Debido a la vinculacin obligatoria de adenina a timina y guanina-citosina-a, Watson yCrick propusieron que la mitad de la escalera del ADN sirve

como plantilla para volver a crear la otra mitad durante la replicacin del ADN. En 1958, dos lneas de evidencia se unieron para presentar pruebas de esta hiptesis. En primer lugar, una enzima fue descubierta - la polimerasa de ADN - que aade nucletidos complementarios a la plantilla proporcionada por una molcula de ADN y medio. En segundo lugar, un ingenioso experimento utiliza istopos de nitrgeno para seguir la construccin de nuevas molculas de ADN en generaciones sucesivas de bacterias. Esto demostr que una hebra de cada molcula de ADN se pasa a lo largo de igual a cada una de las dos clulas hijas. Este "conservados" hebra acta como plantilla para la ADN polimerasa para sintetizar una segunda cadena complementaria, que se completa cadanueva molcula de ADN. 1.hemos demostrado que el ADN nuevo se hacemediante la copia de la antigua 2.nuevo ADN se debe hacer cuando una clula se divide, cada clula hija debe recibir una copia fiel de ADN de la clula de los padres 3.Watson y Crick sugiri que durante la replicacin de las hebras de ADN se separan,y cada cadena acta como plantilla para sintetizar una nueva cadena complementaria. esto se llama semi-conservador de replicacin, ya que cada una de las molculas hijas se compone de un captulo de la edad de los padres y una molcula de nueva sntesis de cadena. 4. en 1958, publicamos los resultados que apoyeste modelo. como se ver nuestro experimento hecho un uso inteligente de los istopos de nitrgeno y centrifugacin en gradiente de densidad. 5. empezamos por el primer crecimiento de E. coli en cultivo con 15N, que es un istopo pesado del tomo de nitrgeno. ya que las bacterias crecieron y se dividieron el 15N se incorpor en cada una de las bases nitrogenadas del ADN - A, C, G, T 6.hemos salvado una muestra de la etiqueta15N-bacterias para su posterior anlisis 7. el resto de la cultura fue trasladado a los medios de cultivo fresco que contienenitrgeno normales-14N, que es ms ligero que el istopo 15N. por lo tanto, slo 14N es avalible para la construccin posterior de ADN como las bacterias reproducirse. 8. luego se retiraron muestras de la cultura del14N cada poblacin bacteriana se duplic el tiempo 9.en el siguiente se analiz la composicin de nitrgeno del ADN bacteriano de cada cultura.para ello hemos aislado el ADN de los cultivos de bacterias y se disuelve el ADN en una solucin de sal.

10. luego se centrifuga la solucin de ADN a gran velocidad. la fuerza centrfuga tira msmolculas de sal en la parte inferior del tubo, dejando molculas cada vez menos hacia la parte superior. cuanto mayor sea el nmero demolculas de sal en cualquier punto del tubo, mayor es la densidad de la solucin. 11. se espera que las molculas de ADNcompuesto por 15N pesado se hundira an ms en el gradiente de sal que una molcula de ADN comparables compuesto de 14N. esto es exactamente lo que vimos en los tubosprocedentes de las culturas 15N y 14N. 12. los tubos de crticas fueron las que contienenmuestras de la primera cultura crecido en 15Ny luego cambiaron a 14N. en la muestra # 2,despus de tomar la poblacin bacteriana (ylas molculas de ADN) se ha duplicado, la banda de ADN que vimos fue exactamente a medio camino entre el 15N y bandas de 14N. 13. en la muestra # 3, tomada en el tiempo de duplicacin siguiente, haba dos bandas de ADN. un alineado exactamente con la banda14N mientras que el otro estaba en el punto medio. 14. estos datos perfectamente sincronizados los resultados predichos por el modelo de ADNsemi-conservador de replicacin. las molculas ms pesadas del ADN se encontren la muestra # 1, donde las dos cadenas de la molcula incorporada 15N pesados 15. las molculas ms ligeras de ADN fueron encontrados en la muestra # 4 . recordar que el ADN de la muestra # 4 slo contienen 14Nporque las bacterias se cultivaron en 14N. 16. en la muestra # 2 las molculas de ADNrecoger como una banda de densidad intermedia. cuando el cultivo bacteriano se cambia de 15N a 14N cualquier nuevo ADN sedebe utilizar 14N. las dos cadenas pesadas15N de ADN padres separados, y actan como plantillas para la incorporacin de 14Nen nuevas cadenas de ADN. por lo tanto, todo el ADN son hbridos con una pesada 15N y14N un hilo de luz. 17. muestra # 3 se sometieron a una nueva ronda de replicacin y hay dos bandas separadas enel tubo de centrfuga. en este caso, cadamolcula hbrida se separa en una de las cadenas ligeras y pesadas una. La hebra progenitora pesada acta como una plantillapara hacer una cadena de luz complementariaque resulta en otra molcula hbrida.