrumentos 45
5.4.1 Material vegetal 45
5.4.2 Materiales de laboratorio 45
5.4.3 Equipos 45
5.4.4 Reactivos 45
5.5 Procedimiento experimental 46
5.5.1 Extracto etéreo 48
5.5.2 Extracto etanólico 50
5
5.5.3 Extracto acuoso 52
5.5.4 Parámetros fisicoquímicos 53
CAPÍTULO III
RESULTADOS 56
DISCUSIÓN 60
CONCLUSIONES 61
RECOMENDACIONES 62
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 63
ANEXOS 68
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura N° 1. Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 18
Figura N° 2. Mapa con los puntos de colecta de la especie Unonopsis floribunda
Diels (ICOJA) 44
Figura N° 3. Flujograma de la extracción del material vegetal para la aplicación
de técnicas para el tamizaje fitoquímico 47
Figura N° 4. Flujograma del tamizaje fitoquímico en el extracto etéreo de
Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 49
Figura N° 5. Flujograma del tamizaje fitoquímico en el extracto etanólico de
Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 51
Figura N° 6. Flujograma del tamizaje fitoquímico en el extracto acuoso de
Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 52
INDICE DE TABLAS
Tabla N° 01. Tamizaje fitoquímico del extracto etéreo de hoja, corteza y raíz de
Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 56
Tabla N° 02. Tamizaje fitoquímico del extracto etanólico de hoja, corteza y raíz
de Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 57
Tabla N° 03. Tamizaje fitoquímico del extracto acuoso de hoja, corteza y raíz de
Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 58
Tabla N° 04. Porcentaje de humedad, cenizas totales, cenizas soluble en agua y
cenizas insoluble en ácido clorhídrico de Unonopsis floribunda
Diels (ICOJA) 59
ÍNDICE DE ANEXOS
FOTOGRAFÍAS
Fotos N° 1 Hoja, corteza y raíz de Unonopsis floribunda Diels (ICOJA) 73
A nuestro Padre Celestial por darnos la vida, salud, sabiduría e inteligencia y ser
nuestro guía, para poder cumplir nuestro objetivo y alcanzar nuestra meta.
A nuestros padres y hermanos, por su tolerancia y cuidado, han sido nuestros guías y
A la Q.F. Frida Enriqueta Sosa Amay por sus enseñanzas; y por brindarnos todo lo
nuestra tesis.
Al Q.F. José Torres Tejada, Ing. Gladys Cárdenas de Reátegui, y Q.F. Henry
RESUMEN
hoja (11,41%), corteza (10,52%), raíz (11,16%); cenizas totales: hoja (6,85%),
corteza (7,15%), raíz (5,67%); cenizas solubles en agua: hoja (4,85%), corteza
(5,15%) raíz (3,67%); cenizas insolubles en ácido clorhídrico: hoja (8,68%), (corteza
8,92%), raíz (7,38%) valores por debajo de lo establecido por las Normas Generales
SUMMARY
determining the physicochemical parameters of the leaf, bark and root of Unonopsis
floribunda Diels (icoja) carried out in the Laboratory of the Natural Resources
respective qualitative and quantitative study. The ethereal extract analysis reports
sesquiterpenolactone / coumarin groups in the cortex and root, and a diverse variety
coumarins and saponins) and leaf (tannins). The aqueous bark extract reports
parameters reported a moisture content for leaf (11.41%), bark (10.52%), root
(11.16%); Total ashes: leaf (6.85%), bark (7.15%), root (5.67%); Water soluble ash:
leaf (4.85%), bark (5.15%) root (3.67%); Ash insoluble in hydrochloric acid: leaf
(8.68%), (bark 8.92%), root (7.38%) values below that established by the General
Norms of the Pharmacopoeia; While insoluble ashes in acid medium were found
Keywords: Unonopsis floribunda, residual moisture, total ash, soluble ash, acid
insoluble ash.
I. INTRODUCCIÓN
Las plantas medicinales, fueron por mucho tiempo el principal y muchas veces el
recurso del cual disponían los galenos. La comunidad científica comenzó a mostrar
población del mundo. En los países en desarrollo, el uso de las plantas se eleva a más
del 80%. Cerca del 50% de la población de América Latina, carece de acceso a las
drogas modernas, mientras que del 60 al 70% utiliza plantas medicinales para el
rural, de las cuales cerca de 1000 son amazónicas. Al menos el 80% de la población
amazónica depende del uso de esas plantas para tratar sus problemas de salud. La
Existe un gran sector del mercado que está dedicado a la venta informal de dichos
Sin embargo, a pesar de que han aumentado las investigaciones y estudios científicos
adecuados; éstos a su vez deben ser analizados y establecidos dentro del sistema
para así continuar con los demás procedimientos que permitan la obtención de un
empírica, con miras a mejorar su eficacia frente a las dolencias descritas y seguridad
para resaltar, validar y rescatar los valores ancestrales sobre su uso como
3.1 ANTECEDENTES
el que menciona que no se concluyó la investigación en esta planta; sin embargo las
nuevos agentes que presentan esta actividad farmacológica. Algunas especies de esta
gran familia se han identificado interesantes metabolitos con actividad biológica del
Reino : Plantae
Subreino : Tracheobionta
División : Magnoliophyta
Clase : Magnoliopsida
Subclase : Magnolidae
Orden : Magnoliales
Familia : Annonaceae
Género : Unonopsis
Es una especie arbórea que puede llegar a medir hasta 20 m de altura. Las ramas son
cm de longitud con yemas florales esféricas. Los frutos suelen ser múltiples,
Esta especie se encuentra distribuido en regiones selváticas del Perú: En las regiones
3.2.5 Clima
La especie se desarrolla tanto en zona tropical húmeda como en zona tropical seca.
Con una temperatura media anual variable entre 26° y 27ºC y una precipitación
orgánica. Su hábitat es muy variable desde áreas no inundables hasta aquellas que se
inundan anualmente, tanto en zonas cercanas como alejadas de los cuerpos de agua y
luego ser desecada a pleno sol o bajo sombra para su posterior conservación. La
aguardiente es utilizada para mejorar los síntomas de los descensos vaginales (16) (17).
3.3 FARMACOGNOSIA
Estudia los principios activos de origen natural que pueden poseer un potencial
farmacológica
e industrial (18).
realiza a nivel externo, y en el caso de la droga hay que hacer cortes histológicos y
Todo ello con el fin de obtener drogas con mayor contenido en principios activos,
e. Las condiciones en que se almacena una droga son importantes porque influyen
química se conoce como Fitoquímica. Hay que hacer ensayos cualitativos para
llegar a los principios activos que se encuentran en una droga. También hay que
pero sólo para las drogas oficinales, hay otras drogas que se comercializan, pero no
tiene un objetivo determinado y que se puede usar para terapéutica. El control hay
(18)
.
El control de identidad es el inicio del punto de partida para los posteriores pasos en
histología, etc) de la especie en estudio, y para ello hay que hacer a su vez diferentes
a) Ensayos morfológicos:
Muchas veces sólo tenemos la droga (parte medicinal), otras veces disponemos de
toda la planta y otras de un órgano, que es lo que habrá que analizar. Estos
sustancias:
Reactivos aclarantes: Estos agentes expanden las estructuras, por lo que nos resulta
estructuras concretas. Tales como cloruro de zinc; agua de yodo; sudan III (18).
c) Ensayos microscópicos:
Cuando tenemos una droga pulverizada hay que observar olor, el color y el sabor (si
es un polvo verde suponemos que es una hoja) y conocer las distintas estructuras que
• Metabolitos primarios: Son importantes para la vida vegetal; por lo que éstos
vitaminas, hormonas.
• Metabolitos secundarios: Son compuestos químicos de estructura relativamente
parte de la droga y se realiza un proceso extractivo que permite aislar los principios
Extracción mecánica:
Permite obtener los principios activos disueltos en los fluidos propios de la planta,
los cuales una vez extraídos se denominan jugos. La extracción mecánica se puede
realizar por expresión, la cual consiste en ejercer una presión sobre muestra, por
calor, o mediante incisiones por las que fluyen los fluidos de la planta.
Destilación:
menos o nada volátiles. Es un método en el que se utiliza una fuente de calor, por
solubilizar los principios activos. Los principios activos deben pasar de la muestra
La extracción con solventes es uno de los métodos que se emplea con más
PRIMARIO CARBOHIDRATOS
POLISACÁRIDOS
de monosacáridos que tienen una distribución casi universal y aseguran, en los seres
LÍPIDOS
alcohol y éter e insolubles en agua. Se forman en las plantas a partir de los hidratos
de carbono, las cuales los conservan como sustancias energéticas de reserva. Poseen
productos ricos en lípidos son: avena, cacao, girasol, maíz y olivo. Al contrario que
PROTEÍNAS
formadas por aminoácidos unidas entre sí. Existen unos veinte aminoácidos
diferentes que se encuentran comúnmente en las plantas y los animales. Una proteína
normal puede contener 300 aminoácidos o más. Cada proteína tiene un número y una
Sirve como mensajeros químicos ya que producido en una parte de la planta tiene
como "blanco" otra parte de ella. Las hormonas y las enzimas cumplen funciones de
en plantas.
VITAMINAS
ÁCIDOS NUCLEICOS
GLICÓSIDOS
verde, azul, púrpura o negra al tratarlas con cloruro férrico (solución acuosa o
alcohólica).
irritante y violenta al disminuir la reabsorción del agua, sodio y cloro a nivel del
colon (18).
SAPONINAS
producir espuma cuando se agita una solución acuosa que las contiene. La formación
de espuma se debe a que las saponinas disminuyen la tensión superficial del agua
FLAVONOIDES
naturales. Se emplean desde hace mucho tiempo como colorantes de lana. Presenta
ANTOCIANINAS
Son pigmentos que se encuentran en la planta y son responsables del color del
estimulante del tono nervioso). Reducen las glicoproteínas de las paredes de los
propias de la diabetes.
CUMARINAS
TANINOS
curtir la piel y su poder astringente. Los taninos al precipitar las proteínas salivares y
ACEITES ESENCIALES
Son conocidos como los constituyentes odoríferos o esencias de una planta, las
ALCALOIDES
suponer que no son vitales para las plantas. Son conocidas por su acción
nombres populares porque la misma puede tener diferentes nombres dependiendo del
lugar de donde proceden; además que muchas especies diferentes pueden ser
activos y de sus propiedades farmacológicas. El poder extractivo del agua suele ser
inflorescencias, hojas, raíces, semillas, corteza, o frutos. Estos pueden contener una
lo que una limpieza manual previa a la extracción debe ser prescindible; sin embargo
el porcentaje de tales sustancias puede ser insuficiente como para causar el rechazo
solución ácida. Añada una pizca de cloruro de sodio en polvo, agite y filtre.
turbidez definida (++) o precipitado copos (+++) de color crema, indica que la
c.- Ensayo de Wagner: Se parte al igual que en los casos anteriores de la solución
acético y se mezcla bien. Por la pared del tubo de ensayo se dejan correr 2 ó 3
gotas de ácido clorhídrico concentrado, sin agitar: Un ensayo positivo se tiene por
fases o en desarrollo de un solo color. Muy pocas veces puede observarse el primer
producen cambios de coloración azul o azul verdoso; las segundas producen rojo,
rosado o púrpura.
un tubo de ensayo con 1mL de ácido sulfúrico (H 2SO4) concentrado que se deja
correr lentamente por la pared del tubo. La aparición de una coloración amarilla
dienos que aparece una coloración violeta o azul con el tiempo (26, 27).
lactónicos pueden dar positivo el ensayo: como las lactonas sesquiterpénicas. Para
b.- Ensayo de Legal: A una solución del extracto disuelto en alcohol etílico se le
En caso positivo aparece una coloración roja intensa que desaparece en unos
a.- Ensayo de Carr-Price: A una alícuota del extracto etéreo (éter de petróleo) se le
añade 1 ml de una solución diluida en agua del colorante de Sudan III. Se calienta
de color rojo oscuro indica la presencia de lípidos y/o aceites esenciales (26, 27).
3.7.3.7 Identificación de azúcares reductores
de un precipitado rojizo.
el sabor a una gota del extracto acuoso del vegetal y reconociendo el mismo al
a.- Ensayo de la espuma: Permite reconocer la presencia de saponinas tanto del tipo
a.- Ensayo del cloruro férrico: A la fracción disuelta en 1 ml de etanol se añade 0.5
las fases y se deja reposar hasta que las mismas se separen. El ensayo se considera
de sodio al 20%. Un ensayo positivo se indica por una coloración violeta o azul.
hidrófilo que aumenta la densidad del agua cuando se extrae. Para ello una alícuota
del extracto se deja enfriar a 0-5 °C y si la solución toma una consistencia gomosa al
cloroformo para resaltar la actividad enzimática. Se coloca una tira de papel de filtro
tampón. Hay que evitar que el papel toque las paredes del recipiente. Caliente a 35°C
igual a 14%; este porcentaje de humedad permite que la droga se conserve por
de los tejidos de las mismas plantas y las "cenizas no fisiológicas" son los residuos
son la diferencia calculada en peso entre las cenizas totales y el residuo remanente
insolubles en ácido es el residuo obtenido después de hervir las cenizas totales con
ácido clorhídrico diluido, lavar el material insoluble sobre papel filtro, esta
Metabolitos secundarios.
Parámetros fisicoquímicos.
4.2 Indicadores
Humedad residual en %
Cenizas totales en %
VARIABLES
DEFINICIÓN DEFINICIÓN
DE INDICADORES ÍNDICES
CONCEPTUAL OPERACIONAL
ESTUDIO
42
CAPÍTULO II
V. METODOLOGÍA
farmacognósticas.
La muestra vegetal estuvo constituida por las hojas, corteza y raíz de Unonopsis
floribunda Diels (ICOJA), que fue recolectada mediante la técnica de muestreo por
conveniencia.
43
Figura N°2. Mapa con los puntos de colecta de la especie Unonopsis
floribunda Diels (icoja).
44
5.4 Materiales Equipos e Instrumentos
Frascos x 2l con tapa hermética, condensador, balón de vidrio 250 mL, papel filtro
n°1, papel indicador de pH, embudos de vidrio, vaso de precipitado de 100 y 250
mL; tubo de ensayo 15mm x 100mm, placas de Petri, lunas de reloj, pinzas
5.4.3 Equipos
5.4.4 Reactivos
Cloroformo, etanol, ácido clorhídrico, ácido pícrico, ácido sulfúrico concentrado, alcohol
amílico, anhídrido acético, hidróxido de sodio al 5%, ácido clorhídrico al 1%, reactivo de
1%, hidróxido de sodio al 10%, cloruro férrico al 5%, ácido 3,5-dinitrobenzoico, hidróxido
30.5.
realizar una separación de las partes deterioradas y evitar que se mezcle con otras
especies.
estufa a 45°C por espacio de 4 horas por 4 días la cual dará lugar a un secado
uniforme para así evitar el deterioro (producción de hongos), hasta que este crujiente
identificación taxonómica.
Posteriormente cada una de las muestras se filtró para los ensayos correspondientes
IMET de Es Salud.
MATERIAL VEGETAL
FILTRAR
A una fracción del extracto etanólico se llevó a sequedad en baño maría y el residuo
ladrillo.
rosado.
A una fracción del extracto etanólico se le agrego 1ml de la solución SUDAN III,
A una fracción del extracto etanólico se le agregó 2ml de nihindrina 0,2% en alcohol
para luego calentar en baño maría por 5-10 minutos. La reacción es positiva con la
A una fracción del extracto etanólico, se le añadió acetato de sodio previo al ensayo
A una fracción del extracto etanólico se llevó a sequedad en baño maría para luego
DIVIDIR EN FRACCIONES
2ml del extracto ENSAYO DE ESPUMA 2ml del extracto 2ml del extracto 2ml del extracto
(Saponinas) ENSAYO DE BALJET ENSAYO DE LIEBERMAN - BURCHARD ENSAYO DE CLORURO FÉRRICO
Figura N°5. Flujograma del tamizaje fitoquímico en el extracto etanólico de Unonopsis floribunda Diels (icoja)
51
5.5.3 EXTRACTO ACUOSO:
Se identificaron compuestos de alta polaridad: saponinas, taninos, mucílagos.
EXTRACTO ACUOSO
DIVIDIR EN FRACCIONES
52
5.5.4 PARÁMETROS
humedad residual
Este análisis se realizó por triplicado. Se colocó un crisol durante 1 hora en la estufa
hasta que las variaciones entre dos pesadas sucesivas no excedieran de 5mg (29).
𝐌𝟏−𝐌𝟐
𝐇𝒈 = 𝐱 𝟏𝟎𝟎 𝐦/𝐦 (%)
𝐌
Dónde:
temperatura de 700 a 750°C durante 24h. El crisol se dejó enfriar en una desecadora
de dos pesadas sucesivas no difiere más de 0,5mg por gramo (masa constante).
Para obtener la masa constante los intervalos entre calentamiento y pesada son de 30
minutos. Al enfriar el crisol, el residuo dio color blanco o casi blanco (29).
53
La cantidad de cenizas totales Ct en base anhidra se calculó por la fórmula siguiente:
𝐌𝟐−𝐌 𝐂𝐈𝐱 𝟏𝟎𝟎
𝐂𝐢 = 𝐱 𝟏𝟎𝟎 (%) 𝐂𝐭 =
𝐌𝟏−𝐌 𝟏𝟎𝟎−𝐇
Dónde:
H =% Humedad
Es la diferencia de peso entre las cenizas totales y el residuo remanente después del
fórmulas siguientes:
𝐌𝟐−𝐌𝟒 𝐂𝐈𝐱 𝟏𝟎𝟎
𝐂𝐢 = 𝐱 𝟏𝟎𝟎 (%) CA =
𝐌𝟏−𝐌 𝟏𝟎𝟎−𝐇
Dónde:
54
M = Masa del crisol vacío (g).
H =% humedad.
solución de HCl al 10% durante 5 minutos. Luego, se filtró a través de papel de filtro
sin cenizas. Lavando cuidadosamente con agua caliente y colocando el papel de filtro
Dónde:
H = % humedad.
CAPÍTULO III
RESULTADOS
TABLA N° 01: Tamizaje fitoquímico del extracto etéreo de hoja, corteza y raíz
de Unonopsis floribunda Diels (ICOJA)
Triterpenos y Lieberman
esteroles - - - - - - - - -
Burchard
Cumarinas Baljet - +++ +++ - +++ +++ - +++ +++
Lípidos y aceites
Sudán III - - - - - - - - -
esenciales
sesquiterpenlactónicos (cumarinas).
Triterpenos y Lieberman
- - - - - - - - -
esteroles Burchard
Cloruro +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++
Taninos
férrico
Cumarinas Baljet - ++ ++ - ++ ++ - ++ ++
Saponinas Espuma - +++ - - +++ - - +++ -
Lípidos y aceites Sudán III - - - - - - - - -
esenciales
taninos;
taninos.
TABLA N° 03: Tamizaje fitoquímico del extracto acuoso de hoja, corteza y raíz
de Unonopsis floribunda Diels (ICOJA)
Mucílagos - - - - - - - - -
son valores muy por debajo de lo establecido por la USP (12%). Esto es un
indicativo que las muestras están libres de contaminación con tierra, sílice o en su
(3,48%). confirma que no hay presencia de iones como calcio, magnesio, hierro,
sodio, potasio, etc. porque estos son solubles en agua. Sin embargo el porcentaje de
(6,21%) son valores por encima de límites según el MINSA. establecidos por lo que
floribunda Diels (icoja), se encontró que la corteza y raíz posee abundante presencia
metabolito.
que no hay proliferación de hongos y bacterias que puedan dañar la muestra, por lo
En las cenizas totales se encontraron valores muy por debajo de lo establecido por la
encuentran dentro de los límites establecidos (< 5 %), al nivel nacional según el
MINSA.
RECOMENDACIONES
la especie en estudio.
Pp. 172-174.
(2006).
http://www.monografias.com/trabajos52/demanda-chuchuhuasi/demanda-
chuchuhuasi2.shtml#descrip.
58.
http://www.deperu.com/abc/plantas-medicinales.
https://www.ecured.cu/Unonopsis_floribunda.
Pp. 7- 48.
del segundo nivel de atención Rev. Med. Inst. Mex. Seguro Soc. Año 2007; 45 (5):
453-458.
http://www.plantas-medicinal-farmacognosia.com/temas/vitaminas/.
http://medicina.usac.edu.gt/quimica/biomol/acids.htm.
www.ispch.cl/lab_amb/met_analitico/doc/ambiente%20pdf/HUMEDAD_en_estufa_
de_aire.pdf.
ICOJA
X Y Lugar de DAP Altura Altura
extracción (cm) fuste(m) total (m)
Poma rosa, huito,
1 03° 59’ 7.7” 73° 26’ Carretera 30 17 20 uvilla, chontaquiro,
sur 23.4” Iquitos-Nauta cedro, uña de gato.
oeste Km 30.5
Pijuayo, cordoncillo,
2 03° 59’ 73° 26’ Carretera 18 15 18 chuchuhuasi, shapaja,
19.9” sur 10.2” Iquitos-Nauta caña agria, zapote,
oeste Km 30.5 castaña, sangre de
grado.
Huamansamana,
3 03° 59’ 73° 26’ Carretera 23 15 18 capinuri, amasisa,
25.1”sur 15.4” Iquitos-Nauta retama, lupuna y
oeste Km 30.5 granadilla.
70
ANEXO N° 03: Preparación de reactivos
Solución reactiva de Dragendorff: Mezclar 21.3 ml. de ácido nítrico (D = 1.42) con
suficiente agua destilada para hacer 62 ml. En 20 ml de esta solución se disuelven 5 g
de subnitrato de bismuto. Por separado, se disuelven 31.2 g de yoduro de potasio en
69 ml de agua. Mezclar luego ambas soluciones.
Solución reactiva de hidróxido de sodio al 5%: Puede ser sustituida por hidróxido
de potasio o de amonio a la misma concentración.
71
Solución B: 35 g de tartrato de sodio y potasio y 15.5 g de hidróxido de sodio
disuelto en 100 ml de agua.
Solución reactiva de Benedict:
Solución A: 17.3 g de citrato de sodio, 10 g de carbonato de sodio anhidro y 60
mL de agua destilada.
Solución B: 1.73 g de sulfato de cobre pentahidratado en 15 ml de agua destilada.
Se mezclan ambas soluciones y se completa a 100 ml con agua destilada.
Solución de Gelatina: 0.5 g de gelatina en polvo en agua. Esta solución debe ser
recién preparada.