Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina

Instructivo

Recolección y Transporte de muestras vegetales para Análisis Genético

A continuación, se presenta una lista de instrucciones para seleccionar y recolectar
muestras vegetales destinadas a análisis genéticos, incluidos el manejo y transporte hasta el
laboratorio de análisis genético (INIA La Platina, La Pintana, Santiago).

1.- Material Vegetal

1.1 Se debe obtener la muestra desde una planta única, la cual debe ser marcada para
su posterior uso (propagación, identificación). La edad de la planta a analizar y su estado
fitopatológico (presencia/ausencia de enfermedades) no es determinante, aunque se prefiere
un tejido sano en activo crecimiento (ver 1.2).

1.2 El tejido ideal corresponde a hojas y/o brotes jóvenes, ya que a partir de ellos es
posible obtener una mayor cantidad de ADN y de mejor calidad, lo cual facilita los análisis
posteriores. Si no se dispone de este material (hojas) se puede seleccionar opcionalmente otro
tejido, ya sea fruto, tallos, raíz u otros. Se debe tener en cuenta que la cantidad y calidad del
ADN extraído a partir de estos otros tejidos es menor o mucho menor, por lo cual siempre es
preferible la elección de hojas provenientes de brotes para los análisis.

1.3 Si se trata de material in vitro, se recomienda enviar un frasco con una muestra
recientemente repicada en su medio de propagación, guardando siempre una contramuestra
de la cual poder propagar posteriormente los genotipos identificados, con la certeza de contar
con material autentificado genéticamente. El o los frascos o contenedores se envían al
laboratorio de análisis en condiciones normales a temperatura ambiente, cuidando de que
vengan en un envase mayor protegido de golpes y con indicaciones externas de “este lado
hacia arriba”, “no golpear”, etc.

2.- Manejo de las muestras en provenientes de invernadero o campo

2.1 Cada muestra – ya sean hojas, brotes, frutos o raíces – debe ser puesta en un
contenedor único (ejemplo: bolsa plástica tipo ziploc, bolsa de papel u otro envase que se
pueda cerrar y rotular adecuadamente), el cual debe ser rotulado con el nombre de la
muestra (indicar la variedad de la cual proviene (si se conoce), su origen geográfico, posición
en el huerto, etc., o en su defecto asignarle un número o código) y fecha de muestreo. El/la
interesado/a debe conservar una panilla o cualquier forma de registro con la lista y descripción
de lo enviado para análisis (idealmente, incluir copia de lista en el envío).

2.2 Una vez que se ha tomado la muestra, ésta debe permanecer siempre en
condiciones de frío para evitar que se descomponga u oxide (o más bien enlentecer este
proceso), por lo que se recomienda guardarla en un cooler o caja aislante que contenga hielo o
refrigerante en bolsas.

Nota: el refrigerante o hielo no debe tener contacto directo con el tejido vegetal, para
evitar que se queme por contacto. Si se quema, se acelera y favorece la
descomposición de la muestra.

Laboratorio de Biotecnología Mayo 2021

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Nota: No es recomendable congelar las muestras antes de llegar a su destino final

(Lab de Biotecnología, INIA), ya que su descongelamiento posterior destruye los
tejidos y se daña el ADN de las muestras.

2.3 Una excepción la constituyen muestras mantenidas en speedlings o bolsas, las

cuales se pueden hacer llegar al laboratorio de análisis en su mismo envase, en tierra o el
sustrato que sea. En este caso, al igual que las muestras in vitro, serán manejadas y enviadas a
temperatura ambiente.

3.- Transporte de las muestras al laboratorio

Como se mencionó anteriormente, las muestras deben ser mantenidas en condiciones

de frío desde que son colectadas hasta su arribo al laboratorio. Es importante que esta cadena
de frío no se rompa ya que esto garantiza que la calidad del ADN extraído sea adecuada para
los análisis posteriores.

3.1 Si el transporte desde el campo o lugar de almacenaje al laboratorio es corta (1-2

días), se recomienda seguir las indicaciones dadas en el punto 2.2.

3.2 Si el transporte es de larga distancia (más de dos días) se sugiere secar o

deshidratar la muestra. Para ello la muestra – con su etiqueta de reconocimiento – se coloca
en un pliego de papel filtro o absorbente (tipo toalla nova) y los distintos pliegos se van
poniendo unos sobre otros de forma ordenada, introduciendo entre ellos varios papeles
absorbentes que faciliten la extracción de la humedad (de forma similar a la preparación de un
herbario). Una vez que se ha formado una pila, esta debe ser prensada. Para tal efecto se
pueden utilizar objetos pesados de superficie plana (ejemplo: libros). Los papeles absorbentes
deben ser cambiados al día siguiente, y en días sucesivos, tantas veces como sea necesario,
hasta comprobar que las plantas estén totalmente secas – usualmente entre 5-10 días - . Este
proceso puede ser acelerado si los paquetes con las muestras son secados cerca de un
calefactor con ventilador incluido. El calefactor debe ser ubicado a una distancia no menor de
50 cm y siempre debe ser complementada con el cambio diario de papeles. Otra opción para el
secado es el uso de cristales de sílica gel en un desecador; esta sílica es la misma que se usa
para preservar objetos delicados que requieren evitar la humedad (cristales azules se vuelven
naranja cuando absorben humedad ambiente). En este caso, se deben guardar las muestras en
el desecador con sílica por varios días, hasta que se aprecie a simple vista que las muestras se
han desecado.

3.3 Para despachos internacionales, se deben considerar posibles restricciones o

permisos de las respectivas agencias fitosanitarias del país de origen y destino. En el caso de
Chile, no hay una normativa específica que aplique sobre muestras deshidratadas (tipo
herbario), aunque si las hay para muestras vegetales de tejido vivo. En cada caso o especie, se
deberá seguir la normativa ad hoc establecida por el Servicio Agrícola y Ganadero de Chile
(SAG, www.sag.gob.cl) para el movimiento transfronterizo. Tampoco hay restricciones para el
despacho y traslado de muestras de ADN en solución acuosa tamponada, lo cual es muy
conveniente porque el ADN es estable en estas condiciones a temperatura ambiente por
períodos prolongados.

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