TALLER No 2.

PROBLEMAS (ESPECTROFOTOMETRIA)

1.- De un suero se mezclaron 0,1 mL Biuret para proteínas y se lee a la longitud de onda de máxima
absorción obteniéndose una absorbancia de 0,545 en una celda de 1 cm. Un patrón de proteínas de
7,5 g/dl se diluye 1:2 y se lee en igual forma que el suero obteniéndose una absorbancia de 0,486.
Calcules los g/dl de la proteína en el suero.

2.- una disolución de un colorante 0,5 mM presenta una transmitancia de 40% en una celda de 1 cm.
¿Qué diluciones hay que hacer de un patrón 2 mM para obtener absorbancias de 0,1 y 0,9 en la
misma celda y la misma longitud de onda?

3.- Determine el rango de concentraciones de una sustancia Y con absortividad molar de 350 cm -1
M-1, para que las absorbancias estén entre 0,10 y 1,00 al leerlas en una celda de 1 cm.

4.- Que dilución hay que hacerle a un suero de un paciente que al leer su glucosa por el método O-
toluidina presenta una transmitancia del 6%, si el valor de T debe estar cerca del 30%.

5.- el complejo FeSCN2+ tiene una absortividad molar de 7,00x103 L cm-1 mol-1 a 580 nm, longitud
de onda de máxima absorción. Calcúlese: a) la absorbancia de una disolución 2,5x10-5 M del
complejo cuando se mide en una cubeta de 1,00 cm a 580 nm; b) la absorbancia de una disolución
con el doble de la concentración del complejo de la disolución en a; C)la transmitancia de las
disoluciones descritas en a) y b).

6.- una alícuota de 2,5 mL de una disolución que contiene 3,8 ppm de hierro (II) se trata con un
exceso KSCN y se diluye a 50,0 mL. ¡Cual es la absorbancia de la disolución cuando se mide en una
celda de 2,50 cm a 580 nm? (tenga en cuenta el problema 5)

7.- Completar las cantidades que faltan en la tabla que se muestra a continuación. Cuando se
necesario emplease 200 para la masa molar del analito.

---------- ---------- ε a b C
A %T Lmol-1 cm-1 cm-1ppm-1 cm M ppm
0,172 4,23x103 1,00
44,9 0,0258 1,35x1-4
0,520 7,95x103 1,00
3,733x103 0,10 1,71x10-3
0,798 1,50 33,6
5,23 9,78x103 5,24

8.- Un patrón de glucosa de 80 mg%, presenta una transmitancia de 42%, al leerse a 630 nm después
de tratarse con el reactivo de O-toluidina. El suero de una muestra de sangre tratado en igual forma,
presenta una transmitancia de 32% a la misma longitud de onda y en la misma celda, calcule los
mg% de la glucosa en el suero.

9. dos mL de un patrón de proteína de 35% p/V se mezclaron con dos mL del reactivo de Biuret y
después de 30 minutos se leyó su transmitancia a 540 nm, obteniéndose una lectura del 34%. 1 mL
e un suero mezclado con 1 mL de solución salina y 2 mL de Biuret, producen una transmitancia del
42% a 540 nm en la misma celda del patrón, calcule la concentración de proteínas totales en el
suero.

10.- Para la determinación de colesterol en suero se puede usar la técnica de Liebermann-Buchard;

un suero estándar de 200 mg/L presenta una transmitancia de 45% después de tratarse con el
reactivo de Lieberman y leerse a 610 nm en una celda de 1 cm. Una muestra de suero se diluyo 1:1
y se trató con el reactivo, en las mismas condiciones que el suero estándar; obteniéndose una lectura
de 15%. Calcule los mg/L de colesterol en la muestra de suero.

11.- se pesan 0,025 g de glucosa pura y se disuelven con agua hasta 10 mL, esta disolución se
diluye 2:3 , 100 microlitros se mezclan con 4 mL del reactivo de O-toluidina, se lleva a ebullición la
mezcla por 15 minutos y luego se lee a 630 nm obteniéndose una transmitancia de 0,30. Para
analizar e contenido de glucosa en un suero se tomaron 100 microlitros de suero y se trataron y
leyeron en igual forma que la dilución de glucosa obteniéndose una transmitancia de 0,36,
determine los mg de glucosa por decilitro en el suero.

12.- una sustancia X presenta una absortividad molar de 21700 a 220 nm. Que dilución debe hacerse
de un patrón de X de 20 mg/L para obtener una transmitancia de 36,8% al leerse la dilución a 220
nm en una celda de 1 cm. El peso g/mol de X es 100.

13.- con el fin de determinar la concentración de ácido salicílico en una muestra, se realizó una curva
de calibración y la lectura de una muestra a una longitud de onda de 298 nm en una celda 1 cm
obteniéndose los datos que se encuentran a continuación;

ppm 0 2 10 20 30 60 100 X
%T 100 90 85 56 42 20 12 38
X= se refiere a la muestra diluida ¼

14.- Para analizar el contenido de cafeína en una muestra se tomaron en 0,5 mL de esta y se
diluyeron hasta 10 mL. Se prepararon patrones de calibración los cuales se leyeron en la misma
celda de la disolución diluida de la muestra obteniéndose los siguientes datos:

%T 96 60 40 2 45
ppm 0,5 10 20 100 x

Calcule los mg/L de cafeína en la muestra.

15.- una disolución de 6000 ppm de ion cobalto tiene una transmitancia de 38% a 510 nm en una
celda de un centímetro calcular a) cuál es su absorbancia en una celda de 2 cm, b)para que en la
celda de 2 cm la absorbancia sea la misma original, cuál debe ser su concentración. C) cual es la
concentración para que en la celda de 2 cm se obtenga la misma transmitancia inicial