TINIÓN DE WRIGHT

PROCEDIMIENTO:

Antes de empezar esté procedimiento, recibimos instrucciones de los pasos a seguir y una
previa teoría del proceso celular que se produce.

Teoría(retroalimentación): Sistema para la coloración de las células en frotis de sangre

periférico, medula óssea o para el estudio citológico de elementos celulares recogidos por
punción, raspaje o concentrados celulares de derrames cavitarios. Los colorantes puestos
habitualmente en técnica hematológica, hacen parte del grupo de los colorantes sintéticos,
derivados del carbón, las anilinas, solubilizadas en estado de sal. conocida como tinción
policromática, debido a que produce diversos colores. Es una solución de metanol (fijador de la
muestra), eosina (colorante ácido) y azul de metileno (colorante básico), los que son muy
sensibles a las variaciones de pH de las estructuras. Es una modificación de la tinción de
Romanowsky para tinción diferencial de células y elementos celulares. La coloración
característica azul o rosa es el producto de la combinación de los colorantes purificados de
eosina y tiazina.

Indicaciones previas:
1) Preparar un FROTIS de sangre, a partir de una punción capilar. (esta sangre, por
recomendación será tomada en la mano no dominante, en el dedo anular, punzando en un
área externa a la de la yema del dedo).
2) Se prepara el porta objetos donde será puesta la gota de sangre. (la primera gota de sangre
será desechada, la segunda gota es la indicada para realizar el frotis).
3) Al momento es esparcir la sangre lo haremos en un solo movimiento, de atrás hacia
adelante con otro porta objetos. (ubicamos el segundo portaobjetos sobre el primero, el
segundo porta objetos debe tomar la gota de sangre con uno de sus bordes y de un solo
movimiento rápido deslizamos la gota de sangre).
4) Después de 1 min ubicamos la muestra sobre un par de varillas de cristal y empezamos con
la tinción.

Material usado o insumos:

 1 lanceta  Colorante de Wright (mezcla de
 2 portaobjetos colorantes básicos (azul de
 Torundas con alcohol y secas metileno) y colorantes ácidos
 Un par de varillas de cristal/puente (eosina)
de cristal  Sol. Buffer para Wright
 Aceite de inmersión
 Microscopio
Procedimiento:
1. Primero recogimos el material a utilizar en la practica
2. Una vez conseguimos el material, se hizo el debido lavado del material y de manos, y
preparación del mismo
3. Con la lanceta se hizo la punción capilar, a uno de nuestros compañeros:
a. Primero se hizo un ligero masaje en el dedo a
puncionar para que haya un mayor flujo de sangre.
b. Después con una torunda con alcohol se limpió
debidamente el área del dedo.
c. Una vez limpio el dedo, con una lanceta nueva se
puncionó el dedo, a un lado de la “yema” del dedo.
d. Una vez puncionado el dedo se volteó la mano palma
abajo, para que la sangre caiga.
e. De nuevo se hizo otro masaje al dedo para que
empezara a salir la sangre.
4. Una vez salió la primera gota de sangre con una torunda seca
se limpió esa primera gota de sangre.
5. Cuando salió la segunda gota de sangre se preparo el porta
objetos abajo del dedo para que la gota de sangre caiga (esta
gota se puso en uno de los extremos del portaobjetos, para
poder hacer la expansión de la sangre).
6. Una vez la gota cayó en el portaobjetos, con otro
portaobjetos lo ubicamos enfrente de la gota de sangre de tal
manera que esta quede pegada al borde del portaobjetos, y
de un solo movimiento se desliza rápidamente el
portaobjetos hacia adelante haciendo el esparcimiento de la sangre de manera
uniforme.
Con esto finaliza el proceso de realizar el frotis a continuación se procede a explicar como se
hace la tinción:
Con esto finaliza el proceso de realizar el frotis, a continuación, se procede a explicar como se
hace la tinción:

I. Una vez hecho el frotis sanguíneo, ubicamos nuestro portaobjetos en un puente de

cristal y este a su vez deberá estar en un lava manos para el escurrimiento de los tintes
y prevención de accidentes.
II. Una vez hecho el paso anterior, a nuestro portaobjetos agregamos el colorante de
Wright durante 5min, cubriendo toda nuestra muestra.
III. Pasados los 5min sobre el colorante de Wright agregamos la Sol.Boffer este al tener un
ph similar al de la sangre PH=7.2, es capaz de teñirla sin dañar las células, este mordente
lo dejamos por 10min más.
IV. Pasado los 15min, lavamos nuestra muestra, primero escurriendo el colorante y el
Boffer, seguido de esto con agua agregamos a nuestra muestra hasta que no escurra
más solución y se deja secar.
V. Finalizando el paso anterior podemos dar por concluida esta tinción
VI. Ahora podemos observar con el aceite de inmersión y el microscopio, nuestra muestra.

Durante esta tinción se pudo observar 2 tipos de células las cuales se les conoce como:

 Glóbulos rojos
 Glóbulos Blancos

Siendo de un color rojizo los glóbulos rojos y de un color azul los glóbulos blancos, se pudo
apreciar en gran medida que entre ambos hay una gran diferencia de tamaños, siendo los
glóbulos rojos con una medida aproximada de 6-8 µm mientras que los glóbulos blancos miden
aproximadamente 8 y 20 μm.