UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE MEDICINA
GENÉTICA “B”
CITOGENÉTICA

GRUPO: 3

INTEGRANTES:
• AGUAGUIÑA GALLEGOS ANDREA NICOLE
• COELLO ORTIZ DAYANA CAROLINA
• GONZÁLEZ CHAMBA NATHALY MICHELLE
• MARAÑÓN RUALES JOSÉ ESTEBAN
• MEZA QUINGA NAGIELY FERNANDA
• SISA MATZA LUIS ROBERTO
• SISA TUBÓN BRYAN STALIN
• TAIPE CRUZ MARIO ULICES
• YANZAPANTA MORALES JOHN LEONARDO

DOCENTE:
DR. JOSUE ACOSTA ACOSTA
FECHA:
DOMINGO, 21 DE NOVIEMBRE
DEL 2021
INTRODUCCIÓN:
En el estudio de los componentes y mecanismos de transmisión de la información genética en los
organismos vivos, existió varias interrogantes en varias áreas como la organización, procesos e
identificación del enrollamiento del ADN con sus tipos de empaquetamiento y actividad de
expresión; descubriendo la heterocromatina y eucromatina dentro del núcleo
celular, en la conformación estructural de los cromosomas, clasificación de los
cromosomas según su forma y organización de grupos dentro del cariotipo, además del
desarrollo de técnicas de identificación de los cromosomas sexuales y no sexuales dentro del
cariotipo humano para determinación del sexo, aberraciones y alteraciones estructurales-
numéricas cromosómicas. Todo aquello mencionado desarrolló una nueva
rama especializada dentro de la genética fundamentada en la biología molecular y celular, la rama
de la Citogenética.

Video 1: https://www.youtube.com/watch?v=2B9unRdTvXw
TEMA: construcción del cariotipo
CARIOTIPO
Como sabemos las células eucariotas tienen el material genético contenido en el núcleo y en
mitocondrias. Sabemos que el ADN naturalmente está compuesto por dos cadenas que forman
una hebra, esta hebra se enrolla en proteínas (histonas) para formar un nucleosoma, el conjunto
de estos últimos forma un solenoide, a la vez la agrupación de solenoides va a formar la
cromatina, esta se va a enrollar y a ultracondensar para dar lugar a los cromosomas.
Las Histonas H3 Y H4 forman un dímero proteico, al igual que las H2A Y H2B; ambos dímeros
se unen para formar un tetrámero y a la vez la unión de 2 tetrámeros formará un octámero de
histonas, alrededor de esta estructura se enrolla el ADN para la formación del nucleosoma, esta
unión tiene el soporte de otra histona, la H1 (1).

El cromosoma de tipo profásico está constituido por 2 cromatides unidas por el centrómero, este
también divide a las cromatides en un brazo corto (p) y un brazo largo (q). A la vez tenemos
diferentes tipos de cromosomas: metacéntricos (los brazos miden lo mismo); submetacéntricos
(el brazo que tiene mayor longitud); acrocéntricos (el brazo que es aún más largo y el brazo p
solo tiene una pequeña porción) (1).

En el caso se los seres humanos únicamente encontramos cromosomas metacéntricos,

acrocéntricos y submetacéntricos, no existe la presencia de cromosomas telocéntricos debido a
que este se encuentra únicamente en los animales.
Las cromátides hermanas que conforman un cromosoma se encuentran unidas por medio de
un centrómero, a su vez este último se encuentra rodeado por el cinetocoro que es la
estructura encargada de fijar a los cromosomas con el huso acromático durante el proceso de la
división celular (1).
Construcción del cariotipo.
Para la construcción del cariotipo se debe empezar tomando una muestra de sangre
y dejándola sedimentara durante varios minutos, esto con el objetivo de que los glóbulos rojos al
ser células pesadas se vayan al fondo, dejando en la superficie a los leucocitos que tienen un
menor peso, de este último proceso se extraen únicamente los glóbulos blancos debido a que son
las únicas células que tienen núcleo en comparación con los eritrocitos. Después de haber
seleccionado únicamente a las células de la línea blanca procedemos a agregarle colchicina que
es la sustancia encargada de detener el proceso de división celular en metafase, como siguiente
paso se procede a agrega agua a la muestra, para de esta manera lograr la lisis celular y obtener
el material genético. Para lograr separar los restos celulares del material genético que se
encuentran disueltos en la muestra, es necesario llevarlos a una maquina conocida
como centrifuga, donde se da un proceso de sedimentación que separa al material genético de
las demás estructuras presentes en la muestra, y como paso final a los cromosomas sedimentados
se los lleva a una placa donde se los fija con alcohol y se los tiñe (1).
MAPEADO DEL CARIOTIPO

Para un mejor estudio de los cromosomas es necesario realizar un cariotipo, en donde podemos
separar a los cromosomas de acuerdo a su tamaño, forma y posición del centrómero, y formar
grupos que van desde la (A) hasta la (G).
 GRUPO CROMOSOMAS
A 1,2,3
B 4,5.
C 6,7,8,9,10,11,12 y el cromosoma X.
D 13,14,15.
E 16,17,18.
F 19,20.
G 21,22 y el cromosoma Y.

Para la realización del mapeo del cariotipo a partir de una microfotografía de los cromosomas en
metafase procedemos a hacer lo siguiente.

1: con un lápiz dividir la microfotografía en cuatro cuadrantes, esto nos facilitara el conteo de los
cromosomas.
2: contar los cromosomas que contiene cada cuadrante, en donde se obtendrá la cantidad de un
total de 46 cromosomas.
3: ubicar el centrómero de cada cromosoma y pintarlos, esto nos ayudara al momento de
emparejarlos.
4: definir los cromosomas según la posición del centrómero en donde pueden ser:
METACÉNTRICOS: el centrómero se ubica en la mitad del cromosoma y sus brazos son de
igual longitud.
SUBMETACÉNTRICOS: el centrómero se ubica un poco alejado del centro del cromosoma
dando lugar a un brazo largo y un brazo corto
ACROCÉNTRICOS: el cromosoma tiene el centrómero localizado más hacia uno de sus
extremos.
5: diferenciar a los cromosomas según su tamaño. Grandes, medianos y pequeños y
los marcamos.
6: realizar el mapeado del cromosoma, para lo cual se deberá emparejarlos teniendo en cuenta el
tamaño, forma y la posición del centrómero, empezando con los más grandes luego con los
medianos y al final con los pequeños (1).
Una vez clasificado los cromosomas a partir de la ubicación de su centrómero y tamaño, se
procede a buscar sus parejas, esto se lo realiza a partir de las características que comparten entre
sí, para eso se puede tomar como guía la siguiente tabla:

Como se puede observar en la tabla, los cromosomas pueden clasificarse a partir de su

morfología, dividiéndose en 7 grupos, los mismos que se representan mediante letras (A, B, C,
D, E, F, G) y un grupo sexual (par X e Y).
En el grupo A se encuentran los cromosomas grandes metacéntricos (par 1 y 3) y
grandes submetacéntricos (par 2).
En el grupo B se encuentran los cromosomas grandes submetacéntricos (par 4 y 5).
En el grupo C se encuentran los cromosomas medianos submetacéntricos (par 6, 7, 8, 9, 10,
11 y 12)
En el grupo D se encuentran los cromosomas grandes acrocéntricos (par 13, 14 y 15).
En el grupo E se encuentran los cromosomas pequeños submetacéntricos (par 16, 17 y 18).
En el grupo F se encuentran los cromosomas pequeños metacéntricos (par 19 y 20)
En el grupo G se encuentran los cromosomas pequeños acrocéntricos (par 21 y 22)
En el grupo sexual se encuentran los pares de cromosomas “X” (submetacéntrico mediano) y
“Y” (acrocéntrico pequeño) (1).
Video 2: https://www.youtube.com/watch?v=vpMD-F9jVAE
Tema: Citogenética
ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL GENÉTICO
El material genético se encuentra en una molécula llamada ADN, la cual está organizada en una
estructura denominada cromatina, conformada por el empaquetamiento de la hebra que
constituye al ADN, misma que se condensa rodeando a las proteínas, posteriormente esta
estructura se condensa nuevamente para dar lugar al cromosoma.
Cada especie está conformada por un número característicos de cromosomas, por lo que, el
conjunto de los mismos ordenados de acuerdo a su tamaño y forma, constituye un cariotipo (2).
CITOGENÉTICA
La citogenética es el estudio del número y estructura de los cromosomas, en donde se considerar
ciertas técnicas, como:
1. Toma de muestra: generalmente se utiliza una muestra de sangre, aunque
también se puede usar muestras de tejidos que contengan células vivas.
2. Cultivo de células: las células recogidas en la muestra son cultivadas con el
objetivo de que se multipliquen para poder disponer de varias células que permitan un
amplio estudio.
3. Inhibición de mitosis: se utiliza sustancias que permite un paro dentro de la
mitosis en la metafase, ya que es la fase en donde los cromosomas son más visibles
debido a su alta condensación.
TINCIÓN DE CROMOSOMAS
Se añaden sustancias que se adhieren a los cromosomas dándoles pigmentación o color, cabe
mencionar que las tinciones que se utilizan se unen con mayor afinidad a una región que a otra,
dando como resultado una proyección de bandas intercaladas entre oscuras y claras, siendo esto
conocido como bandeo (2).
El uso de algunas tinciones provoca que el bandeo se dé de distintos colores, por lo que cada una
de ellas son diferentes, permitiendo que se pueda identificar cada cromosoma, además del
reconocimiento de su estructura (2).
Una vez que se identifica los cromosomas y sus estructuras, se procede a ordenarlos en pares de
mayor a menor tamaño, tomando en cuenta que al final siempre se coloca el par de cromosomas
sexuales, para posteriormente compararlo con un cariotipo normal (2).
A través de la comparación se realiza un estudio que permite reconocer alteraciones
cromosómicas presentes como: una trisomía o monosomía (2).
Video 3: https://www.youtube.com/watch?v=w8xdqWI-PQs
Tema: FISH
La hibridación in situ con fluorescencia es la técnica primordial de la citogenética molecular, su
procesamiento se lleva a cabo gracias a una sonda previamente marcada con un fluorocromo que
hibridará una región específica del genoma con el objetivo de determinar si la región se encuentra
o no presente durante la metafase celular, la detección de fluorescencia señala su existencia, de
esta manera, cuando se presentan dos señales o una sola señal de mayor tamaño estas apuntan a
la presencia de las dos cromátidas que posee un cromosoma (3).
Esta técnica puede ser muy útil para la detección de deleciones y microdeleciones que con otras
técnicas convencionales pasan desapercibidas, de igual manera, se puede implementar para la
determinación de traslocaciones y anomalías numéricas de cromosomas de manera
rápida, analizando los núcleos en interfase sin recurrir al periodo de metafase celular. Por último,
gracias a este procedimiento se puede obtener el número de copias en núcleos que se encuentran
en interfase (3).
Ejemplos:
• Deleciones: en la presente imagen se puede apreciar que en uno de los
cromosomas se evidencian dos señales que representan a dos genes diferentes, pero
que se localizan en el mismo cromosoma, sin embargo, en su cromosoma homologo
se vislumbra solo una señal que indica la presencia de una deleción (microdeleción),
esto se lo puede contemplar gracias a dos sondas distintas marcadas
con fluorocromo rojo.
• Traslocación: entre el cromosoma 12 y 4, el cromosoma 12 normal posee 2
señales (roja y verde) con 2 puntos (2 cromátides). En la imagen se puede apreciar
que en esta alteración el cromosoma 12 se ha fragmentado, dando como resultado que
parte de él se fusionó con el 4 y la parte restante a mantenido su ubicación en el
cromosoma 12. La señal roja se posiciona en el derivado del cromosoma 12 y la verde
en el derivado del cromosoma 4.

• Anomalías numéricas: se evidencia una trisomía del cromosoma 8, se

puede obtener este resultado al cuantificar el número de células que señalan una
trisomía y el número de células normales.
Video 4: https://www.youtube.com/watch?v=8EfEpKnJEWU
Tema: Biología Molecular
BIOLOGÍA MOLECULAR
La Biología Molecular es una ciencia que se encarga del estudio de las estructuras, composiciones
y funciones de las moléculas esenciales e importantes para la vida, manteniendo una estrecha
relación entre diversas disciplinas como la bioquímica y genética. Para llevar a cabo este estudio
debemos partir desde el ADN.
Todas las células de los seres vivos están constituidas por ADN, el cual está formado por 4 bases
(pirimidinas y purinas) y se encuentra en el núcleo en estructuras denominadas cromosomas que
contienen a los genes. La especie humana posee un total de 3200 millones de pares de bases(4).

En el ser humano existen 23 pares de cromosomas, 22 pares somáticos y un par de cromosomas

sexuales (XY). Cada cromosoma contiene alrededor de 1400 genes que se encuentran presentes
en el núcleo y un pequeño porcentaje en las mitocondrias. Los genes codifican un gran número
de proteínas a través de un proceso denominado splicing. De toda esa gran secuencia de pares de
bases solamente el 1,5 % es empleado en la codificación de proteínas (4).
Cada ser humano presenta diferencias en su secuencia genómica (0,1 %); cada individuo posee
aproximadamente 3 millones de bases distintas.
Las mujeres poseen dos cromosomas X mientras que los varones cuentan con un cromosoma X
y un cromosoma Y. A través de la mitosis las células pueden replicarse, mientras que en la
meiosis se formarán células germinales en el hombre y en la mujer que al interactuar darán origen
al nuevo ser (4).
La biología molecular dentro del campo de la medicina ha permitido:
1. Estudiar el origen de tumores y otras patologías.
2. Conocer el comportamiento epigenético de la interacción con otros genes.
3. Predecir y prevenir enfermedades.
4. Diagnosticar entidades que anteriormente eran de difícil acceso.
5. Obtener nuevas técnicas de tratamientos moleculares.

Video 5: https://www.youtube.com/watch?v=lanzdwi-mF0
Tema: Cuerpos Barr: Observación en laboratorio | 37/87 | UPV
CUERPOS DE BARR
Reseña histórica
-Theophilus Painter en 1923 demostró mediante microscopía celular que la mujer posee
dos cromosomas sexuales XX.
-Murray Barr y Ewart G. Bertram en 1949 visualizaron a nivel del núcleo cuerpos condensados
y con una mayor pigmentación que el resto del núcleo en células de gatos hembra.
-Mary Lyon propuso que el cuerpo de Barr era un cromosoma X inactivado. Mediante posteriores
estudios se pudo descubrir que ese cromosoma se inactivaba alrededor del día 16 después de la
fecundación de un óvulo y espermatozoide cargados genéticamente con dos cromosomas X y que
la inactivación sucedía al azar (5).
Características del Cuerpo de Barr
El cuerpo de Barr es una zona redondeada más condensada y por ende más teñida que aparece
generalmente en la periferia de las células somáticas femeninas.
La importancia del cuerpo de Barr radica en que los genes que controlan ciertas características
específicas del fenotipo del individuo por ejemplo el color de pelo en gatos se encontrarán
respectivamente en ambos cromosomas X, sin embargo al existir esta inactivación al azar de uno
de ellos, en el individuo se expresará el color del gen que se encuentre en el cromosoma no
inactivado, de esta manera si una célula tiene desactivado el cromosoma con el color naranja se
expresará el gen de color negro y si en otra célula está desactivado el negro se expresará el naranja
obteniendo como resultado un individuo mosaico respecto al fenotipo del color de pelo:

Podemos analizar lo siguiente:

-En el caso de los gatos machos se presentará un solo color ya que solo tienen un solo cromosoma
X.
-En el caso de una hembra homocigótica con el mismo color de pelo en ambos cromosomas X la
hembra presentará un solo color.
-En el caso de hembras heterocigóticas se podrá observar el patrón de color característico del
ejemplo de la inactivación del cuerpo de Barr.
-Si vemos un gato de 2 colores diferentes podemos deducir que es una hembra, si vemos un gato
de un solo color es probable que sea un macho o una hembra homocigótica (5).
Observación de los cuerpos de Barr en el laboratorio
Materiales:
-Células de la mucosa bucal de un individuo.
-Orceína acética al 1%
-Portaobjetos
-Cubreobjetos
-Microscopio Óptico
-Papel de filtro
-Pinzas de disección
-Depresor bucal (baja lenguas)
Procedimiento:

• Colocar una gota de agua en el portaobjetos.

• Recoger las células de la cavidad bucal en específico de la lengua o del carrillo con un
baja lenguas.

• Realizar un frotis con la muestra en el portaobjetos.

 • Colocar una gota de orceína acética por 20 minutos para teñir la muestra.

• Remover el exceso de colorante y estar atento a que no se seque.

• Poner un cubreobjetos y secar la muestra.

• Observar en el microscopio la muestra con un aumento de 40x.

Lo que observaremos:
1. En el caso de que el individuo sea una mujer, presentará el corpúsculo de Barr en todas
sus células somáticas.

2. En el caso de que el individuo sea hombre, no presentará el corpúsculo de Barr

3. En el síndrome de Turner no habrá corpúsculo de Barr (XO)

4. En el síndrome de Klinefelter presentará corpúsculo de Barr (XXY) (5).

CONCLUSIONES:

• El impacto e importancia de la citogenética para el diagnóstico y tratamiento de

enfermedades genéticas se da gracias a las técnicas biomoleculares que han
mejorado históricamente el bienestar humano con programas y conferencias de control,
prevención e identificación en cromosomas que posean un potencial de alteración que
podría ser adquirida por las siguientes generaciones.

• El cariotipo es el ordenamiento de los cromosomas del ser vivo, en este caso el ser humano
según su clasificación morfológica en siete grupos y cada uno de los cromosomas poseen
zonas que permiten su expresión génica determinando la esencia característica del
organismo por funcionalidad y forma única en su fenotipo dado por su genotipo
intrínseco.

• Los procesos y mecanismos para el enrollamiento/empaquetamiento del ADN

son imprescindibles para determinar el grado de actividad o expresión genética desde el
punto de vista numérico y estructural, para identificación de sus componentes al momento
de la extracción y formación del cariotipo en conjunto con la utilización
de técnicas moleculares: FISH, HIS, Inmunocitoquímicas fluorescentes y cariotipo
espectral.
BIBLIOGRAFÍAS:

1. CONSTRUCCION DE CARIOTIPO [Internet]. Youtube; 2013 [cited 2021 Nov 20].

Available from: https://www.youtube.com/watch?v=2B9unRdTvXw

2. Citogenética [Internet]. Youtube; 2013 [cited 2021 Nov 20]. Available from:
https://www.youtube.com/watch?v=vpMD-F9jVAE

3. FISH [Internet]. Youtube; 2014 [cited 2021 Nov 20]. Available from:
https://www.youtube.com/watch?v=w8xdqWI-PQs

4. Biología Molecular [Internet]. Youtube; 2013 [cited 2021 Nov 20]. Available from:
https://www.youtube.com/watch?v=8EfEpKnJEWU

5. Cuerpos Barr: Observación en laboratorio | 37/87 | UPV [Internet]. Youtube; 2019 [cited
2021 Nov 20]. Available from: https://www.youtube.com/watch?v=lanzdwi-mF0