CUESTIONARIO

a) Describa los sistemas CRISPR-Cas disponibles en la actualidad y su uso de

cada uno en la edición genética para el tratamiento de enfermedades.

Según Chávez (1), Hasta el momento se han clasificado seis tipos distintos de sistemas
CRISPR/Cas (I-VI) fundados en el mecanismo molecular que emplean para el
reconocimiento del ADN y la forma en que se unen al mismo (1) .

Hernández acota (2). Existe gran diversidad entre los sistemas CRISPR/Cas descritos en
cuanto a la composición de proteínas, arquitectura del locus, estructura del complejo
efector y su mecanismo de acción. La Clase I contiene complejos de efectores con
múltiples subunidades mientras que en la Clase II las funciones del complejo efector
son realizadas por una única proteína multidominios de gran tamaño como es Cas9. La
Clase I contiene los sistemas de tipo I que son más comunes y diversos, los sistemas de
tipo III más abundantes en arqueas, así como los sistemas de tipo IV que carecen del
módulo de adaptación. La Clase II incluye los bien caracterizados sistemas de tipo II
que incluyen la endonucleasa efectora Cas9, utilizada ampliamente en la edición de
genomas (2).

Además, contiene los sistemas de tipo V que han sido probados experimentalmente e
incluyen las proteínas efectoras Cas12a–e. Estas proteínas poseen un dominio RuvC que
corta la simple cadena de ADN, excepto Cas12a (también Cpf1) que tiene además un
dominio catalítico que participa en el procesamiento del pre-crARN. Por otra parte, los
sistemas efectores de tipo VI contienen dos dominios HEPN de posible actividad
RNAsa. La descripción de sistemas que no se ajustan a la clasificación anterior indica
que aún existen nuevos tipos y subtipos por clasificar (2).

Lagunas sustenta (3). En la rama de la medicina, la edición del genoma es de gran

interés e importancia para la prevención y el tratamiento de diversas enfermedades. En
la actualidad, con el sistema CRISPR/Cas se está examinando una extensa variedad de
padecimientos, incluidos los trastornos de un solo gen, como la fibrosis quística, la
hemofilia y la enfermedad de células falciformes (con forma de media luna). Esto es
prometedor para el tratamiento y la prevención de afecciones más complejas, como el
cáncer, los padecimientos cardiacos, las enfermedades mentales y la infección por el
virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) (3).

Con el sistema CRISPR/Cas se han transformado genéticamente ciertos mosquitos para

que no puedan transmitir la malaria; también se ha experimentado en cerdos para que
sus tejidos sean compatibles con los del ser humano; asimismo, se ha utilizado en
bacterias para la identificación de cepas y para estudiar los mecanismos y genes
relacionados con la resistencia a los antibióticos. Asimismo, estas implicaciones
médicas, el sistema CRISPR/Cas también se puede utilizar para mejorar los alimentos
que consumimos y modificar las bacterias y otros microorganismos de uso industrial y
alimentario. El sistema CRISPR/Cas se ha implementado para luchar contra las
enfermedades que atacan a las plantas y los animales de los que nos alimentamos, lo
cual conlleva reducir el uso de fertilizantes y hormonas, mejorarlos para que su
consumo pueda resultar más favorecedor. Otro ejemplo importante es en S.
thermophilus, una bacteria muy utilizada en la elaboración de quesos y yogur, la cual se
modificó para protegerla de los virus que pudieran dañarla, y así asegurar su producción
o incluso aumentarla. (3)

b) Describa el uso de ARN de interferencia en el tratamiento de enfermedades.

Según Nakamura, Esparza , Garrido, Palomar, Gallardo (4), el ARN de interferencia

(ARNi) es una respuesta biológica conservada al ARN de doble cadena (dsARN) que
otorga resistencia a los ácidos nucleicos patógenos y regula la expresión génica. El
mecanismo puede haber evolucionado para interrumpir la replicación viral o la
actividad del transposón o para responder a otras formas inapropiadas de expresión
génica. se usa actualmente para reducir la actividad de un gen específico. Por tratarse
de un mecanismo biológico presente en las células de muchos organismos, incluidos los
humanos, representa una estrategia nueva y muy específica para inhibir
fisiológicamente la expresión de un gen determinado(4). A pesar que el mecanismo de
RNAi es un descubrimiento nuevo, se ha utilizado para prevenir la expresión de genes
específicos que causan enfermedades, y las tecnologías modernas para su aplicación en
la vida están en constante desarrollo. Los efectos de la inhibición de genes que causan
diversas enfermedades ya han sido analizados en modelos animales e in vitro.
Recientemente, se ha demostrado que el dsRNA se puede usar en animales vivos para
prevenir infecciones virales de virus invasivos.Estos hallazgos han planteado la
posibilidad de usar fragmentos de dsRNA como vacunas antivirales y marcaron el
comienzo de una nueva era de medicamentos antivirales puede significar tratamiento
(4).

Un ejemplo, el siARNs en enfermedades metabólicas se utiliza para estudiar el papel de

diferentes genes en la patogénesis de la diabetes y la obesidad. Uno de los intentos para
usar la tecnología del ARNi en enfermedades metabólicas fue investigar las vías de
señalización de la insulina. La señalización de insulina es un mecanismo requerido para
la homeostasis de glucosa. Dentro de las principales vías metabólicas reguladas por
insulina se encuentra la inhibición de la gluconeogénesis en hígado y la estimulación del
transporte de glucosa en músculo y tejido adiposo. Otro grupo diseñó la estrategia de
inducir silenciamiento postranscripcional del gen para PEPCK, la enzima que controla
la gluconeogénesis utilizando siARNs clonados en vector, obteniendo una disminución
considerable de los niveles de glucosa en sangre, mejorando la tolerancia a glucosa, así
como la disminución de ácidos grasos y triglicéridos en ratones.Estos datos validan a la
PEPCK como un blanco para la terapia génica de la diabetes. Un enfoque diferente fue
a través de la administración de siARNs dirigidos contra el ARN mensajero de la
apolipoproteína B (Apo B) en hígado, y se obtuvo una disminución en los niveles de
dicha proteína en plasma.Apo B es una proteína involucrada en el metabolismo de
colesterol. Las concentraciones en sangre de dicha proteína están relacionadas con las
concentraciones de colesterol y los altos niveles de ambos se asocian con un alto riesgo
de enfermedades coronarias. Además, se observó que la inyección intravenosa de
siARNs contra ApoB resultó en una disminución de los niveles de colesterol en sangre
comparado con los resultados observados en ratones, en el cual el gen de la
apolipoproteína había sido deletado (4).

Referencias Bibliográficas

1. Chávez-Jacobo VM. El sistema de edición genética CRISPR/Cas y su uso

como antimicrobiano específico. TIP [Internet]. 2018 [citado el 28 de
septiembre de 2022];21(2). Disponible en:
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1405-
888X2018000200200
2. Concepción-Hernández M. CRISPR/Cas: aplicaciones y perspectivas para el
mejoramiento genético de plantas. Biotecnol Veg [Internet]. 2018 [citado el
26 de septiembre de 2022];18(3). Disponible en:
http://webcache.googleusercontent.com/search?
q=cache:X20AFmmyVIoJ:https://revista.ibp.co.cu/index.php/BV/article/
view/585/html&hl=es-419&gl=pe&strip=1&vwsrc=0

3. Rangel FAL, editor. Sistema CRISPR/Cas [Internet]. Vol. 70. Ciencia; 2019.
Disponible en:
https://www.amc.edu.mx/revistaciencia/online/X2_70_4_1200_CRISPR_L.p
df

4. Nakamura Y, Gallardo J , Esparza M, Garrido L , Palomar V. Aplicaciones

terapéuticas del ARN de interferencia [Internet]. Medigraphic.com. [citado el
26 de septiembre de 2022]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq-2009/bq091e.pdf