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BIOQUÍMICAS
FOTOBIORREACTORES
INTEGRANTES:
Caballero, Anabella
Casanova, Leah
Guzmán, Mariana
Naccarato, Giuliana
Pantuso, Martín
-2023-
1. Introducción
Se puede definir al fotobiorreactor como un contenedor biológico artificial que utiliza
la luz para cultivar microorganismos fotosintéticos, dado que su ambiente interno
presenta las condiciones necesarias para el crecimiento y desarrollo de
microorganismos de manera eficiente y rápida.
Los microorganismos fototróficos son organismos recolectores de luz en los que la
energía luminosa se convierte en energía química y se almacena en diversas formas
de biocompuestos de carbono.
La mayoría de los microorganismos fototróficos también son autótrofos y fijan dióxido
de carbono (CO2) atmosférico mediante la fotosíntesis. Los microorganismos
fototróficos de interés comercial más populares son las cianobacterias y las
microalgas. Su crecimiento requiere energía luminosa y una fuente de carbono
inorgánico (normalmente CO2).
Por lo tanto, es de suma importancia el diseño de los fotobioreactores eficaces que
permitan la penetración suficiente de luz, un suministro eficiente de fuentes de carbono
y demás condiciones necesarias para que microorganismos y células fotosintéticas
puedan crecer y desarrollarse con rapidez y eficiencia generando biomasa y productos
deseados. Los organismos vivos que se desarrollan en este tipo de reactores son
microalgas, cianobacterias y algunos musgos.
Las microalgas son organismos unicelulares presentes en diversos hábitats.
Presentan una amplia variedad de formas y tamaños, y se caracterizan por su elevada
capacidad fotosintética y de reproducción. El aumento en los niveles de dióxido de
carbono (CO2) en la atmósfera como consecuencia del consumo masivo de
combustibles fósiles, ha llevado a la búsqueda de combustibles alternativos. En este
sentido, las microalgas pueden emplearse como materia prima para la generación de
biocombustibles.
La industrialización de productos de microalgas requiere un cultivo a gran escala, que
comúnmente se realiza utilizando sistemas abiertos (estanques abiertos o con
canales) o sistemas cerrados (PBR). Aunque los sistemas abiertos son económicos en
términos de construcción, operación y mantenimiento, algunos problemas importantes
incluyen la contaminación, la evaporación, la susceptibilidad a las condiciones
climáticas y las grandes necesidades de terreno (generalmente se utilizan estanques
abiertos poco profundos para permitir una buena penetración de la luz solar). Por el
contrario, los sistemas PBR cerrados pueden eliminar problemas de contaminación y
evaporación y lograr mayores concentraciones de biomasa.
Por otro lado, las Cianobacterias son organismos microscópicos, bacterias Gram-
negativas que contienen clorofila, lo que les permite realizar fotosíntesis. Muchas
especies de cianobacterias producen toxinas, las cuales son contenidas en la célula o
exudadas al medio, por lo que pueden aparecer disueltas en el agua, constituyéndose
en un problema de significancia para la salud humana y ambiental.
En general, tanto las microalgas como las cianobacterias tienen aplicaciones
potenciales en la producción sostenible de diversos productos. La elección entre ellos
dependerá de los requisitos específicos del proceso y los productos deseados.
2. Medio de Cultivo
- Oxígeno: suministrado tanto por el H2O como por el CO2. Sin embargo, es
sólo el oxígeno del CO2 el que se incorpora en la biomasa.
- Nitrógeno: el cuarto elemento más importante por volumen ya que forma parte
de las proteínas y nucleótidos de la biomasa. Suministrado como NO3- y NH4+.
- Fósforo: suministrado como fosfato, forma parte de importantes intermedios
metabólicos, lípidos, enzimas y multitud de especies bioquímicas.
Adicionalmente existe una gran cantidad de otros nutrientes que pueden ser
necesarios dependiendo de la especie. Según la cantidad en la que se necesiten se
suelen clasificar como macronutrientes o micronutrientes, ya que es importante para la
preparación del medio.
3.2 pH
El crecimiento de las microalgas puede verse afectado significativamente por los
cambios en el pH, porque el pH determina la solubilidad y disponibilidad de CO2 y
otros nutrientes esenciales, las actividades de las enzimas intracelulares y asociadas a
la pared celular, y la producción de diversos productos comercialmente importantes. El
pH ácido altera la capacidad de absorción de nutrientes, interfiere con los procesos
celulares e induce toxicidad por metales. El pH alcalino reduce la afinidad de las algas
por el CO2 y aumenta la flexibilidad de las células madre, retrasando la finalización del
ciclo celular. La asimilación fotosintética del carbono tiene el potencial de aumentar el
pH extracelular, y la liberación de CO2 por la respiración en la oscuridad puede
disminuir el pH.
El pH adecuado para la mayoría de los microorganismos fototróficos varía según la
especie, aproximadamente en el rango de 6 a10. El pH óptimo para cualquier cepa
aislada es el valor de pH al que la cepa se adapta para crecer, y cualquier cambio
puede afectar el crecimiento y la concentración de biomasa.
La mayoría de las microalgas crecen en rangos de pH desde neutro hasta alcalinidad
débil, todo depende de qué tipo de microalga sea.
3.3 Temperatura.
La temperatura es uno de los factores más importantes en el cultivo de
microorganismos y está altamente correlacionada con la tasa de crecimiento, esto se
debe a que el crecimiento de microorganismos y células fotosintéticas crecen a
medida que aumenta la temperatura llegando a una Tº óptima y luego decae ese
crecimiento.
Es necesario tener en cuenta que toda la luz absorbida por las paredes de
fotobiorreactor o por el cultivo que no es usada en la fotosíntesis, se convierte en
energía térmica y puede dar lugar a un aumento de la temperatura del cultivo. Existe
un amplio rango de temperaturas para las distintas variedades de microorganismos,
pero todos ellas presentan un rango fuera del cual se ven inhibidos o incluso mueren.
Si la fluctuación entre la T máxima y mínima es muy amplia, puede ser igual de
importante el calentamiento durante las horas de poca luz como la refrigeración
durante las horas del día de mayor iluminación.
3.6 Agitación/Mezcla
Buenas condiciones de mezcla aseguran una distribución uniforme de nutrientes y la
utilización eficiente de la luz, facilita la transferencia de calor, promueve el intercambio
de gases y mantiene las células en suspensión. En general, el sistema de agitación en
este tipo de reactores se puede dividir en tipo no mecánico, como levantamiento de
aire, columna de burbujas y PBR tubular; y del tipo mecánico, como tanque agitado y
estanque de canalización.
Sin embargo, la turbulencia creada por estos métodos puede provocar estrés
hidrodinámico, dando como consecuencia la rotura celular y la inhibición de la
actividad metabólica. La tolerancia de las microalgas a la turbulencia depende de la
cepa y debe evaluarse individualmente. Mediante una agitación adecuada, la mayoría
de los microorganismos y nutrientes fototróficos podrían distribuirse uniformemente en
el medio, lo que es beneficioso para el crecimiento celular. Una mezcla adecuada en
los PBR también ayuda a proporcionar una mejor distribución de la luz sobre las
celdas, como ya se mencionó. Además, el intercambio de gases eficiente siempre está
asociado con una agitación adecuada durante el cultivo, lo que puede proporcionar
una mejor transferencia de masa de CO2 a las células, así como una eliminación
efectiva de oxígeno gaseoso y el calor que se acumula durante el proceso.
4. Tipos de fotobiorreactores.
Es requisito fundamental que el PBR sea efectivo para la producción masiva de
biomasa a partir de microalgas que presentan distintas composiciones y
funcionalidades. En general, los PBR constan de un sistema de 4 fases: células como
fase sólida, medio de crecimiento como fase líquida, fase gaseosa y campo de
radiación de luz. Entonces, al evaluar el diseño de los PBR, se deben considerar los
siguientes aspectos:
- Intercambio gaseoso
- Patrón de mezcla
- Eficiencia del suministro de luz
- Control de contaminación
- Material de construcción
- Configuración geométrica
Además, el producto final deseado en la biomasa cultivada y la calidad de los
productos objetivo son factores clave para determinar el mejor diseño de los PBR.
Sin embargo, la operación y construcción a gran escala de los mismos lleva asociado
altos costos. La eficiencia de los fotobiorreactores está influenciada por varios factores
que deben ser analizados con precisión durante el proceso de diseño.
Es necesario considerar diversos factores al diseñar sistemas cerrados:
1. El PBR cerrado debería permitir el cultivo de diversas cepas de microalgas.
2. El PBR cerrado debe proporcionar una iluminación uniforme de la superficie de
cultivo y una rápida transferencia de masa, de CO2 y de O2.
3. El PBR cerrado debería minimizar la contaminación de las superficies de
transmisión de luz de los PBR.
4. El PBR cerrado debería permitir la transferencia de masa a tasas altas para
evitar la supresión de células.
5. El PBR cerrado debería poder funcionar en condiciones de intensa formación
de espuma causada por las altas tasas de transferencia de masa.
6. El PBR cerrado debe mostrar una alta relación iluminada de área de superficie
a volumen (A/V) y garantizar la máxima iluminación para evitar el efecto de
sombreado de luz.
En general, los principales objetivos que deben perseguirse para que los PBRs sean
rentables y respetuosos con el medio ambiente son:
a. Maximizar la captación, distribución y utilización de la luz, ya que el suministro
de luz es un parámetro clave a considerar en la eficiencia de los PBRs
cerrados.
b. Control preciso de los parámetros de los cultivos (pH, temperatura, etc.), para
promover la bio-fijación de la fuente inorgánica de carbono, generalmente el
CO2.
c. Minimizar los costos operacionales y de capital.
d. Reducir el consumo energético.
En conclusión, de todos los factores mencionados, la provisión para la penetración de
la luz influenciada por la relación superficie/volumen es el principal parámetro que
afecta el diseño del reactor. Para lograr una alta relación entre superficie y volumen,
se han desarrollado varios tipos de PBR. Por ejemplo, los reactores tubulares y de
placa plana son la opción más popular y están diseñados específicamente para captar
eficientemente la luz solar. Por otro lado, el fermentador tipo PBR está diseñado para
iluminación artificial.
Dependiendo de su diseño, los PBR se clasifican fundamentalmente en PBR tubulares
y PBR de placa plana. También hay otros tipos de PBR y nuevas configuraciones de
PBR existentes que están siendo investigadas y desarrolladas, tales como PBRs con
iluminación interna, uso del desplazamiento espectral, PBRs de membrana o plastic
bag PBRs.
5. Cinética
5.1 Utilización de la luz
Para poder conocer los modelos que rigen el crecimiento de las microalgas, debemos
previamente analizar los efectos de la luz en los PBR.
Debido a que el medio de cultivo está en constante movimiento, las células solo son
expuestas por breves instantes a la luz, lo que determina la relación de períodos
luz/oscuridad (L/O). La proporción óptima entre zona iluminada y zona oscura sería
15% correspondiente a la zona fótica (en la que penetra la luz) y un 85% a las algas
que estarían en oscuridad en cada momento. En condiciones reales, el factor que
determina la actividad fotosintética es la cantidad de energía disponible para cada
célula individual, más que la cantidad de energía luminosa incidente. Por todo esto es
importante la selección correcta de la fuente lumínica al momento del diseño del
fotobiorreactor (artificial o natural) y su disposición.
Imagen 11. Trayectoria de la luz y los ciclos de luz/oscuridad.
Los parámetros que pueden considerarse como básicos para describir la disponibilidad
de energía bajo una iluminación intermitente son dos, la relación de los periodos
luz/oscuridad (L/O) y la frecuencia de los ciclos L/O, que, junto con la intensidad de la
luz y la trayectoria de la luz en el reactor, establecen en gran medida el régimen de
iluminación, el cual es un indicador de la disponibilidad de luz para una célula
individual. Para asegurar la máxima actividad fotosintética y la mejor utilización de la
luz incidente, se requiere de un régimen de iluminación óptimo. No obstante, a pesar
de su importancia, éste no puede determinarse cuantitativamente, razón por la cual es
común usar los parámetros citados antes para caracterizar la incidencia de luz en los
fotobiorreactores.
Todo esto es de gran importancia, considerando la fase oscura de la fotosíntesis
que es el proceso bioquímico mediante el cual las plantas convierten el dióxido de
carbono en glucosa. Es oscura porque no requiere de la luz y se la conoce también
como fase de fijación de carbono. En esta fase, la energía química es suministrada por
los productos generados en la fase luminosa.
La fase luminosa de la fotosíntesis es la primera parte del proceso fotosintético que
requiere la presencia de luz para obtener energía química en forma de ATP y NADPH.
A partir de la disociación de moléculas de agua, generará oxígeno.
La materia prima fundamental para el proceso en la fase oscura es el carbono, que se
obtiene a partir del dióxido de carbono. El producto final son los carbohidratos o
azúcares simples.
Estos compuestos de carbono que se obtienen, son la base fundamental de las
estructuras orgánicas de los seres vivos.
1 - Exceso de luz.
2 - Baja temperatura.
El segundo caso tiene lugar típicamente durante las mañanas cuando el cultivo está
frio y requiere calentar el cultivo antes del amanecer o sombrear el PBR hasta que se
caliente. La baja temperatura ralentiza las reacciones bioquímicas y hace que los e- se
metabolicen lentamente.
El diseño correcto del FBR implica tener siempre un suministro correcto de CO2.
Modelo que tiene la particularidad de tener sólo 2 parámetros: µmax e I max que es la
irradiancia a la que se produce la máxima velocidad específica de crecimiento.
6 Productividad
La productividad se usa para relacionar la productividad volumétrica (Pv) o la
productividad de área (Pa) y el cambio de concentración de biomasa con el tiempo
(dx/dt):
𝑉
𝑃𝑎 = 𝑃𝑣 ( ) = 𝜇
𝐴
Siendo, A es la superficie limitada, d el espesor del cultivo y V el volumen del cultivo.
Se puede estimar la productividad volumétrica, evaluando las pendientes en la curva
de crecimiento en la zona limitada por la luz:
𝑑𝑋 𝐴
𝑃𝑣 = ( ) = 𝜇 ∗ 𝑋 ∗ 𝑑𝑒 ∗ ( )
𝑑𝑡 𝑉
Sabiendo que, de es el espesor equivalente del cultivo (espesor que tendría si la
geometría del reactor fuese plana).
Esta ecuación es útil para demostrar el efecto de la razón A/V (área efectiva iluminada
del reactor), X (concentración de biomasa) es la única variable independiente entre los
parámetros de la ecuación de productividad.
Para lograr valores adecuados de productividad, se emplea procesos de cultivo
continuos, donde es retirada la biomasa para mantener X en un valor constante y
adecuado, esto se debe a que la funcionalidad de Pv con X presenta un máximo.
7 Ecuaciones de diseño
Para un componente “i” cualquiera de un cultivo celular, incluida la biomasa, se puede
plantear el siguiente balance de materia en el biorreactor:
𝑑(𝑉 ∗ 𝐶𝑖)
= 𝐹𝑜 ∗ 𝐶𝑖𝑜 − 𝐹𝑠 ∗ 𝐶𝑖𝑠 + 𝑉 ∗ 𝑟𝑓𝑖 − 𝑉 ∗ 𝑟𝑐𝑖
𝑑𝑡
Donde:
V: volumen de cultivo
Fo: caudal de alimentación
Fs: caudal de salida
Cio: concentración del componente "i" en la
alimentación
Ci: concentración del componente "i" en el caudal de
salida
rfi : velocidad de formación (f) del componente "i"
rci: velocidad de consumo (c) del componente "i”
Bajo el supuesto de que, el cultivo está perfectamente mezclado se puede asumir que
Ci es idéntica a la concentración que hay dentro del bioreactor.
7.1 Balances de materia
En biorreactores continuos la velocidad de crecimiento específico (μ) de un
microorganismo es igual a la velocidad o tasa de dilución (D):
𝜇=𝐷
La tasa de dilución se define como la razón entre flujo promedio y el volumen del
cultivo en el biorreactor:
𝐹
𝐷=
𝑉
- Balance de materia general
𝑑(𝐶𝑖)
𝑉∗ = 𝐹 ∗ (𝐶𝑖𝑜 − 𝐶𝑖) + 𝑉 ∗ (𝑟𝑓𝑖 − 𝑟𝑐𝑖)
𝑑𝑡
- Balance de materia para Biomasa
𝑑(𝑋)
𝑉∗ = −𝐹 ∗ 𝑋 + 𝑉 ∗ 𝑟𝑓𝑥
𝑑𝑡
- Balance de materia para el sustrato limitante
𝑑(𝑆)
𝑣∗ = 𝐹 ∗ (𝑆𝑜 − 𝑆) + 𝑉 ∗ 𝑟𝑠
𝑑𝑡
- Balance de materia para el producto
𝑑(𝑃)
𝑉∗ = −𝐹 ∗ 𝑂 + 𝑉 ∗ 𝑟𝑝
𝑑𝑡
De esta forma la tasa de flujo F, determina la velocidad de crecimiento y la
productividad:
𝐹
𝜇=𝐷 𝐷=𝑉 𝑃𝑣 = 𝐷 ∗ 𝑋
8 Aplicaciones comerciales
Las microalgas han sido reconocidas como una fuente viable de ingredientes
funcionales con efectos positivos para la salud porque estos microorganismos
producen componentes bioactivos como polisacáridos, pigmentos naturales, minerales
esenciales, vitaminas, enzimas y péptidos.
Por lo que sus aplicaciones abarcan desde producción masiva de biomasa a partir de
microalgas, producción de biocombustibles, producción de alimentos, fertilizantes y
productos farmacéuticos, además para el tratamiento de aire y de aguas
9 Bibliografía
Imágenes del filo de plantas verdes Desmodesmus (coocan.jp)
https://www.cajamar.es/storage/documents/018-microalgas2-1467367279-9023d.pdf
https://uvadoc.uva.es/bitstream/handle/10324/44886/TFG-I-
1688.pdf;jsessionid=5D77B7E8F959CC330C106CB53390A95F?sequence=1
dise-o-de-un-fotobiorreactor-para-la-obtenci-n-de-biomol-culas-fran-sanz.pdf (upc.edu)
(PDF) FOTOBIORREACTOR: HERRAMIENTA PARA CULTIVO DE
CIANOBACTERIAS (researchgate.net)
Modelos de dinamicos crecimiento de limitacion por luz (ual.es)
Plantilla PFC (upc.edu)
02a_1487_520.pdf (aaiq.org.ar)(PDF) Agitación y transferencia de masa de CO² en
fotobiorreactores tipo airlift (researchgate.net)