UNIVERSIDAD DE AQUINO DE BOLIVIA
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
GIPS N° 5
MATERIA: ANALISIS INSTRUMENTAL
TEMA: USO DE LA MICROPIPETA Y SU CONTROL
GRUPO: C
DOCENTE: ROY ZABALA JUSTINIANO
ESTUDIANTE: KATIA PADILLA GARCIA
FECHA: 17 DE OCTUBRE DE 2023
I. OBJETIVO GENERAL.
-Explicar el uso adecuado de las micropipetas o pipetas automáticas basados en las normas de
calidad a fin de diagnosticar si se encuentran en óptimas condiciones para su uso en las
mediciones volumétricas.
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños
volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Los volúmenes
captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales, denominados p20,
p200 y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y 1000 μl, respectivamente.
Las micropipetas o pipetas de pistón se cargan y descarga merced a la acción del dedo pulgar
sobre su pistón, en cuyo extremo opuesto se coloca una punta de plástico desechable llamada
también puntera. Con ellas se evita la succión de los líquidos biológicos y el consiguiente riesgo de
contagio de enfermedades, y succionar disolventes orgánicos u otros líquidos que produzcan
vapores tóxicos o sean venenosos. Su volumen puede ser fijo o variable.
III. ESQUEMA
IV. MATERIALES
Balanza analítica
Vaso precipitado
Micropipeta de volumen fijo
Micropipeta de volumen variable
Termómetro
Agua destilada
V. PROCEDIMIENTO
Realice 10 pipeteadas y pesadas adecuadamente
Calcule promedios, desviación estándar, errores aleatorios y/o sistemático
Determine si las micropipetas utilizadas en el laboratorio están o no calibradas.
VI. PLANILLA
Nº Xi X (Xi -. X ) (Xi – X )
1 0 , 63 0, 63 0 0
2 0, 59 0, 63 -0, 04 0, 0016
3 0, 04 0, 63 0, 01 0, 0001
4 0, 63 0, 63 0 0
5 0, 63 0, 63 0 0
6 0, 64 0, 63 0, 01 0, 0001
7 0, 64 0, 63 0, 01 0, 0001
8 0, 64 0, 63 0, 01 0, 0001
9 0, 65 0, 63 0, 02 0, 0004
10 0, 64 0, 63 0, 01 0, 0001
VII. CALCULO
VIII. CUESTIONARIO
1. Indique y explique acerca de los elementos de una micropipeta.
Las micropipetas son partes de la familia de las pipetas, pero su diseño varía enormemente
respecto a las primeras. Esto debido al mecanismo que emplea para realizar la absorción de las
sustancias con medidas precisas del volumen a obtener.
Botón superior: pulsa el resorte interno, accionando el funcionamiento del instrumento.
Tornillo: mantiene el resorte y el botón conectado, en sí, es parte del botón superior.
Rueda: con ella se gradúa el volumen a recolectar; esto solo en los analógicos.
Cuerpo de la pipeta: donde van todas las piezas unidas.
Botón expulsor: botón para expulsar la punta de la pipeta luego de ser usada.
Punta: extremo inferior extraíble, es donde se almacena la sustancia y es una parte desechable.
2. Explique cómo se realiza el llenado y la expulsión de la muestra al medirla con la
micropipeta.
Se aprieta el émbolo hasta el primer tope. Se introduce la punta y se aspira el contenido
previamente ajustado en la micropipeta. Con cuidado de no generar burbujas. A la hora de verter el
volumen aspirado, se aprieta hasta el primer tope. Presionar hasta el segundo tope para soltar el
volumen completamente. Se desecha la punta en el recipiente correspondiente después de
terminar.
3. ¿Cómo se realiza el mantenimiento de las micropipetas?
Las pipetas son dispositivos que requieren inspecciones frecuentes para detectar desgastes
anormales o daños y verificar que las mismas se encuentran en buenas condiciones de
funcionamiento.
- La inspección de la pipeta se debe realizar diariamente y debe cubrir los siguientes aspectos:
- Verificar la integridad y ajuste de los mecanismos. Los mismos deben poder moverse de forma
suave. El pistón debe desplazarse suavemente.
- Confirmar que el porta puntas no presente distorsiones o marcas de desgaste, dado que es
esencial para la exactitud de las medidas.
- Colocar una punta y llenarla con agua destilada. La pipeta no debe presentar ningún tipo de fuga.
4. Investigue acerca de las normas ISO DIS 8655 y 12650 sobre el calibrado de las
micropipetas.
Los puntos principales de la ISO8655 se centran en:
1. Utilizar la balanza adecuada
2. Minimizar efecto de la evaporación
3. Condiciones ambientales
Adaptar rápidamente su balanza para comprobar el rendimiento de las pipetas simplemente
montando el colector de evaporación.
El software Calibry permite llevar a cabo todos los pasos del proceso de calibración, acelerando de
este modo la calibración de pipetas y la gestión de los datos.Calibry le ayuda a cumplir con las
normas
5. ¿Qué es una puntera y para qué se la utiliza?
Las micropipetas son muy útiles para la manipulación de cualquier clase de líquido debido a que su
punta puede ser desechada, ya que emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente
son estériles.
Las puntas para micropipeta se utilizan para tomar una pequeña muestra de
líquido o solución, utilizadas principalmente en investigación. Ideales para
laboratorios de microbiología y biología molecular.
6. Dibuje las micropipetas utilizadas en el laboratorio e indique sus partes
7. Investigue las precisiones con las que normalmente suelen trabajar las micropipetas
El rango de trabajo de la mayoría de micropipetas es entre el 10 y el 100% de su volumen nominal
máximo, es decir, del volumen máximo de líquido teórico que es capaz de medir dicha micropipeta.
8. Qué es y para qué se utiliza un dispensador
En el laboratorio se encuentran diversas clases de dispensadores, los hay para atender las
necesidades del área de química, pero también modelos que efectúan una labor análoga, aunque
varían en diseño como los utilizados en microbiología, bacteriología, inmunología y farmacología.
El dispensador es un equipo multipropósito que puede utilizarse en el laboratorio para realizar las
siguientes actividades:
1. Aspirar y dispensar volúmenes de líquidos o soluciones que no requieren mayor exactitud.
2. Distribuir un volumen de líquido o solución almacenado en un recipiente contenedor en
volúmenes parciales predefinidos, mediante un dispositivo de suministro (dispensaciones
repetitivas con volumen final constante).
3. Mezclar una solución mediante operaciones sucesivas de aspiración y dispensación, utilizando
un dispositivo de aspiración y suministro.
4. Titular. Determinar la concentración de una solución, midiendo exactamente los volúmenes
dispensados (dispensaciones consecutivas hasta lograr el punto final).
5. Diluir. Reducir la concentración de una solución, utilizando mezclas controladas. (Adición de dos
reactivos a un vial –frasco– común).
6. Utilizar como una pipeta (aspirar un volumen y luego dispensarlo).
7. Distribuir medios de cultivo en placas Petri. Generalmente para esta función se utilizan
dispensadores automatizados, dotados de accesorios para mover las placas de Petri y
almacenarlas una vez dispensado el medio de cultivo. Para aplicaciones puntuales –pequeña
escala–, la distribución de medios de cultivo se efectúa utilizando jeringas plásticas desechables
con agujas Nº 161.
9. Dibuje un dispensador
10. Convierta los siguientes volúmenes según convenga de ml a ul o viceversa:
864 ml =
7 ul =
84 ml =
1860 ul=
88 ul =
284 ul =
0,730 ml=
1,50 ml=
87 ul =
0,085 ml=
IX.- CONCLUSION
En conclusión, para un buen manejo de sustancias con micropipetas, es indispensable tener muy
presente las condiciones en las cuales hacemos uso de las pipetas y micropipetas de laboratorio.
Así como también la calidad de las mismas y los errores de pipeteo que se pueden presentar
durante un transvase de líquido, el tipo de líquido que podemos absorber y la forma correcta de
hacerlo
