PRÁCTICA 5: CALIBRACIÓN DE LAS MICROPIPETAS

1. OBJETIVOS
Comprobar si una micropipeta está calibrada y reconocer la importancia de la
calibración de las pipetas. También conocer los conceptos de precisión y exactitud.

2. INTRODUCCIÓN
En esta práctica se procede a conocer como calibrar las pipetas de laboratorio y
comprobar si las que hemos utilizado se encuentran calibradas correctamente,
mediante unas pruebas también conoceremos los conceptos de precisión y
exactitud.
Tendremos los siguientes objetivos:

• Utilizar una micropipeta de 100-1000ul junto con 5 tubos Eppendorf para

pesar una cantidad de 5ml en cada tubo, previamente los pesaremos vacíos
para comprobar la precisión de la micropipeta.
• Utilizare una micropipeta de 20-200ul junto con una placa Petri para tarar a
0 la balanza e ir pesando de 5ml en 5ml para comprobar la precisión de la
micropipeta.

3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

- MATERIALES: micropipeta de 100-1000ul, micropipeta de 20-200ul, EPI (guantes
y bata), vaso de precipitado, gradilla, papel de filtro, tubos Eppendorf, placa Petri
y puntas de micro pipeta de distinto tamaño
- EQUIPOS: balanza.
- REACTIVOS: agua destilada.

4. PROCEDIMIENTO
En esta práctica procedemos de la siguiente manera:
1. Encendemos y calibramos las balanzas 30 minutos antes de comenzar la
práctica.
2. Nos abrochamos la bata, pelo recogido y nos ponemos los guantes, después
colocamos el papel de filtro en la zona de trabajo.
3. Buscamos todo el material necesario para la práctica y lo llevamos a la zona
de trabajo.
4. Una vez con los materiales necesarios seguimos los siguientes pasos:
 • Pesamos los tubos Eppendorf vacíos y apuntamos sus pesos, a
continuación, procedemos a llenarlos con 1ml cada uno en su interior
para de nuevo pesarlos en la balanza, anotando en una tabla los datos
de volumen vacío, volumen lleno y volumen dispensado en g y
volumen:

TUBOS VOL. VACÍO VOL. LLENO VOL. DISPENSADO VOLUMEN

(g) (g) (g) (ml)
1 0,81g 1,82g 1,01g 1,01ml
2 0,79g 1,80g 1,01g 1,01ml
3 0,81g 1,81g 1,00g 1,00ml
4 0,80g 1,81g 1,01g 1,01ml
5 0,78g 1,78g 1,00g 1,00ml

o Se usó el valor más alto de la micropipeta (1000ul = 1ml), una vez

tomadas estas medidas para obtener el VOL. DISPENSADO se restaron
los datos de VOL. LLENO y VOL. VACÍO:

Tubo 1: 1,82g – 0,81g = 1,01g

Tubo 2: 1,80g – 0,79g = 1,01g
Tubo 3: 1,81g – 0,81g = 1,00g
Tubo 4: 1,18g – 0,80g = 1,01g
Tubo 5: 1,78g – 0,78g = 1,00g

• Para obtener el volumen en ml utilizamos la fórmula d=m/v:

Tubo 1: 0,9983g/ml = 1,01g/v -> v= 1,01g/0,9983g/ml -> ml= 1,01ml

Tubo 2: 0,9983g/ml = 1,01g/v -> v= 1,01g/0,9983g/ml -> ml= 1,01ml
Tubo 3: 0,9983g/ml = 1,00g/v -> v= 1,01g/0,9983g/ml -> ml= 1,00ml
Tubo 4: 0,9983g/ml = 1,01g/v -> v= 1,01g/0,9983g/ml -> ml= 1,01ml
Tubo 5: 0,9983g/ml = 1,00g/v -> v= 1,01g/0,9983g/ml -> ml= 1,00ml

• Ahora calculamos la DV (desviación estándar) para saber la precisión:

Media = (suma de todos los valores / número de mediciones) = 1,006

DS (desviación estándar) = √ (∑ (X1 – media)2 / nº mediciones) = 0,0049

• Calculamos la exactitud para saber el porcentaje de error obtenido:

(∑ (Vol. dispensado – Vol. medido / Vol. medido) x 100= 3% de error.
 • Tras medir los tubos Eppendorf procedemos a medir con una placa
Petri la micropipeta de 20-200ul, colocaremos la placa Petri en la
balanza, tararemos a 0 e iremos vertiendo de 0,20ml en 0,20ml
anotando los pesos obtenidos para calcular los mismos datos que con
los tubos Eppendorf:

MEDICIÓN VOL. PESADO VOL. REAL VOLUMEN

(g) (g) (ml)
1 0,20g 0,20g 0,20ml
2 0,39g 0,19g 0,19ml
3 0,59g 0,20g 0,20ml
4 0,79g 0,20g 0,20ml
5 0,98g 0,19g 0,19ml

• Se usó el valor más alto de la micropipeta (200ul= 0,2ml), una vez

tomadas las medidas para saber el VOL. REAL de cada una de ellas se
fueron restando entre ellas para sacar su volumen por separado:

Medición 1: 0,20g
Medición 2: (medición 2 – medición 1) = 0,39 – 0,20 = 0,19g
Medición 3: (medición 3 – medición 2) = 0,59 – 0,39 = 0,20g
Medición 4: (medición 4 – medición 3) = 0,79 – 0,59 = 0,20g
Medición 5: (medición 5 – medición 4) = 0,98 – 0,79 = 0,19g

• Para obtener el volumen en ml utilizamos la fórmula d=m/v:

Medición 1: 0,9983g/ml = 0,20g/v -> v= 0,20g/0,9983g/ml -> ml= 0,20ml

Medición 2: 0,9983g/ml = 0,19g/v -> v= 0,19g/0,9983g/ml -> ml= 0,19ml
Medición 3: 0,9983g/ml = 0,20g/v -> v= 0,20g/0,9983g/ml -> ml= 0,20ml
Medición 4: 0,9983g/ml = 0,20g/v -> v= 0,20g/0,9983g/ml -> ml= 0,20ml
Medición 5: 0,9983g/ml = 0,19g/v -> v= 0,19g/0,9983g/ml -> ml= 0,19ml

• Ahora calculamos la DV (desviación estándar) para saber la precisión:

Media = (suma de todos los valores / número de mediciones) = 0,196

DS (desviación estándar) = √ (∑ (X1 – media)2 / nº mediciones) = 0,0049

• Calculamos la exactitud para saber el porcentaje de error obtenido:

(∑ (Vol. dispensado – Vol. medido / Vol. medido) x 100= 10% error.
 • Pipetas utilizadas durante la práctica:

- Pipeta de 100ul a 1000ul:

o MARCA: Handrop
o CAPACIDAD: de 100ul a 1000ul.
o Nº DE SERIE: YL215AK0057800

- Pipeta de 20ul a 200ul:

o MARCA: Spinreact
o CAPACIDAD: de 20ul a 200ul.
o Nº DE SERIE: YL6A186867

5. CONCLUSIÓN

Tras realizar la práctica llegamos a la conclusión de que el método más exacto

debido a su porcentaje de error ha sido el de los tubos Eppendorf, ya que ha sido
de un 3% frente al 10% de la placa Petri, en cuanto a la precisión ambos métodos
han resultado ser muy precisos ya que los valores eran muy próximos entre sí.

6. GESTIÓN DE RESIDUOS
Desechamos el agua destilada por la pila