Solemne I Microbiología

• Definición de Mbiología

Definición de microbiología → Estudio de MOs microscópicos

Disciplina científica → Estudio sistemático y metódico que genera conocimiento básico y aplicado
(5-10) MOs en la historia del hombre
1) Vid, cebada, agave → Vino, Cerveza, Alcohol
Vino (Levaduras) → Pueblos antiguos que cultivaban la vid 2) Harina y levadura → Pan
Fermentación alcohólica (Saccharomyces cerevisiae)
Cerveza (levaduras) → Antiguos egipcios
C6H12O6 → 2C2H6O + 2CO2
Pan (levaduras) → Antiguos egipcios

Queso (Bacterias u hongos filamentosos) → A partir de 1) Leche → Yogurt

Lactobacillus casei, bifidus, bulgaricus
leche de bovinos, almacenada en bolsas de cuero 2) Leche → Queso → Queso maduro
Penicillium roqueforti y camemberti
Yogurt (Bacterias y levaduras) → tártaros expandidos a
Fermentación láctica
C6H12O6 → 2C3H6O3
Europa permite difusión de este

(11-25) Antecedentes
MICROSCOPIO

Anton van Leeuwenhoek → Primera observación de MOs libres y creador de microscopio primitivo
Robert Hooke → Construcción de microscopio similar al actual. Observa estructura reproductiva del hongo
FERMENTACIÓN

Louis pasteur y Theodore Schwann → Descubren origen biológico de f. láctica, alcohólica y MO anaerobios
ENFERMEDAD

Robert Koch → Definió postulados sobre identificación de MO como causante de enfermedad. Trabajo en etiología
del carbunco (bacillus anthracis) y la tuberculosis. Desarrolló medios de cultivo líquidos y sólidos y métodos para
obtención de cultivos puros
• Postulados
o MO debe estar en individuos con misma enfermedad y ausente en individuos sanos
o MO debe ser recuperado de individuo enfermo y aislado en medio de cultivo
o MO proveniente del cultivo debe causar misma enfermedad al inocularse a otro hospedero
o Individuo experimental debe contener el MO

Louis Pasteur → Colabora con identificación de MOs como causante de enfermedad y desarrolló vacuna de la rabia
VACUNAS

Edward Jenner → Vacunación exitosa a niño contra la viruela, de vacuna obtenida de pústulas de vaca enferma de
viruela
ANTISEPSIA

Joseph Lister → Genera el concepto de antisepsia. Usa soluciones de fenol para desinfectar material quirúrgico y ropa
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VIRUS

Martinus → Da origen a la virología, definiendo agentes infecciosos mas pequeños que bacterias y postulo que solo
podían ser cultivados en presencia de bacterias
BACTERIOFAGOS

Felix d´Hérelle → Descubre primer virus capaz de infectar y destruir bacterias (bacteriófagos)
ANTIBACTERIANOS

Paul Ehrlich → Crea primero compuesto químico sintético (Salvarsan) que podía curar enfermedad sifilis
ANTIBIÓTICOS

Alexander Fleming → Observo que hongo Penicillium notatum impedía cremiento de STP aureus
Howard Florey y Ernest Chain → Purificación y aislamiento de Penicilina G para su uso como antibiótico
(26-37) Microscopía

INVERTIDA

NORMAL

Aumento efectivo máximo

Hasta 2000x
Resolución máxima
0,2 µm

Microscopía de luz → Espécimen se aprecia gracias al contraste mínimo entre la muestra y el medio que la rodea
• Tinción
o Células naturalmente pigmentadas se visualizan más fácil
o Tinción simple
o Tinción diferencial → GRAM
▪ (+) → Violeta
▪ (-) → Primero violeta y luego rosada
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Contraste de fases – Campo oscuro

Fluorescencia → Permite marcar estructuras específicas o células determinadas

con fluoróforos (Emisión de luz al ser excitados)

Tinción diferencial → Tinción Gram en un paso

• Usa mezcla de colorantes fluorescentes donde se aprecia
diferencia entre Gram (+) → Anaranjado y (-) → Verde

Microscopía electrónica

• Transmisión
o Utiliza electrones
• Barrido
o Imágenes 3D por captación de electrones que rebotan en cels cubiertas con delgada película de
material denso

(38-43) Morfología y agrupaciones bacterianas

• Agrupaciones bacterianas
o Cadena → STC pyogenes
o Racimo → STL aureus
o Pares/Diplo → Neisseria gonorrhoeae
o Tétradas, octetos → Sarcina lutea
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(1) Fisiología bacteriana
(2) Componentes externos
a. Exopolisacáridos (Glicocálix) → Macromoléculas formada por azúcares
i. Capa o cubierta de polisacáridos que dispone fuera de la pared celular de bacterias de
Gram (+) y (-) (no todas las cels son de esta índole)
b. Cápsula Antígeno → Cualquier estructura que
i. Unión firme a la bacteria (Rígida y compacta) puede ser reconocida por el sistema
inmune y esta responde generando
ii. Pegada a la superficie bacteriana
anticuerpos
iii. Importante en PATOGENICIDAD → Inhibe la fagocitosis Anticuerpos → Proteínas específicas
iv. Facilita adherencia a superficies inertes que reconocen estructuras
v. Antigénico (antígeno K)
1. Se une al anticuerpo
vi. Resiste a la rx del sistema inmune
c. Capa mucoide
i. Unión débil a bacteria
ii. Sin organización determinada
iii. Participa en formación de biopelículas
iv. Protege de acción del complemento, anticuerpos y antimicrobianos
1. Resistencia a la rx del sistema inmune
(3) Morfología (vista en clase 1)
a. Pared celular
i. Responsable de morfología celular
ii. Estructura rígida
iii. Esta por fuera de la membrana plasmática
iv. Soporta presión interior y exterior
(4) Envoltura celular
a. Gram (+)
i. Pared gruesa de PGC
ii. Ac. Teicoico y lipoteicoico Propio de Gram
iii. Proteínas asociadas (M) (+)
b. Gram (-)
i. Pared delgada de PGC
ii. Periplasma
iii. Membrana externa
iv. Liposacáridos o lipooligosacáridos
Propio de Gram (-) v. Porinas
vi. Lipoproteínas
(5) GRAM (+)
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(6-7) PGC
a. Mureína → Capas de polisacáridos entrelazadas por puentes peptídicos
a. “Malla”
i. Vertical → Azucares
ii. Horizontal → AA
b. Cadena polisacárida
a. NaG + Ac NaM
b. Puentes → Tetrapéptidos unidos a NaM
c. AA (4)
a. L-Alanina
b. D-Ác. Glutámico
c. aa3
i. G(+) → L-lisina
ii. G(-) → Ac. Meso.diaminopimélico (DAP)
d. D-Alanina

(PGC G[+] y G[-])

• PGC en G(-)
o L-Ala-D-Glu-DAP-D-Ala --------------- D-Ala-DAP-D-Glu-L-Ala
• PGC en G(+) Enlace covalente
o L-Ala-D-GluNH2-L-Lys-D-Ala -Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-D-Ala-L-Lys-D-GluNH2-L-Ala

Interpuente
(8) Gram (+) Ac. Teicoico y lipoteicoico

• Polisacáridos acídicos
o Ac. Lipoteicoico → Polímero de glicerol fosfato unido a lípidos de m.citoplasmática
o Ac. Teicoico → Polímero de Ribitol fosfato unido covalente a PGC
• Funciones
o Estabilización de PGC
▪ “Mallas” dan estabilidad física
o Adhesión celular (“Adhesina”)
▪ Sobresales por PGC y es lo primero que se encuentra con otra célula
▪ Unión específica (necesita receptor [proteína])
o Le dan carga (-) a la envoltura bacteriana
▪ Esto, por el fosfato de cada polímero

(9) Gram (-)

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(10) ME lipopolisacárido

• LPS → 2 azucares + 4,6 AG

o Molécula compleja, formada por porción lipídica (Lípido A o “endotoxina”) anclada a ME y
unidades repetidas de monómero compuesto por distintos azucares

• Antígeno O (Región variable)

• “Core” → Oligosacárido central
• ENDOTOXINA → Lípido A (Tóxico; lípido queda expuesto y se una al sist inmune y causa inflamación)
Esto es cuando ocurre muerte celular

(11) Porinas

• Grupo de proteína que generan poros o canales acuosos

o Permiten el paso de pequeñas moléculas hidrofílicas
• Estructura barril B → 16-18 hebras B empacadas antiparalelamente
• Canal hidrofílico interior
• Exterior altamente hidrofóbico

(12) Periplasma

• Entre Me y MI
• “Gel”
• 20-40% del volumen celular
• Ambiente altamente oxidante (Rx oxidación como formación de ptes disulfuros)
• Contiene al PGC
• Tres tipos de proteínas
o Enzimas hidrolíticas (metabólicas y detoxificantes[resistencia a antibiótico])
▪ Rompe moléculas mas grandes
o Proteínas de unión (carriers) Transportadoras
▪ Llevan desde acuaporina hasta dentro de la célula
o Quimireceptores (quimiotaxis)

(14-19) Memb citoplasmática

• Indispensable para G (+) y (-)

• No contiene esteroles
• Funciones
o Barrera de permeabilidad
▪ Separación de IC y EC
▪ Permeabilidad selectiva de solutos
• Tipos → Uniporte, antiporte, simporte
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o Rol estructural
▪ Síntesis y transporte de macromoléculas
▪ Señalización al MIC → Comunicación
• Sistema encargado de detectar cambios en el medio ambiente del MO y de
enviar info por medio de señal molecular
• OBJ → Modificar fisiología bacteriana para adaptarse a las condiciones del
medio externo
• 2 proteínas
o Receptor → Actividad quinasa, se autofosforila
o Regulador → Una vez fosforilado, regula respuesta. Hace que algunos
genes se puedan expresar (transcripción de genes)
▪ Quimiotaxis
o Generación de energía
▪ Gradientes de iones

(20-23) Apéndices proteícos. Flagelos

• Sirve para moverse, funciona como hélice

• Anexo formado por proteínas
o Filamentos helicoidales → Polímeros de flagelina
o Anclado a maquinaria rotatoria presente en MCTP a través de hook
• Movilidad bacteriana → Consumo de energía (gradiente de iones de H+)
• Factor de virulencia
o Le ayuda a la bacteria a causar infección a su hospedero
o “Si no necesita nadar para infectar, no es factor de virulencia”
• Antigénico (Antígeno H)

• Tipos
o Monótrico polar
o Perítrico → Varias colas por toda la superficie bacteriana
o Anfítrico → Un flagelo en cada polo
o Iofótrico → Todos concentrados en un ext
• Movilidad
o Taxia → Movimiento dirigido en respuesta de un gradiente físico, detecta cambios de
concentración
▪ Sentido y velocidad de rotación flagelar → Bacterias procesan esa información de
medio ambiente a través de vías de transducción de señales que controla
▪ Procarionte móvil → Acomodado a su entorno fisicoquímico y pueden alejarse o
aproximarse a un hábitat
▪ Competencia y supervivencia
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(24-26) Apéndices proteícos. Fimbrias y pilus
Fimbria

• Pequeños apéndices de naturaleza proteíca (Pilina)

• Papel de adherencia específica con bacterias y eucariontes
• No participa en movimiento
• Clasificación
o Según modo de expresión y ensamblaje
▪ Perítricas
▪ “Curli”
▪ IV (polar)

Pilus

• Apéndice retráctil mayor longitud

• Pilina
• Papel de adherencia → IV y curli
• Interviene en proceso de conjugación → Intercambio de material genético entre bacteria (Pili sexual)

(27-28) Esporas

• Solo dos géneros bacterianos importantes en el ser humano → Clostridium y bacillus

• Ocurre en respuesta al agotamiento de algún nutriente
• Originadas dentro de la célula
• DNA bacteriano muy compactado
• Función
o Resistencia al calor, desecación, radiación, etc..
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(29-30) Ribosomas
• Partícula ribonucleoproteica 70S (RNA+prot)
• 2 subunidades
o 50S → 31 prot+rRNA 23S+rRNA 5S
o 30S → 21prot + rRNA 16S
• Presente en miles de copias en el citoplasma bacteriano (Aspecto granular)
• Responsable de síntesis proteíca
• POLISOMA

o
(31-33) Genoma bacteriano.
Cromosoma

• Replicón autónomo
o Debe haber secuencia de origen y término de replicación → Cromosoma único
• DNA circular de doble hebra sobreenrrollado → No forma cromatina
• Megamolécula → Desoxirribonucleoproteica no envuelta por membrana (DNA + Prot)
• Copia única (bacterias haploides)
• Patrimonio genético
o Tiene información genética de cada bacteria

Nucleoide

• DNA super compactado (1mm)

Plásmidos

• Mas pequeño que cromosoma

• Replicones autónomos. Moléculas de ADN → Tienen todo lo que necesitan para replicarse, se replican
por su cuenta
• DNA circular de doble hebra sobreenrrollado
• Capacidad de transferencia horizontal
• Contiene genes no esenciales, que aportan ventaja adaptativa
o Resistencia a antibióticos y metales pesados
o Rutas metabólicas
o Toxinas y factor de virulencia
• Bacteria con plásmido tiene mayor visa, no es indispensable
o Plásmido relajado → MG que se traspasa en conjugación
o Plásmido sobreenrrollado
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(34) Genética bacteriana y variabilidad genética

(35) Definiciones

• Genotipo
o Patrimonio genético característico de un organismo, especia o individuo
o Propiedad inherente al ADN presente en organismo
▪ 90% DNA codificantes (son genes) *en bacterias
• Fenotipo
o Conjunto de características observables o medibles de un organismo
▪ Puede ser microscopico
o Manifestación externa de genotipo de un individuo
▪ Bajo influencia del medio ambiente
▪ Tiene características que se manifiesta bajo estímulo externo

(36) Características geneticas de bacterias

• Bacterias haploides
o Una sola copia de cromosoma
o Solo una molécula de ADN u otras tienes 4;5;6 copias. En cada cromosoma hay info distinta
• Reproducción asexual
o Células hijas idénticas a la parental
• Plásmidos en algunas bacterias
o Pueden encontrarse en múltiples copias

(37) Control de la expresión de la información genética

• Bacterias se adaptan a condiciones ambientales

• Cambia expresión de sus genes
• Ej. a través de proteína capaces de bloquear transcripción en determinadas circunstancias

(38-39) Expresión de la información genética

• Síntesis de proteínas a partir de genes que la codifican

• Proteínas con funciones que otorgan capacidades a la bacteria (ej. enzimas de la glicólisis permiten a
bacteria alimentarse de glucosa

• Cualquier alteración en DNA se puede traducir en alteración de la función de una prot. Esta alteración
puede ser favorable o desfavorable
o Alteraciones → Variabilidad genética
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(40) Mecanismos de variabilidad genética
• Mutaciones → Cambios en ADN; cambios en genes propios
o Missense/Nonsense
o Inserción/deleción
• Transferencia horizontal (lateral) de MG → Adquisición de nuevos genes
o Conjugación
o Transducción
o Transformación

(41-51) Mutaciones

• Cambios heredables en el patrimonio genético (genoma) de un organismo

o El organismo es la única célula, por lo tanto, los cambios son heredable
• Puede generarse de manera espontánea o inducid
• Puede causar cambios en propiedades fenotípicas de bacteria
• Fuente primordial de variabilidad genética en todos los seres vivos
• Para que mutación se establezca, debe conferir ventaja adaptativa

• Tipos
o Sentido equivocado “Missense”
▪ Sustitución de nucleótido que genera cambio de un codón condificante por otro
distinto (aa diferente)
▪ Cambia secuencia primaria de una prot en un aa particular
o Pérdida del senti “Nonsense”
▪ Sustitución de nucleótido que genera aparición de un codón de detención de
traducción (TAA, TGA o TAG)
▪ Codón que representa un aa que se cambia por un codón de término
▪ Genera prot incompleta que suele se no funcional (Degradación)
o Silente (silenciosa)
▪ Sustitución de un nucleótido que genera el cambio de un codón codificante por otro
codón que codifica el mismo aa
▪ INADVERTIDA
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o Inserción
▪ Se agregan nucleótidos de sobra
▪ Corrimiento en el marco de lectura de un gen (mutación missense y/o nonsense)
▪ Casos extremos
• Ganancia de gen completo o regiones genómicas completas

o Deleción
▪ Pérdida de nucleótidos
▪ Cambio o corrimiento en marco de lectura (missense o nonsense)
▪ Casos extremos
• Deleciones que comprometen genes completos o regiones genómicas
completas
• Pérdida de uno a cientos de genes

•
o Regulatoria
▪ Sustitución de un solo nucleótido, inserciones y deleciones
▪ Se puede presentar fuera de regiones codificantes
• Alteración de promotores y otras regiones regulatorias
▪ Consecuencias, puede incluirse pérdida total de la expresión del gen
o Compensatorioa “Supresión”
▪ Mutación secundaria generada por los mecanismos de mutaciones
▪ Corrige defecto generado por mutación previa
▪ Tipos
• Mismo gen mutado → Supresión intragénica
• Distinto al gen mutado → Supresión intergénica o extragénica

(52) Transferencia horizontal

• Paso de MG entre organismos de una misma especia o de especies no relacionada filogenéticamente

o Causan cambios en propiedades fenotípicas de bacteria → Adquisión de nuevos genes
o Debe conferir ventaja adaptativa para establecerse
• Tres mecanismos
o Conjugación
o Transducción
o Transformación
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(53-54) MG presente en bacterias
• Cromosoma
• Plasmidios
o Replicones autónomos → Replicación independiente
o DNA circular de doble hebra
o Algunos con capacidad de transferencia horizontal (plásmidos conjugativos)

(55) Elementos genéticos transferibles. Plásmidos

• Plasmidio F (fertilidad)
o Para que haya conjugación se necesita región TRA y oriT
o OriT
▪ Lugar donde ocurre corte y desenrrolle de hebra y atraviesa la ptra bacteria
o TRA
▪ Genes que codifican las enzimas para todas sus funciones, y esta codificado el pilus
• Plasmidio R100 (resistencia)

(57) Tranferencia por fagos. Transducción

• Bacteriófagos
o Virus → Intermediario
▪ Inyecta su MG a la célula
o Partículas virales que infectan bacterias
o DNA o RNA encapsulado por proteínas
o Se unen a receptores específicos de la pared celular bacteriana (Adsorción)
• Virus lítico
o Replicación continua y destruye a bacteria hospedera
o Puede realizar transducción
• Virus lisogénico
o Integra genoma en genoma bacteriano y se replica junto a él
o No realiza transducción

(58)Transducción

• Partículas virales inyectan DNA de origen bacteriano en una bacteria receptora

• DNA recombina con MG de receptor
• Las dos cels deben ser parientes, virus son muy específicos

• Algunas cubiertas en vez de llenarse de MG de virus, se llenan de MG de bacteria

o Probabilidad de 1% transductoras y 99% virales
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(59) transformación
• Algunas bacterias “competentes”, poseen proteínas de superficie, que una DNA lineal desde exterior de
la cel bacteriana y lo transporta al interior de la célula
• Una vez dentro de la bacteria ese DNA externo se puede integrar en genoma de la bacteria
• Pasos
o 1. Célula dadora muere
o 2. Se fragmenta DNA
o 3. Mediador RecA lleva a cabo la recombinación homóloga
o 4. Durante transformación, DNA foráneo se capta y se internaliza

TIPOS DE TRANSFERENCIA DNA TRANSFERIDO

Conjugación Solo se pueden traspasar plásmidos conjugativos
Transducción Fragmentos de DNA cromosomal
Fragmentos de plásmidos
Plásmidos completos (Ambos tipos)
Plásmidos completos siempre y cuando quepan en
partícula viral
Transformación Fragmentos de DNA cromosomal
Fragmentos de plásmidos
Plásmidos completos (Ambos tipos)
Plásmidos conjugativos o no

(64) Variabilidad genética importancia

• Cuando cambia la info genética de una bacteria, cambian sus capacidades
o Cuando las bacterias cambian la info que ya tenía o capta info que no tenía, cambian sus
capacidades
• Fenómenos de variabilidad genética afectan a cels individuales y dan origen a nuevas cepas en una
especia
o Afectan a cels individuales, para algunas bacterias patógenas hay variedades que son sensibles
a un antibiótico y otra que es resistente

(66) Transferencia horizontal. Sushi

• Genes de bacteria marina Zobellia galactanivorans han sido traspasados a bacteria Bacteroides plebeius
del intestino humano
• Explicación
o Genes de la bacteria marina son competentes para bacteria del intestino humano y la adopta
o Cuando es crudo se libera el MG y se encuentra con bacteria del intestino
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METABOLISMO BACTERIANO

(2)Metabolismo
• Procesos que ocurren al interior de la célula (BIOQUIM)
a. Nutrientes para la síntesis → ANABOLISMO → Macromoléculas y otros componentes
b. Fuentes de energía (producto químicos y luz) → Catabolismo → Energía para biosíntesis,
movilidad y transporte de nutrientes → Desechos

(3) Enzimas

• Catalizadoras → Acelera rx química

a. + rápido; - energía de activación
b. Energía de activación → energía necesaria para juntar moléculas reactantes hasta alcanzar
estado de transición

(4) Catabolismo

Obtención de energía a partir de glucosa

• Glicolisis → No dependiente de O2
a. Lisis del azúcar → Degradación de glucosa (6C) a 2 piruvatos (3C)
b. Citoplasma de procariontes y eucariontes
c. Ganancia neta → 2ATP x 1 glucosa
d. Fosforilación oxidativa con 2NADH → 5ATP

• Ciclo de Krebs
a. Oxidación completa y degradación de glucosa
b. Bacteria aerobica, protozoo, algas y hongos
c. Oxidación glucosa → 2 Ac. Pirúvico (2 Acetil-CoA)
d. Acetil CoA → 2CO2; 3NADH=7,5ATP; 1FADH2=1,5ATP; 1GTP o 1ATP
• Transporte de electrones
a. Glicolisis → 7ATO
b. Oxidación de piruvato → 5ATP
c. Krebs → 20ATP

(10) Respiración aeróbica y anaeróbica

• Aeróbica → C.IV entrega electrones a O2

• Anaeróbica→ Enzima recibe electrones del CytC se lo entrega a compuesto inorgánico
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(11) Fermentación

• Obtención de energía por medio de azucares y moléculas inorgánicas

• Molécula orgánica como aceptor final de electrones
• Generación de baja cantidad de ATP
• Función
o Permite que glicolisis siga ocurriendo. Alcohólica o láctica
• Tipos
o Láctica
▪ Usada por bacterias cariogénicas en la cavidad oral
▪ Lactato baja pH lo que induce la desmineralización del esmalte dental
• Varibilidad de fermentación
o Célula puede usar como nutriente a galactosa, manosa, fructosa, y si se le entrega un azúcar, la
célula es capaz de adaptarse y hacer glicolisis
o Siempre y cuando a bacteria tenga la enzima para poder transformar lo azúcares en un
intermediario de la glicolisis, puede adaptarse al azúcar

(16) Clasificación según fuente de energía

• Quimiotróficas o quimiosintéticas
o Obtención de energía a partir de rx químicas ej. E.coli
o Tipos
▪ Quimiorganotróficas
• Obtención de energía a través de utilización de sustancias químicas orgánicas
▪ Quimiolitotróficas
• Obtención a través de la utilización de sustancias químicas inorgánicas
• Fototrófica o fotosintéticas
o Obtención de energía captándola de la luz solar ej. cianobacteria
▪ Cianobacteria → Luz solar aporta energía requerida para proceso de transferencia de
electrones en la membrana, generando gradientes de H+ que se acopla a síntesis de ATP

(20) Anabolismo

• Según fuente de carbono

o Heterótrofas
▪ Todos los seres vivos que obtienen carbono de moléculas complejas
▪ Hidratos de carbonos, aa, lípidos, etc..
▪ *Mayoría de bacterias son heterótrofas
o Autótrofas
▪ Obtención de C a partir de moléculas simples
• Biosíntesis de macromoléculas
o Citrato → AG y esteroles
o A-cetoglutarato → Glutamato, AA, purinas
o Succinil CoA → Porfirinas, hemo
o Oxoacetato → Aspartato → Purinas, pirimidinas, aa
• Fijación de CO2
o Ciclo de Calvin → Bacterias fototróficas
o Fijación de Fosforo
▪ Fotofosforilación → Fotosíntesis = ADP y Pi → ATP
▪ Fosforiación oxidativa → Cadena trasnportadora = ADP y Pi → ATP
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▪ Fosforilación a nivel sustrato → Durante glicólisis
o Fijación de Azufre
▪ Se reduce sulfato
o Nitrógeno
▪ Nitrato → Nitriro → Amoniaco
▪ NH3 +´Ac- glutámico → ATP → Glutamina

CRECIMIENTO BACTERIANO

• División bacteriana. Fisión binaria

o Coordinación espacial y temporal en síntesis de macromoléculas
▪ DNA, proteínas, hidratos de carbono, lípidos
• Definiciones
o Crecimiento → Aumento de N° de individuos en población de MOs (Aumento de biomasa de
MO)
o Velocidad de crecimiento → Crecimiento de MO por unidad de tiempo
o Tiempo de generación → Tiempo requerido para formación de 2 cels hijas a partir de una
parental. Tiempo para que población microbiana se duplique, distinto para distinta especie
• Curva de crecimiento

LAG → Crecimiento lento o retardado. Acondicionamiento ambiental

EXPONENCIA → máxima capacidad

ESTACIONARIA → Detención del crecimiento, no del metabolismo

DECAIMIENTO → Muerte celular (agotamiento de cultivo)

• Medición del crecimiento bacteriano

o Recuento total de cels
▪ Comteo directo con M.O usando muestra diluida de cultivo y cámara de recuento
calibrada (Petroff-Hausser)
▪ No discrimina viabilidad
▪ Desventajas
• Pequeñas son difíciles de ver al microscopio y pueden no contarse
• Requiere tiempo y habilidad para precisión
• Se necesita M. de contraste de fases cuando hay tinción
• Cuando muestra esta muy diluida, no se recomienda este método
▪ EXACTITUD → + cerca del valor real
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• Colonia bacteriana
o Grupo de cels que provienen de la división celular de una única cels bacteriana viva, donde esta
agrupación es visible a simple vista y el MO esta creciendo en superficie o medio sólido
o Recuento de cels viables
▪ Dilución de muestra y siembra (“plaqueo”) sobre medio sólido o siembra de la muestra
incluida en medio sólido dependiendo del volumen de la muestra
▪ Se cuentan las colonias
▪ Dilución seriada → Serie de diluciones, donde se está aplicando en todas las
disoluciones un fator de dilución
▪ Ventajas
• Método sensible
o Suficientemente bueno para detectar diferencias pequeñas
• Se puede contar bacterias específicas gracias a los medios selectivos y
diferenciales
▪ Desventjas
• N° de colonias no depende solo de tamaño del inoculo (cantidad de bacterias
en muestra)
• Depende de
o Medio de cultivo (nutrientes necesario para la bacteria)
o Condiciones de incubación (atm u o2)
o Tiempo de incubación
o No siempre las colonias son del mismo tamaño, pequeñas pueden ser
ignoradas
• Medición de crecimiento bacteriano
• |Espectrofotométrica
o Mide turbidez, mide luz o desviación de luz
o No discrima viabilidad
o +Turbidez, + pérdida de precisión
o Ventajas
▪ No hay distorsión
▪ Muy precisas
▪ Fácil, rápido y barato
o Desventajas
▪ No discrimna viabilidad
▪ Crecimiento celular estimación de la biomasa
▪ Elevadas concentraciones se pierde precisión

Tipos de cultivos

• En “batch” o no renovado
o Cultivo en tubos.
o Estadios tardíos del crecimiento
o Cambios
▪ pH → Agotamiento de nutrientes
• Continuo o renovado
o Cultivo de volumen constante al que se le añade medio fresco
o Al alcanzar eq. el n° de cels y estadío metábolico se mantiene constante (estado de eq)
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Factores que afectan crecimiento

• T°

Psicrófilos → T° óptima baja (<1 a 15°C)

Mesófilos → T° óptima rango medio 25-42°C)

Termófilos → T° óptima alta (50 a 70°C)

Hipertermófilos → T° óptima muy alta (80 a >100°C)

• Salinidad
o No halófilos → No toleran
o Halotolerantes → Toleran concentraciones moderadas de sal
o Halófilos → Leves (1 a 6% NaCl) y moderados (6 a 15% NaCl)
o Halófilos extremos → 15 a 30% NaCl
• pH o acidez
• Disponibilidad de O2
o Aerobios
▪ Estrictos
• 02 requerido
• Respiración aeobica
▪ Facultativo
• O2 no requerido
• Respiración, fermentación
▪ Microaerofílicos
• O2 requerdio a bajos niveles
• Respiración aeróbica
o Anaerobios
▪ Aerotolerantes
• O2 no requerido, no afecta
• Fermentación
▪ Estrcito
• Dañina o letal
• Respiración, fermentación

Respiración. Formas tóxicas del O2

• O2 + 4e + 4H+ → 2 H2O
o Generadas durante metabolismo normal de bacterias (respiración aeróbica)
o Radicales superóxidos e hidroxilo, rx rápidamente oxidando diversas macromoléculas orgánicas
como lípidos, prot y ac. Nucleicos
o Oxidación destruye estructuras biológicas
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• Defensa contra formas tóxicas

o Presencia de enzimas capaces de degradar derivados tóxicos de O2
o Catalasa →
▪ H2O2 + H2O2
o Peroxidasa
▪ H2O2 + NADH
o Superoxidasa dismutasa
▪ O2- + O2- → H2O2
o Superoxido dismutasa/catalasa
▪ O2-
o Superoxidasa reductasa
▪ O2- → H2O2

Anaerobiosis

• Jarra anaeróbica → Recipiente hermético

• Catalizador químico que consume todo el oxígeno dentro del recipiente
• Capnofilia
o Característica operacional, aquellos que crecen mejor en un ambiente con CO2 aumentado

MEDIOS DE CULTIVOS

• Requisitos y condiciones
o Esterilidad
o Tener nutrientes esenciales
o Requisitos físicos → T°, pH neutro, condición atm
o Protegidos del medio ambiente (evita contaminación)
• Esterilización → Autoclave
• Filtración → Poros de 0,22 – 0.45 um
• Radiación → No muy penetrante, solo para superficie. Actúa sobre ADN, interactura con BN

Medios de cultivos → Soluciones acuosas de nutrientes de distinta naturaleza que permiten crecimiento de
MOs. Se utiliza para aislamiento e identificación de MOs

• Requerimientos nutricionales de las bacterias

o Micronutrientes → Necesitan en pequeñas cantidades para crecer
▪ Pueden ser cofactores enzimáticos
o Macronutrientes → Necesitan en grandes cantidades para crecer
• ¿Cómo se observa el crecimiento bacteriano?
o Medio líquido
▪ Enturbamiento
▪ Aparición de grumos
▪ Velo o película en superficie
o Medio sólido
▪ Colonias
▪ Césped
• Zona o superficie completa de una placa Petri que esta cubierta de bacterias
• ¿Cuál es la utilidad de los medios de cultivos?
o Aislamiento de bacterias
Solemne I Microbiología
o Obtención de cultivos puros → Estudio de propiedades fisiológicas e identificación
o Conservación de cepas
▪ Comservación en el tiempo
o Evaluación de antibióticos
o Pruebas de esterilidas
o Fabricación de sueros, vacunas, etc..
• Clasificación de MDC
o Estado físico
▪ Medios
• Sólido (Agar 1,5%)
• Líquido
• Semi-sólido (Agar 0,8%)
o Presentación
▪ Tubo
▪ Placa

o Formulación
▪ Definidos
• Se conoce exactamente el medio químico de componente inorgánicos y
orgánicos
▪ Indefinidos
• No tiene formulación precisa
• Preparación a base de digeridos proteicos (deshidratados)
▪ Semi-definidos
• Parte que se desconoce y otra que se sabe
• Composición bien formulada de sales y otra levadura
o Contenido de nutrientes
▪ Mínimo
• Requerimientos básicos de sales minerales y fuentes de carbono
▪ Corriente
• Elementos nutritivos esenciales (Un poco de sal, extracto de levaduras) Simples
▪ Enriquecido
• Sustancias de alto valor nutritivo
• Bacterias mas exigentes
o Agar sangre, agar chocolate
o Ej, agar sangre se puede suplementar con nutrientes específicos para
satisfacer necesidades del MO (con hemina)
o Utilidas
▪ Corriente
• Elementos nutritivos esenciales
o EJ. agar corriente, caldo luria
▪ Especiales
• Mejorados o enriquecidos
o Alto valor nutritivo
o Ej. agar sangre y chocolate
Solemne I Microbiología
• Selectivos
o Sustancias inhibidoras
o Ej. Agar SS para salmonella y shigella
• Diferenciales
o Permite establecer función metabólica de bacteria que la diferencia de
otras

Enriquecidos y diferenciales

• A-hemolisis
o Pueden romper glóbulos rojos, lo que forma colonias alrededor
o *Halo verdoso
• B-hemolisis
o Total
o *Halo transparente
• Y-hemolisis → No hay hemolisis

Selectivo y diferencial

• Agar MacConkey
o Selectivo
▪ Selecciona lo que crece
• Ej. G(-) por presencia de cristal violeta y sales biliares
o Diferencial
▪ Marca diferencias
• Ej, los que utilizan lactosa como fuente de carbono de los que no (lac + o -)
• Agar manitol salado
o Selecciona
▪ Selecciona lo que crece
▪ EJ. bacterias halotolerantes, por contenido de NaCl
o Diferencial
▪ Aquellos que fermentan el manitol
▪ *Halo amarillo

MICOLOGÍA

• Características hongos
o Eucariontes
o Paredes rígidas (Quitina)
o Quimioheterótrofos
o Obtención de nutrientes por absorción
o Reproducción: Asexual, sexual o ambas
• Generales
o Amplia diversidad de hábitat
o Crecimiento principalmente en materia orgánica en descomposición
o Hay hongos beneficiosos, pero unas 8.000 perjudiciales
o Parásitos vegetales (Agricultura, forestación y economía)

Hongos beneficiosos

• Comestibles
Solemne I Microbiología
o Elevada calidad nutritiva
▪ Ricos en proteínas y vit
▪ Escaso carbohidratos y lípidos
o Hongos microscópicos
▪ Elaboración de alimentos como, yogur, cerveza, pan, etc
▪ Hay de industria farmacéutica → Penicilina, cefalosporina

Hongos dañinos

• Hongos patógenos de vegetales

• Algunos producen toxinas
• Algunos causan enfermedad

Clasificación de hongos

• Microscópicos
o LEVADURAS (unicelular)
o MOHOS U HONGOS FILAMENTOSOS (pluricelulares)
• Macroscópico
o SETAS (pluricelulares)

Crecimiento

• Hongos moderamente acidófilos → pH 5,6 – 6,8

• Unicelulares → Anaerobios facultativos
• Pluricelulares → Aerobios estrictos
• T° de crecimiento
o Psicrófilos → 0°C a 20°C (T° óptima → 15-17°)
o Mesófilos → 0 a 50° (T° óptima 15-40°)
o Termófilos → 15 a 40° (T° óptima 20-50°)
o Hongos en seres humanos son mesófilos y termófilos

Características estructurales
Algunas levaduras pueden formar
• Membrana plasmática → ERGOSTEROL
pseudohifas
• Pared celular → QUITINA Existen hongos dimórficos
• Unidades morfológicas y de crecimiento
o Hifas → Filamentosos y pluricelulares
▪ Hongos peludos
o Levaduras → Unicelulares
▪ Yemación
• Pared celular
o Determina morfología
o Constituye interfase entre hongos y ambiente
o Protege a la cel fúngica contra la lisis osmótica y contra otros factores ambientales
o Algunos componentes tienen función de adhesión en la colonización
o Características antigénicas → Taxonómica
• Adherencia
o Formación de biopelículas
o Resistencia a sist. inmune
o Resistencia a acción de drogas
Solemne I Microbiología
Levaduras

• Unicelulares (1,5 um de ancho y 5-30um de largo)

• Anaerobio facultativo
• Forma colonias
• Textura cremosa y pastosa
• Formación de pseudohifas o hifas verdaderas, presencia de cápsula
• Pseudohifas
o Levaduras creciendo en cadenas, cada célula es un organismo individual

Hongos filamentosos

• Formados por hifas, cels alargadas y unidas

• Pluricelulares, multinucleados
• Reproducción: esposaras móviles o inmóviles, sexuales o asexuales
• Hifas → Pueden crear septos que las dividen (hifas septadas o tabicadas). Si no los presentan →
Cenocíticas o no septadas
o Conjunto de hifas → MICELIOS vegetativo o reproductor

• Mohos → crecen por elongación de hifas, permite penetración de superficies que están colonizando
o Aerobios obligados
o Se nutren por absorción
▪ Obtención de C desde fuentes orgánicas
▪ Ext de hifa libera enzima que degradan sustratos
▪ Productos de degradación son absorbidos por la hifa

Hifas y pseudohifas

• Hifas verdaderas
o célula dependiente
o Presenica de poros → Simple, microporos, doliporo o rodante
o Tipos
▪ Aseptadas
▪ Septadas (pigmentadas o blancas) Hialinas
• Pseudohifas
o Célula independiente

Reproducción

• Sexual o asexual
• Modalidades
o Telomorfos → Solo asexual
o Holomorfos → Sexual y asexual
o Anamorfos → Asexual
• Talo fúngico
o Homotálico → Dos sexos en el mismo micelio
o Heterotálico → Solo un sexo por micelio
• Unicelulares (levaduras)
o Asexual
▪ Fisión binaria → Mitosis
Solemne I Microbiología
▪ Gemación → Célula madura que genera otra pequeña
▪ Conidioesporas
• Fiálides → No especializada
• Cadena de esporas o vesículas → Especializada
o Sexual
▪ Se necesitan dos haploides que se van a fusionar y luego debe hacer meiosis
▪ Sigospora → Se genera la fusión
▪ Espora germina para formar hifa

Clasificación nutricional

• Saprobios
o Descomponen residuos orgánicos para alimentarse (materia orgánica muerta)
• Parásitos
o Extraen sustancia orgánica que necesitan desde un hospedero a que debilitan y luego matan
• Simbióticos o mutualista
o Extraen sustancias de un hospedero, pero le procuran ventajas

Obtención de nutrientes

• Quimioheterótrofos → Hongos
o Obtención de C de material orgánico no vivo (saprófitos) o de tej vivo (simbionte)
▪ Saprotroficos
• Utilizan compuestos orgánicos de organismos no vertebrados muertos
• Relevancia clínica
o Inhalación
o Inoculación traumática → heridas
▪ Zootróficos
• Crecen en tejidos de organismos vivos, Patógenos primarios
• Se aprovecha de pcte sano
• Necrotróficos
o Compuesto orgánicos producido por animales vertebrados
o Clasificación
▪ Queratinofílicos → queratina
▪ Lipofílicos → lípidos
▪ Osmofílicos → Bajo contenido de agua
▪ Simbiontes endógenos → Flora normal
▪ Uro y coprofílicos → urea, ac úrico y creatina