Cocos Gram Negativo

Neisseria spp & Moraxella sp

M. Paz
Microbiologa UMG-2011

Gnero Neisseria
nico reservorio:

ser humano
Dos especies patgenas

N. gonorrhoeae
Gonorrea

N. meningitidis
Meningitis epidmica/meningitis meningocccica

Muchas especies no patgenas

habitantes del tracto respiratorio.

Gnero Neisseria
Neisser (1879)

Describi al agente causal de la gonorrea

Leistikow & Loeffler (1882)

Cultivo por primera vez

Weichselbaum (1887)

aisl a N. meningitidis de LCR de un paciente

con meningitis purulenta
endmica, epidmica y meningococcemia
estado de portador

Gnero Neisseria: Morfologa

Aerobios
Cocos Gram Negativo
No mviles
Crecen en parejas

No formadores de esporas
Los cocos individuales son pequeos (0.8 x 0.6
m)

Ocasionalmente en ttradas o racimos

Algunas veces: formas bizarras (autlisis)

Citoplasma y pared celular son similares

entre las dos especies.

Gnero Neisseria: Morfologa

Pared celular: tiene una capa densa y una

membrana externa
Meningococos: tienen cpsula de
polisacridos
Gonococos: no cpsula
Formas coloniales: (gonococos)

T1 y T2: colonias pequeas y virulentas

pili

T3 y T4: colonias ms grandes: avirulentas

No pili

Gnero Neisseria: Metabolismo

Organismo

Crece en agar
sin sangre

Crece a
22C

Oxida
Glucosa

Oxida
Maltosa

Oxida
Sacarosa

N.
meningitidis

N.
gonorrhoeae

Caractersticas de cultivo

Difciles de cultivar
Son susceptibles a cidos grasos txicos y a
metales traza que estn contenidos en la
peptona y en el agar (se contrarresta con
sangre, suero, almidn o carbn)

El agar chocolate es ms adecuado

Ambas especies patgenas sufren rpida

autlisis.

Enzimas autolticas se inactivan a 65C por 30 min

o agregando cianuro de potasio o formalina.

Caractersticas de cultivo

Resistencia a condiciones fsicas y

qumicas es extremadamente baja

Atmsfera de crecimiento

Susceptibles a desecacin
Mueren a 55C por 30 min
5-10% de CO2 (jarra con candela)

Oxidasa (+)

Oxidan rpidamente DPD o TPD (dimetil o

tetrametil para fenilendiamina)
Produce un color de rosado a negro en las colonias

Neisseria meningitidis

Neisseria meningitidis
Usualmente

habita en la nasofaringe
sin causar sntomas
Segunda causa de meningitis
epidmica (adquirida en la comunidad)
en adultos previamente sanos.
Cambio muy rpido de estado de sano
a enfermo de gravedad
Causa tambin meningococcemia

Caractersticas generales de N. meningitidis

Patogenicidad y virulencia
Mediada por los pili
Colonizacin especfica de receptor de las clulas
no ciliadas de la nasofaringe
Cpsula antifagoctica de polisacrido que le
permite diseminarse en ausencia de inmunidad
especfica.
Efectos txicos mediados por hiperproduccin
de lipooligosacrido
Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de
todas las infecciones

Epidemiologa:
Hospedero natural: humano
Diseminacin persona-persona va aerosolizacin de
secreciones respiratorias
Ms alta incidencia en nios menores de 5 aos, personas
institucionalizadas y pacientes inmunodeficientes
Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C
Neumona: serogrupos Y y W135
Infecciones en pases subdesarrollados: serogrupo A
Mayor incidencia en las pocas fras y secas del ao en
todo el mundo

Diagnstico y Tratamiento
Tincin de gram de LCR (difcil cuando hay pocos organismos)
Dx definitivo: cultivo
m.o. fastidioso y muere rpidamente en condiciones de fro y
sequedad.
Tx, prevencin y Control:
Inmunidad pasiva por lactancia
Droga de eleccin: penicilina y alternativamente:
cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima.
Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o sulfadiazina
Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B)
Vacunas de polisacrido conjugado con protenas
transportadoras para nios menores de 2 aos.

Cultivo

Se usa un medio selectivo para recuperar al

meningococo y al gonococo. Cuando est en un
ambiente contaminado con otras bacterias de la
microbiota normal.
Medio selectivo de Thayer Martin
Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina
(inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos) y Trimetoprim
(inhibe a Proteus spp que ocasiona swarming)
Ocasionalmente hay cepas de GC sensibles a la
vancomicina, por lo que siempre debe usarse el agar
chocolate tambin.

Las colonias requieren 48-72 horas para crecer.

Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al

TM, pero usa anisomicina en lugar de nistatina, para
inhibir mejor a Candida albicans).

Cultivo en jarra con candela

Cultivo de N. meningitidis

Enfermedades asociadas con

Neisseria meningitidis
Despus de la diseminacin de
organismos virulentos de la nasofaringe:
Meningitis
Septicemia (meningococcemia) con o sin
meningitis
Meningoencefalitis
Neumonia
Artritis
Uretritis

Infecciones por MGC

Meningococcemia:
Sntomas: fiebre alta, escalofros, dolor muscular y
rash petequial (tpico de infecciones por MGC)
Enfermedad puede ser crnica, moderada o
fulminante.
Tipo fulminante: Sndrome de WaterhouseFriderichsen caracterizado por CID, hemorragia
dentro de la piel, glndulas adrenales y otros
rganos.
Muerte rpida por la toxemia generalizada y el
shock.
La mayora de los sntomas son debidos a la
actividad de endotoxina.

Rash Petequial

Sndrome de WaterhouseFriderichsen

Curso de la enfermedad
meningocccica
Receptores para las fimbrias bacterianas (ganglisido GD1)
sobre las clulas columnares epiteliales no-ciliadas en la
nasofaringe del hospedero.
Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocticas,
evitando la muerte intracelular.
Replicacin intracelular y migracin al espacio subepitelial
donde libera fragmentos de membrana.
Hiperproduccin de endotoxina (lpido A ) y se disemina
al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente
sanguneo): causa la mayora de manifestaciones clnicas
de dao vascular: dao endotelial, vasculitis, trombosis,
CID.

Neisseria gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae
nico

hospedero natural: humano

Portador asintomtico es el mayor
reservorio.
Edad ms afectada: 15-24 aos
Patogenia: gonorrea

Uretritis
Cervicitis

Generalidades de
Neisseria gonorrhoeae
Fcilmente transmitido por contacto sexual
Diplococos Gram-negativo achatados por el lado
de unin.
Fastidiosos, capnoflicos y susceptibles a
temperaturas fras, a la desecacin y a cidos
grasos.
Requiere medios pre-calentados complejos
El medio debe llevar almidn soluble para neutralizar la
toxicidad de los cidos grasos
Crece mejor en atmsfera hmeda suplementada con
CO2

Produce cido de la oxicacin de glucosa, pero

no de otros azcares.

Diagnstico, tratamiento y
prevencin

Tincin de Gram es precisa en muestras masculinas.

Cultivo: diagnstico definitivo
Biologa molecular
Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y
ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe
evitarse porque ya se presenta mucha resistencia.
Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con
Chlamydia sp.
Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1%
Prevencin: educacin (ETS)
NO HAY VACUNA

Crecimiento de GC enMTM

Oxidasa positivo

Prueba de Oxidasa en placa

Prueba de Oxidasa en papel

Identificacin Bioqumica

Para diferenciar entre las especies de

Neisseria y B. catarrhalis.
Pruebas de utilizacin de carbohidratos.
Oxidacin de Carbohidratos

Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con

azcares. Requiere una inoculacin grande e
incubacin sin CO2 y observacin por 24-72
horas.
Resultados: GC: + para glucosa solamente

Azcares en CTA

Epidemiologa de la Gonorrea
Serio subregistro
Diferencia epidemiolgica entre hombres y
mujeres
Mayor reservorio: portador sintomtico
Transmisin sexual
No hay inmunidad protectora para la reinfeccin
(en parte por la diversidad antignica de las
cepas)
Mayor riesgo de enfermedad diseminada en
pacientes inmunocomprometidos.

Mujeres

Hombres

Riesgo post-exposicin (1 contacto) es

de 50%

Riesgo post-exposicin (1 contacto) es

de 20%

Frecuentemente asintomtica y sin dx

Mayora: sintomtico (95%)

Principal reservorio es la portadora

asintomtica

Principal reservorio es la portadora

asintomtica

Infeccin genital primariamente en el

cervix, pero tambin son colonizados la
vagina, la uretra y el recto.

Infeccin genital restringida a la uretra

con descarga purulenta y disuria

Infecciones ascendentes en 10-20%:

salpingitis, abscesos tubo-ovricos,
enfermedad inflamatoria plvica,
infertilidad por infeccin crnica.

Complicaciones raras: epididimitis,

prostatitis y abscesos periuretrales.

Infecciones diseminadas ms comunes:

septicemia, infeccin de la piel y
articulaciones (1-3%)

Infecciones diseminadas muy raras

Puede infectar al infante durante el

parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum

Ms comn en hombres
homosexuales/bisexuales que en la
poblacin heterosexual

Patogenia de Neisseria gonorrhoeae

Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la
membrana mucosa intacta
N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir
membranas intactas o piel con abrasiones.
Adherencia al epitelio mucoso
Penetracin y multiplicacin antes de pasar a travs de
las clulas epiteliales de la mucosa
Establecimiento de la infeccin en la capa subepitelial

Sitios ms comunes de inoculacin:

Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer
Uretra (uretritis) o pene en el hombre

Factores de virulencia asociados a

Neisseria gonorrhoeae

Gonorrea

Ophthalmia neonatorum

Significancia clnica del GC

Infecciones complicadas
Ocurren ms frecuentemente en mujeres

Diseminacin del crvix a las trompas de falopio

Endometritis
Salpingitis
Peritonitis (EIP)
Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas
Sntomas: dolor abdominal bajo, flujo
cervical y vaginal anormal, tero blando.
Puede resultar en infertilidad o en embarazo
ectpico.

Salpingitis

Moraxella catarrhalis

Moraxella catarrhalis

Diplococo gram-negativo
Aerobio y oxidasa positivo
Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y
clasificacin taxonmica como de su consideracin de
comensal o patgeno.
Actualmente, es aceptado como el tercer patgeno ms
importante en el tracto respiratorio humano despus de
Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae.
En los ltimos 20 aos, esta bacteria ha emergido como
un importante patgeno causante de infecciones en el
tracto respiratorio superior de nios y ancianos, e
infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con
enfermedad pulmonar obstructiva crnica (EPOC).
Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras
de -lactamasas.

Moraxella catarrhalis

Micrococcus catarrhalis
Neisseria catarrhalis
En 1970, basndose en la diferencia en el
contenido de cidos grasos y mediante estudios
de hibridacin de ADN se demostr la escasa
homologa que exista entre N. catarrhalis y las
llamadas "verdaderas" especies de Neisseria,
estando, ms cercana al gnero Acinetobacter.
As pues, fue reclasificada y transferida al
gnero Moraxella

Moraxella catarrhalis

Actualmente, el gnero Moraxella engloba cocos

y bacilos cortos relacionados genticamente
Bovre propone su divisin en dos subgneros:
Branhamella, que englobara los cocos y
Moraxella para los bacilos cortos.
Algunos autores prefieren el nombre de
Branhamella catarrhalis

Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos,

mientras que M. catarrhalis son diplococos
M. catarrhalis es un importante patgeno del tracto
respiratorio humano, mientras que las especies de
Moraxella rara vez causan infeccin en humanos.

Patogenia de Moraxella catarrhalis

En nios:

Otitis media
Sinusitis
Bacteremia
Meningitis

En adultos:

exacerbaciones en pacientes con EPOC

neumona en ancianos
infecciones nosocomiales.

Factores de virulencia de Moraxella

catarrhalis
LOS (Lpido A)
Peptidoglucano
Protenas de la membrana externa
Fimbrias
Cpsula
Protenas reguladores del hierro
Resistencia al complemento

Diagnstico de Moraxella
catarrhalis

Muestras clnicas: Gram, Cultivo y pruebas bioqumicas

Crece en medios comunes, como agar sangre y agar
chocolate,
Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris.
Los criterios ms usados para su identificacin son los
siguientes:

Ausencia de pigmentacin en agar sangre (no hemoltica).

Produccin de oxidasa y catalasa.
Produccin de DNAasa.
Hidrlisis de la tributirina.
Ausencia de produccin de cido a partir de glucosa, maltosa,
sacarosa y fructosa.
Reduccin de nitratos y nitritos.

Tratamiento de Moraxella
catarrhalis
Las cepas de

M. catarrhalis son
uniformemente sensibles a las quinolonas,
amoxicilina-clavulnico, cefalosporinas,
ticarcilina, piperacilina, macrlidos,
cloranfenicol y aminoglucsidos.
Se han comunicado casos aislados de
cepas resistentes a las tetraciclinas,
eritromicina, fluoroquinolonas, macrlidos,
piperacilina y a algunas cefalosporinas