LABORATORIO DE

INMUNOLOGÍA
SECCIÓN B
PRÁCTICA 1.- AGLUTINACIÓN Y
GRUPOS SANGUÍNEOS; PRUEBAS
DE INMUNOCOMPATIBILIDAD
PROFRA.: MARÍA ERNESTINA
BARTOLO ALAMEDA
DIEGO SAID REYES TÉLLEZ
SEMESTRE 2
00/02/23
 MATERIALES Y MÉTODO
MATERIALES
 8 tubos de ensayo
 Lancetas
 Torundas con alcohol
 Tubos de 12 x 75 mm
 Tapones de hule
 Gradilla para tubos
 2 pipetas Pasteur
 Envase para descartar material utilizado

Reactivos

 Antisueros de grupos sanguíneos (anti A, anti B, anti

AB, anti D, reactivo de Coombs)
 Solución salina isotónica

Muestra biológica

 Muestra de sangre del paciente (3ml en tubo sin

anticoagulante)
 Hematíes: A, B y O al 5%

Equipos

 Centrífuga clínica
 Rotor de placas

Procedimiento
1) Determinación de ABO y RH (D) en hematíes (Grupo
sanguíneo directo) Aglutinación directa

1.- Se prepara un tubo de 12 x 75 con solución salina,

previamente rotulado con el nombre del paciente
2.- Se realiza venopunción con sistema vacutainer en un
tubo morado con EDTA
3.- Se coloca 1 gota de muestra sanguínea en el tubo de
12 x 75 con solución salina, mezclar inmediatamente y
cuidar que no se coagule
 4.- El tubo con muestra sanguínea se debe centrifugar a
3500 rpm por 5 min, (previamente nivelados)
5.- Rotular 4 tubos con el antisuero que será utilizado
6.- Agregar 1 gota de antisueros (anti A, anti B, anti
AD, anti D)
7.- Colocar una gota de suspensión de eritrocitos en
cada tubo de ensayo con ayuda de una pipeta Pasteur
8.- Mezclar suavemente, hasta que se formen unas
moléculas compactas
9.- Colocar los tubos previamente nivelados en una
centrífuga por 30 segundos a 3500 rpm
10.- Leer y reportar en cruces los resultados

2) Determinación de anticuerpos anti-ABO (grupo sanguíneo)

en suero o plasma, Grupo sanguíneo inverso

1.- Centrifugar la sangre del tubo sin anticoagulante 5

min a 400 gr o 3500 rpm
2.- Extraer el suero (o plasma) y depositarlo en un tubo
de ensayo
3.- Marcar tres tubos: uno con la letra A, otro con la
letra B y un último con la letra O
4.- Agregar una gota de eritrocitos A al 5% al tubo
marcado como A, una gota de eritrocitos B al 5% al tubo
marcado como B, y una gota de eritrocitos O al 5% al
tubo marcado como O
5.- colocar 2 gotas de suero de la muestra problema en
los tubos marcados
6.- Mezclar suavemente y centrifugar 30 seg a 3500 rpm
7.- Leer y reportar en cruces los resultados de la
reacción
 Diagrama de flujo

Determinación de ABO y
RH
1.- Preparar un tubo 3.- Con ayuda de una
2.- Realizar
de solución salina pipeta, colocar 3
venopunción con
rotulado con el gotas en el tubo con
tubo EDTA
nombre del paciente solución

5.- Rotular los tubos 6.- Colocar 1 gota de

4.- Centrifugar el tubo
de 12x75 con el antisuero en el tubo
a 3500 rpm por 5 min
antisuero a utilizar correspondiente

7.- Colocar 1 gota de

8.- Mezclar la 9.- Centrifugar los
la muestra de
muestra con los tubos a 3500 rpm por
eritrocitos en cada
antisueros y observar 30 seg
tubo con antisuero