Universidad Autónoma de Coahuila

Facultad de Ciencias Biológicas.

Inoculación de
microorganismos en agar
inclinado.
Práctica 2

Docente: Dr. Nagamani Balagurusamy

Integrantes:
Ally Fernanda Crispin Vallejo
Andrea Guadalupe Espino Esquivel
Jenny Priscila Salinas Mireles
Andrea Valadez Monsivais
Grado y Sección: 4-A

Equipo: 6

Fecha de entrega: 05/Febrero/2024

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INTRODUCCIÓN
Los medios de cultivo son elementos y sustancias que garantizan a los
microorganismos u otras células los nutrientes necesarios para su conservación y/o
desarrollo. Estos elementos o sustancias pueden ser de origen orgánico e inorgánico,
natural o artificial. Su finalidad es garantizar el crecimiento del organismo o célula e
inhibir el desarrollo de otros. (Rodríguez, C et al., 2018).

La inoculación o siembra es el
proceso por el cual se transfieren
los microorganismos de un cultivo
a un medio en el cual crecerán
para ello se efectúan diversas
técnicas las cuales para ser
efectivas deben ir acompañadas
del empleo de la técnica aséptica
y de material estéril.

Imagen 1. Ingredientes de los medios

de cultivo,
por su naturaleza y función.

Se trata de un método simple y rápido de agotamiento progresivo y contínuo del inóculo

sobre un medio sólido, generalmente contenido en una placa de Petri. El objeto es
obtener a partir de un elevado número de bacterias, un número reducido de ellas
distribuidas individualmente a lo largo de la superficie de la placa. Al incubar está, cada
una de las bacterias originará una colonia. Las colonias individuales constituyen cada
una un cultivo puro. (Sanz, S., 2011)

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METODOLOGÍA Y MATERIALES
Instrumental

● Asa
● Tubos de ensayo
● Mechero bunsen
● Gradilla

Reactivos

● Agua
● Glucosa
● Extracto de carne
● Agar-Agar
● Peptona

Equipo

● Autoclave
● Incubadora
● Balanza Analitica

Para realizar esta práctica se preparó un agar nutritivo, el cual se utilizó para resembrar
microorganismos provenientes de una muestra de tierra.
Se comenzó preparando el agar nutritivo, en un matraz erlenmeyer se agregó 100 ml
de agua, 2 g de agar bacteriológico, 1 g de glucosa, 0.5 g de peptona y 0.3 g de
extracto de carne. Posteriormente en 4 tubos de ensayo se agregaron 2 ml del agar
preparado los cuales se esterilizaron en autoclaves, y se dejaron solidificar con una
inclinación de 1/3 del tubo.

Después con un asa cerca de un mechero se inocularon en dos tubos (imagen 2.) con
agar, las unidades formadoras de colonias cultivadas una semana antes de las cuales
se utilizó un medio de una disolución de 1x10^-5 y por último los medios de cultivo
fueron incubados por 24 horas.

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 DIAGRAMA DE FLUJO

Imagen 2. Inoculación por estriado en tubo.

RESULTADOS
Los resultados que se observan en la imagen 3 muestran un crecimiento después de
24 horas en incubación una vez inoculada una colonia formada en la dilución 1x10^-5 ,
obteniendo un crecimiento de colonias blanquecinas.

Imagen 3. Crecimiento de microorganismos después de 24 horas en incubación.

DISCUSIÓN
Based on the detailed procedure, it can be assured that all tubes with agar contained
the same concentration of nutrients from the nutrient medium, since with help of heat,
all the components of the medium were homogenized before being poured into the
tubes. Therefore, all the slanted tubes were in the same growth conditions. It is
important to mention that the flask with agar should not be subjected to dry heat or
placed directly on the hot plate stirrer, this can burn it and alter its properties.

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The fact that a higher number of CFUs in one tube was noticed with the naked eye may
have been due to a large amount of sample being taken for inoculation into the tube.
Finally, it would have been convenient to check the tubes in the incubator after 12 hours
of growth, to analyze if a lower amount of enriched medium allows bacterias to grow
faster.

CONCLUSIÓN
Al realizar una investigación sobre tipos de cultivos sólidos, se concluyó que la
inoculación en cultivos de agar inclinado prolongan el tiempo de conservación del
microorganismo entre dos a tres meses, en el cual puede ser aumentada la
conservación al realizarse una una inoculación del microorganismo a otro medio de
cultivo, o aplicarse aceite mineral (parafina de densidad 0.869 a 890) esterilizado
(Freire et al., 1999).

REFERENCIAS
1. Freire, J. R. J., & Sato, M. L. (1999). Conservación de cultivos de rizobios.
Revista latinoamericana de microbiologia-México 41(1), 35-42.
https://www.medigraphic.com/pdfs/lamicro/mi-1999/mi991f.pdf
2. Rodriguez, C., Zhurbenko, R. (2018). Información general sobre los medios de
cultivo. Manual de medios de cultivo. (4 ed.) [Archivo PDF].
https://www.biocen.cu/wp-content/uploads/2021/05/Manual-MC-2018.pdf
3. Sanz, S. (2011). Practicas de Microbiologia. Universidad de la Rioja. (2 ed.)
[Archivo PDF]
file:///C:/Users/fvfv1/Downloads/Dialnet-PracticasDeMicrobiologia-100835.pdf

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