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Introducción A La Cromatografía de Líquidos
Introducción A La Cromatografía de Líquidos
Especializado
Le dan la Bienvenida al
Curso
“Fundamentos de la
Cromatografía de Líquidos” Sala de Cursos
www.industrialgaray.com
Soporte Analítico
Datos de Contacto
Especializado
industrialgaray1@gmail.com
https://www.industrialgaray.com
Clasificación
de acuerdo al estado de la
fase móvil.
Soporte Analítico
1ª Etapa
Las muestras se disuelven en una fase
móvil (FM) líquida que se hace pasar a
través de una fase estacionaria (FE)
inmiscible, la cual se mantiene fija en
una columna o lecho cromatográfico
Soporte Analítico
Especializado
2ª Etapa
• Los componentes de la muestra se
distribuyen de modo distinto entre la
FM y la FE dependiendo de la
afinidad por ambas fases,
desplazándose a velocidad distinta.
Soporte Analítico
Especializado
3ª Etapa
• Debido a la distinta movilidad, los
componentes se separan en bandas
discriminadas que pueden analizarse
cualitativamente y/o cuantitativamente
Soporte Analítico
Especializado
INSTRUMENTACION
Sistemas De Inyección
Columnas Detectores
Sistema de Registro
Sistema de suministro de
disolventes
BOMBA
Filtración y Desgasificación de solventes
Control de pH
• importante cuando se usan
analitos ácidos / básicos separados
en RP
• analitos débilmente ácidos
pH bajo
• analitos débilmente básicos
pH alto
• Fase Estacionaria estable con pH
entre 2 y 10
Solventes mas usados
Disolventes que pueden provocar corrosión del instrumento
Burbujas de aire
Para evitar que entre aire en el sistema y asegurarse de que las fluctuaciones de
presión no ocurran, observe las siguientes precauciones:
• Asegúrese de que el filtro de entrada de disolvente de la bomba esté por debajo del
nivel de disolvente en el recipiente del disolvente.
• Si la bomba no se ha utilizado durante un período de tiempo prolongado, elimine las
burbujas de aire de la siguiente manera:
Conectar una jeringa a la válvula de drenaje de la bomba, abrir la válvula de
drenaje, y lavado rápido del sistema para purgar la bomba. Después de purgar la
bomba, cierre la válvula de drenado completamente.
Sistema de inyección
• INYECTOR MANUAL
• AUTOMUESTREADOR
DETECTORES
Detección
• Un buen detector debe ...
La eficiencia de un detector cromatográfico depende de la relación entre la • Tener alta sensibilidad
cantidad física medida y la composición del efluente, así como también de
las características de las señal de transferida. • Responder a todos los
analitos, o tener
especificidad predecible
Los tipos de detectores en HPLC se clasifican en:
• Ser fiable y conveniente de
Detectores basados en una propiedad de la fase móvil . Ejemplo: Detector usar
de Índice de Refracción • Tener una respuesta que
aumenta linealmente con la
Detectores basados en una propiedad de la sustancia a separar. Ejemplo: cantidad de soluto
Detector de Fluorescencia, Detector Ultravioleta • Ser no destructivo del soluto
DETECTORES
Detector de Fluorescencia.
• Este detector solamente puede detectar compuestos que tengan fluorescencia nativa o inducida por derivatización .
Detectores Electroquímicos.
• Detector Amperométrico
• Detector Conductimétrico
• Detector Potenciométrico
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