SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERÍA, TURISMO Y ALIMENTOS TECNÓLOGO CONTROL DE CALIDAD DE ALIMENTOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

INTEGRANTES Andrés fuquene juan

Daniel jaraba Julián gomez jhoan martin INSTRUCTOR: Luz M Dangond C RESULTADO DE APRENDIZAJE:
COMPETENCIA:
Fecha practica:28/10/2024
Fecha entrega:11/10/2024

1 INTRODUCCIÓN que fermentan la sacarosa más fácilmente que la

La presencia de microorganismos patógenos en los lactosa. Los colorantes eosin Y el azul de metileno son
alimentos, como las bacterias coliformes, representa inhibidores parciales de bacterias Gram-positivas e
un riesgo significativo para la salud pública. indicadores de pH. Debido a la lactosa y la sacarosa,
Escherichia coli, como miembro destacado de este este medio puede ser diferencial en el cultivo primario:
grupo, es un indicador de contaminación fecal y Salmonellae y Shigellae que son lactosa-negativas se
puede causar diversas enfermedades pueden diferenciar de otros organismos negativos a la
lactosa y a la sacarosa como Proteus vulgaris,
Esta práctica tiene como objetivo evaluar la calidad Citrobacter y Aeromonas. El fosfato dipotásico actúa
microbiológica del néctar mediante la identificación como un sistema tampón y el agar bacteriológico es el
de Escherichia coli agente solidificante.
Para ello, se empleará el agar EMB
2 Objetivo general 4 MATERIALES,EQUIPOS, REACTIVOS Y
Evaluar la calidad microbiológica del néctar MEDIOS DE CULTIVOS.
mediante la detección e identificación de 4.1 Materiales
Escherichia coli. 4.1.1 Laboratorio
Objetivos Específicos
 7 cajas Petri grande
 Realizar recuentos en placa utilizando agar
 Bandeja de trasporte
EMB.
 Mechero
 Confirmar la presencia de Escherichia coli a
través de la observación de colonias típicas  Dispensador de pipetas
con brillo metálico en el agar EMB.  Frascos y recipiente para descarte
3 MARCO TEÓRICO  Gradillas
Agar Eosina y Azul de Metileno (EMB): Para el  4 hisopos Estériles
aislamiento, cultivo y diferenciación de bacilos  Marcador
entéricos Gram negativos de muestras clínicas y de  Micropipetas de 100 u 1000 uL
otro tipo. utilizado para el aislamiento de  Pipetas graduadas estériles de 1, 5 y 10 ml
Enterobacterias.  Toallas de papel absorbente
El uso de eosina y azul de metileno permite la  4 tubo de ensayo tapa rosca 10cm X 16mm
diferenciación entre organismos fermentadores de
lactosa y no fermentadores. Es ampliamente utilizado 4.1.2 Limpieza y desinfección
en bacteriología médica, en técnicas recomendadas  Alcohol
por APHA y para la detección y enumeración de  hipoclorito de sodio
coliformes, contaminantes de alimentos y agua
potable. 4.2 Equipo
 Incubadora
La peptona: proporciona nitrógeno, vitaminas,  Balanza electrónica
minerales y aminoácidos esenciales para el  Cabina de flujo laminar
crecimiento. La sacarosa se agrega a la lactosa como  Incubadora de 35 °C
un carbohidrato fermentable para detectar coliformes  Neveras
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4.3 Medio de cultivos

 Agar EMB 6 TABLA DE RESULTADOS
 Peptona 0.1%
Cálculos de resultados:
4.4 Elementos de protección
 Usar bata blanca, guantes, mascarilla, gorro y 1 1
lentes de protección. 1= =¿ 10 ufc /ml
1∗(0 ,1)10 0 ,1
 Lavarse las manos antes y después de
manipular. ¿ 1 , 0∗10
1 ufc / ml

 Desinfectar el área de trabajo antes y después

de realizar una tarea.
 No comer, beber, fumar, aplicarse maquillaje
1 −2 −3
o cremas en el área de trabajo. 10 10 10
 No almacenar alimentos y bebidas en 0 0 0
refrigeradores donde se encuentren los medios 0 0 0
de cultivos, reactivos, soluciones y materiales
de trabajo.
TABLA DE RESULTADOS
1 PARÁMETRO EVALUADO Bacteria E-coli

5 METODOLOGÍA (Gráfica) 2 UNIDADES DE UFC/ml

Para realizar la actividad dentro del laboratorio se EXPRESIÓN
inicia con la limpieza, desinfección y esterilización 3 RESULTADO ¿ 1 , 0∗10
1 ufc / ml

en el área de trabajo; se prepara las herramientas o

elementos donde se lava quitando todo rastro de
químicos o microorganismos que intervenga para la 4 TÉCNICA ANALÍTICA Recuento en
recolecta de medios de cultivos o se contamine placa
dañando el análisis de cada superficie o ambiente a 5 MÉTODO ISO 9308-
trabajar. 1:2014
6 NORMATIVIDAD 3929– Min¿ 10
5.1 Preparación de Agar Max (0)
VALOR
5.1.1 Agar EMB MÁXIMO PERMISIBLE
 Suspender 36 gramos de medio en un litro de 7 CONFORMIDAD cumple
agua destilada. Mezclar bien y disolver
calentando con agitación frecuente. Hervir DISCUSIÓN DE RESULTADOS
durante un minuto hasta disolver por
completo. Esterilizar en autoclave a 121 ºC
durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC, Se puede evidenciar que en ninguna caja Petri se
mezclar bien, evitar la formación de burbujas evidencio carga microbiológica esto quiere decir que el
y dispensar cuidadosamente en placas de producto cumple con los parámetros microbiológicos y
Petri. NO SOBRECALENTAR. que el procedimiento se realizó con los estándares
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higiénico ya que no se observó ningún crecimiento de metileno-emb.html

otros microrganismos en las cajas Petri

CONCLUSIONES

 Se evidencio que en las muestras evaluadas

no se presenció rastros de E. Coli
 Se buscaba que por medio del agar EMB se
detectaran presencia de E. coli lo cual arrojo
un resultado Negativo.
 Aunque los resultados de E. coli fueron
negativos, es importante seguir monitoreando
otros microorganismos, como coliformes
totales, mohos, levaduras y mesófilos
aerobios,.
RECOMENDACIONES
 Se recomienda continuar con la
realización periódica de análisis
microbiológicos para detectar la
posible presencia de E. coli,
coliformes totales, mohos, levaduras
y mesófilos aerobios en las
diferentes etapas de producción
BIBLIOGRAFÍA
https://www.britanialab.com/back/public/
upload/productos/upl_6054e713a290e.pdf
- Holt-Harris and Teague. 1916. J. Infect. Dis.
18:596. - Levine. 1918. J. Infect. Dis. 23:43. -
MacFaddin. 1985. Media for isolation-
cultivation-identificationmaintenance of medical
bacteria, volume 1. Williams & Wilkins,
Balhttps://www.minsalud.gov.co/Normatividad_
Nuevo/Resoluci%C3%B3n%203929%20de
%202013.pdf
https://www.condalab.com/medios-de-cultivo-
deshidratados/35-14841-agar-eosina-y-azul-de-