Grupo D

CULTIVO CELULAR

PRÁCTICA #4
Gabriela Mejía Gallego 1, Stephany Paola Mena Pinto 1, Iuskq Emmanuel Novoa Vargas 1

14 DE MARZO DE 2024

RESUMEN

El cultivo celular es el conjunto de técnicas que permiten la preservación y manifiesto de seres microorganismo. En el presente informe se presentarán
los resultados obtenidos bajo la práctica llevada a cabo en el laboratorio virtual de cultivo celular, de igual forma, se le da relevancia la cultivo celular a
favor del bienestar y la integridad humana, pues en este informe se resalta esta técnica como un de los tantos procesos realizados por el hombre en
busca de proteger y cuidar la salud de la humanidad como técnica investigativa que permite el desarrollo de una gran variedad de tratamientos que
logren combatir a las bacterias y virus que ataquen y generen anomalías en los sistemas biológicos de los seres vivos.

Palabras Clave: Investigación, Cultivo Celular, Salud, Bienestar, Bacterias.

METODOLOGÍA

Para dar inicio a esta práctica se debe tener
en cuenta no solo los materiales o reactivos
a trabajar sino también el proceso e incluso
protocolo para realizar un buen
procedimiento, entre ello se debe saber el
bueno manejo de reactivos como:
° Medio de cultivo específico para el tipo de
células a cultivar (por ejemplo, DMEM para
células adherentes).
° Suero fetal bovino (FBS).
° Antibióticos y antimicóticos.
° Solución tampón (por ejemplo, PBS).
Mediante estos y muchos otros reactivos se
llegara a un cultivo celular realizado gracias
a un buen procedimiento, todo comienza
con la técnica aséptica la cual consiste en
mantener el área de trabajo esterilizada
mediante el uso del Etanol al 70%, revisar
que se encuentre bien instalada la campana
de cultivo celular o simplemente mantener
el área de trabajo ordenada. Todo esto con
el fin de evitar la contaminación tanto de los
reactivos como de las propias células a
cultivar.
Luego de esto se dará inicio a la práctica
una vez se tenga el equipo de higiene

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personal como lo es el uso de la bata,
guantes, zapatos antifluidos, etc. Una vez
se encuentro lista el área de trabajo se
procedió a preparar las células hasta llegar
al producto final (Medio completo), todo
esto teniendo en cuenta que al cultivar
células, es importante proporcionarles los
nutrientes esenciales que necesitan para
sobrevivir como lo son los aminoácidos,
vitaminas, sales inorgánicas y una fuente
de carbono como la glucosa, pero estas
formulaciones de medios basales deben
complementarse con suero.
Ahora, cada componente tiene un uso
especial en el proceso para cultivar
bacterias, por ejemplo, el medio de cultivo
proporciona los nutrientes esenciales y las
condiciones adecuadas para el crecimiento
celular, el suero fetal bovino (FBS) aporta
factores de crecimiento y proteínas
necesarios para las células y por último los
antibióticos y antimicóticos que previenen la
contaminación microbiana, sin embargo
estos últimos se evita usarlos a menos que
sea estrictamente necesario pues los
antibióticos puede llegar a contaminar el
cultivo y alterarlo.
Respecto a la preparación de placas de
cultivo se habla más que todo de los
materiales a utilizar como lo son las placas
de cultivo (placas de Petri o placas de
cultivo de células), el uso de pipetas
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automáticas o manuales teniendo en cuenta
que una vez se use una pipeta esa no se
puede reutilizar ya que puede contaminar
todo lo que se haya llegado a realizar y por
último mantener los filtros estériles.
Para continuar se enfocara el proceso en el
funcionamiento correcto de cada material
teniendo siempre como base la técnica
esteril, por la parte de las placas de cultivo
podemos decir que estas proporcionan un
sustrato adecuado para que las células se
adhieran y crezcan, también se debe tener
en cuenta que las pipetas se utilizan para
dispensar con precisión el medio de cultivo
y las células en sus respectivas placas y
como se ha nombrado anteriormente, los
filtros estériles se utilizan para mantener las
condiciones de esterilidad durante la
manipulación de cada elemento.
Ahora, respecto al cultivo que se esté
realizando se puede llegar a necesitar
máquinas como lo son las Incubadoras con
control de temperatura, humedad y CO2 o
el Microscopio invertido, por otra parte, la
incubadora proporciona las condiciones
controladas de cultivo, simulando el
ambiente fisiológico y permitiendo que el
cultivo crezca sin problemas mientras que
por la parte del microscopio invertido se
puede llegar a utilizar para el seguimiento y
análisis del crecimiento celular.
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Una vez se tenga listo tanto la preparación procedemos a arrojar los resultados
celular como el cultivo y se encuentre expuestos en la práctica.
dentro de la incubadora este puede durar
dentro de la misma hasta 4 o 5 días, una
vez complete estos días se sacará de la
incubadora y se le añadirán diversos
reactivos que permitirán la división celular y
el seguimiento del crecimiento tanto de las
células vivas como el de las células
muertas, para el caso de esta práctica se
usarán reactivos como la Tripsina-EDTA y (Como primer punto de partida frente al proceso de
Azul Tripán que ayudarán para el recuento cultivo celular, formamos a partir de DEMN y FBS
de células y la disociación celular. preparamos el medio de cultivo completo que
cumpla con las condiciones que proveen al cultivo)
Por su parte también existen diferentes
fases del crecimiento celular tales como “El
pasaje celular” el cual se realiza para
mantener las células en fase exponencial
de crecimiento y evitar la sobre confluencia
ya que si esto llega a pasar las células
morirá, este recuento celular se puede
hacer de 2 maneras, mediante un
Hemocitómetro que puede ser si bien
manual o no, además este se usa (Posteriormente pasamos a alistar la muestra

específicamente para evaluar la viabilidad celular teniendo en cuenta que todos los medios y

celular. Una vez se obtuvieron los análisis y materiales pasaron por un proceso de verificación

resultados se procedió a tomar las células y de calidad)

pasarlas por un proceso de congelación

utilizando nitrógeno líquido para su
conservación por un tiempo prolongado.

RESULTADOS:

Teniendo como guía o base la metodología

de trabajo realizado en el laboratorio virtual,

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(Inicialmente después de realizar toda la pertinente

verificación de calidad y de haber preparado la
muestra, usando un pipeteador extraemos de la
misma y inyectamos en el objeto donde
inicialmente ya se habría preparado el medio
completo)

(En este punto podemos empezar a realizar la

subcultivacion la cual da paso a la tercera fase del
cultivo, la fase estacionaria.)

(Ya después de haber tomado la muestra y

agregarla al medio completo, utilizamos la
incubadora la cual no va a permitir que el cultivo
pase por la primera de las 3 fases, la fase de
retraso, donde las células se adaptaran a su nuevo
ambiente)
(Inyectamos un cantidad mínima de bicarbonato de
sodio el cual nos va permitir mantener el pH entre 4
a 7. Este Índice nos indica que el cultivo no sufrirá
cambios o lo que puede resultar en una
citotoxicidad)

(Tiempo después de haber agregado el

bicarbonato de sodio, nos encontramos en el punto
(Retomando el anterior resultado. Después de que donde aplicamos la tripsina)
las células se acoplaron a su nuevo ambiente
después de haberlas dejado en la incubadora por 4
días, podemos visualizar que después de ese
tiempo el cultivo está entrando a su segunda fase,
la fase logarítmica.)

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(Aplicamos nuevamente una cierta cantidad del
medio para así lograr realizar un adecuado conteo
de las células, que después pasamos a un tubo de
ensayo con el cultivo)
(En este punto ya habremos realizado el
subcultivo, para luego agregar la tripsina azul, la
cual, nos va permitir determinar y saber
cuantitativamente cuántas células hay en la
muestra)
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(Anteriormente, con ayuda de un pipeteador se
tomó una muestra del cultivo junto al trypsin azul
en una lámina para llevarla al cell number, el cual
nos arrojó la cantidad de células presentes en el
medio.)
(Finalmente después de haber realizado el debido
proceso. Por último llevamos el cultivo a
criogenizar para resguardarlo junto a un agente del
propio que realice el adecuado proceso de
preservar.)
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
¿Qué es el Cultivo Celular?
Según (Brito,2010) el cultivo celular es el conjunto
de técnicas cuya función nos permite a través de
un modelos in vitro la máxima preservación de las
propiedades fisiológicas, bioquímicas y genética de
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la célula. Es decir, es un método o proceso el cual (Introducción al cultivo celular, s.f.)¨ Este tipo de
nos permite llevar a cabo la preservación de cultivo permite mantener, al menos en parte, la
muestras que en su mayoría se orientan a la arquitectura característica del tejido “in vivo”2. Se
investigación.1 conservan las interacciones histológicas y, gracias
a ello, este tipo de cultivo permite mantener los
Ahora, como pudimos observar no solo en los
tipos celulares diferenciados, por lo que
resultados sino también en el laboratorio virtual el
representan una buena réplica del tejido de origen¨
proceso de un cultivo celular conlleva una serie de
Es decir, es un método el cual permite resguardar
pasos los cuales podemos determinar de que se
las propiedades únicas de las células del tejido
dividen en 3 fases generales.
extraído.
La primera fase es la fase de retraso, en esta la
¿Cómo se debe mantener un cultivo de una
célula es inyectada en un medio completo el cual
línea celular?
es, una solución que contiene una diversidad de
vitaminas, hormonas y factores de crecimiento que Ya conociendo que una Línea celular es el primer
permiten a la célula reproducirse en este ambiente. subcultivo el cual se crea a partir de un cultivo
celular. La forma más adecuada para mantener y
La segunda fase es la fase logarítmica, en esta la
resguardar este subcultivo es a través de la
célula ya se había acoplado a su medio y comienza
criopreservación la cual el método más adecuado
a reproducirse de forma binaria de tal forma que
es almacenarlo en nitrógeno líquido con un agente
debe poseer una variabilidad genética.
crioprotector como lo puede ser el dimetilsulfóxido.
Y por último, la tercera fase llamada, fase
¿Qué es un órgano cultivo?
estacionaria. En esta la célula ya se habrá
adaptado a su ambiente y reproducido de tal Este tipo de cultivo es único pues, permite
manera que ya abarca entre un 70-90% de todo el mantener la estructura original del tejido, se
área del cultivo, en esta principalmente ya se conservan las interacciones histológica, las cuales
comienza a realizar las respectivas observaciones
del cultivo, para así, poder determinar las
propiedades fisiologicas y bioquimicas de la célula. permiten resguardar los tipos celulares
diferenciados.
¿Qué tipos de cultivos celulares hay para
células animales? ¿Qué importancia tienen los cultivos celulares
en la investigación y avance de la ciencia?
El tipo de cultivo más común para células
eucariotas es el cultivos de órganos. según

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Primero que todo, Inicialmente toda técnica que
permita la interacción con microorganismos
siempre es un paso en el avance de la ciencia, por
que, el propio hecho de realizar este tipo de
proceso nos lleva a conocer y descubrir todos los
engranajes que integran a el TODO.
No solo el ser humano se limita a este tipo de
interacción si no que, también se embarca en lo
que yo llamo una aventura al conocer, pero, el
conocer que?. no conocer descubrir, el ser humano
desde sus inicios ha traído el hambre de saber
cómo se compone el universo. Según la física, solo
sabemos un 8% del universo pero, las ciencias que
abarcan los pequeños mundos también descubren
los secretos que integran a este diminuto universo.
Siendo más específicos, los avances que generan
el cultivo celular son diversos en múltiples ámbitos
de la ciencia desde la creación de vacunas hasta la
creación de tratamientos para las enfermedades, el
trasplante de órganos y aunque parezca mentira se
que pueden causar enfermedades.¨3 Este cultivo
se prepara en un laboratorio añadiendo una
muestra de bacterias a una placa de Petri que
contiene un medio adecuado, sólido o líquido, en
función del tipo de bacteria que se vaya a
analizar¨Es decir, son pruebas eficaces y
significativas para la investigación médica y
científica, ya que se utilizan tanto para identificar y
estudiar agentes infecciosos, como para
comprobar la efectividad de otros tratamientos
como los antibióticos.
¿Qué tipos de cultivos bacterianos hay?
En la actualidad, aunque existan diferentes tipos de
cultivos de bacterias, todos persiguen un mismo
objetivo: diagnosticar posibles infecciones. A
continuación, describiremos las pruebas de cultivo
bacteriano que más se utilizan en la actualidad.
-Cultivo de Garganta

encuentra dentro de la ingeniería también. -Cultivo de Orina

El cultivo celular solo es otro método el cual le -Cultivo de Esputo

permite al ser humano descubrir y redescubrirse a
-Cultivo de Sangre
sí mismo, pues todo descubrimiento trae una
pequeña reflexión. -Cultivo de Heces

-Cultivo de una Herida

¿Qué es un cultivo bacteriano?

Según (IEQFB, 2023) ̈Un cultivo bacteriano es una Destacando un ejemplo en cultivos de bacterias
prueba que se utiliza para detectar bacterias puede ser el cultivo de heces.
perjudiciales que están dentro o sobre el cuerpo y

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Para poder realizar un cultivo de Heces, el paciente
debe llevar una muestra de heces en un recipiente
limpio siguiendo las instrucciones de su médico.
Mediante este cultivo, se identifican infecciones
bacterianas en el sistema digestivo, así como las
intoxicaciones alimentarias.
salud o en otros casos permite el cultivo de
órganos que pueden llegar a salvar vida, todo
gracia al cultivo celular pues, no es solo una
técnica si no que se recalca que es un conjunto de
técnicos, es decir, es un trabajo en colectivo que
Normalmente, esta buscaba ayudar a la humanidad.

prueba se combina con otras para detectar virus y

otros parásitos, ya que las causas de las
enfermedades digestivas pueden ser múltiples. BIBLIOGRAFÍA

1)(S/f-b). Paho.org. Recuperado el 13 de

Otro ejemplo más común puede llegar a ser el cultivo
marzo de 2024, de
de sangre, el cual, en este caso, el profesional de
https://www3.paho.org/hq/dmdocuments/20
salud toma una muestra de sangre del paciente a
10/L%20Brito%20INHRR.pdf
evaluar, generalmente, mediante la vena del brazo.
Como el resto, esta prueba también se utiliza para
2) D. (s/f). INTRODUCCIÓN AL CULTIVO
detectar infecciones bacterianas, pero esta vez en la
CELULAR . Ehu.eus. Recuperado el 13 de
sangre. Con este cultivo, también se identifica la
marzo de 2024, de
presencia de hongos en la sangre, pero este caso es
https://www.ehu.eus/biofisica/juanma/mbb/p
más común en pacientes enfermos de cáncer o en
df/cultivo_celular.pdf
personas con catéteres intravenosos.
3)¿Qué es un cultivo bacteriano y para qué
CONCLUSIÓN se utiliza? (2023, 8 de febrero). Instituto
Europeo de Química, Física y Biología.
Como Corolario, el cultivo celular es una técnica de
https://ieqfb.com/cultivo-bacteriano-tipos-us
modalidad in vitro la cual permite resguardar las
os/
propiedades fisiológicas de una célula, tejido o
microorganismo el cual es llevado como objeto de
estudio a una investigación.

El proceso de cultivo celular a permitido aplicarlo

en otros ámbitos de la ciencia de la salud los
cuales han tenido avances y descubrimientos
significativos los cuales están a favor del bienestar
de la humanidad, esto permitiendo el poder
combatir los virus y bacterias que atenten a nuestra

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