norma UNE-EN ISO 16140-2

española
Diciembre 2016

TÍTULO Microbiología de la cadena alimentaria

Validación de métodos

Parte 2: Protocolo para la validación de métodos alternativos

(registrados) frente a los métodos de referencia

(ISO 16140-2:2016)

Microbiology of the food chain. Method validation. Part 2: Protocol for the validation of alternative
(proprietary) methods against a reference method (ISO 16140-2:2016).

Microbiologie de la chaîne alimentaire. Validation des méthodes. Partie 2: Protocole pour la validation de
méthodes alternatives (commerciales) par rapport à une méthode de référence (ISO 16140-2:2016).

CORRESPONDENCIA Esta norma es la versión oficial, en español, de la Norma Europea EN ISO 16140-2:2016,
que a su vez adopta la Norma Internacional ISO 16140-2:2016.

OBSERVACIONES Esta norma, junto con la Norma UNE-EN ISO 16140-1:2016, anula y sustituye a las
Normas UNE-EN ISO 16140:2003 y UNE-EN ISO 16140:2003/A1:2012.

ANTECEDENTES Esta norma ha sido elaborada por el comité técnico AEN/CTN 34 Productos
alimentarios cuya Secretaría desempeña FIAB.

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Editada e impresa por AENOR LAS OBSERVACIONES A ESTE DOCUMENTO HAN DE DIRIGIRSE A:
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 Índice

Prólogo...................................................................................................................................................... 7

0 Introducción ............................................................................................................................ 8

1 Objeto y campo de aplicación ................................................................................................ 8

2 Normas para consulta ............................................................................................................ 9

3 Términos y definiciones .......................................................................................................... 9

4 Principios generales para la validación de los métodos alternativos .................................. 9

5 Métodos cualitativos. Protocolo técnico para la validación ................................................ 9

5.1 Estudio de comparación de métodos ..................................................................................... 9
5.1.1 Consideraciones generales ..................................................................................................... 9
5.1.2 Estudio pareado o no pareado ............................................................................................. 10
5.1.3 Estudio de sensibilidad ......................................................................................................... 10
5.1.4 Estudio del nivel de detección relativo ................................................................................ 15
5.1.5 Estudio de inclusividad y exclusividad................................................................................ 16
5.2 Estudio interlaboratorios ..................................................................................................... 18
5.2.1 Consideraciones generales ................................................................................................... 18
5.2.2 Protocolo de medida ............................................................................................................. 18
5.2.3 Cálculos y resumen de los datos .......................................................................................... 20
5.2.4 Interpretación de los datos ................................................................................................... 23

6 Métodos cuantitativos – Protocolo técnico de validación .................................................. 24

6.1 Estudio de comparación de métodos ................................................................................... 24
6.1.1 Consideraciones generales ................................................................................................... 24
6.1.2 Estudio de veracidad relativa .............................................................................................. 25
6.1.3 Estudio del perfil de exactitud ............................................................................................. 29
6.1.4 Estudio del límite de cuantificación .................................................................................... 34
6.1.5 Estudio de inclusividad y exclusividad................................................................................ 34
6.2 Estudio interlaboratorios ..................................................................................................... 36
6.2.1 Consideraciones generales ................................................................................................... 36
6.2.2 Protocolo de medida ............................................................................................................. 36
6.2.3 Cálculos, resumen e interpretación de los datos ................................................................ 37

Anexo A (Informativo) Clasificación de los tipos de muestras y combinaciones sugeridas

de organismos objeto de estudio para los estudios de validación ......... 41

Anexo B (Normativo) Orden de preferencia para el uso de muestras contaminadas de

forma natural y artificial en los estudios de validación ......................... 57

Anexo C (Informativo) Protocolos generales para la contaminación por mezcla y la

contaminación artificial de alimentos ..................................................... 58

Anexo D (Informativo) Modelos de cálculos del RLOD utilizando datos procedentes del
estudio de comparación de métodos ........................................................ 61

Anexo E (Normativo) Puntos a tener en cuenta al escoger cepas para los ensayos de
inclusividad y exclusividad ...................................................................... 63

Anexo F (Informativo) Consideraciones respecto a los cálculos del nivel de detección

relativo (RLOD) entre laboratorios obtenidos en un estudio
interlaboratorios ....................................................................................... 65

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 Anexo G (Informativo) Principio del perfil de exactitud para la validación de los
modelos cuantitativos ............................................................................... 68

Anexo H (Informativo) Aplicación del perfil de exactitud en el estudio de comparación

de métodos ................................................................................................. 70

Anexo I (Informativo) Ejemplo de la aplicación del perfil de exactitud en un estudio

interlaboratorios ....................................................................................... 73

Bibliografía............................................................................................................................................. 77

1 Objeto y campo de aplicación

Esta parte de la Norma ISO 16140 especifica el principio general y el protocolo técnico para la validación de métodos
alternativos, por lo general patentados, relacionados con la microbiología de la cadena alimentaria. Su objetivo es que
los estudios de validación realizados conforme a esta parte de la Norma ISO 16140 se desarrollen por parte de
organizaciones dedicadas a la validación de métodos.

Esta parte de la Norma ISO 16140 resulta aplicable para la validación de métodos para el análisis (detección o
cuantificación) de microorganismos en:

– productos destinados al consumo humano;

– productos destinados a la alimentación animal;

– muestras ambientales recogidas del área de producción y manipulación de productos alimenticios para consumo
humano o animal, y

– muestras procedentes de la etapa de producción primaria.

En particular, esta parte de la Norma ISO 16140 resulta aplicable para bacterias y hongos. Algunos capítulos de esta
parte de la Norma ISO 16140 podrían aplicarse a otros (micro) organismos o a sus metabolitos, de forma individual en
cada caso. En el futuro se incluirán directrices para otros organismos (como virus y parásitos), bien en esta parte de la
Norma ISO 16140 o bien en partes separadas.

2 Normas para consulta

Los documentos indicados a continuación, en su totalidad o en parte, son normas para consulta indispensables para la
aplicación de este documento. Para las referencias con fecha, sólo se aplica la edición citada. Para las referencias sin
fecha se aplica la última edición (incluyendo cualquier modificación de ésta).

ISO 16140-1, Microbiología de la cadena alimentaria. Validación de métodos. Parte 1: Vocabulario.

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