PRÁCTICAS DE HEMATOLOGÍA

Bioq. Claudia Ortega C.

Docente de Hematología

2022
 Recuento de leucocitos
OBJETIVO: Cuantificar a los leucocitos por mm³ de
sangre

FUNDAMENTO: gracias a una solución ácida que

hemoliza los hematíes, pero no altera los leucocitos o
células nucleadas, se evidencia el número de las mismas
en una cantidad determinada de sangre.
 MATERIAL

- Hemocitómetro
- Pipeta de toma para GB
- Cubrecámara o cubreobjetos
- Cánula se succión
- Microscopio de luz y contómetro
- Tubos de hemolisis
- Pipeta automática, vortex.
LIQUIDO DE DILUCIÓN (LIQ. DE
TURK)
- Solución Acido acético glacial 1-2 ml.
- Violeta de genciana o azul de metileno al 1%
1ml.
- Agua destilada 100ml.
 TÉCNICA
• La parte inferior o capilar de la pipeta esta dividida en 10 partes que miden el volumen de
la columna de sangre obtenida como muestra; la quinta división esta marcada con 0.5 y la
décima con 1.0. el volumen de la ampolla o bulbo de mezcla se extiende hasta una señal de
11.
• El vol. Del bulbo o ampolla es 20 veces superior al del capilar hasta la señal 0.5 y 10 veces
superior hasta la señal 1.0. por lo tanto cuando la sangre se aspira hasta la señal 0.5 y el
liquido de dilución hasta 11 la dilución sanguínea es de 1:20.
 MUESTRA TÉCNICA

 Si el recuento leucocitario es inferior a 2.500 la muestra de sangre se lleva hasta la señal 1

y se diluye hasta la señal 11, Por lo tanto dilución 1:10

 Si se tiene leucocitos por encima de 20.000 se aspira la sangre hasta la marca de 0.2 y el
diluyente hasta 11 logrando una dilución 1:40

 En caso de leucocitosis intensa tipo leucemia, se efectúa una dilución de 1:200 o 1:100 en
pipeta de eritrocitos.

 Se recomienda sangre
venosa, ya que los valores
de los GB están
disminuidos en la sangre
capilar.

 La sangre venosa debe

anticoagularse con EDTA
TÉCNICA de Dil. 1:20

• 1.- se prepara la cámara de recuento adherido el cubrecámara igual que para el recuento de GR

• 2.- se aspira la sangre con ayuda de una cánula hasta la marca de 0.5, limpiando la parte externa y se llena con el

diluyente de Turk hasta la señal 11

• 3.- se agita la pipeta por 3 – 5 min

• 4.- se desprecian las 3 a 4 primeras gotas y se llenan los dos lados de la cámara, teniendo los mismos cuidados que

epara la carga de GR

• 5.- Se lleva la cámara a reposo 2 min. Luego a observación microscópica con 10 x en los 4 cuadrados grandes de las

esquinas que rodean al cuadrado

Liq. De
Turk

GB
MÉTODO MANUAL DEL HEMACITÓMETRO

Dil 380µl de Liq. Turk

1:20
20 µl de la sangre

- se deja la cámara en
Con ayuda de un
agitador mezclar reposo 2 min.
la muestra por 3 - Luego observar al
min. microscopio
CALCULOS
C1 = 40
C2 = 37
C3 = 36
C4 = 37
150
 CÁLCULOS
Varían de acuerdo a la dilución de la muestra

Si la dilución es 1:20 el número total de células contadas en 4 grupos de 16

Cuadraditos se multiplican por 50, para obtener el número de leucocitos por mm³

El FACTOR de 50 resulta de

Donde:
GB /mm³ = Nº GBx 20 x 10 x 16
NºGB= Nro. de GB contados 64
20=Inversa de dilución 1:20

10=Inversa de la profundidad de la cámara (0.1) 50

64=Nro. total de cuadrados 16x4

16=Nro. de 4 cuadrados contados

VALORES DE REFERENCIA

Hombres: 7.250 (3.900 – 10.600/mm³ de sangre )

Mujeres: 7.280 (3.500 – 11.000/mm³ de sangre)

TAREA

- Averiguar en que casos se presenta Leucocitosis y Leucopenia?

GRACIAS…