Guía para la Evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

Autor:
Ministerio de Medio Ambiente y Agua (MMAyA)

Edición y diseño:
Viceministerio de Recursos Hídricos y Riego (VRHR)

Texto:
Gloria Rodrigo Lira

El presente documento fue elaborado en el marco del Programa Nacional de Cuencas (PNC) y su impresión fue posible gracias al apoyo de la Coopera-
ción Suiza en Bolivia a través de HELVETAS Swiss Intercooperation, programa CONCERTAR miembro de GESTOR.

Está permitida la reproducción del presente documento, siempre que se cite la fuente.

La Paz – Bolivia

2014
 Contenido

1 ¿QUÉ ES GENOTOXICIDAD?................................................................................................................................. 5

2 ¿CÓMO SE EVALÚA EL GRADO DE GENOTOXICIDAD EN CUERPOS DE AGUA? ....................................................... 7

2.1 PROTOCOLO PARA LA EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DEL AGUA CON MICRONÚCLEOS DE ALLIUM CEPA (CEBOLLA) ............................ 9
2.1.1 Material y reactivos ......................................................................................................................................... 10
2.1.2 Procedimiento de muestreo ............................................................................................................................ 11
2.1.3 Medición de micronúcleos ............................................................................................................................... 13
2.1.4 Datos y cálculos ............................................................................................................................................... 14
2.1.5 Interpretación de resultados ........................................................................................................................... 15

3 GLOSARIO .........................................................................................................................................................17

4 BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA .............................................................................................................................18

ANEXOS ....................................................................................................................................................................20

1
 Presentación
Con el objetivo de facilitar la labor del personal técnico de las instituciones gubernamentales y no guberna-
mentales encargados de ejecutar acciones orientadas a la vigilancia y monitoreo de la calidad de los cuerpos de agua, el
Ministerio de Medio Ambiente y Agua (MMAyA) a través del Viceministerio de Recursos Hídricos y Riego (VRHR)
elaboró la presente cartilla con la finalidad de orientar las actividades que se requieren para la vigilancia de los cuerpos
de agua, en cumplimiento con el Artículo 4 del Reglamento en Materia de Contaminación Hídrica que reglamenta la
Ley 1333 en lo que se refiere al control y vigilancia de la contaminación de las aguas o la degradación de su entorno.

Es deseable que, por su aplicación en campo, se pueda mejorar y ampliar el presente documento, por lo que
será de mucho valor toda observación, sugerencia y comentario que se pueda hacer llegar al VRHR para su incorpora-
ción en sus próximas ediciones con los reconocimientos que correspondan.

Ing. Carlos Ortuño Yáñez

VICEMINISTRO DE RECURSOS HÍDRICOS Y RIEGO

3
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
1 ¿Qué es genotoxicidad?
La genotoxicidad es la capacidad relativa que
tiene un agente físico, químico o biológico de ocasionar
daño en el material genético (genotóxico o xenobióti-
co), originando efectos biológicos adversos en los seres
vivos.
De acuerdo a su modo de acción o efectos se
clasifican en mutágenos1, carcinógenos2y teratógenos3,
dando lugar a los procesos de mutagénesis, carcinogé-
nesis y teratogénesis respectivamente.
El daño en el material genético se da en el ADN
y en todos aquellos componentes celulares que se en-
cuentran relacionados con la funcionalidad y compor-
1
Agente químico, físico o biológico capaz de causar daño al
ADN.
2
Agente químico, físico o biológico qué actúa sobre los tejidos
vivos, causando cáncer.
3
Agente o sustancia que actúa sobre el embrión en desarrollo
causando alteraciones morfo-fisiológicas.
tamiento de los cromosomas dentro de la célula como
son las proteínas y el ARN4.
La Genética Toxicológica es la rama de las ciencias
biológicas que se encarga de evaluar el daño causado en
el ADN por distintos tipos de exposición de potenciales
agentes genotóxicos y que se evalúa a partir del monito-
reo ambiental y humano.
Los primeros estudios llevados a cabo por
5
Ames en bacterias que presentaban mutaciones en
genes específicos y el desarrollo de la fracción S96 para
4
Ácido ribonucleico, es la molécula que dirige la síntesis de
proteínas a partir de la información contenida en el ADN.
5
La prueba de Ames se utiliza en la evaluación de mutageni-
cidad de muestras problema (agua, aire, lixiviados de resi-
duos sólidos, extractos acuosos, etc.). Es considerada parte
esencial de las pruebas toxicológicas para la detección y loca-
lización de fuentes que generen un daño potencial por la
presencia de compuestos genotóxicos.
6
Fracción sobrenadante obtenido a partir de un homogenei-
zado de órganos por centrifugación a 9000 g durante 20 mi-
nutos en un medio adecuado; esta fracción contiene citosol y
microsomas. Se la obtienen del hígado de rata de las líneas
Sprague-Dawley y Wistar. La fracción S9 se utiliza en con-
5
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
activación metabólica, permitió demostrar en experi-
mentos con animales de laboratorio que entre el 60 y el
90% de las sustancias carcinogénicas fueron mutagéni-
cas.
En la década de los 80’s se confirma la función
de las mutaciones en el desarrollo del cáncer con el des-
cubrimiento de los oncogenes por activación de proto-
oncogenes. Ahora se sabe que además de las sustancias
denominadas carcinógenos genotóxicos, existen tam-
bién otros carcinógenos no genotóxicos o epigenéticos
que actúan por otros mecanismos.
El descubrimiento de la relación entre mutagé-
nesis y el desarrollo de tumores permitió establecer por
tanto la necesidad de evaluar el riesgo de carcinogenici-
dad por exposición a sustancias químicas mediante la
evaluación de mutagenicidad (Ascarrunz y Rodrigo
2010).
junción con la prueba de Ames para evaluar el potencial mu-
tagénico de compuestos químicos debido a que permite pre-
decir el posible comportamiento del compuesto a evaluar en
su paso por la vía hepática.
6
Las pruebas para la detección de mutágenos,
por tanto adquirieron su importancia debido a que es-
tos compuestos tienen la capacidad de alterar el mate-
rial genético en los organismos produciendo malforma-
ciones en el embrión o feto, causar mutaciones en las
células germinales reduciendo la fertilidad, inducir en-
fermedades cardíacas, arterioesclerosis, influir en los
procesos de envejecimiento y provocar mutaciones que
pueden generar cáncer (Majer et al., 2005).
Según Fiskesjo (1985), los organismos biológi-
cos tienen la capacidad de expresar las alteraciones más
sutiles que operan durante cierto tiempo en un ecosis-
tema mediante respuestas individuales o de conjunto
por su capacidad para detectar cambios en la calidad de
los efluentes y controlar que la toxicidad este por deba-
jo de los límites permitidos. En este sentido, los ensa-
yos o test biológicos se están transformando en herra-
mientas valiosas para la evaluación del impacto ambien-
tal generado por los compuestos mutágenos.
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
2 ¿Cómo se evalúa el grado de genotoxici-
dad en cuerpos de agua?
Los ensayos de genotoxicidad están diseñados
para detectar compuestos que inducen directa o indi-
rectamente a daños genéticos por diferentes mecanis-
mos. Generalmente se considera que este daño produce
efectos heredables y provocan las distintas etapas de
formación de tumores.
Actualmente, se dispone de pruebas con las que
se puede determinar un daño genético y así detectar
compuestos genotóxicos. Muchas de estas pruebas son
bioquímicas, in vivo o in vitro, con micro o macro orga-
nismos. Mediante estos ensayos de pueden determinar
daños microscópicos o moleculares, o bien la formación
de aductos, es decir, complejos que se forman cuando
un compuesto químico se une a una molécula biológica,
como el ADN o a ciertas proteínas.
Para detectar con exactitud o predecir confia-
blemente los efectos genotóxicos de una sustancia en el
ser humano; no es suficiente una sola prueba, por esto
es importante tener varias alternativas para evaluar
compuestos genotóxicos.
La correlación entre mutagenicidad y carcino-
genicidad es cada día más evidente. Se ha demostrado
que 157 de los 175 carcinógenos conocidos también son
mutágenos. De ahí la conveniencia de saber con preci-
sión el posible daño que un compuesto puede tener
sobre nuestro organismo o sobre otros seres vivos.
El monitoreo de los contaminantes por análisis
directo requiere conocer el agente químico a verificar, y
su evaluación está limitada por la sensibilidad y especi-
ficidad del método utilizado. Ante esto, los bioensayos
ofrecen ventajas considerables debido a que un orga-
nismo puede metabolizar un compuesto cualquiera y
convertirlo en otro que pueden ser aún más tóxico que
el original.
Actualmente, a nivel mundial, las agencias re-
guladoras de medio ambiente exigen una batería o con-
7
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
junto estándar de estudios de genotoxicidad antes de
dar autorización para liberar productos de consumo
humano, entre ellos el agua potable ya que el proceso de
potabilización requiere de cloro, compuesto que ha
mostrado ser mutagénico en diferentes ensayos.
La batería estándar para determinar genotoxi-
cidad incluye el llamado test de Ames, que es un ensayo
biológico rápido utilizado para determinar el potencial
mutagénico y cancerígeno de compuestos químicos7.El
procedimiento se describe en una serie de documentos
de principios de 1970, escritos por Bruce Ames y su
grupo de investigación de la Universidad de California,
Berkeley. En este sentido, el test de Ames es utilizado
mundialmente como un ensayo inicial para discriminar
nuevos químicos y fármacos por su potencial mutagéni-
co.
En varios estudios, las aguas contaminadas han
mostrado que pueden inducir daño genético en mamífe-
ros y organismos acuáticos (Minissi y Lombardi, 1997).
7
Las pruebas estándar para la carcinogenicidad hechas sobre
roedores toman años para completarse y son caras de realizar.
8
El efecto mutagénico de estas aguas y sus sedimentos
puede ser evaluado bajo condiciones de laboratorio
usando sistemas biológicos como bacterias, levaduras,
plantas y peces (Minissi et al., 1996).
El protocolo mejorado para micronúcleos en
raíces de Vicia y Allium (arvejas y cebollas) fue estableci-
do como un ensayo estándar internacional por el Inter-
national Programon Plant Bioassays bajo el auspicio del
Programa Ambiental de las Naciones Unidas (Ji et al.,
1999; Ma et al., 1999)
Entre los diferentes ensayos citogenéticos en
plantas, el test de micronúclesos (MCN) en raíces de
Vicia faba (haba) es el más sensible para agentes
aneugénicos y clastogénicos, además de ser simple,
barato y requerir condiciones mínimas de laboratorio
(Minassi y Lombardi, 1997). En China el test de MCN
en Vicia faba (haba) es un método estándar en monitoreo
ambiental (Kong et al., 1998). Sin embargo, en este en-
sayo también puede utilizarse Tradescantia paludosa
(purpurina o amor de hombre) y Allium cepa (cebolla)
debido a que resultaron ser bioindicadores altamente
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
sensibles, fáciles de aplicar en diferentes situaciones y
de evaluar empleando procedimientos y protocolos
sencillos y de bajo costo.
2.1 Protocolo para la evaluación de la calidad del
agua con micronúcleos de Allium cepa (cebo-
lla)
Los micronúcleos son fragmentos de cromoso-
mas o cromosomas completos que espontáneamente o
por causa de agentes que rompen cromosomas quedan
fuera del núcleo durante la mitosis8. Entre estos agentes
están las radiaciones y medicamento utilizados en el
tratamiento del cáncer.
Los micronúcleos son conocidos, en el campo
de la hematología, como cuerpos de Howell-Jolly. Su
forma es generalmente redonda u ovalada, con un diá-
metro que varía desde 0,4 a 1,6 micras. Su formación
8
La mitosis es la división de la célula en la que, previa dupli-
cación del material genético, cada célula hija recibe una dota-
ción completa de cromosomas.
ocurre en la anafase de la mitosis9 donde el fragmento
cromosómico que no posea centrómero no podrá inte-
grarse a un núcleo por carecer del elemento indispensa-
ble para orientarse en el huso acromático.
Luego, en la telofase, los cromosomas normales,
así como los fragmentos que posean centrómeros, dan
origen a los núcleos de las células hijas. Sin embargo, los
elementos rezagados – que pueden ser fragmentos o
cromosomas completos – quedan incluidos en el cito-
plasma de las células hijas y una proporción de ellos se
transforma en uno o varios núcleos secundarios. Tales
núcleos son mucho más pequeños que el núcleo princi-
pal, de ahí su nombre de “micronúcleos”. Entonces, si el
compuesto estudiado es un clastógeno, se formarán
micronúcleos pequeños, pero si es un aneuploidógeno,
lo que se observará será la formación de micronúcleos
grandes (Terradas et. al. 2010).
9
Durante la anafase, los centrómeros se dividen, lo que per-
mite que cada una de las cromátidas idénticas que formaban
el par se separen (cromosomas hijos) y se dirijan a los dos
polos de la célula arrastradas por los microtúbulos del huso
mitótico.
9
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

Para la realización de esta prueba es indispen- sión celular persisten al menos durante la si-
sable utilizar un tejido en constante división, pero debe guiente interfase.
considerarse que en las células con poco citoplasma los
micronúcleos no son fácilmente distinguibles de los Adicionalmente, la prueba no deja lugar a dudas
lóbulos o proyecciones del núcleo normal. sobre el daño producido, pues lo que se observa como
micronúcleos es claramente una pérdida de ADN.
La prueba se realiza en diferentes tipos celula-
res como: eritrocitos policromáticos de la médula ósea, Sin embargo, la prueba no detecta agentes que
cultivos de linfocitos de sangre periférica, células de la no producen pérdidas de material genético o rezagos
mucosa bucal, hepatocitos de rata, eritrocitos en peces anafásicos y tampoco es útil en poblaciones celulares
y aves. En células vegetales, las más utilizadas son las que no se dividen.
células meióticas de la Tradescantia (purpurina ó amor 2.1.1 Material y reactivos
de hombre) y las células meristemáticas de Allium cepa
(cebolla) y Vicia faba (haba) (Majer et al., 2005)
Capacidad
Dentro de las ventajas de la técnica de micronú- Material Cantidad
o tamaño
cleos están: Microscopio óptico 1 40X – 100X
Gradilla 1 Mediano
- La posibilidad de probar un sólo químico sin Tubos de ensayo 21 15 – 20 mL
Frascos de vidrio 7 50 – 100 mL
otros compuestos,
Bisturí o gillete 1 5 cm
- La abundancia de células analizables en di- Portaobjetos 6 2 x 4 cm2
ferentes periodos del ciclo celular y el que Cubreobjetos 6 2 x 4 cm2
los micronúcleos formados durante la divi-

10
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

determinaciones. Si no hubiera papel filtro,

se puede usar servilletas de papel.
Reactivos Cantidad Unidad b) Para minimizar la contaminación de la
Ácido clorhídrico 1N 50 mL muestra, conviene recogerla con la boca del
Etanol 70% 300 mL frasco de recolección contra la corriente.
Ácido acético 99% 100 mL
Etanol: ácido acético (3:1) 100 mL c) Se debe tomar un volumen suficiente de
Orceína10 acética 45% 50 mL muestra, entre 2 a 3 litros, para eventuales
necesidades de repeticiones.
d) Se debe realizar todas las determinaciones
posibles de campo, como las mediciones de
2.1.2 Procedimiento de muestreo pH y conductividad. Para evitar riesgos de
contaminación, estas determinaciones deben
Durante el muestreo se recomienda tomar las realizarse en alícuotas de muestras separa-
siguientes precauciones11: das de las que serán enviadas al laboratorio.
a) Las muestras no deben incluir partículas e) Se deben limpiar muy bien los frascos y de-
grandes, desechos, hojas u otro tipo de ma- más materiales de recolección. Es importan-
terial accidental, salvo cuando se trate de te recordar que en gran parte de los casos la
muestras de sedimentos. Además, deben ser contaminación de los frascos no es visible ni
filtradas para la realización de los ensayos o siquiera al microscopio.
f) La parte interna de los frascos no debe ser
tocada con la mano ni debe quedar expuesta
10
Colorante de color rojo violáceo, extraído de líquenes y que al polvo, humo u otras impurezas.
tiñe con preferencia núcleos y cromosomas.
11
Litter et al., 2009.

11
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
g) Las personas encargadas de la recolección de
muestras deben mantener las manos limpias
y usar guantes.
h) Los frascos deben ser llenados completa-
mente y de manera rápida con la muestra y
luego resguardadas fuera del alcance de la
luz solar.
i) Las muestras que exijan refrigeración para
su preservación deben ser acondicionadas en
cajas de poliestireno de manera inmediata.
Para evitar posible contaminación de las
muestras, no debe añadirse sal al hielo.
j) Se debe mantener un registro de toda la in-
formación de campo. Para esto se deberá lle-
nar una ficha de recolección por muestra o
conjunto de muestras de las mismas carac-
terísticas.
k) El muestreo en pequeños cursos de agua de-
be hacerse aguas arriba y aguas debajo de las
fuentes de contaminación, con la inclusión
opcional de puntos adicionales para evaluar
el grado de contaminación o asimilación de
12
carga orgánica a lo largo del tramo en estu-
dio.
l) En el caso de aguas subterráneas, deben
considerarse protocolos específicos para evi-
tar la alteración de las muestras. Entre los
datos que se deberán registrar están:
- Tiempo de bombeo,
- Profundidades de donde se realizaron las
recolecciones,
- Profundidad del pozo,
- Profundidad de los niveles estático y
dinámico,
- Tipo de bomba,
- Profundidad del ranurado, etc.
Para determinar si existe una relación de dosis
– efecto, la muestra de agua debe evaluarse consideran-
do las siguientes proporciones de dilución:
- Sin dilución (100% la muestra),
- Dilución al 50%,
- Dilución al 25%,
- Dilución al 12,55%, y
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
- Dilución al 6,25%.
Las diluciones pueden realizarse con agua de
grifo o agua destilada, la misma que deberá utilizarse
también para el control negativo o blanco.
2.1.3 Medición de micronúcleos
Para el ensayo con bulbos de Allium cepa (cebo-
llas o cebollines), se debe seleccionar el número necesa-
rio o suficiente de bulbos con el mismo tamaño y apa-
riencia. Mínimamente deberá considerarse un número
de 60 bulbos, 10 para el control negativo, 10 para el con-
trol positivo y 10 para cada una de las diluciones de la
muestra, en el caso de usar cebollines. De usarse cabe-
zas de cebollas más grandes, tres son suficientes por
tratamiento.
Para proceder con los ensayos se deberá seguir
la siguiente secuencia de acciones:
1) Se deberá quitar la zona radicular con cui-
dado y retirar la cascara externa, para luego
cortar las hojas dejando unos 5 cm.
2) En vasos de precipitados o en tubos de en-
sayo, se debe colocar los bulbos de Allium
cepa, asegurándose que la zona radicular
quede en contacto con las soluciones (Figu-
ra 1).
3) Se debe dejar reposar a temperatura am-
biente por 96 horas en la muestra de agua
que se está evaluando.
4) Se debe contar y medir las raíces, reportar
los datos en una tabla para procesarlos.
5) Cortar aproximadamente 5 mm de las raí-
ces de cada tratamiento y colocarlas en
frascos pequeños con la solución de etanol:
ácido acético 3:1 por 22 horas para que se fi-
jen (detener los procesos metabólicos).
6) Cambiar las raíces a frascos con etanol al
70%. Pueden guardarse hasta 3 meses en re-
frigeración.
7) Colocar unas cuantas raíces en un tubo con
solución de HCl 1N, tapar y dejar en baño
María de 3 – 5 minutos.
13
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

8) Sacar 1 a 2 raíces sobre un portaobjetos, 2.1.4 Datos y cálculos

cortar aproximadamente los 3 mm finales
El recuento de micronúcleos se realiza en mi-
de la raíz y eliminar el resto.
croscopio binocular con objetivo de 40X. El criterio
9) Cortar las raíces con el gillete o bisturí lo
para análisis de micronúcleos de las células debe cum-
más finamente posible.
plir los siguientes requisitos (Fenech 2000; Figura 2):
10) Añadir una gota de orceína acética y dejar
10 a 15 minutos. Si se seca, añadir más or-
ceína acética.
11) Colocar un cubreobjetos, aplastar fuerte-
mente, repiquetear con la goma de un lápiz
sobre el cubreobjeto.
12) Observar al microscopio, ubicar campos
donde las células estén dispersas, contar
1 000 células por placa. Esta acción debe
realizarse por duplicado.
13) Reportar las células que contengan uno o
más micronúcleos. Figura 1.- a) bulbos expuestos, b) Montaje del ensayo

Los micronúcleos son núcleos citoplasmáticos

que contienen DNA, pequeños, redondos y de tamaños
variables con las mismas características histoquímicas 1) Morfología idéntica de los núcleos princi-
que el núcleo principal, pero están envueltos dentro de pales,
un pedazo separado de membrana nuclear. 2) Debe tener una forma redonda u ovalada,

14
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
3) Su diámetro debe estar entre 1/16 y 1/3 de
los núcleos principales,
4) Debe tener el mismo color, textura y retrac-
ción que el núcleo principal,
5) No debe presentar refringencias (núcleos o
partes de núcleos brillosos),
6) Debe estar claramente separado del núcleo
principal,
7) No debe estar sobrepuesto a ninguno de los
núcleos,
8) El MCN dudoso será descartado en el aná-
lisis.
Cuando la frecuencia de micronúcleos (MCN
%) es menor de 3/1 000 se deberá evaluar un máximo de
3 000 células. Esto para disminuir la probabilidad de
que la ausencia de los micronúcleos se pudiera deber a
un evento al azar.
La frecuencia de Micronúcleos (MCN %) se
calcula como sigue:
Número de celulas conteniendo micronúcleos
MCN % 
Número total decélulas contadas
Para el análisis estadístico se puede hacer uso
de Microsoft Excel y determinar medias y error están-
dar en cada grupo experimental, así como el F-test para
la varianza de todos los tratamientos. El t-test Dunnett
se aplica para determinar la diferencia significativa
entre medias del control y los grupos de tratamiento
(Duan et al., 1999).
2.1.5 Interpretación de resultados
Los resultados son considerados positivos
cuando existe un aumento estadísticamente significati-
vo en la frecuencia de células MCN con relación al gru-
po de control negativo.
Los resultados son considerados negativos
cuando no hay un aumento significativo en la frecuen-
15
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

cia de células de MCN con relación al grupo control

negativo.

Figura 2. Micronúcleos en a) Vicia faba (haba) y b) en

Allium cepa (cebolla).

16
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
3 Glosario
Aneugénicos: agente capaz de producir en la
célula que uno o más cromosomas completos de un
conjunto normal falten o se presenten más de una vez.
Clastogénicos: Agente que causa rotura de los
cromosomas y/o consecuentemente, ganancia, pérdida o
reordenamiento de los fragmentos cromosómicos
Micronúcleos: fragmentos de cromosomas o
cromosomas completos que espontáneamente o por
causa de agentes que rompen cromosomas, como las
radiaciones (agentes que se denominan clastógenos) o
que dañan el huso mitótico, como la vincristina (aneu-
ploidógenos), quedan fuera del núcleo durante la mito-
sis.
Mutación: alteración en la secuencia de ADN.
Puede ser causado por daños producidos por químicos,
por radiación o por errores durante la replicación y la
reparación del ADN. Entre sus consecuencias están las
enfermedades genéticas y el cáncer.
Mutagenicidad: Propiedad de agentes físicos o
químicos de inducir cambios en el material genético
que se transmiten durante la división celular.
Mutágenos: Un agente químico, físico o bio-
lógico que altera o cambia la información genética de un
organismo y causa un incremento en la frecuencia de
mutaciones espontanea. Cuando numerosas mutaciones
causan cáncer, se denominan carcinógenos.
Genotóxico: Tóxico (dañino) para el ADN. Las
sustancias genotóxicas pueden unirse directamente al
ADN o actuar indirectamente mediante la afectación de
las enzimas involucradas en la replicación del ADN y
causando, en consecuencia, mutaciones que pueden o
no desembocar en un cáncer. Las sustancias genotóxi-
cas no son necesariamente cancerígenas, pero la mayor
parte de los cancerígenos son genotóxicos.
17
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua
4 Bibliografía consultada
Ascarrunz M, Rodrigo G. 2010 Manual de
Genética Toxicológica. 1ra ed. Universidad Mayor de
San Andrés La Paz-Bolivia editor: Mercedes Morales.
252 pp. Capítulo 8. La genética toxicológica desde el
punto de vista analítico. 213-245
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Fiskesjo G. 1985 The Allium test as a standard in
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 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

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19
 Guía para la evaluación del grado de genotoxicidad en cuerpos de agua

Anexos

Fases de la MITOSIS: En verde interfase; en rojo célula en

profase; en azul metafase; en negro anafase y en ama-
rillo telofase.

20
La impresión de este documento contó con el apoyo de:

Calle Héroes del Acre, esquina Conchitas N° 1778

Telf. (591):2124484– 2117391