FACULTAD CIENCIAS DE LA VIDA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
BIOL251

BACTERIAS ANAEROBIAS MICROBIOTA NORMAL CAVIDAD ORAL

Nombres: Francisco Aros, Patricio Jorquera, Claudia Repetti

Sección: 301
Puntaje total: 72 puntos

1. Objetivo general del práctico (3 ptos)

- Identificar las especies bacterianas anaerobias que forman parte de la microbiota

normal de la cavidad oral.

Microbiota Anaerobia Facultativa:

2. Tinción de Gram directa desde diente: Realice un análisis microscópico indicando: (4

puntos totales)
 3. Análisis microscópico y macroscópico de muestra de saliva:

3.1 Tinción Gram directa desde saliva: Realice un análisis microscópico indicando: (4
puntos totales)

3.2 Observaciones muestras de saliva en agar sangre:

a) Observaciones microscópicas muestra de saliva en agar sangre: Realice un análisis

microscópico indicando: (4 puntos totales)
 b) Observaciones macroscópicas muestra saliva en agar sangre: Realice dibujo
macroscópico de la siembra (1 pto). Indique abundancia del cultivo (1 pto), si hay
colonias aisladas y en qué cuadrante (1 pto), tipo de hemólisis (1 pto) y si el cultivo
es puro o contaminado, justifique (2 ptos). (6 puntos totales)

3.3 Observaciones muestra de saliva en agar Mitis Salivarius:

a) Observaciones microscópicas colonia azul: Realice un análisis microscópico

indicando: (4 puntos totales)
b) Observaciones microscópicas colonia negra: Realice un análisis microscópico
indicando: (4 puntos totales)

c) Observaciones macroscópicas muestra agar mitis-salivarius: Realice dibujo

macroscópico de la siembra (1 pto). Indique abundancia del cultivo (1 pto), si hay
colonias aisladas y en qué cuadrante (1 pto) y si el cultivo es puro o contaminado,
justifique (2 ptos). (5 puntos totales)
 d) Cálculo unidades formadoras de colonias (UFC) por mL (UFC/mL) agar mitis-
salivarius. Indique UFC/ml de colonias azules y de colonias negras. Incluya el
desarrollo de los cálculos (I = incontables) Considere que sembró 100 uL en cada
placa (6 puntos totales: 3 puntos por la tabla, 3 puntos por los cálculos)

Dilución 1/100 1/1000 1/10000

Número Número Número
UFC/mL UFC/mL UFC/mL
Colonia colonias colonias colonias
Azul 1530 1.53 x 10^6 928 9.28 x 10^6 792 7.92 x 10^7
Negro I N I N 1056 1.056 x 10^8

4. Análisis de la microbiota anaerobia de la lengua:

a) Tinción Gram directa desde lengua: Realice un análisis microscópico indicando: (4

puntos totales)
b) Análisis microscópico muestra de lengua en agar sangre: Realice un análisis
microscópico indicando: (4 puntos totales)

c) Observaciones macroscópicas muestra de lengua agar sangre: Realice dibujo

macroscópico de la siembra (1 punto). Indique abundancia del cultivo (1 punto), si
hay colonias aisladas y en qué cuadrante (1 punto), tipo de hemólisis (1 punto) y si
el cultivo es puro o contaminado, justifique (2 puntos). (6 puntos totales)
 4. Discusión y conclusiones: Debe incluir características y diferencias de los medios y
condiciones de cultivo utilizados, características de las microbiotas presentes en los
tejidos analizados. Describa 2 patologías asociadas a la microbiota de la cavidad oral
(máximo 1,5 planas, 15 puntos)

El agar Mitis Salivarius (AMS) y Agar sangre suplementado con hemina-menadiona (ASHM)
son medios utilizados para la identificación de Streptococcus. AMS es un medio selectivo
para Streptococcus mutans y ASHM es un medio no selectivo, por tanto permite el
crecimiento de varios tipos de estreptococos. Otra diferencia entre los medios es que AMS
contiene sacarosa y bajo pH, permitiendo el crecimiento de Streptococcus mutans y ASHM
gracias a la hemina-menadiona permite observar la presencia de hemólisis.
La microbiota presente en los dientes es diversa y compleja, alguna de estas bacterias
tienden a adherirse a la superficie dental, formando lo que se conoce como placa dental,
estas bacterias pueden crecer y colonizar diferentes áreas de la boca, incluyendo las encías,
las bolsas gingivales y la lengua Además, la microbiota de los dientes es capaz de producir
ácidos que actúan en contra del esmalte dental, lo que puede llevar a la caries dental si las
condiciones son favorables para ello.
La microbiota presente en la lengua es diversa y puede variar según la dieta y la higiene oral.
La superficie dorsal de la lengua es el hábitat principal de la microbiota de la lengua y puede
estar colonizada por diferentes especies bacterianas, como Streptococcus, Prevotella,
Veillonella, entre otras. Adicionalmente, la lengua puede contener hongos e incluso virus. Es
importante tener en cuenta que la microbiota lingual también puede estar relacionada con
problemas de salud oral como la halitosis y otras afecciones.
Una de las patologías más usuales de la cavidad oral son las caries. Esta enfermedad es
infectocontagiosa que se manifiesta por tener aperturas pequeñas u orificios en los dientes
por la bacteria Estreptococo mutans, que produce ácidos que atacan el esmalte de los
dientes. Puede prevenir la formación de caries con una buena higiene dental y visitas al
dentista. Si la infección persiste el paciente presenta dolor, infecciones y pérdidas de piezas
dentales. Por otra parte, tenemos la gingivitis, una enfermedad frecuente y leve que genera
irritación, enrojecimiento e inflamación de las encías debido a una acumulación de la placa
dental entre el diente y las encías. Usualmente el paciente sangra al cepillarse o utilizar hilo
dental, se recomienda una buena higiene de la cavidad oral para que no avance la
enfermedad a periodontitis.
5. Bibliografía (3 puntos): Al menos 3 referencias sin incluir la guía del laboratorio, debe
utilizar un libro como mínimo. (recuerde citar las referencias donde las haya utilizado
según norma Vancouver)

- Mayo Clinic. Gingivitis - Sintomas y Causas - Mayo Clinic [Internet] Rochester (MN):
Mayo Foundation for Medical Education and Research; c2022 [citado el 03 de junio
de 2023]
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/gingivitis/symptoms-causes/s
yc-20354453#:~:text=La%20gingivitis%20es%20una%20forma,en%20serio%20y%20t
ratarla%20r%C3%A1pidamente.

- Mayo Clinic. Caries Dentales - Síntomas y Causas - Mayo Clinic [Internet] Rochester
(MN): Mayo Foundation for Medical Education and Research; c2022 [citado el 03 de
junio de 2023]
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/cavities/symptoms-causes/sy
c-20352892

- Lamont, Richard J, et al. Microbiología e Inmunología Oral. Primera edición en

español. México, El manual moderno, 2015. (páginas 6, 12, 13)