Determinación de hongos y

levaduras - Técnica de recuento en placas

NCh2734.Of2002

Pesar 25 gramos de muestra en Bolsa y ambiente estéril

↓

Añadir 225 ml en bolsa para Stomacher (1:9).

10-1
Homogeneización

Homogenizar por 1 min. Constituye la dilución 10-1.

↓
Agregar 1 ml del homogenizado a 9 ml del diluyente
Dilución de la muestra

Constituye la dilución 10-2; 10-3;10-4

El tiempo transcurrido entre la preparación del homogeneizado de la

muestra y la siembra, no debe ser superior a los 15 min.
↓
Transferir 1ml a placas Petri en DUPLICADO Control
ambiental;
Control
de
productividad
(+ y -) ;
Control
esterilidad
DILUYENTE
Control
esterilidad
PDA

↓
Verter en cada placa Petri aproximadamente 15 ml de agar para recuento en
placa (PDA) que ha sido mantenido a 46°C ± 1°C en el baño termorregulado y
mezclar homogeneamente.

↓
Incubar las placas sin invertir a 24°C ± 1°C por tres días a cinco días

Después de cinco días seleccionar aquellas placas con menos de 150

colonias.
Si parte de la placa presenta desarrollo excesivo de hongos, o si es difícil
contar colonias aisladas en menos tiempo, registrar los recuentos obtenidos
y registrar el período de incubación, ya sea tres días o cuatro días e incluirlo
en el informe final.