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I.E.S.

Rayuela - Departamento de Biologa y Geologa


Prcticas de Anatoma Aplicada

Prctica de microscopio y observacin de clulas


Objetivos

Conocer el funcionamiento del microscopio ptico


Conocer algunas tcnicas de tincin y fijado de tejidos
Observar clulas humanas
Reconocer las diferentes clulas sanguneas

Material
- Microscopio

- Portaobjetos

- Cuentagotas

- Cubreobjetos

- Alfiler

- Etanol

- Pinturas de colores

- Agua destilada

- Colorante Azul de metileno

- Colorante Wright

Desarrollo
Esta prctica se divide en tres partes:
A Estudio del microscopio
B Extraccin, fijacin, tincin y observacin de clulas de la mucosa bucal
C Extraccin, fijacin, tincin y observacin de clulas de la sangre

Cuaderno de Prcticas

Adjuntar el esquema del microscopio con sus elementos indicados


Adjuntar los dibujos originales de las observaciones microscpicas realizados
Han de ser, al menos seis, tres generales y tres de detalle.
Adjuntar los esquemas (dibujos) de las preparaciones realizadas
Se realizar un dibujo significativo de cada etapa y se incluir un texto corto explicativo en
casa dibujo

Estudio del microscopio

El microscopio es un instrumento ptico que permite observar objetos aumentados. Se pueden


distinguir en l una parte mecnica, una parte ptica y una fuente de iluminacin.
Parte mecnica

Comprende el conjunto de piezas que sirven para sostener y manejar los elementos de la parte
ptica, las preparaciones y la fuente de iluminacin.
Pie o base: Pieza que apoya sobre la mesa de trabajo sobre la que descansan las dems piezas
Brazo : Pieza que une el pi con el resto de elementos mecnicos del microscopio.
Platina: Superficie plana para depositar las preparaciones a observar. Se encuentra perforada en el
centro para permitir la entrada de luz. Lleva unas pinzas para sujetar las preparaciones.
Tubo ocular o can: Cilindro hueco que sujeta el ocular. Es mvil para que las preparaciones
puedan ser vistas por varios observadores sin mover el pie.
Tornillo macromtrico: Cilindro giratorio que permite mover verticalmente la platina para conseguir el
enfoque de las preparaciones.
Tornillo micromtrico: Cilndro menor que permite el enfoque fino.
Revolver: Pieza que contiene los oculares. El l se encuentran atornilladas las lentes de diferentes
aumentos. Permite un giro para utilizar los distintos objetivos.

Parte ptica

Conjunto de lentes que permiten el aumento de las imgenes


Ocular: Situado al final del tubo. Por el se observa la preparacin
Objetivos: Montados en el revlver. Recogen la luz procedente de la preparacin.

Fuente de iluminacin

Interruptor : Permite el encendido de la lmpara de iluminacin.


Lmpara : Fuente de luz situada bajo la platina
Diafragma: Dispositivo situado entre la platina y la lmpara que regula el paso de luz

Preparacin microscpica
Los objetos a observar el el microscopio han de ser atravesados por la luz para que sta llegue al
ocular y verlos. Por ello han de ser transparentes o, al menos, traslcidos, y estar montados en una
lmina de vidrio transparente de 75x25 mm llamada portaobjetos o porta. En la mayora de las
ocasiones el material a observar se cubre con una lmina de vidrio muy fino de uno 20x20 mm
llamado cubreobjetos o cubre.
Cuando los materiales a observar son muy transparentes o sus partes ofrecen poco contraste se
tien con colorantes de microscopa especficos para cada objeto a teir. En las tinciones es muy
importante controlar las concentraciones de los tintes y los tiempos de tincin.

Manejo del microscopio


El microscopio ha de tratarse con cuidado evitando forzar las piezas. Debe estar situado firmemente
sobre el pie evitando que pueda moverse.
Para realiza una observacin al microscopio se han de seguir los siguientes pasos:
1.
2.
3.
4.
5.

Colocar el microscopio, conectarlo y encender la fuente de alimentacin


Colocar la preparacin en la platina.
Colocar el objetivo de menor aumento (el ms corto)
Enfocar la preparacin mirando por el ocular utilizando el tornillo macromtrico
Cuando se vea la preparacin enfocada regular con el el diafragma la cantidad de luz adecuada y
localizar zonas interesantes a observar.
6. Ajustar con el tornillo micromtrico.
7. Si es necesario un mayor aumento cambiar el siguiente objetivo y repetir el enfoque y la regulacin
de la iluminacin.

Extraccin, fijacin y tincin de clulas de la mucosa bucal

Para obtener clulas del epitelio de la mucosa bucal procederemos de la siguiente forma:

Lavar las manos con agua y jabn


Rascar con la ua del dedo la parte interior del carrillo
Extender el material obtenido (saliva y tejido araado) en un portaobjetos
Realizar un frotis con otro portaobjetos para extenderlo adecuadamente. (*)
Fijar la preparacin a la llama. Hay que evaporar el agua pero sin calentar demasiado para no daar
las clulas
Teir la preparacin: Azul de metileno . 5 minutos
Lavar con agua
Observar

Extraccin, fijacin y tincin de clulas de la sangre

Para obtener clulas de la sangre se realizar una puncin, con ayuda de una lanceta
diseada para ello, en la yema de un dedo. La herida no es dolorosa.
Es muy importante no intercambiar la lanceta ni utilizarla para varios individuos. Hay
enfermedades graves que se contagian por la sangre.

Limpiar la yema de un dedo y frotarla con algodn empapado en alcohol


Con la lanceta bien desinfectada hacer una puncin
Apretar el dedo y depositar una gota de sangre en un portaobjetos bien limpio
Hacer un frotis de la gota de sangre con otro porta. (*)
Dejar secar al aire
Teir la preparacin cubrindola con varias gotas de colorante Wright. Mantenerla con el tinte
durante 2 minutos
Aadir a continuacin tantas gotas de agua destilada como las que se pusieron de colorante.
Mantener la preparacin con esta mezcla durante 3 minutos
Lavar con agua destilada vertindola gota a gota durante medio minuto
Dejar secar al aire
Poner un cubreobjetos y observar al microscopio.

Las clulas sanguneas aparecer teidas del siguiente modo:

Ncleos celulares en azul


Eritrocitos en rojo claro.
Citoplasmas de los granulocitos granulados (rojo en eosinfilos, azul intenso en basfilos y
violceo en neutrfilos).
Citoplasma de los linfocitos y monocitos en azul claro
Plaquetas en azul claro
(*) El frotis se hace extendiendo la sangre de forma rpida y continua arrastrando un porta sobre el que contiene la
sangre con un ngulo de inclinacin de unos 45 . Esta operacin se realiza para extender la sangre que, de otro modo
coagulara en grandes masas impidiendo la observacin.

Departamento de Biologa y Geologa Hoja de Prcticas


Prctica n 1 de Anatoma Aplicada 1 de Bachillerato:

Microscopio y observacin de clulas y tejidos


Nombre y apellidos

1 - Pon nombres a las diferentes partes del microscopio

Curso

Fecha

Observacin de clulas de la mucosa bucal.


Esquema preparacin

Aspecto general de la preparacin


Aumento

Detalle de las clulas


Aumento

Observacin de clulas de la sangre


Esquema preparacin sangre

Aspecto general de la preparacin de sangre


Aumento

Tipos celulares
Tipo celular

Tipo celular
Aumento

Tipo celular

Aumento

Tipo celular
Aumento

Tipo celular

Aumento

Tipo celular
Aumento

Aumento