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Journal of Ecobiotechnology 2011, 3(9): 04­07 ISSN:

2077­0464 Disponible

en línea: http://journal­ecobiotechnology.com/

Detección fitoquímica y actividad antimicrobiana de Bauhinia variegata Linn.

DA Dhale*

Departamento de Postgrado en Botánica, SSVP Santha's LK Dr. PR Ghogrey Science College, Dhule­424005 (India)

Resumen
El efecto antimicrobiano de Bauhinia variegata Linn. (Caesalpiniaceae) se evaluó el extracto de hoja y corteza en cepas microbianas como las especies
Gram positivas Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis y las especies Gram negativas Escherichia coli.
y Pseudomonas aeruginosa. El disolvente utilizado para la extracción de la planta fue éter de petróleo, cloroformo y alcohol. El extracto alcohólico de
hojas de Bauhinia variegata muestra una máxima actividad antimicrobiana. La valoración antimicrobiana in vitro se realizó por método de difusión en
disco. La importante actividad antibacteriana del extracto activo se comparó con el antibiótico estándar anficilina. Las muestras de hojas y corteza se
utilizaron además para los estudios fitoquímicos. Los resultados del análisis fitoquímico indicaron la presencia de alcaloides, aceite, glucósidos grasos,
carbohidratos, fenólicos, taninos, lignina, saponinas, flavonoides y terpinoides. La actividad antibacteriana de las hojas y la corteza se debió a la
presencia de varios metabolitos secundarios. El cribado fitoquímico y la actividad antimicrobiana de las hojas y corteza de B. variegata se determinaron
mediante el método estándar.

Palabras clave: Antimicrobiano, Físicoquímico, Fitoquímico, Bauhinia variegata

INTRODUCCIÓN El
género relativamente grande Bauhinia (familia: Caesalpiniaceae) que consta
de árboles, trepadoras y arbustos se distribuye en una amplia gama de ubicaciones
geográficas. Ciertas especies de Bauhinia tienen una larga historia de aplicaciones
medicinales tradicionales (Valdir CF 2009).
La planta Bauhinia variegata Linn. (Caesalpiniaceae), comúnmente conocido
como Mountain Ebony, es un árbol de hoja caduca de tamaño mediano que se
encuentra en toda la India. Se utiliza ampliamente en la medicina popular. Su
corteza, raíz, hojas, semillas y flores se utilizan por sus propiedades medicinales.
Se ha utilizado en dispepsia, bronquitis, lepra, úlcera, para prevenir la obesidad,
como astringente, tónico y antihelmíntico (The Wealth of India, 1959).
Hay algunos informes sobre el uso de plantas en la curación tradicional por
parte de pueblos tribales o comunidades indígenas (Sandhy et al., 2006; Ayyanar
e Ignacimuthu, 2005; Rajan et al., 2002; Natarajan et al., 1999 e Ignacimuthu et
otros, 1998). La actividad antimicrobiana ha sido investigada debido a su gran
relevancia medicinal, con los últimos años las infecciones han aumentado en gran
medida y la resistencia a los antibióticos, se convierte en un problema terapéutico
cada vez mayor (Austin et al., 1999). Los productos naturales de plantas superiores
pueden proporcionar una nueva fuente de agentes antimicrobianos.
compuestos, muchos grupos de investigación analizan extractos de plantas para
detectar metabolitos secundarios con actividades biológicas relevantes. En este
sentido, se han desarrollado varios bioensayos sencillos con fines de detección
(Hostettmann, 1991). El presente estudio se realizó sobre la actividad fitoquímica
y antibacteriana de la hoja y corteza de B. variegata.
MATERIAL Y MÉTODOS
Recolección y autenticación de muestras: Hojas y corteza frescas, maduras y
sanas de Bauhinia variegata Linn. (Caesalpiniáceas)
Se recogieron en las tierras del oeste de Dhule, lejos de la contaminación. Los
materiales vegetales se identificaron utilizando la flora de Dhule y el distrito de
Nadurbar (Patil DA, 2003) en el Departamento de Postgrado de Botánica, SSVP
Sansthas, LKDr.PR Ghogrey Science College, Deopur, Dhule­424005 (MS) India.
Preparación de la muestra: Se pesaron hojas y corteza completamente desarrolladas
de B. variegata (1 kg). Las muestras de plantas se molieron a la sombra y se
tamizaron con un tamiz de cobre de 2 mm para formar un polvo uniforme y se
almacenaron en botellas herméticas.

Preparación del extracto: El material vegetal seco se pulverizó hasta obtener un

Hay muchos grupos de investigación que ahora se dedican a la investigación de
polvo fino utilizando un molinillo (mezclador). Se extrajeron aproximadamente 50 g
plantas medicinales (Samy et al., 1998; Hamil et al., 2003; Motsei et al., 2003).
de material en polvo en un aparato de extracción Soxhlet con 250 ml de cada uno
Silver y Bostian (1993) han documentado el uso de productos naturales como
de los siguientes disolventes; éter de petróleo, cloroformo y alcohol (Vogel, 1988).
nuevos fármacos antibacterianos. Existe una necesidad urgente de identificar
Los extractos obtenidos con cada solvente se filtraron a través de papel de filtro
nuevas sustancias activas contra patógenos altamente resistentes (Recio, 1989;
Whatman No. 1 y los solventes respectivos se evaporaron (a 40ºC) con ayuda de
Cragg et al., 1997). En un esfuerzo por descubrir nuevos
una manta calefactora. Las sustancias pegajosas de color marrón verdoso se
obtuvieron y almacenaron en el refrigerador antes de su uso (Beyer y Walter, 1997).
Recibido: 11 de mayo de 2011; Revisado el 21 de julio de 2011; Aceptado el 21 de julio de 2011. Algunos de los extractos de cada disolvente se utilizaron para la selección
fitoquímica cualitativa para la identificación de las diversas clases de constituyentes
*Autor correspondiente
químicos activos, utilizando métodos estándar prescritos (Harborne, 1984; Trease
y Evans, 1987; Ajaiyeoba, 2000; Edeoga et al., 2005). Las pruebas positivas se
Departamento de Postgrado de Botánica de Dhale, LK Dr. PR Ghogrey de la SSVP Santha
anotaron como presentes (+) y ausentes (­).
Facultad de Ciencias, Dhule­424005 (India)

Fax:+91­2562 271340 Correo

electrónico: datta.dhale@yahoomail.com Preparación de microorganismo: Aislamiento de especies bacterianas de

Gram positivos (Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis ) y
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Tiene lugar Gram negativos (Echerichia coli y Pseudomonas aeruginosa) .
Se verificó la pureza de los cultivos de estas bacterias mediante tinción de
Gram y pruebas bioquímicas, se cultivaron en caldo nutritivo a 37 ˚C y se
mantuvieron en agar nutritivo inclinado a 2­8 ˚C.
Se utilizó medio agar nutritivo como medio de cultivo bacteriano en los
ensayos antibacterianos.
Selección del antibiótico de referencia: el antibiótico de referencia anficilina
se obtuvo en la tienda médica autorizada Dhule (MS). La pureza del antibiótico
es del 99,8%.
Diluciones y preparaciones de inóculo: Los extractos secos de plantas de B.
variegata y el antibiótico anficilina se pesaron y disolvieron en agua destilada
estéril para preparar la dilución adecuada para obtener la concentración
requerida de 10, 20 mg/ml. Los inóculos de Staphylococcus aureus, Bacillus
subtilis, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa se prepararon en medio
caldo nutritivo y se mantuvieron en incubación a 37˚C durante 8 horas. Una
vez observado el crecimiento, los cultivos se almacenan en el refrigerador a
2­8 ˚C para su análisis.
Procedimiento para realizar la prueba de Difusión en Disco (Bayer et al.,
1966): Se prepara la cantidad requerida de placas de Petri y se esteriliza en
autoclave a 121˚C durante 15 minutos. Se dejaron enfriar bajo un flujo de
aire laminar. Transfiera asépticamente unos 20 ml de medio a cada placa de
Petri estéril y déjelo solidificar. Se extendió uniformemente 1 ml de suspensión
de inóculo sobre el medio de agar utilizando una varilla de vidrio estéril para
obtener una distribución uniforme de las bacterias. Los discos estériles
fácilmente preparados se cargaron con diferentes concentraciones de
aproximadamente 10, 20 mg/ml de extracto vegetal de B. variegata y
antibiótico anficilina en cada disco separado de aproximadamente 40 μg/ml.
Los discos difusos de papel se colocaron en el medio adecuadamente
separados y la placa se incubó a 5 ˚C durante 1 hora para permitir una buena
difusión y luego se transfirió a una incubadora a 37 ˚C durante 24 horas. La
actividad antibacteriana se registró midiendo el ancho de la zona de inhibición
clara alrededor del disco utilizando un lector de zonas (mm).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los sistemas de medicina indios como Ayurveda y Siddha utilizan la
mayoría de las drogas crudas de origen vegetal. Es necesario que se
establezcan normas para controlar y comprobar la identidad de la planta y
comprobar su calidad antes de su uso. Por lo tanto, una evaluación
farmacognóstica detallada es un requisito previo muy esencial (Ramana,
2007).
Se probaron extractos de éter de petróleo, cloroformo y alcohol de
hojas y corteza de B. variegata contra diversas bacterias Gram negativas y
Gram positivas (Tabla 1). Entre los extractos ensayados, los extractos
alcohólicos de hojas de B. variegata mostraron buena actividad contra S.
aureus a 20 mg/ml, por ejemplo, se registró 15 mm como zona de inhibición
de diámetro. A esto le siguió P. aeruginosa de 14 mm, E. coli de 10 mm y
B.subtilis de 9 mm respectivamente. La menor actividad de la corteza es de
2 mm contra E. coli y S. aureus, mientras que los extractos con éter de
petróleo registraron 4 mm de S. aureus a 10 mg/ml.
Los extractos de corteza (Tabla 2) de B. variegata mostraron buena
actividad contra S. aureus a 20 mg/ml, por ejemplo, se registró 18 mm como
zona de inhibición de diámetro. A esto le siguió P. aeruginosa de 16 mm, E.
coli de 12 mm y B.subtilis de 10 mm respectivamente.
La menor actividad de la corteza es de 3 mm contra E. coli y P. aeruginosa,
mientras que los extractos con éter de petróleo registraron 3 mm contra B.
subtilis a 10 mg/ml. Las actividades de los distintos extractos fueron
comparables a las del agente antibacteriano estándar ampicilina.
Entre las especies de plantas investigadas, el extracto metanólico de
corteza de Bauhinia variegata mostró la actividad más notable. La polaridad
del disolvente parece desempeñar un papel importante en la exhibición de
una actividad antibacteriana potencial. En este caso, los extractos alcohólicos
de Bauhinia variegata L. mostraron una actividad notable contra algunas
cepas bacterianas de importancia médica. Además, estos resultados justifican
el uso tradicional de Bauhinia variegata L. Se espera que más estudios
fitoquímicos para la identificación y elucidación del componente activo en el
material vegetal probado sirvan como guía en el desarrollo de un nuevo
compuesto antimicrobiano bioactivo.

Tabla 1: Eficacia antibacteriana de diferentes extractos solventes de hoja de Bauhinia variegata

Cepa Zona de inhibición (mm)
Sr. +/­ Concentración (mg/
No.
Microorganismo éter de anficilina
ml) Cloroformo Alcohol
petróleo (40 µg/ml)
10 02 04 06
1. Escherichia coli ­ve dieciséis

20 05 07 10
Pseudomonas 10 02 05 05
2. ­ve 20
aeruginosa 20 06 07 14
10 04 04 07
3. Estafilococo aureus +ve 25
20 08 10 15
10 03 03 05
4. Bacillus subtilis +ve 15
20 05 08 09

Tabla 2: Eficacia antibacteriana de diferentes extractos solventes de corteza de Bauhinia variegata

Cepa Zona de inhibición (mm)
Sr. +/­ Concentración (mg/
Microorganismo Éter de anficilina
No. ml) Cloroformo Alcohol
(40 µg/ml)
10 04 07
1. Escherichia coli ­ve 19
20 08 12
Pseudomonas 10 05 09
2. ­ve 22
aeruginosa 20 09 16
10 petróleo 03 06 05 08 04 05 08
3. Estafilococo aureus +ve 27
20 09 11 18
10 03 04 05
4. Bacillus subtilis +ve 18
20 06 09 10
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6 DA DHALE

Tabla 3: Análisis fitoquímico de Bauhinia variegata

Componentes fitoquímicos éter de petróleo Cloroformo Alcohol
Hojas Ladrar Hojas Ladrar Hojas Ladrar
Alcaloides ­ ­ ­ + + +
Aceites y Grasas + + + + + +
­ ­ ­ ­ + +
glucósido
­ ­ ­ ­ + +
carbohidratos
Fenólicos simples + + + + + +
taninos + + + + + +
­ + ­ ­ + +
Lignina
­ + ­ + + +
saponinas
Flavonoides ­ ­ ­ ­ ­ +
­ ­ ­ ­ ­ +
terpenoide

Tabla 4: Valores extractivos de diferentes extractos solventes de Bauhinia variegata

Solvente Hojas Ladrar

Metanol 11.50 13.2

Alcohol 17,60 19,00
Benceno 5,84 5,70
éter de petróleo 0,45 0,52
Cloroformo 1,10 1,25

Harborne JB 1984. Métodos fitoquímicos, Chapman Hall, Londres, págs. 100 ­

Evaluación fitoquímica: Los resultados del cribado cualitativo de componentes
101.
fitoquímicos en hojas y corteza de B. variegata revelaron la presencia de
Hostettmann K. 1991. Ensayos de bioactividad. Métodos en bioquímica vegetal,
alcaloides, aceite, glucósidos grasos, carbohidratos, fenólicos, taninos, lignina,
Academic Press, San Diego.6, 360.
saponinas, flavonoides y terpinoides presentados en la Tabla 3.
Ignacio. S., Sankarasivaraman.K. y Kesavan. 1998. Estudio médico­
etnobotánico entre las tribus Kanikar de fitoterapia sanitaria mundentherai.
Valores extractivos: Los valores extractivos de hojas y cortezas para diferentes 69:409­414.
solventes se presentan en la tabla 4. Motsei. ML, Lindsey. KL, Vanstaden. J. y Jaeger. Alaska 2003.
Detección de pantalones sudafricanos de uso tradicional para detectar
RECONOCIMIENTO actividad antifúngica contra Candida albicans. J Ethnopharmacol.,
86:235­41.
Los autores desean agradecer al Jefe del Departamento de Botánica,
Natarajan. B., Paulsen. BS, Pushpangadan. P. 1999. Un estudio
SSVP Sansthas, LKDr.PR Ghogrey Science College, Dhule por proporcionar
entofarmacológico del distrito de Coimbatore, Tamil Nadu, India.
las instalaciones de laboratorio necesarias.
Conocimiento tradicional comparado con la ciencia biológica moderna,
REFERENCIAS biología farmacéutica., 37: 378­390.
Patil DA 2003. Flora de los distritos de Dhule y Nandurbar, Bishen singh
Ajaiyeoba EO 2000. Estudios fitoquímicos y antimicrobianos de extractos de
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