FISIOLOGÍA VEGETAL 2

CURSO 2021-2022
TEMA 3 (PARTE I): Las auxinas. Generalidades. Tipos
de auxinas. Biosíntesis y metabolismo. Implicaciones
fisiológicas. Usos prácticos.
 DESCUBRIMIENTO DE LAS HORMONAS
VEGETALES
• A finales del siglo XIX, Julius von
Sachs postuló la existencia de
sustancias morfogéneticas que se
moverían de forma polarizada a
través de la planta.
• Estas sustancias determinarían la
forma de cada órgano.

De Uploaded by de:User:Sixat on de:WP at 00:13, 28. Apr 2004,

CC BY-SA 3.0,
https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=401267
 DESCUBRIMIENTO DE LAS HORMONAS
VEGETALES
• En 1881, Charles Darwin y su
hijo publicaron el libro “The
Power of Movement in Plants”,
donde detallaban algunos de
los primeros experimentos
conocidos sobre sustancias
reguladoras de crecimiento.
• En sus estudios usaron
coleóptilos de gramíneas, que
son estructuras que protegen la
primera hoja de estas plantas.
http://biologiaterceroiem.blogspot.com.es/2011/08/trabajo-
practico-n-4.html
Los coleóptilos son sistemas Primera hoja
experimentales utilizados
Coleóptilo
para estudios sobre la
elongación de las células
vegetales Zona de
elongación
Primer
internodo

raíces

Haces
vasculares

Sección transversal
 DESCUBRIMIENTO DE LAS HORMONAS
VEGETALES
• Los Darwin concluyeron
que cuando unas plántulas
son expuestas libremente a
una luz lateral se transmite
cierta influencia desde la
parte superior a la parte
inferior, que obliga a la
planta a curvarse.

http://biologiapuntocom.blogspot.com.es/2012/06/practico-
auxinas.html
 DESCUBRIMIENTO DE LAS HORMONAS
VEGETALES
• Paál (1919) consiguió provocar
la curvatura en un coleóptilo
decapitado, después de colocar
de nuevo el ápice, pero
desplazado respecto a su
posición inicial.
• Esto sucedía en total oscuridad.
• La sustancia estimuladora se
difundía hacia abajo solo por
un lado del coleóptilo.
DESCUBRIMIENTO
DE LAS HORMONAS
VEGETALES
• En 1926, el fisiólogo
vegetal holandés F. W.
Went consiguió aislar esta
"influencia" de las
plantas.
 Experimentos de Went.
• (a) Went cortó los ápices de los coleoptilos y los colocó en agar durante 1 hora.
• (b) El agar era luego cortado en pequeños bloques y cada uno de ellos se
colocaba en un lado de los coleoptilos decapitados de las plántulas.
• (c) Las plántulas, que se mantenían en oscuridad durante la experiencia, se
curvaban entonces hacia el lado opuesto a donde se había colocado el bloque de
agar.
• (d). A partir de estos resultados, Went concluyó que la "influencia" que causaba
la curvatura en la plántula era un compuesto químico y que se acumulaba en el
lado opuesto a la zona iluminada.
• (e) La curvatura es el resultado de la influencia de la hormona auxina. Su efecto
es el de promover el alargamiento celular. En el experimento de Went, las
moléculas de auxina (puntitos rojos) se transfirieron primero al agar y luego,
mediante los cubitos de agar, a un lado del brote de la plántula.
• Con estos experimentos, Went
demostró que el ápice del
coleoptilo ejerce sus efectos
mediante un estímulo químico (es
decir, una hormona), más bien que
con un estímulo físico, tal como
uno de naturaleza eléctrica.

Este estímulo comenzó a

conocerse con el nombre de
auxina, término creado por Went
a partir de la palabra griega
auxein, "aumentar".
http://biologiapuntocom.blogspot.com.es/2012/06/
practico-auxinas.html
 BIOENSAYOS
• Los experimentos de Went (1928)
fueron los primeros bioensayos
realizados en Fisiología Vegetal.

Un bioensayo es un test que utiliza material

biológico y que permite cuantificar la
cantidad de un estimulo aplicado y la
respuesta fisiológica observada.

TEST DE CURVATURA DEL

COLEÓPTILO DE AVENA https://es.slideshare.net/josemanuel7160/7-biologa-
vegetal-ttans-9
TEST DE CURVATURA DEL
COLEÓPTILO DE AVENA
 Greater growth is caused by
increased auxin accumulation
Auxin accumulation
time
vertical

horizontal

horizontal vertical

Parker, K.E., and Briggs, W.R. (1990) Transport of indole-3-acetic acid during gravitropism in intact maize coleoptiles. Plant Physiol. 94: 1763-1769.
 EL ÁCIDO INDOL-ACÉTICO (AIA)

• Dada la escasa sensibilidad de las

técnicas analíticas de la época, no
fue hasta 1934-35 que dos grupos
de investigación lograron aislar e
identificar la sustancia responsable
de la curvatura del coleóptilo.

Fue identificada como el ÁCIDO INDOL-

ACÉTICO (AIA) y se denominó auxina.
 La auxina estimula la elongación de las
secciones de coleóptilos de avena
• TEST DE ELONGACIÓN DEL
COLEÓPTILO DE AVENA
• Imagen: Consultar fig. 19_2 de TAIZ &
ZEIGER (2006)
 DEFINICIÓN DE AUXINA
• Las auxinas son compuestos con actividades biológicas
similares al AIA,
• que promueven la elongación celular en el coleóptilo y en las
secciones de tallo,
• la división celular en cultivos de callos en presencia de
citoquininas,
• la formación de raíces adventicias en hojas y tallos cortados,
• así como otros fenómenos de desarrollo relacionados con la
acción del AIA.
• (ver TAIZ & ZEIGER, 2006, p. 812)
 OTRAS SUSTANCIAS CON ACTIVIDAD AUXÍNICA
• El descubrimiento del AIA CONCEPTOS
permitió llevar a cabo • FITOHORMONA
investigaciones para
• REGULADOR DE
buscar nuevas estructuras
CRECIMIENTO
que tuvieran los mismos
efectos sobre el • HERBICIDA (reguladores
crecimiento de las plantas. a concentraciones altas)
AUXINAS NATURALES
EJEMPLOS DE AUXINAS SINTÉTICAS
REQUERIMIENTOS ESTRUCTURALES
▪ Una auxina debe poseer una estructura con una
carga negativa en el grupo carboxilo.
▪ Esta carga negativa debe estar separada de otra
carga residual positiva por una distancia de 0,55
nm.
▪ La carga positiva puede estar localizada sobre un
anillo indólico o aromático.
▪ El anillo no es estrictamente necesario. Ej. N,N-
DCMTC no tiene anillo pero si la distancia
adecuada entre las cargas y presenta actividad
auxínica.
ACTIVIDAD AUXÍNICA
la concentración
de la hormona

• Las respuestas que se

Existen concentraciones
producen tras la aplicación
óptimas, supraóptimas e
de auxinas a las plantas
infraóptimas.
dependen de

del tipo de órgano

de que se trate.
Auxinas ¿Cómo se regulan los niveles
endógenos?
HOMEOSTASIS
DEL AIA

Indol-glicerol fosfato TRANSPORTE

Triptófano in ex

[ CONCENTRACIÓN ]
LOCALIZACIÓN TISULAR Y
BIOSINTESIS CONJUGACION
CELULAR
“in situ”

?
Fuentes CRECIMIENTO DEGRADACION
exógenas Y (Oxidación)
(microorganismos) DESARROLLO
Fuente: Fig. 19-5 AZCÓN-BIETO & TALÓN
(2008)
Cada órgano presenta una
sensibilidad diferente a la auxina

• Las raíces son más sensibles

que las yemas, y éstas más
sensibles que los tallos.

Ej. Aplicación de 10-8 M de AIA a los

tres órganos mostrados en la figura.

Fuente: FIG. 19.4: AZCÓN-BIETO & TALÓN (2008)

 Factores de los que depende la sensibilidad
Son muy diversos pero los más importantes son:
• - La concentración de receptores hormonales.
• - La efectividad de la unión receptor-hormona
• - La cadena de procesos siguientes a la unión
receptor-hormona que conduce a la respuesta
final.
 Tools in auxin research

•Auxin quantification from tissue or cell extracts

•Expression of auxin-induced genes

•In situ detection by auxin-specific antibodies

•Orientation of PIN auxin-transport proteins

© 2013 American Society of Plant Biologists

 ANÁLISIS DE LA CONCENTRACIÓN ENDÓGENA DE AUXINA

• Concentración
endógena de auxina:
nanogramos de
sustancia activa /
gramo PF. (En
ocasiones 1 pg)
• Esto requiere técnicas
analíticas de
sensibilidad y
especificidad muy
elevadas.
 ANÁLISIS DE LA CONCENTRACIÓN ENDÓGENA
DE AUXINA POR GC-MS
• En la imagen, los tres espectros de
masas que se obtienen pertenecen
a los tres picos del cromatograma
inicial, que representan a su vez a
tres compuestos distintos.

El espectro de masas es la representación gráfica de

la espectrometría de masas (MS), potente técnica
analítica utilizada para la identificación y
cuantificación de compuestos así como la estructura
química de algunas moléculas.
Es una de las técnicas más importantes utilizadas en
análisis químico. Se basa fundamentalmente en la
separación de partículas moleculares o atómicas por
su diferente masa
http://slyciencia.blogspot.com.es/2011/09/
ANÁLISIS DE LA CONCENTRACIÓN ENDÓGENA
DE AUXINA MEDIANTE TEST ELISA
• Cuando los extractos están
muy purificados se puede
utilizar un inmunoensayo
para cuantificar el AIA.
Chemical analysis of auxin levels from plant
extracts
Chemical analysis by gas
chromatography-mass
spectrometry (GC-MS) is an
important way to quantify auxin.

This experiment
shows an auxin
gradient from tip to
base in young
leaves but not
mature leaves.

Edlund, A., Eklof, S., Sundberg, B., Moritz, T., and Sandberg, G. (1995) A microscale technique for gas chromatography-mass
spectrometry measurements of picogram amounts of indole-3-acetic acid in plant tissues.Plant Physiol. 108: 1043-1047.
 Cell-specific auxin measurements
Dissociate Recently the resolution of
cells and GC-MS measurements
isolate
protoplasts have been greatly refined.

Separate into
single-cells

Charged plates deflect

cells into labeled and
Laser unlabeled pools.

Start with roots

expressing GFP in
defined cell populations

Petersson, S.V., Johansson, A.I., Kowalczyk, M., Makoveychuk, A., Wang, J.Y., Moritz, T., Grebe, M., Benfey, P.N., Sandberg, G., and Ljung, K.(2009) An auxin
gradient and maximum in the Arabidopsis root apex shown by high-resolution cell-specific analysis of IAA distribution and synthesis. Plant Cell 21:1659-1668.
 Cell-specific auxin measurements

Auxin amount

Using this method, a high

resolution map has been
The highest auxin produced of auxin concentration
concentration is in in the Arabidopsis root apex.
the quiescent
center (QC) of the
root apex.
QC

Petersson, S.V., Johansson, A.I., Kowalczyk, M., Makoveychuk, A., Wang, J.Y., Moritz, T., Grebe, M., Benfey, P.N., Sandberg, G., and Ljung, K.(2009) An auxin
gradient and maximum in the Arabidopsis root apex shown by high-resolution cell-specific analysis of IAA distribution and synthesis. Plant Cell 21:1659-1668.
Monitoring auxin response by reporter gene
transcription
TGTCTC GUS (or GFP)

AuxRE
Hours of
The DR5 reporter construct is staining
widely used to monitor auxin-
response level.

DR5 consists of seven repeats of

an auxin-response element
(AuxRE) which is a binding site
for auxin-responsive transcription
factors (ARFs).

Auxin-response level increases

with exogenous auxin (NAA)
Ulmasov, T., Murfett, J., Hagen, G., and Guilfoyle, T.J. (1997). Aux/1AA proteins repress expression of reporter genes
containing natural and highly active synthetic auxin response elements. Plant Cell 9: 1963-1971.
Auxin flow can be inferred from PIN protein
orientation
A shoot apical
meristem imaged
over time, with the
orientation of PIN
proteins indicated by
arrows.

Auxin transport is facilitated by auxin efflux carriers

including PIN proteins, which can have a polar distribution
on the cell membrane. Analysis of the orientation of PIN
proteins provides an approximate picture of intercellular
auxin transport directions.

Reprinted from Heisler, M.G., et al. (2005). Patterns of auxin transport and gene expression during primordium development revealed by live imaging of the
Arabidopsis inflorescence meristem. Curr. Biol. 15: 1899–1911, with permission from Elsevier.

© 2013 American Society of Plant Biologists

 Auxin signaling pathway

Cell
Perception ABP1 surface Biological
Catabolism Conjugation (receptor) Functions
proteins

Synthesis IAA Transport Perception TF activation/ Target Biological

(receptor) inactivation genes Functions

Auxin’s effects depend upon its synthesis, transport,

perception, signaling, and target gene responses. Most of
these functions are controlled by many genes with differing
cell specificities.

Adapted from Kieffer, M., Neve, J., and Kepinski, S. (2010). Defining auxin response contexts in plant development. Curr. Opin. Plant Biol.13: 12-20.
Auxin response pathway – feedback regulation

Cell
Perception ABP1 surface Biological
Catabolism Conjugation (receptor) Functions
proteins

Synthesis IAA Transport Perception TF activation/ Target Biological

(receptor) inactivation genes Functions

The pathway is extensively self-regulated

through positive and negative feedback.

Adapted from Kieffer, M., Neve, J., and Kepinski, S. (2010). Defining auxin response contexts in plant development. Curr. Opin. Plant Biol.13: 12-20.
Auxin response pathway – feedback regulation

Cell
Perception ABP1 surface Biological
Catabolism Conjugation (receptor) Functions
proteins

Synthesis IAA Transport Perception TF activation/ Target Biological

(receptor) inactivation genes Functions

Gravity, Nutrient
nutrient status, ionic
Ionic environment, pathogens,
Pathogens,
Light: directionality, intensity, wavelength

Ethylene, brassinosteroids, cytokinins, gibberellins, jasmonates, strigolactones....

Adapted from Kieffer, M., Neve, J., and Kepinski, S. (2010). Defining auxin response contexts in plant development. Curr. Opin. Plant Biol.13: 12-20.
Biosíntesis y metabolismo
 El AIA puede sintetizarse en una ramificación
del ácido siquímico
• Ácido shikímico (siquímico)
• El ácido siquímico es un
intermediario bioquímico
importante en plantas y
microorganismos.
El ácido siquímico es un
precursor de:
• los aminoácidos aromáticos
fenilalanina y tirosina,
• Indol, derivados del indol y el
aminoácido aromático
triptófano,
• muchos alcaloides y otros
metabolitos aromáticos
• taninos, flavonoides, y lignina.
• La biosíntesis de AIA
puede ser:
• Dependiente del
triptófano
• Independiente del
triptófano (a través del
indol-glicerol-P)

El principal precursor del

AIA es el triptófano
 Biosíntesis de AIA a partir de triptófano
• Puede producirse por medio de diferentes rutas
• RUTA DEL ÁCIDO INDOLPIRÚVICO
• Es la ruta más frecuente en la mayoría de las especies
• RUTA DE LA TRIPTAMINA
• Algunas especies presentan esta ruta junto con la del
indolpirúvico
• RUTA DE LA INDOL-ACETALDOXIMA
• Característica de la familia Brasicaceae
• RUTA DE LA INDOL-ACETAMIDA
• En plantas y en bacterias patógenas como A. tumefaciens
Auxin is produced through several pathways
The IAOx pathway
IAA is produced from may be restricted to
tryptophan (Trp) via IAOx IAN Arabidopsis and its
several pathways, close relatives
and one Trp-independent IAOx pathway

Trp-dependent pathways
pathway
IAM

IAM pathway
Indole Trp IAA
TAM IAAld

TAM pathway

IPA
IPA pathway

Trp-independent pathway
Adapted from Rosquete M.R., Barbez, E. and Kleine-Vehn, J. (2011) Cellular auxin homeostasis: gatekeeping is housekeeping. Mol. Plant 5: 772–
786. See also Mashiguchi, K.,et al. (2011) The main auxin biosynthesis pathway in Arabidopsis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108: 18512–18517.
.
Most auxin in plants is synthesised by a two-step
IPA pathway
Tryptophan
Light quality
The IPA pathway Shade
Tryptophan amino acid
is a conserved
transferase 1 (TAA1) Temperature
two-step pathway.
The activity level
of the two
enzymes are Indole-3-pyruvic acid
regulated in (IPA)
diverse ways Flavin monooxygenase Cell-specific
(YUCCA) expression
Encoded by 11 genes in
Arabidopsis
Rate-limiting step
IAA Nutrients
Cheng, Y., Dai, X. and Zhao, Y. (2007). Auxin synthesized by the YUCCA flavin monooxygenases is essential for embryogenesis and leaf formation in Arabidopsis. Plant Cell 19: 2430-2439.

© 2013 American Society of Plant Biologists

MUY IMPORTANTE
Este esquema actualizado
sustituye al de la fig. 19.6 del
AZCÓN-BIETO & TALÓN (2008)
Auxin synthesis and homeostasis

indole 3-butyric acid

 SITIOS DE BIOSÍNTESIS DE AIA
PRINCIPALES LUGARES DE BIOSÍNTESIS
• Una alta concentración DE AIA:
de hormona en un • Ápices de coleótilos
determinado tejido u • Tallos jóvenes
órgano no
• Hojas jóvenes
necesariamente implica
que sea un lugar con alta • Cambium
capacidad biosintética. • Frutos jóvenes y semillas en
desarrollo ¿síntesis o acumulación?
Visualización de AIA con la construcción
DR5::GUS
• http://plantphys.info/plant
_physiology/auxin2.shtml
 Visualización de AIA con la construcción DR5::GFP Y
DR5::GUS EN RAICES DE ALGODÓN

http://www.plantphysiol.org/
content/162/3/1669
DR5 expression reveals high auxin activity in the
root apex and QC

Reprinted by permission from Macmillan Publishers, Ltd. Blilou, I., et al. (2005) The PIN auxin efflux
facilitator network controls growth and patterning in Arabidopsis roots. Nature 433: 39-44.
Auxin homeostasis is also regulated by
conjugation and degradation
Overexpression of an auxin conjugating enzyme
encoded by a GH3 gene reduces auxin levels in
the plant and causes a dwarfed phenotype.
IAA
Rice

GH3 genes
are auxin- Arabidopsis
(GH3 genes)
induced

GH3.13
Wild-type
overexpression
GH3.13
Wild-type
overexpression
Zhang, S.-W., et al., (2009) Altered architecture and enhanced drought tolerance in rice via the down-regulation of indole-3-acetic acid by TLD1/OsGH3.13 activation. Plant
Physiol. 151:1889-1901. Staswick, P.E., et al., (2005) Characterization of an Arabidopsis enzyme family that conjugates amino acids to indole-3-acetic acid. Plant Cell 17: 616-627.
See also Ludwig-Müller, J. (2011) Auxin conjugates: their role for plant development and in the evolution of land plants. J. Exp. Bot. 62: 1757–1773.

© 2013 American Society of Plant Biologists

 CONJUGACIÓN DE AIA
• El AIA se puede unir • En algunos tejidos la
covalentemente a otras
moléculas (AUXINA LIGADA O
mayor parte del AIA se
CONJUGADA) encuentra en forma de
• Es frecuente la conjugación con conjugados.
• AMINOÁCIDOS
• GLUCOSA
• También puede estar unido a
• PÉPTIDOS Y PROTEÍNAS
• OLIGOSACÁRIDOS
Fig. del Azcon-Bieto & Talón (2008)
(Fig. 19-8)
 FUNCIONES DE LAS AUXINAS CONJUGADAS
❖Almacenamiento o reserva
de AIA.
• La conjugación puede ser
❖Protección del AIA frente a reversible o irreversible.
la acción de peroxidasas.
❖Transporte de AIA.
❖Mecanismo de
desintoxicación para
eliminar el exceso de auxina.
 CATABOLISMO AUXÍNICO: OXIDACIÓN DEL AIA

Se pierde el grupo COOH de la

OXIDACIÓN DESCARBOXILATIVA cadena lateral en forma de CO2

OXIDACIÓN NO DESCARBOXILATIVA Se conserva la cadena lateral

 CATABOLISMO AUXÍNICO: OXIDACIÓN DEL AIA
• OXIDACIÓN DESCARBOXILATIVA
• Se pierde el grupo COOH de la
cadena lateral en forma de CO2.
• Los productos iniciales de la
reacción pueden ser
• Indolmetanol (sustrato de una
peroxidasa)
• Hidroximetil oxindol
• AIA + O2 Productos + CO2

Consultar Fig. 19-9 del Azcon-Bieto & Talón (2008)

 CATABOLISMO AUXÍNICO: OXIDACIÓN DEL AIA
• OXIDACIÓN NO
DESCARBOXILATIVA
• Se conserva la cadena lateral
• La oxidación no descarboxilativa
se produce en el anillo indólico
sin pérdida del grupo carboxilo
• Observada en unas pocas
especies
Consultar Fig. 19-10 del Azcon-Bieto & Talón (2008)
TRANSPORTE DE AUXINAS
 TRANSPORTE DE AUXINAS

• El transporte es una Transporte en distancias cortas por

característica esencial de difusión célula a célula. (Transporte
las hormonas. lateral o radial)
• Las hormonas vegetales
pueden también ejercer Transporte a través de los tejidos
su acción en el lugar de
biosíntesis. vasculares (xilema y floema)
• Las auxinas son las
únicas hormonas que se Transporte polar por las células del
transportan cambium y las células parcialmente
polarmente.
diferenciadas asociadas al floema.
 Polar Auxin Transport

Auxin moves long distances

through the phloem.

Auxin also moves via auxin

transport proteins.

Auxin normally moves from the tip

of the shoot towards the tip of the
root. At the root tip, auxin changes
direction and moves short
distances up the root again
(basipetally).

Reprinted with permission from Macmillan Publishers, Ltd. Robert, H.S., and Friml, J. (2009) Auxin and other signals on the move in plants. Nat. Chem. Biol. 5: 325-332.
Reprinted from Muday, G.K., and DeLong, A. (2001). Polar auxin transport: Controlling where and how much. Trends Plant Sci. 6: 535–542, with permission from Elsevier.
 TRANSPORTE NO POLAR POR EL FLOEMA

• Una cantidad importante del

transporte auxínico se
realiza de forma no polar a
través del floema.
• El transporte por el floema
es la ruta principal de
transporte de auxina hacia
el ápice de la raíz
(transporte acropétalo)

Fig. modificada de TAIZ & ZEIGER 2006

 EL TRANSPORTE POLAR Y EL TRANSPORTE POR
EL FLOEMA NO SON INDEPENDIENTES
• Las auxinas pueden ser transferidas
desde el floema (transporte no
polar) a la ruta polar.
• La permeasa AUX1 se localiza
asimétricamente en la membrana
plasmática del extremo superior de
las células protofloemáticas de la
raíz.

Para detalles consultar TAIZ & ZEIGER

(2006), p. 833 y sig.
CARACTERÍSTICAS DEL TRANSPORTE POLAR DE AUXINAS

1. La velocidad de transporte es de unos 10 mm/h (100 veces menos

que por el floema pero 100 veces mayor que por difusión).
2. La dirección del transporte polar está polarizada.
1. En el tallo se produce desde el ápice hacia la base (transporte basípeto).
2. En la raíz el transporte es preferentemente acrópeta (desde la base hacia el
ápice) aunque también existe transporte basípeta y lateral (desde las
células próximas al cilindro vascular hacia la corteza)
3. El transporte de AIA requiere energía. No se produce en ausencia
de O2 ni en presencia de inhibidores de la síntesis de ATP.
4. Es independiente de la gravedad.
PRINCIPALES PARÁMETROS EN EL TRANSPORTE
DE AUXINA
• Velocidad: espacio • Método utilizado para la
recorrido por la auxina medida de estos
por unidad de tiempo. parámetros.
• Intensidad: Cantidad de • Método de Van der Weij
auxina transportada por (1932) modificado.
unidad de tiempo. • La modificación consiste
en la aplicación de AIA
radiactivo.
Fig. del Azcon-Bieto & Talón (2008)
Auxinas Modelo quimiosmótico del
transporte polar de auxina
AIA

AIA- Membrana
plasmática
Permeasas para H+ El modelo se sustenta en:
cotransporte H+ AIA- H+

apical
AIAH
1) existencia de un gradiente de
2H+ Pared celular
AIAH pH entre la pared y el citoplasma.
ATP citosol
ATP
H+ H+
AIA- 2) la permeabilidad selectiva de la
pH 5 ATP
pH 7 H+ membrana.
Vacuola
ATP
H+ 3) la localización de
AIA-
transportadores específicos para
AIA- la entrada y salida del AIA.
basal H+
AIAH

ATP
 Modelo quimiosmótico del
Auxinas transporte polar de auxinas
AIA-
pH= 5 pH= 7

apical
AIAH H+ + AIA- AIAH H+ + AIA-
2H+
Dirección del transporte

AIAH AUX1 En la pared celular predomina la

AIA-+ H+ forma protonada (AIAH), debido al
ATP
pH ácido inducido por la actividad
ATP H+
de H+-ATPasas localizadas en la
H+ pH= 7
MP.
AIA- PIN1
pH= 5
En el citosol, a pHs neutros,
AIA-+ H+ AIAH predomina la forma aniónica (IAA-)
basal 2H+
H+
AIA- AIAH
Consultar Fig. 19-13 Azcon-Bieto y M. Talón, (2008)
 Modelo quimiosmótico del
Auxinas transporte polar de auxinas
AIA AIA-
El AIA entra en la célula
apical [1] de manera pasiva en forma protonada
AIAH H+ + AIA-
2H+ (IAAH), desde cualquier posición, o
[2] mediante un transporte activo
Dirección del transporte

AIAH AUX1 secundario de la forma aniónica (IAA-),

→ transportador simporte 2H+-IAA-
AIA-+ H+
ATP (AUX1).
ATP H+
H+ pH= 7

AIA- PIN1
pH= 5
La forma aniónica sale de la célula por
medio de proteínas exportadoras (PIN)
AIA-+ H+ AIAH que se concentran en los extremos
basal 2H+ basales de cada célula en la ruta
H+ longitudinal
AIA- AIAH
Azcon-Bieto y M. Talón, (2008)
 PROTEÍNAS TRANSPORTADORAS DE AIA
TRANSPORTADORES DE SALIDA
• Presentan homología con los
transportadores bacterianos.
• Los principales son
producidos por los genes PIN
Transportadores ABCB
Transportadores PILS
TRANSPORTADORES DE ENTRADA
• Pertenecen a la familia de las
permeasas de aminoácidos.
• Gen AUX1
• Genes LAX (like AUX)
• Son específicos para auxinas y no
pueden transportar TRP.
• Realizan el co-transporte de AIA- +
2 H+ .
Auxin moves through efflux and influx carrier
proteins
ABCB The PIN family of
proteins contributes to
directional movement
ABCB
of auxin out of the cell.

Cell-to-cell
The AUX1/LAX polar
auxin
influx carriers transport
contribute to
The ABCB
movement of
transporters
IAAH into the ABCB contribute to auxin
cytoplasm.
transport in a diverse
ways. (These were formerly
referred to as MDR or PGP
proteins).
Reprinted with permission from Macmillan Publishers, Ltd. Robert, H.S., and Friml, J. (2009) Auxin and other signals on the move in plants. Nat. Chem. Biol. 5: 325-332.
 TRANSPORTADORES PINs
• La distribución subcelular de los PINs
determina la dirección del eflujo de auxina
y la localización coordinada de ellos a lo
largo de la cadena de células canaliza la
dirección del transporte.
• Los PINs no están estáticos en la
membrana. Sufren un continuo reciclado
mediado por clatrina.
• El gen GNOM, entre otros, regula este
proceso vía de los ARF.
 TOPOLOGÍA DE LA PROTEÍNA PIN1
• Ver también Fig. 19-15 de
TAIZ & ZEIGER (2006)
• PIN1 presenta 10
segmentos transmembrana
y un gran bucle
hidrofílico en el medio.
• En algunos PINs pueden
haber hasta 12 segmentos.

Křeček et al.: The PIN-FORMED (PIN) protein family of auxin transporters. Genome Biology 2009, 10
PIN proteins orient asymmetrically in plant cells

PIN1 localizes to Root

the lower Base
surface of root
cortex cells

PIN1 is
responsible for
auxin flow from
shoot apex to
root apex.

Root
Apex

Reprinted by permission from Macmillan Publishers, Ltd. Dhonukshe, P., et al. (2008). Generation of cell polarity in plants links endocytosis, auxin distribution and cell fate
decisions. Nature 456: 962-966. Reproduced with permssion from Dolan, L., et al. (1993). Cellular organisation of the Arabidopsis thaliana root. Development 119: 71-84.
NOTA:
La citocalasina D es un
metabolito de origen
fúngico que se une a los
filamentos de actina
impidiendo su
polimerización y
elongación. Por ello,
inhibe procesos celulares
relacionados con la actina.

Fig. 19-17 p.830 de

TAIZ & ZEIGER
(2006)
Los microfilamentos
de actina canalizan
las vesículas que
llevan nuevos PINs a
la membrana
plasmática TIBA= ácido 2,3,5-triyodo-
benzoico

NPA= ácido naftil ftalámico

Fig. 19-18 p.831 de TAIZ
& ZEIGER (2006)
The distribution of PIN proteins contributes to
the auxin gradients

Křeček , P., Skůpa , P., Libus, J., Naramoto, S., Tejos, R., Friml J., and Zažímalová, E. (2009) The PIN-
FORMED (PIN) protein family of auxin transporters. Genome Biology 10: 249.
Clathrin-mediated endocytosis is needed for PIN
redistribution

heavy
A clathrin subunit is made of chain
light
three heavy and three light chain
chains. They assemble into
a polyhedron

Reprinted by permission from Elsevier from Dhonukshe, P., et al. and Friml, J. (2007). Clathrin-mediated constitutive endocytosis of PIN auxin efflux carriers in Arabidopsis. Curr. Biol. 17: 520-527. Chen, X., Irani,
N.G. and Friml, J. (2011). Clathrin-mediated endocytosis: the gateway into plant cells. Curr. Opin. Plant Biol. 14: 674-682. Kleine-Vehn, J., et al and Friml, J. (2011) Recycling, clustering, and endocytosis jointly
maintain PIN auxin carrier polarity at the plasma membrane. Mol. Syst. Biol. 7: 540. Repriinted by permission from Macmillan Publishers Ltd. From Fotin, A., Cheng, Y., Sliz, P., Grigorieff, N., Harrison, S.C.,
Kirchhausen, T. and Walz, T. (2004) Molecular model for a complete clathrin lattice from electron microscopy. Nature 432: 573-579.

© 2013 American Society of Plant Biologists

 Schematic representations of PIN and auxin patterns in different plant tissues.

Klaartje van Berkel et al. Development 2013;140:2253-2268

© 2013. Published by The Company of Biologists Ltd

Schematic representations of PIN and auxin patterns
in different plant tissues. Auxin is in blue and PIN
proteins in red; arrows indicate the direction of
auxin flux. (A) Auxin-accumulating veins in a
developing leaf. (Inset) PIN proteins point with the
flux of auxin toward the base of the leaf. (B)
Phyllotaxy pattern on the shoot apical meristem,
where auxin maxima precede primordia and form in
a regular pattern. (Inset) PIN proteins point toward
each auxin maximum. (C) Reverse-fountain-like
pattern in a developing shoot primordium. In the
inner layers, PINs transport auxin away from the
maximum (direction 1), whereas in the outer layer,
PINs transport auxin toward the maximum
(direction 2). (D) Fountain-like pattern in the root
tip. PINs in the outer layer transport auxin away
from the maximum (direction 1), whereas PINs in
the inner layers transport auxin toward the
maximum (direction 2).
 AUX1 takes up auxin into the cell

AUX1/LAX

Carrier-
mediated
auxin
uptake

There are several

genes encoding Auxin uptake is
proteins like AUX1; disrupted in aux1
these are the LAX mutants.
proteins (Like AUX1).
Reprinted with permission from Macmillan Publishers, Ltd. Marchant, A. et al., (1999) AUX1 regulates root gravitropism in Arabidopsis by facilitating auxin uptake within
root apical tissues. EMBO J. 18: 2066–2073.

© 2013 American Society of Plant Biologists

Transportadores ABCB de auxina

• Son proteínas transportadoras implicadas en el

transporte de auxina a nivel celular.
• Las proteínas ABCB se localizan de forma uniforme
en la membrana plasmática
The ABCB proteins are important for auxin
transport

ABCB
PGP
WT abcb19-2 abcb19-2
abcb19-1 abcb1 – abcb1

WT abcb19-1
Arabidopsis encodes 21 ABCB
Loss-of-function of some ABCB
proteins, many of which are
genes causes diverse
necessary for proper auxin
phenotypes including dwarfism
transport.
and altered tropisms.
Wu, G., Lewis, D.R., and Spalding, E.P. (2007) Mutations in Arabidopsis multidrug resistance-like ABC transporters separate the roles of acropetal and basipetal auxin
transport in lateral root development. Plant Cell 19: 1826–1837. Noh, B., Murphy, A.S., and Spalding, E.P. (2001) Multidrug Resistance–like genes of Arabidopsis
required for auxin transport and auxin-mediated development. Plant Cell 13: 2441–2454.

© 2013 American Society of Plant Biologists

The ABCB proteins have diverse expression
patterns

ABCB19 As described
accumulates later, ABCB19
The functions of the ABCB genes may be uniformly around
may stabilize the
the periphery of
determined in part by different patterns of these root cells. PIN1 location...
expression and cellular localization – many
are still uncharacterized.
Wu, G., Lewis, D.R., and Spalding, E.P. (2007) Mutations in Arabidopsis multidrug resistance-like ABC transporters separate the roles of acropetal and basipetal auxin
transport in lateral root development. Plant Cell 19: 1826–1837. Titapiwatanakun, B., and Murphy, A.S. (2009) Post-transcriptional regulation of auxin transport
proteins: cellular trafficking, protein phosphorylation, protein maturation, ubiquitination, and membrane composition. J. Exp. Bot. 2009 60: 1093-1107 by permission
of Oxford University Press for the Society of Experimental Biology.

© 2013 American Society of Plant Biologists

• Misuk Cho and Hyung-Taeg Cho,2013. The function of ABCB transporters in auxin transport.
Plant Signaling & Behavior 8:2, e22990; Landes Bioscience
ABCB proteins may stabilize PIN proteins within
membrane domains

ABCB19 Plasma Orange =

Membrane overlap
protein
The ABCB proteins seem to stay in the plasma membrane, unlike the
PIN proteins. An interaction between the two transporters may
contribute to stabilizing PINs.

Titapiwatanakun, B., and Murphy, A.S. (2009) Post-transcriptional regulation of auxin transport proteins: cellular trafficking, protein phosphorylation, protein maturation,
ubiquitination, and membrane composition. J. Exp. Bot. 60: 1093-1107, by permission of the Society for Expiremental Biology.

© 2013 American Society of Plant Biologists

A newly identified family of PILS auxin
transporters are ER localized

PIN5 and PIN8 PIN5 These auxin transporters are thought to

also localize to the play a role in intracellular auxin
ER membrane PIN8
homeostasis and accumulation

Feraru, E., Vosolsobě, Feraru, M.I., Petrášek, J. and Kleine-Vehn, J. (2012) Evolution and structural diversification of PILS putative auxin carriers in plants. Front. Plant Sci.
3:227. See also Barbez, E., et al. and Kleine-Vehn, J. (2012) A novel putative auxin carrier family regulates intracellular auxin homeostasis in plants. Nature 485: 119–122.

© 2013 American Society of Plant Biologists

Auxin transport - summary

Regulated movement of auxin is critical

for phototropism, gravitropism,
embryonic pattern formation and
organogenesis.
Auxin transport proteins have been
identified. Factors that control their
position and activity are under
investigation.

Arabidopsis has 6 AUX1/LAX

proteins, 21 ABCB proteins, 8
PIN proteins and 7 PILS
proteins - we don’t yet
understand all the complexity
of auxin transport!

© 2013 American Society of Plant Biologists