MARIANO GALVEZ DE GUATEMALA

SEDE PETÉN

NOMBRE :

LETICIA CLARIBEL REYES FLORES

CURSO:

CARNET: 2554-20-1157

SANTA ELENA PETÉN

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Contenido
1 INTRODUCCIÓN_______________________________________________________________3
2 OBJETIVO GENERAL____________________________________________________________4
2.1 OBJETIVOS ESPECIFICOS____________________________________________________4
3 EXPERIMENTO DE EXTRACCIÓN DEL ADN___________________________________________5
3.1 MATERIALES Y REACTIVOS__________________________________________________5
3.2 PROCEDIMIENTO__________________________________________________________5
3.3 RESULTADOS Y EXPLICACIÓN________________________________________________6
4 FUNDAMENTO CIENTIFICO______________________________________________________9
5 CONCLUSIÓN________________________________________________________________10
6 RECOMENDACIONES__________________________________________________________11

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 1 INTRODUCCIÓN

La extracción de ADN es una técnica fundamental en la biología molecular y la

genética, que permite obtener el material genético presente en las células de un
organismo. El ADN, o ácido desoxirribonucleico, contiene la información genética
que determina las características y funciones de un ser vivo. La extracción de ADN
es esencial para diversas aplicaciones científicas, médicas y forenses, ya que
proporciona una fuente invaluable de datos genéticos.
El proceso de extracción de ADN involucra la ruptura de las células y membranas
celulares para liberar el ADN contenido en el núcleo celular. A través de técnicas
específicas, se logra separar el ADN de otras moléculas presentes en la célula,
como proteínas y lípidos. Una vez aislado, el ADN puede ser analizado y
estudiado para comprender la genética, la evolución, la identificación de
individuos, el diagnóstico de enfermedades genéticas y otras investigaciones
biológicas.
En esta introducción, exploraremos los fundamentos de la extracción de ADN, las
distintas metodologías utilizadas y las aplicaciones que ha tenido en diversas
áreas científicas. La capacidad de extraer y analizar el ADN ha revolucionado
nuestra comprensión del mundo biológico y ha permitido importantes avances en
medicina, biotecnología y la resolución de crímenes, entre otros campos. La
extracción de ADN continúa siendo una herramienta esencial en la investigación y
exploración del mundo genético que nos rodea.

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 2 OBJETIVO GENERAL
Comprender el concepto y la estructura del ADN: El experimento de extracción de
ADN permite a los participantes comprender la naturaleza del ADN como la
molécula portadora de la información genética en los seres vivos.
2.1 OBJETIVOS ESPECIFICOS
1. Familiarizarse con los principios de la biología molecular: Los participantes
aprenderán sobre los principios fundamentales de la biología molecular y
los procesos celulares involucrados en la extracción de ADN.

2. Aplicar técnicas básicas de laboratorio: El experimento proporciona una

oportunidad para que los participantes adquieran habilidades prácticas de
laboratorio, como la manipulación de muestras biológicas y el uso de
reactivos.

3. Observar y describir los cambios físicos y químicos durante el proceso: Los

participantes podrán observar cambios visibles en la muestra durante la
extracción, como la separación de fases y la formación de precipitados, lo
que les permitirá describir y entender los procesos involucrados.

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 3 EXPERIMENTO DE EXTRACCIÓN DEL ADN
3.1 MATERIALES Y REACTIVOS
- Guantes
- Tijeras
- Formulario de remisión de indicios y cadena de custodia.
- Hisopos
- Masking tape
- Lapiceros
- Tarjetas FTA
- Sobres de papel
- Lancetas
- Muestra vegetal (cebolla, ajó, tomate, etc.)
- Agua (destilada o mineral)
- Sal de mesa
- Bicarbonato sódico
- Detergente líquido o champú
- Alcohol isoamílico a 0°C
- Batidora
- Nevera
- Colador o centrífuga
- Vaso
- Tubo de ensayo
- Varilla fina
3.2 PROCEDIMIENTO
1.- Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o
en un baño de hielo triturado:
120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
5 g de bicarbonato sódico.
5 ml de detergente líquido o champú.
2-. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda
haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
3.- Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas
a impulsos de 10 segundos. Y así se romperán muchas células y otras quedarán
expuestas a la acción del detergente.
4.- Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón
frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los
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restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador
lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después
pipetear el sobrenadante.
5.- Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml
de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se tiene que dejar escurrir lentamente el
alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol va a
quedar flotando sobre el tampón.
6- Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la
separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia
atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN.
Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el
ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón
mojado.
Notas:
Si se quiere realizar una extracción "profesional" puedes agregar enzimas que lo
puede hacer mejor, y el producto que resultaría seria pura.
Cuando añadas el alcohol frío debes hacerlo de forma que resbale por las paredes
del tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Para realizarlo mejor puedes
utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.
Si se expone por mucho tiempo la muestra vegetal a rayos ultravioletas, esto
provoca daños sobre la estructura del ADN, o aplicar ciertos conservantes que
puedan provocar efectos sobre la cadena del ADN.
3.3 RESULTADOS Y EXPLICACIÓN
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,
entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se
realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que
se unan al ADN.
Para realizar una extracción pura ocurrirá que el detergente contiene lauril sulfato
de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas y proteínas.
Éste actúa de la misma manera en el protocolo de extracción de ADN, separando
las grasas (lípidos) y las proteínas que constituyen las membranas que rodean la
célula y el núcleo. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado
de la célula.
El calor suaviza los fosfolípidos (grasas) en las membranas que rodean la célula y
el núcleo.

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También desactiva (desnaturaliza) a las enzimas desoxirribonucleicas (ADNasas)
las cuales, si están presentes, pueden cortar el ADN en pedazos tan pequeños
que lo haría imposible de ver. Si las enzimas se desnaturalizan y el ADN se
desenrolla, éste pierde su forma y se vuelve inactivo. Las enzimas se
desnaturalizan a 60° Celsius y el ADN se desnaturaliza a 80° Celsius.
Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, la solución
ablandadora de carne también actúa como una enzima, que contribuye a eliminar
las proteínas que puedan contaminar el ADN. La solución ablandadora de carne
actúa como una enzima.
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto.
Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
El proceso de extracción de ADN desde una célula es el primer paso para muchos
procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnología. Los científicos
deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas
que se encuentran en las células, evitando que el ADN se desnature (que se
rompa).
El material que se necesita para ello es fácil de encontrar y el procedimiento es
sencillo. Cada uno de los ingredientes tiene su propia función. La solución de sal y
jabón sirve para romper la membranaplasmática y nuclear e incluso la pared
celular. El líquido de lentillas elimina las proteínas que degradan el ADN. El
alcohol etílico sirve para precipitar el ADN.
-EL ADN
El ADN constituye el material hereditario de un individuo. En él están escritas las
instrucciones que deben seguir las células para construir un organismo y
mantenerlo vivo. Todas las células que forman un individuo contienen una copia
idéntica de ADN. Cada una de ellas, sin embargo, lee una parte de estas
instrucciones y por eso hay células con diferentes formas y funciones.
Está formado por desoxirribonucleotidos (A, G, C, T). Que a su vez están
formados -D desoxirribosa y un ion fosfato. La proporción y secuencia de las
bases nitrogenadas diferencia a los poli nucleótidos.
El ADN presenta dos niveles de plegamiento que dan lugar a:
Estructura primaria: Los polinucleótidos se forman entre las bases nitrogenadas de
adenia, guanina, citosina y timina por enlaces covalentes de tipo fosfodiester. Así
se forma un esqueleto de polidesoxiribosa-fosfato, de forma que queda un
extremo con -OH 3´ libre y un extremo 5´ con un grupo fosfato libre. Estructura
secundaria: Tiene un empaquetamiento espacial pero no se altera.
Dentro de la estructura secundaria hay 3 modelos:

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El modelo de la estructura secundaria del ADN en forma de doble hélice dextrógira
(forma B). Las dos hebras son anti paralelas es decir si una presenta la dirección 5
´->3´, la otra posee la dirección 3´->5´.
El conjunto se pliega sobre sí mismo obligado por los puentes de hidrógeno entre
diferentes regiones de la molécula, hasta adoptar la conformación más estable,
que es la de doble hélice. Este enrollamiento entre las 2 hebras de la doble hélice
es dextrógiro es decir gira a derechas y de tipo plectonémico, como si estuvieran
trenzadas.
Las secuencias de bases son complementarias, pues hay una correspondencia
entre las bases de ambas cadenas. La adenina sólo puede estar frente a la timina
y la guanina frente a la citosina. Así las bases púricas están enfrentadas a las
bases pirimidínicas y la unión se realiza por puentes de hidrógeno en los pares
A=T y tres en los pares G-C.
La correspondencia entre las bases es la causa de que las dos cadenas de la
doble hélice de ADN posean secuencias complementarias.
Además, los pares de bases están horizontales y el eje los atraviesa por el centro.
Modelo hélice A: En este modelo los pares de bases nitrogenadas están inclinados
hacia el exterior, pero la hélice al igual que la del ADN B es dextrógiro
Modelo hélice z: En este modelo las cadenas de ADN no se enrollan en forma de
doble hélice sino en forma de zig-zag. ADN es la abreviatura del ácido
desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el material genético de los
organismos. El ADN es una molécula que se encuentra en todas las células de los
seres vivos y se encarga de codificar todo lo que nosotros formamos o somos,
desde nuestro color del pelo hasta las proteínas que tenemos en nuestra sangre.
El ADN es una molécula cargada que está asociada a proteínas y en el caso de
los organismos eucariontes está encerrado dentro de un núcleo.
El ADN está presente en los indicios biológicos como sangre, semen, saliva,
hueso, pelo, etc.
Es muy importante conocer las condiciones para remisión adecuada de las
muestras.
El Salting- out es uno de los métodos de extracción de ADN más utilizados por su
fácil implementación, baja toxicidad de los reactivos y permite la visualización del
ADN.
-Factores que afectan el rendimiento, calidad y pureza del ADN:
Cantidad de material de partida
Número de copias de las moléculas de AN

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Cantidad de tejido.
Condiciones en las que se encuentra el material de inicio (fresco, congelado,
fijado)
Contaminantes e interferentes en el material biológico.

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 4 FUNDAMENTO CIENTIFICO
http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/

http://html.rincondelvago.com/extraccion-del-adn-de-una-cebolla.html

http://centros5.pntic.mec.es/ies.victoria.kent/Rincon-C/Practica/PR-5.htm

http://www.joseacortes.com/practicas/extraccionADN.htm

http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/
la_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm

http://www.bioapuntes.cl/laboratorio/extrac-adn.htm

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 5 CONCLUSIÓN
En conclusión, la extracción de ADN es una técnica fascinante y fundamental en la
biología molecular que nos permite obtener la molécula de ácido
desoxirribonucleico, responsable de llevar la información genética en todos los
seres vivos. A través de este proceso, podemos acceder a la esencia misma de la
vida y desentrañar los secretos genéticos que nos hacen únicos como individuos y
como especie.
La extracción de ADN no solo es una herramienta esencial en la investigación
científica, sino que también tiene aplicaciones prácticas en la medicina, la
biotecnología, la agricultura, la conservación de especies y la ciencia forense. Esta
técnica ha revolucionado nuestra comprensión del mundo biológico y ha
impulsado importantes avances en diversas áreas.
A través del experimento de extracción de ADN, los participantes tienen la
oportunidad de sumergirse en el mundo de la biología molecular y adquirir
habilidades prácticas en el laboratorio. Además, el experimento fomenta la
curiosidad científica y promueve una mayor apreciación por la complejidad y
maravilla de la vida en su nivel más básico.
Es importante destacar que la extracción de ADN también tiene implicaciones
éticas y sociales, ya que el conocimiento genético plantea cuestiones éticas sobre
privacidad, identidad y manipulación genética. Por lo tanto, es crucial abordar
estas consideraciones en el contexto de su aplicación en la investigación y la
práctica.
En resumen, la extracción de ADN es una herramienta poderosa que ha
transformado nuestra comprensión del mundo biológico y ha abierto un vasto
campo de posibilidades en la ciencia. Con cada experimento de extracción de
ADN, nos acercamos más a los secretos genéticos de la vida, lo que nos permite
avanzar hacia una mejor comprensión y aprovechamiento de la riqueza genética
que nos rodea.

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 6 RECOMENDACIONES
A continuación, te proporciono algunas recomendaciones sobre la extracción de
ADN, especialmente si estás planeando realizar un experimento o actividad
relacionada:
Seguridad en el laboratorio: Siempre prioriza la seguridad al trabajar en el
laboratorio. Usa equipo de protección adecuado, como guantes y gafas de
seguridad, para evitar el contacto con reactivos y muestras biológicas.
Protocolo estándar: Sigue un protocolo estándar de extracción de ADN. Puedes
encontrar protocolos detallados en libros de laboratorio, sitios web de instituciones
científicas o en artículos de investigación.
Limpieza y esterilización: Mantén un ambiente limpio y estéril para evitar
contaminaciones cruzadas que puedan afectar los resultados del experimento.
Calidad de los reactivos: Asegúrate de utilizar reactivos de alta calidad y que estén
en buen estado. La calidad de los reactivos puede afectar el éxito de la extracción.
Control de variables: Si estás realizando un experimento con diferentes variables,
asegúrate de mantener un control adecuado de cada una de ellas para poder
interpretar correctamente los resultados.
Respeto a las muestras: Si estás extrayendo ADN de muestras biológicas, como
células o tejidos, asegúrate de trabajar con ellas de manera cuidadosa y
responsable. Si son muestras de organismos vivos, evita dañar o alterar su
integridad.
Almacenamiento adecuado: Una vez extraído el ADN, guárdalo adecuadamente
para su posterior análisis o uso. El almacenamiento en condiciones óptimas es
esencial para mantener la integridad del material genético.
Desecho adecuado: Después de terminar el experimento, desecha los residuos y
materiales utilizados de acuerdo con las normas de seguridad y los protocolos de
manejo de desechos.
Interpretación de resultados: Si estás analizando los resultados obtenidos,
asegúrate de interpretarlos correctamente y tener en cuenta las posibles
limitaciones del experimento.
Divulgación científica: Si es un experimento educativo o divulgativo, aprovecha la
oportunidad para explicar los conceptos detrás de la extracción de ADN y su
relevancia en la ciencia.
Siguiendo estas recomendaciones, podrás realizar un experimento de extracción
de ADN de manera segura y efectiva, lo que te permitirá comprender mejor el
fascinante mundo de la biología molecular y la genética.

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