ENZIMAS

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Componentes de una Enzima:

ENZIMA: protenas que funcionan como catalizadores biolgicos.
Sitio Activo: Sitio de la enzima al cual se unen el o los sustratos y ocurre la reaccin. (tamao, forma, unin, interaccin, especificidad).

Sitio Alostrico: Sitio distinto al sitio activo, a este se une una sustancia llamada "regulador alostrico" 10/8/12

Sitio Alostrico

Sitio Activ o

CARACTERISTICAS
v

CATALIZADORES BIOLOGICOS DE NATURALEZA PROTEICA. Alto grado de especificidad Catalizan una sola reaccin qumica. No se consumen. Aceleran la velocidad de reaccin. Actan sobre reacciones qumicas que ya existen (termodinmicamente posibles).

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Disminuyen la energa de activacin. La mayora de las enzimas estn constituidas por mas de 100 aa, masa mayor de 10k Dalton y un dimetro de mas de 25 A*. No modifican el equilibrio de la reaccin. Se requieren en cantidades mnimas. Pueden ser regulables. Son susceptibles de ser inhibidas por diversas sustancias. Modifica la estructura qumica del sustrato. Sin enzimas la vida no es posible.

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Partes de un sistema Enzimtico:

Sustrato. Producto. Coenzima. Grupo prosttico. Activadores. Moduladores. Inhibidores. Proenzima. Isoenzima. Holoenzima= apoenzima + coenzima. 10/8/12

Cofactor: Son molculas orgnicas inorgnicas, cuya presencia es necesaria para que la enzima sea activa. a) Iones inorgnicos Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+etc. b) Complejos orgnicos (Coenzimas) Vitaminas hidrosoluble

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Modelo llave-cerradura. Encaje inducido.

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CLASIFICACION ENZIMATICA 1.-OXIDO-REDUCTASAS. 2.-TRANSFERASAS. 3.-HIDROLASAS. 4.-LIASAS. 5.-ISOMERASAS. 6.-LIGASAS.

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1.- Oxido-Reductasas
catalizan reacciones de oxido-reduccion

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Ejemplos:

Deshidrogenasa alcohlica. Deshidrogenasa mlica. Deshidrogenasa succinica. Glutatin reductasa. Citocromo oxidasa. Peroxidasa. Xantina oxidasa.

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2.-TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de grupos que contienen C,N P

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Ejemplos:

Guanidino acetato transferasa. Transaldolasa. Acetil coA Acetil transferasa. Transaminasa glutamica pirvica (TGP). Transaminasa glutamica oxalactica (TGO). Hexoquinasa. Glicerolquinasa. Malonato coA Transferasa.

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3.- HIDROLASAS
catalizan la ruptura de enlaces por la adicin de una molcula de agua (reacciones de hidrlisis).

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Ejemplos:
v v v v v v

Glucosa 6 fosfatasa. amilasa-. Ureasa. Tripsina. Carboxipeptidasa A. ATPasa.

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4.-LIASAS
Catalizan la adicin de grupos a dobles enlaces o formacin de dobles enlaces por remocin de grupos.

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Ejemplos: Piruvato descarboxilasa Enzima condensante Fumarasa Citrato deshidratasa

5.-ISOMERASAS
Catalizan cambios geomtricos o estructurales dentro de la misma molcula (ismeros).

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Ejemplos: Metilmalonil-coA mutasa. Maleato isomerasa. Triosa fosfato isomerasa. Glucosa fosfato isomerasa.

Catalizan la formacin de enlaces entre C-C, C-O,C-S,C-N. Reaccin posible mediante la energa derivada del ATP.

6.-LIGASAS

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Ejemplos: Acetil coA sintetasa Succinil coA sintetasa Glutamina sintetasa Piruvato carboxilasa

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Cintica Enzimtica:
Estudia la velocidad de las reacciones qumicas que son catalizadas por las enzimas, as como, los factores que afectan dichas velocidades.

Factores:

Tiempo. PH. Temperatura. Relacin Enzima-Sustrato

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Componentes de una reaccin enzimtica

El caso mas simple de reaccin enzimtica implica:

La reaccin de un sustrato (S) con un enzima (E) para formar el complejo enzima-sustrato (ES). El complejo se descompone originando el producto (P) y liberando a la enzima.

S
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COMPLEJO S-E

Ecuacin de Michaelis - Menten

1913:

V i

Relacin entre [S] y la velocidad de reaccin.

El paso limitante en una reaccin enzimtica es el rompimiento del complejo ES en producto y enzima libre.

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C Vi A B

Curva Hiperblica

Vi = velocidad inicial Vmax = velocidad mxima

En Vi: [P] es mnima [S] es elevada 10/8/12 [S] >>> [E]


Vi

Vi aumenta hasta alcanzar Vmax

Curva Hiperblica
C

La velocidad de la reaccin
aumenta linealmente con el aumento de la [S].

B A

Al aumentar la [S], la enzima se

satura y alcanza su velocidad mxima (Vmax), la cual ya no se incrementar, por ms que aumente la [s].

Si: [S] aumenta y E est saturada con S Vi no aumenta En Vi: [P] es mnima 10/8/12 [S] es elevada [S] >>> [E] Vmax

Vi = velocidad inicial Vmax = velocidad mxima

Km en la cintica enzimtica

Vi A

A C B
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Cuando [S] <<< Km: Vi [S]. Cuando [S] >>>Km: La velocidad de reaccin es mxima e invariable, aunque se incremente an ms [S]. Cuando [S] = Km: Vi = Vmax

Mecanismo de accin de un inhibidor Competitivo(reversible)

S I E EI
1. 2. 3.

ES

E+P

Disminuir el No. de molculas de E libre disponibles para enlazarse con el sustrato, formar ES y luego P.

Las fijaciones de I y S son mutuamente excluyentes. El complejo EI no es productivo. I es un anlogo qumico del substrato.

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Ejemplo de Reaccin Enzimtica

SDH: Succinato deshidrogenasa

Inhibidores competitivos

MALONATO Y GLUTARATO

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Inhibicin Competitiva

Sustrato

Anlogo estructural del sustrato

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*
S I E S EI
1.

Mecanismo de accin de un inhibidor No Competitivo(Irreversible)

ES ESI

E+P
I se une en sitio distinto al sitio de unin del sustrato.

2. 3.

El inhibidor se fija indistintamente a la enzima libre E y al complejo enzima-substrato ES. Los complejos EI y ESI no son productivos. I tiene poca o ninguna semejanza con el sustrato.

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Inhibidor Irreversible
Inhibidores que se unen a la enzima en forma irreversible. La enzima es modificada qumicamente. Los inhibidores irreversibles envenenan a la enzima.

E+I

En general, los inhibidores irreversibles son altamente txicos. 10/8/12

Algunos tipos de inhibidores irreversibles

Reactivos de grupos SH: a).- Agentes alquilantes. b).- Compuestos insaturados. c).- Formadores de mercptidos. d).- Oxidantes.

FERRICIANURO IODACETATO LEWISITA

2. Organofosforados: Plaguicidas como Parathion ,Malathion Y DFP.

3. Ligandos de metales: Cianuro. 4. Metales pesados: 10/8/12 Plomo, Mercurio, Cadmio, Zinc, etc.

Malformaciones congnitas Confusion mental Constriccion de la laringe Perdida de mov. Ocular.

Distribucin tisular de Enzimas con importancia en el diagnostico clnico:

TGP: hgado, musc card. y esqueltico, rin, pncreas, eritrocitos, cerebro y piel. TGO: corazn, hgado, musc esqueltico y rin. AMILASA: pncreas, saliva, partida, intestino y trompas de Falopio. LIPASA: pncreas, estomago, I.Delg, adipositos, leucocitos y secrecin salival. CREATIN CINASA: corazn, musc esqueltico y cerebro. FOSFATASA ALCALINA: hueso, mucosa intestinal, hgado y placenta. FOSFATASA ACIDA: Prstata, eritrocitos, leucocitos y plaquetas DESHIDROGENASA LACTICA: corazn, hgado, musc 10/8/12 esqueltico, rin y eritrocitos.

Enzimas de escape
Reciben este nombre debido a que cuando existe dao tisular son vertidas al torrente sanguneo, por lo que su actividad enzimtica aumenta en la sangre.

Deshidrogenasa Lctica (DHL) Aspartato aminotransferasa (AST)

Transaminasa glutmico-oxalactica (TGO)

Infarto al miocardio

Creatincinasa (CK) Creatin fosfoquinasa, (CPK)

Pancreatitis aguda

Amilasa

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Principales enzimas sricas utilizadas en el diagnstico clnico (Algunas enzimas son inespecficas para la enfermedad listada)
Enzima Srica Aminotransferasas Aspartato aminotransferasa (AST) Alanino aminotransferasa (ALT) Amilasa Ceruloplasmina Creatincinasa -glutamil transpeptidasa Lactato deshidrogenasa (Isoenzimas) Lipasa Fosfatasa cida Fosfatasa Alcalina (Isoenzimas) Principal uso diagnstico Infarto al Miocardio Hepatitis Viral Pancreatitis aguda Degeneracin hepatocelular (Enfermedad de Wilson) Trastornos musculares Infarto al miocardio Varias enfermedades hepticas Infarto al miocardio Pancreatitis aguda Carcinoma metasttico de la prstata Varios trastornos seos, enfermedades hepticas obstructivas.

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Enzimas de Laboratorio:
Amilasa pancretica: procesos inflamatorios, pancreatitis aguda, carcinoma de pncreas. 12-24 hrs 1-2 das. Lipasa: igual al anterior pero es mas de 4-5 das o hasta 10. Fofatasa alcalina: en Hgado (obstruccin biliar); Hueso (raquitismo) (osteomalacia); Intestino(ulcera pptica, colitis). Antgeno prosttico: carcinoma prosttico (cncer). TGP(ALT): hepatitis, cirrosis, obstruccin biliar precoz. TGP(AST): Problemas cardiacos. 12-48hrs 4-7dias.
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*Deshidrogenasa Lactica(izoenzima): Piruvato

Lactato

infarto del miocardio 2-3 das 5-10 das. *Creatina Quinasa(CPK): musculo esqueltico, cardiaco y cerebral. Distrofia muscular tipo duchenne. OTRAS PRUEBAS NO COMUNES: Uridin transferasa de galactosa 1P: Galactosemia congnita. Lactasa. Glucosa 6 P Deshidrogenasa: anemia falciforme. Acetilcolinesterasa(relaja el musc): mide el dao heptico.

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