UNIVERSIDAD TÉCNICA PRIVADA COSMOS

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

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CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

PROTOCOLO DE PROCEDIMIENTOS
QUIMICA ANALITICA II

Docente: Ing. Juan Carlos Ramirez Mamani

Cochabamba – Bolivia
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TEMA (1): USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO UV VISIBLE

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química Analítica

PRE -REQUISITOS
I, Química Orgánica.
Cálculos para determinar Concentraciones Molares
Cálculo para determinar Concentraciones en ppm
FUNDAMENTO
Determinación de masas para preparación de soluciones
TEÓRICO.
Determinación de masas de patrones primarios
Uso del espectrofotómetro.
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Determinar mediante técnicas de laboratorio y cálculos las
diferentes concentraciones en M, ppm
● Describir las técnica y métodos de laboratorio para la
OBJETIVOS
realización de cada preparación de soluciones patrón
● Interpretar los resultados obtenidos y relacionar con los
análisis de datos
MATERIALES, ● Material de laboratorio de vidrio
REACTIVOS, ● Patrones primarios (sólidos, líquidos con pureza conocida)
EQUIPOS, ETC. ● Espectrofotómetro UV visible.
1. Conectar los cables correspondientes al equipo, NO usar otros
cables que no pertenezcan al equipo.
TÉCNICA, PASOS 2. La toma de corriente tiene que estar firme y que no varíe el
QUE EL voltaje.
ESTUDIANTE 3. enchufar cuidadosamente el cable en la toma
DEBE SEGUIR 4. presionar el botón de encendido.
PARA 5. esperar que el equipo inicie, NO forzar al equipo ya que está
DESARROLLAR programado para que inicie automáticamente
EL 6. verificar que todo el chek list esté correcto.
PROCEDIMIENTO 7. Inicie el manipuleo correspondiente al análisis
8. Preparar soluciones de concentración conocida de los
patrones primarios
Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de
EVALUACIÓN DE ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
LA PRÁCTICA por el estudiante en relación con los valores conocidos de los
patrones utilizados, en solución.
El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplicar
análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
ANÁLISIS DE sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un
RESULTADOS informe final con profesionalismo. Evaluación Diagnóstica, resolución
de problemas propuestos.
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TEMA (2): PREPARACIÓN DE SOLUCIONES PARA LAS DETERMINACIONES

COLORIMÉTRICAS.

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química General,

PRE -REQUISITOS
Química Analítica I, Química Orgánica.
Preparación de soluciones a partir de soluciones concentradas de
estándares disueltos.
FUNDAMENTO Manejo correcto de los cálculos relacionados para la preparación de
TEÓRICO. soluciones colorimétricas.
Conocer la función de los materiales que deben ser utilizados para la
preparación de soluciones.
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Cuantificar el analito a determinar a partir de una solución
preparada.
● Describir la técnica y métodos de laboratorio para la
OBJETIVOS
determinación del analito.
● Interpretar los resultados obtenidos y relacionar con los valores
teóricos calculados.
● 2 Balanzas analíticas
● 2 probetas de 25 ml
● 5 Vasos de precipitado 50 ml
● 4 Vasos de precipitado 100 ml
● 5 Varillas de vidrio
● 4 Peras de goma
MATERIALES,
● 4 Matraces aforados 100 ml
REACTIVOS,
● 5 Matraces aforados 50 ml
EQUIPOS, ETC.
● 4 Espátulas.
● 5 g de Dicromato de potasio
● 5 g de Permanganato de potasio
● 5 L de Agua destilada.
● Papel desecador
● detergente líquido
1. Realizar los cálculos necesarios para preparar un volumen
establecido para una concentración en ppm a partir de un
patrón.
2. Pesar y disolver el compuesto en un vaso de precipitado y
TÉCNICA, PASOS
transferir cuantitativamente a un matraz aforado.
QUE EL
3. Si se trabajan con compuestos que desprenden gases trabajar
ESTUDIANTE
bajo una campana de extracción.
DEBE SEGUIR
4. Tomar la cantidad necesaria para preparar o diluir en el matraz
PARA
aforado.
DESARROLLAR
5. Añadir el volumen de agua necesario para aforar
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EL 6. Etiquetar indicando que tipo de solución es y qué reactivo se

PROCEDIMIENTO preparó.
7. Indicar la concentración teórica.
8. Observar la intensidad de coloración de la solución
concentrada y de las disoluciones realizadas.
Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de
EVALUACIÓN DE ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
LA PRÁCTICA por el estudiante en relación con los valores conocidos de los
patrones utilizados, en solución.
El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplica
análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un
informe final con profesionalismo.

ANÁLISIS DE
RESULTADOS
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TEMA (3): DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE ABSORCIÓN

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química General,

PRE -REQUISITOS
Química Analítica I, Química Orgánica.
FUNDAMENTO Determinación de la longitud de onda de los analitos
TEÓRICO. Determinación de la absorción de la solución patrón.
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Obtener la longitud de onda a la cual la absorción es máximo
● Preparar disoluciones para hacer lecturas en
OBJETIVOS espectrofotómetro.
● Conocer las variables que afectan en la lectura de las
muestras diluidas.
● 1 Espectrofotómetro UV-visible.
● 5 Matraces aforados de 50 ml
● 4 Matraces aforados de 100 ml
● 4 Varilla de vidrio
● 4 Vidrio de reloj
● 4 gradillas de tubo de ensayo
● 20 Tubos de ensayo 20 ml
MATERIALES,
● 4 Pipetas graduadas 10 ml
REACTIVOS,
● 4 Pipetas volumétricas 5 ml
EQUIPOS, ETC.
● 4 Espátulas
● 5 g de Permanganato de potasio
● 5 g de Dicromato de potasio
● 5 L de Agua destilada.
● colas de zorro para tubo de ensayo
● detergente líquido
● papel desecador
1. Hacer los cálculos necesarios para preparar las disoluciones
correspondientes
TÉCNICA, PASOS
2. Pesar en una balanza analítica el patrón
QUE EL
3. Hacer la dilución respectiva
ESTUDIANTE
4. Trasvasar a un matraz aforado la disolución, añadir la
DEBE SEGUIR
cantidad de agua hasta el aforo
PARA
5. Proceder a diluir para hacer las lecturas en el
DESARROLLAR
espectrofotómetro
EL
6. Colocar en el recipiente de muestras del instrumento el
PROCEDIMIENTO
volumen necesario de muestra para hacer las lecturas.
7. Lavar y desechar el material utilizado
EVALUACIÓN DE Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de
LA PRÁCTICA ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
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por el estudiante en relación con los valores conocidos de los

patrones utilizados, en solución.
El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplica
análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un
informe final con profesionalismo.

ANÁLISIS DE
RESULTADOS
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TEMA (4): PREPARACIÓN DE CURVAS DE CALIBRACIÓN.

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química General,

PRE -REQUISITOS
Química Analítica I, Química Orgánica.
Preparación de los puntos de la recta
FUNDAMENTO Preparación de soluciones de concentración conocida
TEÓRICO. Obtención de las variables de trabajo
Relación de la absorción con la concentración.
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Realizar los cálculos necesarios para obtener las
concentraciones necesarias de la curva de calibración.
OBJETIVOS ● Obtener curvas de calibración de un compuesto patrón
● Conocer las variables que afectan en la preparación de
curvas de calibración.
● 1 Espectrofotómetro UV-visible
● 20 Tubos de ensayo 20 ml
● 5 Vasos de precipitado 50 ml
● 5 Vasos de precipitado de 100 ml
● 5 Matraces aforados de 50 ml
● 4 Matraces aforados de 100 ml
● 4 Vidrio de reloj
MATERIALES, ● 4 Espátulas
REACTIVOS, ● 5 Pipetas aforadas 5 ml
EQUIPOS, ETC. ● 5 Pipetas volumétricas 10 ml
● 4 Propipetas.
● 4 gradillas para tubo de ensayo
● 5 g de Permanganato de potasio
● 5 g de Dicromato de potasio
● 5 colas de zorro para tubo de ensayo
● Detergente líquido
● 5 L de Agua destilada
1. Realizar los cálculos necesarios para obtener la solución
patrón
TÉCNICA, PASOS
2. Hacer diluciones correspondientes para obtener las diferentes
QUE EL
concentraciones
ESTUDIANTE
3. A partir de las soluciones estándar preparadas tomar el
DEBE SEGUIR
volumen correspondiente y trasladarlo a los tubos de ensayo.
PARA
4. Hacer las lecturas de absorción o transmitancia de cada
DESARROLLAR
solución preparada.
EL
5. Registrar las absorciones correspondientes a cada
PROCEDIMIENTO
concentración
6. Obtener la curva de calibración.
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Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de

EVALUACIÓN DE ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
LA PRÁCTICA por el estudiante en relación con los valores conocidos de los
patrones utilizados, en solución.
El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplica
análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un
informe final con profesionalismo.

ANÁLISIS DE
RESULTADOS
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TEMA (5): APLICACIÓN DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA UV VISIBLE EN LA

DETERMINACIÓN DE ANALITOS.

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química General,

PRE -REQUISITOS
Química Analítica I, Química Orgánica.
FUNDAMENTO Determinación de analitos mediante la espectroscopia UV visible.
TEÓRICO. Aplicación de cálculos para cuantificar los analitos
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Aplicar el procedimiento que se debe realizar para la
determinación de un componente con el espectrofotómetro UV-
visible.
OBJETIVOS ● Realizar los cálculos necesarios de para la determinación del
contenido de analitos en la muestra.
● Conocer las variables que afectan en la determinación
espectrofotométrica.
● 1 Espectrofotómetro UV-visible.
● 5 Matraces aforados 100 ml
● 4 matraces aforados de 50 ml
● 5 Vasos de precipitado 50 ml
● 4 Varillas de vidrio
● 4 Vidrio de reloj
● 20 Tubos de ensayo
MATERIALES,
● 4 gradillas para tubo de ensayo
REACTIVOS,
● 4 Espátulas
EQUIPOS, ETC.
● 5 Pipetas graduadas 10 ml
● 4 Pipetas volumétricas 5 ml
● Detergente líquido
● Colas de zorro para tubo de ensayo
● 5 g de Dicromato de potasio
● 5 g de Permanganato de potasio
● 5 L de Agua destilada
1. Preparar el material de laboratorio para iniciar el procedimiento
TÉCNICA, PASOS 2. Pesar las respectivas muestras y patrones de acuerdo a los
QUE EL cálculos realizados.
ESTUDIANTE 3. Diluir los patrones para su respectiva dilución.
DEBE SEGUIR 4. Preparar la curva de calibración
PARA 5. Hacer las lecturas correspondientes en el espectrofotómetro.
DESARROLLAR 6. Mediante regresión lineal obtener la curva característica.
EL 7. Medir la absorbancia de las muestras preparadas.
PROCEDIMIENTO 8. Mediante la curva de calibración obtener el porcentaje de
analito que se encuentra en la muestra.
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Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de

EVALUACIÓN DE ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
LA PRÁCTICA por el estudiante en relación con los valores conocidos de los
patrones utilizados, en solución.
El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplica
análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un
informe final con profesionalismo.

ANÁLISIS DE
RESULTADOS
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TEMA (6): DETERMINACIÓN DE HIERRO POR EL MÉTODO COLORIMÉTRICO, EN LA

REGIÓN DEL ESPECTRO UV VISIBLE

Nombre:

Código: Grupo:

Fecha: Nota:

Los alumnos deben tener conocimientos básicos de Química General,

PRE -REQUISITOS
Química Analítica I, Química Orgánica.
Se forma un complejo de hierro (II) con 1,10-fenantrolina, Fe
(C12H8N2)3 2+ y se mide la absorbancia de esta solución colorida
FUNDAMENTO con un espectrofotómetro. Se grafica el espectro para determinar el
TEÓRICO. máximo de absorción. Se agrega la hidroxilamina (como clorhidrato,
para aumentar la solubilidad) para reducir todo el Fe3+ a Fe2+ y
mantenerlo en ese estado.
TIEMPO DE
Cuatro periodos académicos cada uno de 45 minutos.
PRÁCTICA
● Realizar la determinación de hierro en muestras líquidas
OBJETIVOS ● Determinar la cantidad de hierro presente en la muestra.
● Hacer uso de los conceptos de espectroquímica.
● 1 Espectrofotómetro UV-visible
● 5 Matraces aforados 100 ml
● 4 matraces aforados 50 ml
● 5 Vasos de precipitado 50 ml
● 5 Vasos de precipitado de 100 ml
● 4 Varillas de vidrio
● 5 Pipetas volumétrica 5 ml
● 5 Pipetas graduadas 10 ml
● 1 Estufa de secado
● 4 Espátulas
MATERIALES, ● 1 pliego Papel filtro
REACTIVOS, ● 5 Embudos de vidrio
EQUIPOS, ETC. ● 4 Propipeta
● 1 pH-metro
● 1 L Solución estándar de Fe
● 1 frasco Ortofenantrolina
● 1 frasco Cloruro de hidroxilamina
● 1 frasco Acetato de sodio
● 10 ml Ácido acético glacial
● 10 ml Ácido clorhídrico.
● 1 frasco Sal de Mohr
NOTA: realizar cálculos para obtener los pesos y volúmenes de los
reactivos según corresponda.
1 En una serie de matraces volumétricos de 100 mL, pipetee
TÉCNICA, PASOS 1.00, 2.00, 5.00, 10.00 y 25.00 mL de la solución estandarizada
QUE EL de hierro. En otro matraz aforado coloque 50 mL de agua
ESTUDIANTE destilada; éste será el testigo. La muestra problema le será
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DEBE SEGUIR entregada en otro matraz aforado de 100 mL. A cada uno de
PARA los matraces (incluso el del problema) agregue 1.0 mL de la
DESARROLLAR solución de cloruro de hidroxilamonio y 5.0 mL de la solución
EL de 1,10-fenantrolina.
PROCEDIMIENTO 2 Regule cada solución agregándole 8.0 mL de la solución de
acetato de sodio para producir el color rojo de 1,10-fenantrolina
ferrosa el complejo hierro (II)-fenantrolina se forma a pH de 2 a
9. El acetato de sodio neutraliza el ácido presente y ajusta el
pH a un valor en el cual se formará el complejo. Deje que
transcurran unos 15 min después de agregar los reactivos para
hacer mediciones de absorbancia para que de esta manera el
color del complejo se pueda desarrollar por completo. Una vez
desarrollado, el color es estable durante horas. Diluya cada
solución exactamente a 100 mL. Los estándares corresponderá
a 0.1, 0.2, 0.5, 1 y 2.5 ppm de hierro, respectivamente.
3 Obtenga el espectro de absorción de la solución de 2.5 ppm
midiendo la absorbancia desde 400 hasta 700 nm
aproximadamente (o en el intervalo de su instrumento). Anote
las lecturas a intervalos de 25 nm, excepto cerca del máximo
de absorción, donde debe anotar las lecturas a intervalos de 5
o 10 nm. Siga las instrucciones de su profesor acerca del
funcionamiento del espectrofotómetro. Debe usar la solución
testigo como solución de referencia. Grafique la absorbancia
en función de la longitud de onda y seleccione la longitud de
onda del máximo de absorción. Eso lo puede hacer con una
hoja de cálculo. A partir de la concentración molar de la
solución de hierro y de la longitud de trayectoria en la celda,
calcule la absortividad molar del complejo hierro (II)-
fenantrolina en el máximo de absorción.
4 Prepare una curva de calibración midiendo la absorbancia de
cada una de las soluciones estándar en la longitud de onda de
absorbancia máxima. Mida de la misma manera el problema.
Usando una hoja de cálculo, prepare una curva de calibración
graficando la absorbancia de los estándares en función de la
concentración en ppm. Con esta gráfica y la absorbancia del
problema, determine la concentración final de hierro en la
solución problema. Haga los cálculos de la concentración
medida tecleando la fórmula en una celda de la hoja de cálculo,
usando los valores de pendiente y ordenada al origen, y la
absorbancia medida. Informe la cantidad de microgramos de
hierro en su problema, junto con la absortividad molar y el
espectro del complejo de hierro (II)-fenantrolina.
Se evaluará de manera escrita mediante cuestionario, resolución de
EVALUACIÓN DE ejercicios, juntamente con la comparación de los resultados obtenidos
LA PRÁCTICA por el estudiante en relación con los valores conocidos de los
patrones utilizados, en solución.
ANÁLISIS DE El estudiante analiza la relación entre los valores obtenidos, aplica
RESULTADOS análisis de datos de los resultados obtenidos y posibles errores
 UNIVERSIDAD TÉCNICA PRIVADA COSMOS
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sistemáticos o aleatorios ocurridos durante la práctica, brindando un

informe final con profesionalismo.