Taller Práctico de Laboratorio I: Uso del microscopio

TALLER PRÁCTICO DE LABORATORIO I: USO DEL MICROCOPIO.

Importante
Para la realización de este taller, lea los conceptos siguientes y realice las
indicaciones que se dan a continuación

El desarrollo del microscopio permite a los biólogos, la observación y el estudio de

los organismos con mayor detalle, lo cual ha contribuido a ampliar el campo de las
investigaciones. El microscopio (micro= muy pequeño, scope= ver) está compuesto
por una serie de lentes que aumenta la imagen de los objetos y permite ver detalles
imperceptibles a simple vista

MATERIALES

 Microscopio compuesto  Goteros

 Portaobjetos  Hilos
 Cubreobjetos  Corcho
 Papel limpia lentes (papel de  Cuchillas
arroz)  Papel milimetrado
 Papel periódico con letras  Papel absorbente
impresas
 Cajas de petri

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ALGUNOS PRINCIPIOS DE MICROSCOPÍA

 Poder de Resolución: Es la capacidad de un instrumento óptico para
distinguir con claridad que los objetos que están muy cerca, en
realidad están separados. Si trazamos dos líneas muy próximas de
manera que diez mil ocuparan un milímetro; el microscopio que resuelva las
dos líneas, es decir, que permita distinguir la una de la otra, es un
microscopio con gran poder. A menor distancia que pueda medirse entre
dos puntos, mayor es el poder de resolución del microscopio. El poder
de resolución del ojo humano es de cien micras; el del microscopio
compuesto es de dos décimas de micra y el del microscopio electrónico es
de una milésima de micra.
 Poder de Aumento: El aumento o magnificación es la capacidad que
posee un instrumento óptico para dar una imagen aumentada del
tamaño de un objeto. Depende de las lentes de los objetivos y del ocular
y es independiente del poder de resolución. Su microscopio consta de
dos lentes; el ocular y el objetivo y cada uno poseen su poder de aumento.
Cuando se observa un objeto, su aumento total es el producto del poder de
aumento del objetivo (A o B), por el aumento del ocular (A o C). El tamaño
real del objeto se representa con X. El aumento se expresa en diámetros.
Un ocular 10X y un objetivo 10X producen un aumento de 100 diámetros.
Empleando el objetivo de inmersión (100X):100X x 10X= 1000 diámetros.

Fuente http://tutorbastom.wordpress.com/2010/04/10/practica-de-laboratorio-n%C2%B0-1-el-microscopio/

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DESARROLLO DEL TALLER: COMO USAR EL

MICROSCOPIO

http://www.hospitalclinico.cl/laboratorio-clinico.html

ACTIVIDAD 1.

Cuando utilice el microscopio compuesto, tenga en cuenta los siguientes aspectos:

 ILUMINACIÓN: abra suave y completamente el diafragma. Mueva el espejo

dirigiendo la cara plana hacia la fuente de luz si esta es natural, o la cara
cóncava si la fuente es artificial. Coloque el objetivo de menor aumento en
posición de observación. Viendo por el ocular manipule el espejo hasta obtener
una iluminación homogénea del campo visual.

 PREPARACIÓN DE LA MUESTRA: cuando haya aprendido a iluminar el

campo del microscopio, está en condiciones de observar diferentes muestras.
Pero la microscopía exige mucha práctica. Se puede empezar con una
preparación sencilla:

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ACTIVIDAD 2.
1. Recorte del periódico la letra (e) más pequeña que encuentre.
2. Colóquela en el centro de un portaobjeto limpio, agregue una gota de agua con
un gotero una pipeta.
3. Coloque el cubreobjetos sobre el portaobjetos formando un ángulo de 45º con
este. Deje caer suavemente el cubreobjetos sobre la muestra de manera que el
agua quede distribuida uniformemente.
4. Las burbujas dificultan la observación; evite su formación desplazando el
cubreobjetos o haciendo leve presión sobre este.
5. Retire el exceso de agua con papel para lentes.
6. Coloque la preparación en la platina de modo que la e quede centrada sobre el
orificio.
7. Compruebe que esta derecha cuando se mira a simple vista.

ENFOQUE CON POCO AUMENTO: verifique que el objetivo de menor aumento

(10X) este posición sobre la muestra.

ACTIVIDAD 3.
1. Mirando por fuera haga girar lentamente el tornillo micrométrico para bajar el
tubo hasta que el objetivo este aproximadamente a 5 mm de la preparación.
2. Mire el ocular y si es necesario suba lentamente el tubo hasta que la e
aparezca en el campo visual.
3. Use el tornillo micrométrico para lograr un enfoque preciso.
4. Esquematice lo observado. ¿Qué diferencias encuentra con la observación
a simple vista?
5. Si desea observar con mayor detalle, gire lentamente el revólver hasta
colocar el objetivo de 43X en la posición adecuada teniendo el cuidado de
que el objetivo no toque la preparación.
6. Mire por el ocular y logre en enfoque preciso con el tornillo micrométrico.
Regule la iluminación.
7. Esquematice lo observado. Compare la imagen obtenida con la anterior.

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OBSERVACIÓN CON EL OBJETIVO DE INMERSIÓN:

Utilice una placa preparada (su tutor se la proporciona) y proceda así:

ACTIVIDAD 4.

1. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubreobjetos.

2. gire el revólver hasta colocar el objetivo de inmersión en la posición correcta.
3. Baje el tubo hasta que el objetivo de inmersión penetre en la gota y casi toque
el cubreobjetos.
4. Mire a través del ocular y consiga el enfoque preciso con el tornillo micrométrico.
5. Esquematice lo observado.
6. Compare esta observación con las anteriores. ¿Qué papel desempeña el aceite
de inmersión?
7. Limpie el objetivo con algodón impregnado de Xilol.
8. Terminada la observación, gire el revólver de manera que quede en posición de
observación, el objetivo de menor aumento.
9. Teniendo en cuenta los pasos anteriores, observe al microscopio una capa de
corcho muy fina.
10. Esquematice lo observado. Haga un montaje similar al de la letra e empleando
hilo de color. Observe con 10x y 43x. esquematice lo observado.

DESPLAZAMIENTO DE LA IMAGEN: empleando el montaje de la letra e enfoque

con el objetivo de 10x.

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ACTIVIDAD 5.

 Mueva la lámina en varios sentidos mientras observa por el ocular.

 Observe el desplazamiento de la imagen en cada caso. ¿en qué dirección se
mueve la imagen? ¿Cómo es el desplazamiento de la imagen con relación al
movimiento de la lámina?

CAMPO VISUAL DEL MICROSCOPIO: al mirar al través del microscopio se

observa un área circular que es el campo visual del microscopio.

MEDICIÓN DEL DIÁMETRO DEL CAMPO VISUAL DE UN MICROSCOPIO: el

micrómetro es el aparato utilizado para hacer las mediciones microscópicas.

Mediciones directas

ACTIVIDAD 6.

Si se carece de él se puede medir el campo visual y calcular el tamaño de la

estructura observada empleando papel milimetrado.

1. Haga un montaje en fresco con un pedazo de papel milimetrado y enfoque con

el objetivo de menor aumento.
2. calcule el diámetro de acuerdo con las divisiones que aparecen en el campo.
3. Recuerde el teorema de Pitágoras: para calcular el diámetro con otros objetivos
divida el diámetro encontrado entre la razón objetivo de mayor aumento/objetivo
de menor aumento, así: si el diámetro para 10X es 1500 micras; el diámetro para
45X será: X=1500/45/10
4. ¿Cuántos milímetros mide el diámetro del dibujo ?
5. ¿visualmente, cuantos mm puedes contar en todo el circulo?

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Sabemos que los pequeños cuadrados del papel milimetrado tienen 1 mm de largo,
por ello nos bastará observar cuantos cuadros aparecen a lo largo del diámetro para
conocer su longitud

 Córrase la preparación, de modo que una línea del papel milimetrado coincida
con la circunferencia.
 Obsérvese el dibujo fijándose como en la letra A coinciden una línea del papel
milimetrado y la circunferencia el campo visual del microscopio.

Mediciones indirectas
Si queremos saber la longitud del campo visual utilizado un objeto de 40x con la
técnica anterior, nos encontraremos con que observamos una pequeña parte de un
cuadro, menos de 1 mm por tanto será muy inexacto decidirlo por cálculo
aproximado. Deberemos utilizar técnicas indirectas.

ACTIVIDAD 7.

1. Si en una observación microscópica directa, observo que el diámetro del campo

visual es de 4.2 mm; en ese diámetro se pueden acomodar seis células de
elodea, ¿Cuánto medirá cada célula de elodea?
2. Si en una medición indirecta observo que el diámetro del campo visual es de 0.4
mm y estoy observando paramecios que miden 0.156 mm.
3. ¿Cuántos paramecios se podrán acomodar en ese diámetro? Utiliza la fórmula
del párrafo siguiente.

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Tengamos en cuenta que mayor objetivo utilizado observamos menor parte del
objeto. De acuerdo con esto podemos aplicar la fórmula:

a1= Objetivo menor utilizado en la medición directa.

a2= Objetivo mayor con el que intentamos saber el diámetro del campo visual.
d1= Diámetro observado en la medición directa.
d2= Incógnita; longitud del diámetro buscado.
Apliquemos la fórmula:

1. Observemos con el objetivo menor del microscopio 5x (a1) según la técnica de

mediciones directas. Supongamos que la longitud del diámetro con este objetivo
es de 3.7 mm (d1).
2. ¿Cuál será la longitud del diámetro (d2) si utilizamos un objetivo de 40x (a2)?
Sustituyamos los datos en la fórmula:

= ;

Con un objetivo de 40x

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