Ms.C.

Juan Giles Saavedra

Ms.C. Carlos Abanto Daz
Blgo. Max Siadn Ortega

DIAGNSTICO MICOLGICO
Y
DIAGNOSTICO DE MICOSIS
SUPERFICIALES Y CUTANEAS
1. Conocer las tcnicas para la toma de muestra en el diagnstico
micolgico.

2. Identificar los productos patolgicos de donde se pueden aislar
los agentes etiolgicos de las micosis humanas.

3. Conocer las caractersticas de los exmenes directos, como de
los cultivos de hongos.

4. Describir las caractersticas de las colonias de hongos causantes
de las micosis superficiales y cutneas en cultivos con agar
glucosado de Sabouraud y microscpicamente.
Setas
Filamentosos=Mohos
Levaduras
Ascomycota
(ascomicetes)
Zygomycota
(zigomicetes)
Basidiomycota
(basidiomicetes)
Deuteromycota (hongos
imperfectos), no se les
conoce ciclo de
reproduccin sexual
Chytridiomycota
(quitridiomicetes)

Clulas eucariotas: Ncleo
La mayora tienen pared
celular de quitina,
mananos, glucanos.
Algunas son
encapsuladas, inmviles,
poseen esteroles en su
membrana citoplasmtica
En la naturaleza suelen
ser saprofitos.
Existen unas cuarenta
especies patgenas para
la especie humana.
Hetertrofo.
Aerobios o anaerobios facultativos.
T ptima crecimiento 25-30C.
pH:Crecimiento entre 2 y 9.
Crecimiento lento (hasta 2 meses).
Modalidades de reproduccin

Asexual o imperfecto Anamorfo

Sexual o perfecto Teleomorfo

Sexual y Asexual (Anamorfo y Teleomorfo juntos =
Holomorfo





La reproduccin asexual no genera variabilidad pero es mucho ms rpida
Los hongos pueden reproducirse de diferentes formas:
Asexual. Se multiplican las clulas dando lugar a nuevas hifas.
Mediante esporas asexuales en el esporangio
Por Conidias en conidiforos
Por gemacin (levaduras)
Por fragmentacin
Tpicos ejemplos: Clamidosporas, Artrosporas, Blastosporas
Sexual. Mediante la produccin de clulas llamas esporas.
Mediante esporas sexuales
O cuando dos hifas de individuos genticamente diferentes se
unen. Tpicos ejemplos: Oosporas, Zigosporas, Ascosporas,
Basidiosporas
Esporas fngicas
Asexuales
Sexuales
Artroconidias
Blastoconidias
Clamidoconidias
Macroconidias
Microconidias
Esporangiosporas
Zigosporas
Ascosporas
Basidiosporas
Oosporas
Macroconidias
Conidias
Esporangiosporas
Levadura multigemante
Macroconidias
Macroconidias
Penicillium sp., conidiforo, mtulas,
filides, y conidios
Curvularia lunata, conidios.
Aspergillus sp. vescula sobre la que se
disponen las filides, mtulas y conidios.
Mtula
De acuerdo a su forma a los hongos se
clasifican en:
Hongos filamentosos (MOHOS)
Las esporas del moho germinan para producir
los filamentos largos de ramificacin conocida
como hifas. Las hifas pueden ser:
- hifas septadas
- hifas no septadas.
Las hifas crecen formando una masa de
ramificacin y su conjunto se llama Micelio.
Hifas tabicadas o septadas
Hifas sifonadas o aseptadas
o cenocticas
Micelio
CLASES DE
MICELIO
MICELIO AEREO
MICELIO
VEGETATIVO
MICELIO
ALGODONOSO
MICELIO
VELLOSO
MICELIO
PULVURULENTO
MICELIO
CEREBRIFORME
MICELIOS
PIGMENTADOS
Hongos que pueden presentar forma de moho o de
levadura (dimorfismo).
Su forma suele depender de factores ambientales tales
como;
Temperatura, as son levaduriformes a 37 y
filamentosos a temperatura ambiente.
Otros factores son por ejemplo la concentracin de
CO
2
, crecimiento en suero, etc.
Hongos dimrficos
Hongos dimrficos
T ambiente T 37C
Blastomyces dermatitidis
DIAGNSTICO
Levaduras y Mohos.
Como en otras enfermedades infecciosas , las micosis se
diagnostican en el laboratorio siguiendo el esquema
clsico
DIAGNOSTICO
DE LAS
MICOSIS
INMUNODIAGNOSTICO
CULTIVOS
EXAMEN DIRECTO

Preparacin en lmina portaobjetos con una gota de KOH al 10%.
Para la cpsula de Cryptococcus neoformans (LCR), se adiciona
una gota de tinta china para visualizar la cpsula.

En exudados purulentos se recomienda realizar una tincin con
Gram, Giemsa y tambin Wright. Si se trata de cortes histolgicos
hacer una preparacin con hematoxilina y eosina.
EXAMEN DIRECTO
Examen microscpico de
la muestra patolgica:
Escamas de piel, pelos,
fragmentos de uas,
Exudado purulento, LCR
o biopsias
Caractersticas
hifas, esporas,
levaduras, etc.
Para observar
AZUL DE LACTOFENOL
Usado para la observacin de hongo:
El fenol destruye la flora acompaante
El acido lctico conserva las estructuras fngicas al
provocar un cambio de gradiente osmtico con
relacin al interior del fngico generando una
pelcula.
Azul de algodn posee la capacidad de adherirse a
la quitina presente en las hifas y conidios y de los
hongos microscpicos
CULTIVO DE HONGOS
El producto patolgico y la tcnica de toma de muestra se elegir
de acuerdo con el tipo de micosis por investigar.
El medio de cultivo ms utilizado en micologa mdica es el AGAR
GLUCOSADO DE SABOURAUD (SGA), se le adiciona antibiticos
con el fin de evitar la contaminacin bacteriana y ciclo eximida
(actidiona) para inhibir los hongos saprofitos
La incubacin en micologa mdica es siempre en aerobiosis, oscilando el
tiempo desde 2-3 das para levaduras y especies saprofitas.

La temperatura de incubacin es 32 C; los dermatofitos y otros causantes de
micosis cutneas a 25 a 30 grados centgrados (temperatura ambiental).

Sporothrix schenckii
Microsporum canis
Mycrosporum gypseum
Epidermophyton floccosum
Cryptococcus neoformans
las infecciones causadas por hongos.
Se clasifican
Micosis
superficiales
Micosis
subcutneas
Micosis
cutneas
Micosis profundas
o
sistmicas
Micosis
oportunistas
son
en
Piedra negra
Piedra blanca
Tia negra
Pitiriasis versicolor
Son infecciones superficiales por hongos que afectan la capa
crnea de la piel y la porcin suprafolicular del pelo.
Se caracteriza porque:
No se invade el tejido vivo y no hay respuesta celular del
husped.
No hay cambios patolgicos.

Estas infecciones son a menudo tan inocuas que los pacientes no
son conscientes de ellas.
DIAGNOSTICO
El diagnstico de micosis superficiales, se
realiza en base a la visualizacin en la muestra
de hifas o esporos caractersticos en el examen
microscpico directo y en el aislamiento del
agente causal en los cultivos.
causa la infeccin
mictica superficial del cabello.
Formando ndulos duros negros que son
masas de hifas con ascosporas, en los
ejes del pelo (porcin extra folicular) en
cuero cabelludo, la barba, el bigote y
pbico.
Asociado a higiene deficiente.
Es comn en Amrica Central y del Sur y
Asia Sur-Oriental.
Colonias pigmentado de
marrn a negro rojizo Hifas pigmentadas, ramificadas
Es una infeccin superficial del
cabello causada por Trichosporum
beigelii o Trichosporum cutaneum
hongo levaduriforme
Los pelos infectados desarrollan
ndulos suaves de color blanco
grisceo que son masas agrupadas
de hifas se encuentran en la parte
distal o central del pelo axilar,
pubiano y crural.
Piedra blanca se encuentra en todo el
mundo, pero es ms comn en
regiones tropicales o subtropicales.
Tia negra
Es una infeccin asintomtica que afecta
exclusivamente el estrato crneo de la piel en
donde da lugar, de manera caracterstica, a
manchas negro-marronceas, no descamativas e
indoloras; (manchas hiperpigmentadas),
localizadas preferentemente en la regin palmar y
ocasionalmente en la plantar u otras reas
cutneas, debido a la colonizacin Hortaea
werneckii.

Las lesiones generalmente son nicas, de
dimetro variable y pueden ser uni o bilaterales.
La tia negra es una micosis superficial de
pronstico benigno.
Hortaea werneckii
Pitiriasis versicolor
Malassezia furfur es una levadura lipfila
que viven en la piel como parte de la flora
normal. La forma filamentosa Pitirosporum
ovale
Es el agente causal de la
pitiriasis versicolor,
Pitiriasis foliculitis y
recientemente se ha
implicado como un agente
causante de la dermatitis
seborreica y la caspa.
Clnico y micolgico.
Micolgico directo con hidrxido de potasio al 10-40% y cultivo en
Sabouraud o lactrimel incubacin a 25 -28C.
Luz de Wood
Diagnstico
Cultivo de M. furfur, 10 das a
30C. Colonias elevadas, de
superficie lisa.
M. furfur en cultivo. Levaduras con
cuello de gemacin ancho.
Luz de Wood
Son infecciones superficiales causada por hongos a nivel de la piel,
cabello o uas. (colonizan superficies queratinizadas).

No se invaden los tejidos vivos, producen una variedad de cambios
patolgicos en el hospedador por su presencia y sus productos
metablicos.

DERMATOMICOSIS: Es cualquier proceso mictico que se da a nivel de
la piel
Candidiasis de la piel, membranas mucosas y uas: Candida albicans
y especies afines

DERMATOFITOSIS: Es cualquier proceso mictico producido por hongos
dermatofitos

Dermatofitosis(tia): Dermatofitos (Microsporum,Trichophyton,
Epidermophyton)
Micosis producida por Candida albicans, hongo oportunista.
Agente causal de los intertrigos (submamario o inguinal), eczema de
paales, onicomicosis con paroniquia y granuloma candidisico.

Tambin pueden producir onicomicosis Candida stellatoidea, C.tropicalis,
C.guillermondii y C.parapsilosis.

DIAGNOSTICO
Las preparaciones teidas con Gram, muestran levaduras Gram positivas
redondas u ovales, con brotes de blastosporas de 3 a 4 m acompaadas
de pseudohifas de 3 a 10 micras de longitud.

CULTIVO
La mayora de los medios de cultivo bacterianos son satisfactorios para el
aislamiento de Candida

Se recomienda efectuar la siembra en medio de Sabouraud con antibiticos
(cloranfenicol). Los medios que contienen actidiona (cicloheximida) inhiben el
crecimiento de algunas especies.

INCUBACION:
Temperatura ambiente (2530 C) cuando se trata de medios con
inhibidores

Temperatura de 37 C. en el caso de medios enriquecidos exentos de
sustancias inhibidoras.

OBSERVAR: Al cabo de 24 a 48 horas observar colonias caractersticas de
color blanco o crema, opacas, elevadas, lisas, brillantes o mates de 1 a 3 mm
de dimetro.

La prueba de filamentacin y produccin de clamidosporas son
caractersticas muy sencillas y tiles para la identificacin de C.albicans.
Filamentizacin en plasma: se toma una pequea
porcin de la colonia con un asa de platino esterilizada
y se siembra en 0,5 ml de plasma humano, se incuba a
37C por 2 horas, al cabo de las cuales, se observara
microscpicamente la formacin de un tubo germinal
sin constriccin en su punto de origen y con forma
caracterstica de "espejo de mano
tubo germinal
Formacin de Clamidosporas: se siembra una parte de la colonia
en el medio Bilis-Agar o Agar Harina de Maz con aguja de
inoculacin esterilizada, incubando en medio a 28 C por 48 a 72
horas en condiciones de aerobiosis.

Observar microscpicamente la formacin de esporas asexuales, de
paredes gruesas y refringentes, llamadas clamidosporas, que pueden
estar intercaladas o en posicin terminal de las hifas tabicadas o
septadas
Es una infeccin fngica de los tejidos (piel, pelo y uas)
que ocurre en seres humanos y animales producida por un
grupo de hongos DERMATOFITOS

3 gneros: Microsporum, Trichophyton,
Epidermophyton.
Son hongos queratinoflicos y queratinolticos
Segn su afinidad por lo que parasiten se clasifican en:
Antropoflicos, Zooflicos y Geoflicos.
Factores predisponentes: calor, humedad, edad, sexo,
hiperhidrosis, microtraumatismos, disminucin de
inmunidad celular, predisposicin gentica.

Tinea capitis o tia de la cabeza es la infeccin del cuero cabelludo.
Tinea corporis o tia del cuerpo es la infeccin del tronco y
extremidades.
Tinea cruris, tia crural o tia de la ingle es la afeccin en la ingle.
Tinea manuum o tia de la mano es la infeccin de las palmas y
regin interdigital.
Tinea pedis, tia del pie o "pie de atleta" afecta principalmente a los
pies en las plantas de los mismos y las zonas interdigitales.
Tinea barbae o tia de la barbilla es la infeccin de la barba y del
rea del cuello.
Tinea faciale o tia de la cara es la infeccin de la cara.
Tinea unguim, tia ungueal o tia de la ua (una forma de
onicomicosis
Las diversas dermatofitosis reciben el nombre de tias que se denominan por el
sitio afectado
Examen microscpico directo de la muestra
(escamas cutneas, pelo); puede hacerse en
fresco o con tinciones especficas para hongos
azul de algodn, azul de lactofenol o blanco de
calcoflor. Las muestras se deben digerir con
KOH o NaOH para liberar las hifas de las
escamas, pelos o uas. Los hongos dermatofitos
crecen bien en agar Saboraud a 25-30C.

Muestras: piel, uas, pelos
DIAGNSTICO
Tinta china en LCR de un
paciente con meningitis
criptoccica
Gram de esputo de un
paciente con Sporotricosis
Calcofluor en un paciente con
colangitis (Inflamacin de la
va biliar) por Aspergillus
fumigatus.
til en muestras clnicas de pacientes con micosis que afectan piel y
mucosas. Resultados en menos de 10 minutos.
Desventajas:
-Baja sensibilidad.
- Incapacidad para identificar el hongo a nivel de especie.
- Imposibilidad de realizar estudios de sensibilidad a los antifngicos.

Microsporum canis
Epidermophyton floccosum
macroconidias
Macroconidias en tros
Cabello ectotrix
Microconidias
Trichophyton mentagrophytes
Cabello endotrix
Macroconidias
Mycrosporum gypseum
Epidermophyton floccosum
Cultivo de Trichophyton tonsurans mostrando
variacin en textura y color.
Las hifas son relativamente anchas y con numerosos septos

Las microconidias tienen numerosas caractersticas que varan en
tamao y forma las cuales estn sujetas en ngulo recto a las hifas
GRACIAS POR SU
ATENCION