Laboratorio 2: Uso del microscopio
Informe de laboratorio:
Realiza los siguientes pasos en tu cuaderno para
realizar el informe de laboratorio.
1. Abre el libro en la página 31 y copia en tu
cuaderno el título del laboratorio.
2. Copia en tu cuaderno el objetivo del laboratorio
que encuentras en la página 31 del libro.
3. Responde en tu cuaderno la pregunta de la
hipótesis.
4. Escribe en tu cuaderno los materiales que vamos
a usar en el laboratorio que encuentras en la
página 31 del libro.
5. Sin copiar las preguntas responde en tu cuaderno
las preguntas que encuentras en el marco teórico,
usando la información de esta guía.
6. Escribe en tu cuaderno todos los pasos del
procedimiento que encuentras en la página 31 del
libro.
7. Responde las preguntas de la parte de identificar,
explicar y comunicar que encuentras en la página
31 del libro.
8. Escribe tres conclusiones del laboratorio.
9. Escribe la bibliografía que consultaste para los
para responder las preguntas.
Hipótesis:
Lo primero que hacen los científicos al tratar de responder
las preguntas que se hacen es formular hipótesis, es
decir, posibles respuestas bien fundamentadas.
Para construir tu hipótesis, en esta práctica, trata de
responder la siguiente pregunta:
¿Cómo es posible el estudio de células y organismos
microscópicos? Escribelo en el informe
Marco teórico:
Sin copiar las preguntas, responde en tu cuaderno:
1. Escribe las normas de seguridad en el laboratorio.
2. ¿Qué es el microscopio, en qué año se inventó y
quién lo inventó?
3. ¿Qué tipos de microscopios existen? Describa
cada uno.
4. ¿Por cuáles sistemas está compuesto el
microscopio?
5. ¿Qué partes conforman el sistema mecánico del
microscopio?
6. ¿Qué partes conforman el sistema óptico del
microscopio?
7. ¿Qué partes conforman el sistema de iluminación
del microscopio?
8. ¿Cuáles son las propiedades del microscopio?
Explique cada una
9. ¿Cuáles son las normas para el adecuado uso del
microscopio?
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
- Antes de realizar una práctica debes leer detenidamente
la guía de esta para adquirir una idea clara de su objetivo,
fundamento y técnica
- Al entrar en el laboratorio, atiende las indicaciones del
profesor y dirígete a tu puesto. Para ello, el profesor habrá
formado los equipos de prácticas y les asignará un puesto
de trabajo concreto, con un lote de material determinado
para cada equipo.
- A partir de este momento debes evitar todo
desplazamiento innecesario, procurando no moverte de tu
puesto de trabajo
- Antes de comenzar el desarrollo de la práctica hay que
asegurarse de que cuentas con todo el material
necesario, según la relación que aparece en la guía de la
práctica, que está en perfectas condiciones de uso.
-No toques otro material que el que corresponde a tu
práctica, aunque lo tengas a tu alcance.
-No manejes ninguna instalación del laboratorio si no lo
indican las instrucciones. Jugar con interruptores,
enchufes, llaves de gas o de agua, etc., puede acarrear
consecuencias muy graves.
- No debes trabajar con prendas que cuelguen sobre la
mesa (collares, bufandas, corbatas, etc.) Si llevas el pelo
largo, conviene recogerlo. Con todo ello evitarás arrastrar
y volcar objetos o quemarte con los mecheros.
- Coloca tus libros y otras pertenencias en los lugares
adecuados, de modo que no dificulten el trabajo, ni
obstruyan los pasillos.
- Maneja los productos, reactivos y, en general, todo el
material, con precaución. Sobre todo, los aparatos
delicados, como pueden ser lupas y microscopios, deben
manejarse con sumo cuidado, evitando los golpes o forzar
sus mecanismos. Si hay algo que no funcione
correctamente, se debe comunicar al profesor, en lugar de
intentar repararlo.
- Todo el material que, a criterio del profesor, se deteriore
por el mal uso, será sustituido por el estudiante
responsable.
- Al manejar los portaobjetos y cubreobjetos deben
cogerse por los bordes para evitar que se manchen de
grasa. En tal caso, deben desengrasarse lavándolos con
una mezcla a partes iguales de alcohol y éter.
- No arrojes cuerpos sólidos en las pilas, a no ser que
estén muy finamente pulverizados y sean fácilmente
solubles. Esa clase de residuos, junto con el material
desechado, debes depositarlo en las papeleras. Si arrojas
líquidos a la pila, ten abierto el grifo del agua.
- No se deben mantener los mecheros encendidos ni las
lamparillas de los microscopios conectadas mientras no
se están utilizando. Aparte del ahorro que supone, se
pueden evitar accidentes.
- Cuando se haya terminado la práctica, limpia y ordena
todo el material utilizado en la misma. Comprueba que
todo vuelve a quedar en perfecto estado de uso, los
aparatos eléctricos desconectados, los grifos cerrados,
etc. Conviene que lleves una toalla para secar el material
y la mesa.
- Finalmente, lava tus manos antes de salir y espera a que
el profesor te indique que puedes abandonar el
laboratorio.
EL MICROSCOPIO.
El Microscopio es un instrumento imprescindible en
microtecnia biológica. Fue inventado en el año 1580 por
los holandeses Hans y Zacarías Janssen; pero fue hasta
el año 1676 cuando Leuwenhoek descubrió los infusorios
o eílióforos, y observó por primera vez los hematíes de la
sangre.
2.1. TIPOS DE MICROSCOPIOS DE LUZ
Hay dos tipos principales de microscopios de luz: el
simple y el compuesto, sin descartar el microscopio
estereoscópico, que tiene muchas aplicaciones en
biología.
El microscopio simple es de poco aumento y consta de
una o varias lentes que actúan como una lente simple, por
lo que nos da imágenes derechas, no invertidas. El más
sencillo es la lupa de mano o de bolsillo. El aumento de
estos microscopios no sobrepasa los treinta diámetros.
Al microscopio compuesto se le conoce también con el
nombre de microscopio clínico. Está integrado por dos o
más lentes. Las imágenes que nos da están invertidas, de
modo que el lado derecho del objeto aparece a la
izquierda, y la cara inferior aparece en la parte superior. El
aumento del microscopio compuesto es superior a los dos
mil diámetros. Los microscopios compuestos que usan
como fuente luminosa luz blanca o ultravioleta se conocen
como FOTÓNICOS o de LUZ.
2.2. PARTES DEL MICROSCOPIO
El microscopio está conformado por tres sistemas:
2.2.1. SISTEMA MECÁNICO, conformado por:
- Base o Pie: es pesado y presta gran estabilidad al
microscopio.
- Brazo o columna: es una prolongación superior del pie y
está unida al brazo por una charnela articulada. Es una
especie de mango por dónde se sostiene y transporta el
microscopio; su forma es variable, aunque generalmente
es curva, y sirve para sostener la platina, el tubo y los
mecanismos del movimiento.
- Platina (con perforación central y pinzas o carro): es una
plancha horizontal que sirve para sostener las
preparaciones. En algunos modelos lleva unas pinzas de
metal para sujetar el portaobjeto. La platina puede ser fija
o móvil. Las platinas móviles pueden efectuar los
movimientos en dos direcciones perpendiculares entre sí,
o pueden realizar movimientos giratorios que viabilizan la
localización de los objetos. Estos movimientos se
efectúan mediante tornillos situados en los bordes de la
platina.
- Tornillos macrométrico y micrométrico: Son los
Mecanismos del Movimiento que permiten desplazar el
tubo para efectuar el enfoque. Consisten en dos tornillos
colocados a los lados del brazo, uno es de mayor tamaño
y ejecuta los movimientos rápido del tubo; se le conoce
con el nombre de TORNILLO MACROMÉTRICO; el otro
se nombra TORNILLO MICROMETRICO y efectúa
movimientos lentos, lo que permite afinar el enfoque. En
algunos modelos el tubo es fijo y lo que hacen estos
tornillos es desplazar la platina.
- Engranajes y Cremallera.
-Portaobjetivos con mecanismo de revólver: es un
dispositivo metálico, situado en la parte inferior del tubo.
Lleva dos, tres, cuatro o cinco objetivos, y mediante un
movimiento giratorio permite cambiar rápidamente de
objetivo sin necesidad de desenroscarlo.
- Tubo del microscopio: Consiste en un cilindro de metal
en cuyo extremo superior se sitúa el ocular, el cual
penetra por simple deslizamiento y es fácil cambiarlo por
otro. En el extremo inferior se encuentra situado el
objetivo por un sistema de Fosca, o más práctico el
sistema de revólver portaobjetivos. La longitud del tubo es
generalmente de 160 a 170 mm.
2.2.2. SISTEMA ÓPTICO, conformado por:
- Condensador: consta de una lente convergente que
recibe la luz de la fuente luminosa y la concentra en el
plano de la muestra; esto permite que incidan en ella una
mayor cantidad de rayos luminosos y que se genere una
adecuada iluminación sobre la misma.
- Objetivo: constan de un sistema de tres lentes
denominadas lente, frontal, lente media y lente superior.
La lente frontal es la más cercana al objeto que se
observa: es la menor y de foco más corto. La lente media
es de foco más largo que la anterior y la lente superior es
la interna, la cual queda más próxima al ocular. Otros
objetivos, de mayor potencia y perfección, constan de 4 o
más lentes. Existen distintas clases de objetivos. Estos
lentes son parafocales porque permiten que la imagen
quede casi enfocada al cambiar de objetivo. Usualmente
hay cuatro lentes objetivos:
a. Rastreo – magnífica cuatro veces (4x)
b. Baja potencia – 10x
c. Alta potencia – 40x
d. Inmersión de aceite – 100x. Por la naturaleza del medio
que separa la lente frontal del objetivo de la preparación,
este puede clasificarse en objetivo seco o de inmersión.
- Objetivos Secos: son aquellos en los cuales la cara
superior de la preparación y la lente frontal del objetivo,
están separadas por el aire cuyo índice de refracción (n)
es igual a 1.
- Objetivo de inmersión: son los que necesitan un líquido
transparente interpuesto entre la lente frontal y la
superficie superior de la preparación. Este líquido debe
tener un índice de refracción más elevado que el del aire,
acercándose lo más posible al del vidrio, que es de 1,52,
ya que las lentes, los portaobjetos y cubreobjetos son de
vidrio generalmente (objetivos acromáticos). Así, el medio
por el cual se propaga la luz es homogéneo.
- El líquido más usado es el aceite de cedro, cuyo índice
de refracción es de 1.515. Otros líquidos empleados
pueden ser el agua (n = 1.33), la glicerina (n = 1.46), o
una mezcla de aceite de ricino y esencia de anís, que
tiene una refracción de 1.510. Este objetivo ofrece la
ventaja de anular la desviación o refracción brusca que
sufren los rayos luminosos al pasar del vidrio (portaobjeto
y cubreobjeto) al aire, y del aire a la lente frontal del
objetivo, tal como acontece cuando usamos el objetivo
seco.
- Prismas: La porción media de los microscopios
modernos contiene prismas en su interior y su función es
proyectar la imagen formada por el objetivo sobre el plano
ocular.
- Ocular: está formado por un sistema de lentes colocadas
en un tubo dentro del tubo principal del microscopio. La
lente situada cerca del ojo del observador se denomina
lente ocular. La más interna se llama lente del campo o
lente colectora. Entre ambas lentes existe una especie de
diafragma, sobre el cual puede colocarse el micrómetro
ocular usado para realizar mediciones longitudinales de
los objetos microscópicos.
2.2.3. SISTEMA DE ILUMINACIÓN, conformado por:
- Fuente luminosa
- Filtros: Son cristales de colores (azul, amarillo, rojo, etc.)
que se interponen al rayo luminoso y absorben
determinadas radiaciones para darnos una luz que
viabiliza la observación microscópica, por cuanto la
imagen goza de mayor brillantez. Los filtros pueden
ponerse bajo el condensador o delante de la lámpara.
- Diafragma: Es un aparato situado debajo de la platina.
En los microscopios existen frecuentemente dos o más
diafragmas. Los microscopios actuales llevan un
diafragma iris similar al de las cámaras fotográficas. Con
él pueden ser eliminados los rayos luminosos marginales.
2.3. PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO
2.3.1. PODER DE AMPLIACIÓN: Es la característica más
importante: permite ampliar imágenes y esta capacidad
puede medirse. Ejemplo 400x, indica que aumentará
claramente la imagen 400 veces su tamaño original.
2.3.2. PODER DE RESOLUCIÓN: Es la medida de
cantidad de detalle que ofrece la imagen formada por la
primera lente u objetivo. Esta resolución depende de la
longitud de onda empleada para iluminar. Así se observan
detalles más finos con longitud de onda corta (azul, azul
verdoso, etc). La longitud de onda más corta para el ojo
humano es la violeta (400 milimicras). La mayor longitud
de onda es la roja (650 milimicras). 1 micra = 10-3 mm o
sea 1/1.000mm. Así pues, mediante el poder de
resolución se pueden ver separadas las imágenes de
objetos que a simple vista aparecen como una sola, y
ningún objeto más pequeño que la mitad de 500
milimicras (250) puede ser visto con un microscopio
luminoso.
2.3.3. PODER DE PENETRACIÓN: Se refiere a la
propiedad que poseen ciertos objetivos de presentar
detallados en una misma porción de enfoque varios
planos del espesor de una preparación. Cuanto menos
aumenta y resuelva un objetivo, mayor será su
profundidad focal.
2.4. NORMAS PARA LA ADECUADA UTILIZACIÓN DEL
MICROSCOPIO.
- Transporte siempre con las dos manos, la derecha
asiendo el brazo del microscopio y la izquierda debajo de
la base.
- Todas las partes del microscopio deben ser manejadas
con suavidad.
- Al terminar las observaciones, debe dejar el microscopio
con el objetivo de menor aumento y cubrirlo siempre con
su funda.
- No limpiar los lentes con etanol.
- No limpiar las lentes con papel ordinario o con algodón.
Usar xilol sí el aceite ha quedado adherido y seco.
- No limpiar los soportes o la platina con xilol.
- No limpiar los lentes internamente con papel. esto
desprenderá la capa antireflejante. Utilizar solo pincel. No
dejar aceite de inmersión en el lente.
- Es responsabilidad individual y colectiva el mantener los
microscopios en óptimas condiciones.
- Cuando deposite el microscopio sobre la mesa, hágalo
con delicadeza.
- No arrastre el microscopio sobre la mesa, o dentro del
gabinete donde se guarda; esto produce vibraciones que
desalinean los lentes.
- Cuando guarde el microscopio doble el cordón eléctrico
alrededor de la base del instrumento.
- Una de las causas principales de una imagen borrosa y
poco definida es la presencia de sucio en los lentes,
especialmente polvo, huellas digitales y depósitos
grasosos dejados por el roce de las pestañas con los
lentes oculares. Antes de usar el microscopio, verifique
que los oculares y los objetivos estén limpios. Nunca
toque los lentes con los dedos. Si tiene que limpiar un
lente, use papel de lente seco o humedezca el lente con
su aliento y frótelo muy suavemente con el papel de lente.
Las laminillas pueden limpiarse frotándolas
cuidadosamente con papel de lente o papel toalla.
- Enchufe el microscopio, prenda el iluminador y ajuste la
intensidad de luz a un nivel cómodo.
- Ajuste la distancia interocular para adaptar la distancia
entre los lentes oculares a la distancia entre sus ojos;
mueva lateralmente la base de los lentes oculares hasta
que vea claramente una sola imagen. El propósito
principal de tener dos lentes oculares, en vez de uno, es
eliminar el cansancio que se produce al mantener un ojo
cerrado y reducir la interferencia de luz ambiental y de
otras imágenes si se mantiene el ojo abierto. Los dos
lentes oculares no proporcionan una imagen
estereoscópica porque hay un solo lente objetivo. La
distancia interpupilar varía para cada persona y por lo
tanto debe ajustarse cada vez que se use el microscopio.
- Escoja una laminilla preparada de la letra «e» y límpiela
con papel de lente seco.
- Coloque la laminilla en la platina con el lente objetivo de
4x (el más corto) en posición vertical. Abra el gancho de la
platina mecánica, monte la laminilla en el centro sin tocar
el lente objetivo con la laminilla y cierre el gancho
suavemente. Use los dos tornillos de la platina para
centralizar la letra «e» debajo del lente objetivo.
- Use el tornillo macrométrico para subir la platina hasta la
posición más alta. Mirando por los lentes oculares (los
estudiantes que usan gafas pueden quitárselos para
facilitar el uso del microscopio), use el tornillo
macrométrico para bajar la platina hasta que el objeto
quede en foco. Cierre el ojo izquierdo y use el tornillo
micrométrico para obtener una imagen en perfecto foco.
Cierre el ojo derecho y gire el ajuste del lente ocular
izquierdo hasta obtener una imagen perfectamente
enfocada. Al igual que la distancia interpupilar, este ajuste
debe hacerse al comienzo de cada laboratorio.
- Observe la laminilla. Para ver más detalles, cambie al
lente objetivo de 10x y luego al de 40x., ajustando el foco
solamente con el tornillo micrométrico. El espécimen u
objeto (en este caso, la letra «e») debe mantenerse en el
centro del campo de visión. Después de cambiar el lente
objetivo, aumente ligeramente la apertura del diafragma y
la intensidad del iluminador (los lentes objetivos de mayor
aumento requieren mayor apertura del diafragma y mayor
intensidad de iluminación).
- Si nota partículas de polvo u otro sucio al observar la
laminilla, use este procedimiento para determinar dónde
se encuentran:
a. Si el sucio se mueve al mover la laminilla, está en la
laminilla.
b. Si el sucio se mueve al rotar los lentes oculares, está
en los lentes oculares.
c. Si el sucio desaparece al cambiar el lente objetivo, está
en el lente objetivo anterior.
d. Si el sucio entra y sale de foco al subir y bajar el
condensador, está en el condensador.
d. Si el sucio no está en ninguno de los lugares
anteriores, debe estar dentro del microscopio. En este
caso notifique al instructor de laboratorio; no remueva
ninguna parte del microscopio.
- Antes de remover la laminilla coloque el lente objetivo de
4x en posición vertical.
- No colocar preparaciones en la platina sin cubreobjetos
para evitar que se dañen los lentes.
- El cambio de objetivo se hace girando el revólver y
dirigiendo siempre la mirada a la preparación para
prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar
nunca de objetivo agarrándolo por el tubo de éste ni
hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
- No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio
(macrométrico, micrométrico, platina, revólver y
condensador).
- Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se
derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño.
- No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se
está utilizando el microscopio.
- Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de
menor aumento en posición de observación, y asegurarse
de que la parte mecánica de la platina no sobresale del
borde de esta.

Fig. 1. Partes del microscopio. (Lifeder, 2022)

Bibliografía:

● Lifeder. (17 de marzo de 2022). Partes del

microscopio óptico. Recuperado de:
https://www.lifeder.com/partes-microscopio-optico/
.